中药中理化常数检测方案

2样品前处理 随着科学研究的发展和生产技术的进步，水分的定量分析已被列为药品检验的基本项目之一，作为药品一项重要的质量指标。一般情况下，药品中水分含量异常会严重地影响药品的质量和疗效。因此，对药品的水分进行检查并严格控制其限度非常重要。 目前，对于药物中水分的分析测定有很多方法，比如：1)卡尔-费休氏(Karl-Fischer)，是通过碘和二氧化硫在吡啶和甲醇溶液中与水定量反应的一种非水溶液中氧化还原滴定的原理来测定水分，因此很容易受到检测环境的影响，而使检测结果不重现，且具有还原性的样品会和卡氏里面的碘反应而产生误差；2)干燥失重法，整个过程繁琐、费时、系统误差大，且热不稳定样品不适用与此法检测；3)甲苯蒸馏法，通过用甲苯做带水剂与药物进行共沸蒸馏，如样品中含乙醇等会造成测定误差大，且整个操作过程繁琐。Lo气相色谱法测定微量水分过程简单、且分离测定准确度高，因此得到广泛应用。 本文以无水乙醇提取药物中的水分，采用赛默飞模块化气相色谱仪热导池检测器，对银杏叶中的水分进行了定量测定，过程简单、重复性好、结果满意，适用于各种药物中水分的定量分析测定。 实验材料 仪器与试剂 仪器Trace 1310 GC气相色谱仪仪 (Thermo Fisher Scientific)； Triplus RSH 三合一自动进样器 (Thermo Scientific)；；TTG-BONDQ色谱柱(30mx0.32 mmx10 pm) (Thermo Fisherscientific，P/N：26004-6030)。 试剂 ( 无水乙醇购于上海国药化学试剂有限公司；水为超纯水；银杏叶由市场购买 ) 标样的配制 ( 分别准确称取0.25g、0.5g、1.0g、1.5g、2.0g 、 3.0g超纯水， 加入到100 ml 容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，配制 成浓度为2.5 mg/mL、5.0 mg/mL、10. 0 mg/mL、15 . 0 mg/mL、20.0 mg/mL 和 30.0 mg/mL 的水标样。 ) 精确称取银杏叶粉末样品5.0g于150mL玻璃瓶中，加入100 ml 无水乙醇，200 rpm 震荡3h，静置12h，吸取上清液过0.45 um的滤膜，然后装入色谱瓶中，进行GC-TCD分析。 色谱条件 色谱条件：色谱柱： TG-BONDQ (30mx0.32mm×10pm)；柱温：100℃(0min)， 20℃ /min 到 200℃ (1 min)；分流进样，分流比10：1；进样口温度：200℃；载气：高 纯氦(99.999%)，恒流模式，3.0 mL/min。液体进样模式，进样量：0.5pL。TCD 检测器：检测池220℃，灯丝280℃，参比气为气气，流速 1.0 mL/min。 结果与讨论 标准品色谱图 图1为采用Thermo TG-BONDQ 规格为 30mx0.32 mm×10 pm的色谱柱对无水乙醇中水分的分离色谱图，可以看出乙醇和水分离良好，且在3min 内即可完成分离分析。 图1.标准溶液色谱图(10.0mg/mL) 线性、方法的检出限以及定量限 配制系列水分的标准溶液，各浓度分别为：2.5、5.0、10.0、15.0、20.0和30.0 mg/mL，采用上述方法分别进样分析，考察在2.5-30.0 mg/mL 浓度范围内的线性。本实验同时将无水乙醇作为空白，是为了抵消在标样配制与储存、以及样品提取过程中所不可避免地引入的水分。实验结 果表明水分在2.5-30.0 mg/mL 浓度范围内线性关系良好，线性相关系数为0.9988(图2)。以最低浓度标样峰强度的3倍信噪比计算其检出限和10倍的信噪比计算定量限，使用 GC-TCD 采用该方法对水分的检出限为0.50 mg/g，定量限为50 mg/g，这一结果同时也表明了该 TCD 检测器对水分测定时的高灵敏度特性。 实际样品测试及加标回收 按照上述方法对银杏叶样品中的水分进行了分析测定(平行测定2次)，并以空白无水乙醇作为背景以扣除影响，测得该银杏叶中的水分为 65.70 mg/g，折合成溶液浓度为3.286 mg/mL。对此，进行了三个水平的加标回收试验， 加标量分别为3.0、5.0、10.0 mg/mL，以考察该方法的可靠性，其中样品以及加标5.0 mg/mL 样品的色谱图见图3。实验的加标回收结果见表1-1，实验结果表明三个水平的加标回收率均在87.1%-98.1%之间，且对该样品平行测定6次， RSD 小于3.29%，符合日常分析检测的要求。 图3.样品及加标色谱图 (Sample 为银杏叶样品， Sample-5.0 mg/ml 为银杏叶样品加入5.0 mg/mL的水分) 表1-1.银杏叶样品中水分测定的加标回收率和精密度结果 样品种类 水分含量 (mg/mL) 回收率% 银杏叶样品 3.286 银杏叶样品+3.0mg/mL 5.899 87.1 银杏叶样品+5.0 mg/mL 8.116 96.6 银杏叶样品+10.0mg/mL 13.094 98.1 总结 本文采用 Thermo Scientific 模块化气相色谱 Trace1310配置TCD 检测器，以无水乙醇对银杏叶样品中的水分进行震荡提取，并进行检测。该方法的操作步骤简单，对水分的检 ThermoFisherS CIENTIFIC AN_C-GC-