蔬菜、水果及制品中农兽药残留检测方案

快速固相萃取法测定食品中多种有机磷农药残留 杨丽莉，姚朝英，纪 英 摘 要：报道了一种简便、快速的石墨碳固相萃取（SPE）食品中多种有机磷农药残留及测定的方法。采用丙酮浸泡、超声提取食品中的有机磷农药，经石墨碳固相小柱净化萃取后，用气相色谱-火焰光度检测法直接测定，加标回收率在72.0%～107%之间，RSD为6.2%～12.7%，最低检出限可达0.001mg/kg。 ToDetecttheOrganicPhosphorusPesticideResidueinFoodwithFastSolidPhaseExtraction YANGLi-li，YAOChao-ying，JIYing （NanjingEnvironmentalMonitoringCenter，Nanjing，Jiangsu210013，China） Abstract：Asimpleandfastmethodtodetecttheorganicphosphoruspesticideresidueinfoodusinggraph-itecarbonsolidphaseextractionwasintroduced.Samplerecoveryratewasbetween72.0%and107%.RSDwas6.2%～12.7%.Thedetectionlimitwas0.001mg/kg. Keywords：Graphitecarbonsolidphaseextractioncolumn；Gaschromatography；Organicphosphoruspes-ticideresidue；Food 关键词：石墨碳固相萃取柱；气相色谱法；有机磷农药残留；食品 有机磷农药一直是检查农作物农药残留的重点。随着世界各国有机农业的不断发展和人们在日常生活中对有机食品需求的增长，有必要建立符合国际限量要求的农药残留检测方法。食品中有机磷农药的测定已有国标［1］和相关文献［2，3］ 报道的方法，但步骤繁琐，有机试剂用量大，对环境造成污染。现采用石墨碳固相萃取柱替代传统的硅胶固相萃取柱对样品进行萃取净化，效果好，处理样品简单、快速，回收率高且稳定。1 试验 1.1 主要仪器与试剂 日本ShimadzuGC-2010气相色谱仪，配火焰光度检测器（FPD），AOC-20i自动进样器；TSK-U928S研磨机（上海灿坤实业有限公司）；氮气浓缩仪（江苏汉邦科技有限公司）。 丙酮，色谱纯试剂；石油醚（60℃～90℃），分析纯试剂；3mL石墨碳固相萃取柱CarbSPETubes（SUPELCO）；敌敌畏、甲胺磷、乙酰甲胺磷、氧化乐果、乐果、甲基对硫磷、毒死蜱、对硫磷、乙硫磷标准溶液均为农业部环境保护科研监测所研制，质量浓度100mg/L，用时稀释成不同浓度的工作液。 1.2 色谱条件 色谱柱：DB-17弹性毛细管柱（30m×0.32mm×0.25µm）。 进样口温度260℃；检测器温度280℃；柱温100℃（1min）以25℃/min升至200℃（7min），再以25℃/min升至250℃（3min）；载气氮气（99.999%），柱内流量2.0mL/min；分流进样，分流比10:1；氢气85mL/min；空气110mL/min。 1.3 测定步骤 石墨碳固相萃取柱活化：用1mLV（丙酮）:V（石油醚）=1:1混合液淋洗活化处理。 无水样品处理：称取约5.0g粉碎样品于25mL具塞三角瓶中，加入20mL丙酮，混匀后超声15min，静置，取上清液10mL，加入10mL石油醚混合均匀后过处理好的石墨碳固相萃取柱，收集过滤液，于氮气浓缩仪上40℃浓缩至1mL，供气相色谱分析。有机磷农药气相色谱峰见图1。 1———敌敌畏；2———甲胺磷；3———乙酰甲胺磷；4———氧化乐果；5———乐果；6———甲基对硫磷；7———毒死蜱；8———对硫磷；9———乙硫磷 含水样品处理：称取粉碎样品适量，加入30mL丙酮搅拌后添加NaCl固体至饱和，混合后静置，上清液用无水Na2SO4除去残留水分，定量取出5mL～10mL，加入等体积的石油醚混合均匀，其余操作同上。2 结果与讨论 2.1 标准曲线与检出限 取不同体积的有机磷标准溶液添加到5g干样品中，使各种有机磷农药质量为0.11µg、0.26µg、0.60µg、0.90µg、1.80µg，按测定步骤处理后，在上述色谱条件下分析，以峰面积y对质量x（µg）作线性回归，结果见表1。 同上操作，以S/N=2确定实际样品的最小检出量，结果见表1。 表1 标准曲线与检出限 由表1可以看出，该方法灵敏度高，线性良好，能满足食品中有机磷农药残留的测定。2.2 回收率与精密度试验 在5g干样品中加入不同体积的标准工作液，使样品中各组分质量分别为0.72µg、1.44µg、1.80µg，按上述操作步骤测定6次，结果见表2。 表2 回收率与精密度测定结果 由表2可以看出，该方法加标回收率在72.0%～107%之间，相对标准偏差为6.2%～12.7%，符合农残分析质量控制的要求。 2.3 色谱柱的优选 参照文献［1］，用BP-5或OV-101非极性毛细管柱分离多种有机磷农药时发现，对硫磷和毒死蜱的保留时间一致。经试验筛选，用中等极性的DB-17毛细管柱可以使其达到基线分离，定性、定量更加准确可靠。 2.4 提取净化方法的优化 一般常用的农残提取净化方法是用丙酮提取，然后用二氯甲烷提取多次，浓缩至近干，加入正己烷溶解，倒入硅胶柱中净化处理，依次用正己烷-丙酮、乙酸乙酯、丙酮-乙酸乙酯、丙酮-甲醇洗脱，全部滤液浓缩后分析。整个处理过程步骤多，耗费时间长，有机试剂用量大，对操作人员的健康和环境会造成危害。另外，食品样品成分复杂，有些样品过净化柱后色素仍然很浓，进入色谱柱后虽然不影响分析结果，但会污染进样口，对色谱柱伤害很大，而且分析多个样品会造成色谱峰拖尾变形，一般每天都要对进样衬管清洗才可保证分离度和灵敏度。 该方法用极性较强的丙酮作为提取溶剂，提取效率高，除水后的提取液加入等体积的石油醚可以直接上柱处理，不必再洗脱，直接收集滤液浓缩，整个操作步骤简单、快速，有机溶剂用量小，不超过40mL。另外，石墨碳固相萃取柱容量大，用3mL小柱就可以达到吸附杂质和色素的目的，不必经常清洗进样衬管，对提高灵敏度和保养色谱仪有利。 2.5 方法验证 参加江苏省技术监督局委托江苏省农林厅举办的食品中农药残留能力验证，所发盲样中选择性地添加乐果、氧化乐果、对硫磷、毒死蜱、甲胺磷等5种有机磷农药。用该方法对盲样定性、定量分析，所出具的结果均获满意评价，说明该方法快速、简单、准确、实用。 ［1］ GB/T17331-1998，食品中有机磷和氨基甲酸酯类农药多种 残留的测定［S］. ［2］ 张 莹，黄志强，李拥军.气相色谱法测定茶叶中多种有机磷 农药残留量［J］.色谱，2001，19（3）：273-275. ［3］ 陈雁君，卢英华，张 娟，等.西红柿、卷心菜中残留丙溴磷的 提取及气相色谱-火焰光度检测法分析［J］.色谱，2001，19（3）：283-285.