乳制品及特殊膳食中营养成分检测方案(固相萃取仪)

Agela Technologies Innovation to Benefit Customers 1.参考方法 博纳艾杰尔内部方法。 香兰素亦称香草素、香草醛等，学名为3-甲氧基-4-羟基苯甲醛，根据欧盟专家委员会2000年2月24日报道，大剂量可导致头痛，恶心，呕吐，呼吸困难，甚至损伤肝肾功能。 香兰素结构式 限量标准 中华人民共和国国家标准《食品添加剂使用标准》(GB2760-2011)规定，较大婴儿和幼儿配方食品中香兰素最大使用量为5mg/100mL， 其中100mL以即食食品计，生产企业应按照冲调比例折算成配方食品中的使用量；婴幼儿谷类辅助食品中可以使用香兰素，最大使用量为 7mg/100g， 其中 100g以即食食品计；凡使用范围涵盖0至6个月婴幼儿配方食品不得添加任何食用香料。 国家标准中只规定了限值，未有检测方法。本实验使用天津博纳艾杰尔科技有限公司的CleanertPAX固相萃取小柱和 Venusil XBP C18(L)液相色谱柱，建立了一种奶粉中香兰素的检测方法，经实验验证，该方法简单、快速、准确度高。 2.实验材料 水(pH=4.5)：取100mL水，用乙酸调节pH至4.5； 2%乙酸铅溶液：称取乙酸铅2g，加水稀释并定容至100mL： 5%氨水溶液：：取氨水溶液5mL， 加水稀释并定容至100 mL： 5%酸化甲醇：取甲酸5mL，加甲醇95mL混匀； 香兰素储备液(1mg/mL)：准确称取香兰素标准10mg，加水稀希并定容至10 mL； 固相萃取柱： Cleanert PAX(规格为60mg/3mL)，使用前分别用3mL甲醇和3mL水活化； 液相色谱柱：：Venusil XBP C18(L) 针式过滤器：亲水型 PTFE (0.45 um， 13 mm). LC-10F高效液相色谱系统； Qdaura"卓睿全自动固相萃取仪； 高速离心机(转子50 mLx6)； 氮吹仪； 12 位固相萃取装置。 3.实验步骤 准确角取奶粉试样1g(精确至0.01 g)于50 mL离心管中，加入 pH=4.5的水溶液5 mL， 混匀超声提取 5 min， 加2%乙酸铅溶液2mL，混匀后静置 2 min， 8000 r/min 离心10min； 取上清液用5%氨水溶液调节pH至中性；将上清液全部加样至活化好的 Cleanert"PAX小柱，然后分别用3mL5%氨水溶液和3mL甲醇淋洗小柱，弃去淋洗液；用3mL5%酸化甲醇洗脱(以上固相萃取操作通过 Qdaura"卓睿全自动固相萃取仪完成)，收集洗脱液于30℃下氮气吹干，用1mL 流动相重新溶解，过滤，待测。 4.色谱条件 色谱柱： Venusil"XBP C18(L)， 5 um， 150A，4.6×150mm： 流动相： A(0.02mol/L 的磷酸二氢钾溶液，磷酸调节 pH=4.0)：B (乙腈)=90：10； 流速：：11.0mL/min： 进样量：20pL； 波长：276nm； 柱 温：30℃。 5.实验结果及谱图 量取一定量香兰素标准储备液，分别用水稀释至1 ug/mL、5 ug/mL、10 ug/mL、25 ug/mL 和 50 ug/mL，按照4检测条件依次进样，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，拟合标准曲线方程，结果见表1；表2，3为回收率结果实验。 表1香兰素标准曲线和检出限 标准曲线方程 相关系数 检出限(S/N>3) Y=86.443X+36.907 0.9998 1ug/g 表2.5pg/g 添加回收实验结果 回收率 平行1 平行2 平行3 平均回收率 RSD 89.03% 94.30% 90.67% 91.33% 2.70% 表3. 25pg/g 添加回收实验结果 回收率 平行1 平行2 平行3 平均回收率 RSD 85.08% 87.85% 83.59% 85.51% 2.16% 人 Best Value Guaranteed Product Quality 图2. 5pg/g添加谱图 图3.1 pg/g标准溶液谱图 6.订货信息 名称 规格 订货号 分析型高效液相色谱仪 10mL/min，等度系统， FL-LC010 分析型色谱柱温箱 200-400 nm 双波长检测器 CC-100-T Qdaura"卓睿全自动固相萃取仪 4通道24位连续处理 SPE-40 Cleanert" PAX 固相色谱柱 60mg /3mL， 50支/盒 AX0603 Venusil" XBP C18(L)液相色谱柱 5 um， 150A， 4.6×150 mm VX951505-L 保护柱芯 4.6×10mm， 4/pk VX950105-L 保护柱套 适用于4.6×10 mm 的保护柱芯 CH-100 针式过滤器 PTFE(亲水)， 0.45 um， 13 mm， 200/pk AS081345 一次性注射器 2 mL无针头，两件式，100支 /pk LZSQ-2ML 溶剂过滤器 1L AM3100 1.5 mL样品瓶 短螺纹，透明，带书写处，100/pk 1109-0519 1.5 mL样品瓶盖 预组装：9mm中心孔，螺纹盖；红色橡胶/米色 0915-1819 PTFE 隔垫， 100/pk 12 mL 样品瓶 12 mL 样品瓶盖 透明，螺纹口， 100/pk 预组装：15mm黑色实心盖；红色丁基/灰色 PTFE 1509-1657 1515-1748 隔垫，100/pk 微孔滤膜 (MCM) 微孔滤膜(Nylon) 50 mm， 0.45 um，100片/pk50 mm， 0.45 um，100片/pk AM015045 AM025045 离心机 最大转速10000 r/min TGL-10B 氮吹仪 15位 NV15-G 真空固相萃取缸 12 位 VM12 流速调节阀 12个/包 A81213 穿板导流针 12个/包 A80100 无油隔膜真空泵 1台 A01003 www.agela.com.cn— 本手册所有应用均可在博纳艾杰尔官方网站以应用编号搜索下载!