12位固相萃取装置

SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 活化：HLB 固相萃取柱使用前依次使用 5 mL 甲醇和 10 mL 水 活化。 上样和洗脱：将待净化液的样品溶液加入已活化好的固相萃 取柱中，以 1 mL/min 的流速过柱，弃去滤液。用 5 mL 乙腈 - 水溶液 (10:90, v/v) 分两次淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液， 用吸耳球吹出小柱中残留液。用 4 mL 甲醇洗脱固相萃取柱， 收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 40℃氮吹吹干，用 2 mL甲醇 -水溶液 (5:5, v/v) 定容，0.22 µm 微孔滤膜过滤，供 HPLC 上机测试。

SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 活化：HLB 固相萃取柱使用前依次使用 5 mL 甲醇，5 mL 水 活化。 上样和洗脱：取待测液，通过 HLB 固相萃取小柱富集，弃去 流出液，富集完成后使用 3 mL 水，5 mL 5% 甲醇水溶液淋洗 固相萃取柱，真空抽干 5 min，弃去流出液。使用 7 mL 甲醇 洗脱萃取柱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 40℃氮气吹干，加乙腈 1.0 mL 溶解残余 物，滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

SPE 柱净化（Copure® PA，500 mg/6 mL） 活化：5 mL 甲醇，5 mL 水，10 mL 萃取液。 上样和洗脱：取 10 mL 待净化液过柱，收集流出液于 25 mL 容 量瓶中，用 10 mL萃取液洗脱，一并收集，用萃取液定容至刻度。

SPE 柱净化（Copure® PSA，60 mg/6 mL） 活化：加 5 mL 甲基叔丁基醚 / 正己烷 (1:1, v/v) 活化。 上样和洗脱：将待净化液转移至固相萃取柱中，用 2×2.5 mL正己烷淋洗，弃去流出液，抽干小柱；加入 6 mL甲醇洗脱， 收集洗脱液（整个过程控制流速在 1 mL/min 以内）。 重新溶解：洗脱液于 40℃缓慢氮气流条件下吹至近干，加 1 mL 甲醇溶解，经 0.22 µm 滤膜过滤，供 HPLC 测定。

SPE 柱净化（Copure® HLB，30 mg/1 mL） 活化：HLB 使用前用 1 mL 甲醇活化，1 mL 水平衡。 上样和洗脱：取 1 mL 备用液过柱，弃去流出液；用 1 mL 5% 甲醇水淋洗，弃去流出液，抽干小柱；用 2 mL 甲醇洗脱， 收集洗脱液。（整个上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min内）。 上机测试：取洗脱液 1 mL 经 0.22 µm 滤膜过滤，供上机测试。

SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 活化：HLB 固相萃取柱使用前依次用 3 mL 甲醇、3 mL 水活化。 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入备用提取液，弃去流出液； 加入 3 mL 15% 甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱；再 用 3 mL 甲醇溶液洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程流 速控制在 1 mL/min 内）。 重新溶解：洗脱液于 50℃下氮吹至近干，用甲醇定容至 1 mL，涡旋 1 min，过滤供 HPLC 测试

SPE 柱净化（Copure® PA，2000 mg/12 mL） 干法上样：取待净化溶液，直接加入 PA 固相萃取柱，弃去流 出液。 淋洗和洗脱：加 10 mL 水淋洗两次，弃去淋洗液，抽干小柱； 加 30 mL甲醇洗脱，收集洗脱液到 100 mL梨形瓶中（整个上样、 洗脱过程保持流速 1 mL/min）。 重新溶解：在 80℃旋转蒸发仪中蒸干洗脱液，用 1 mL 甲 醇溶解。经 0.22 µm 滤膜重新过滤，供高效液相色谱测定。

SPE 柱净化（Copure® C18，500 mg/6 mL） 活化：C18 固相萃取柱使用前用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入提取备用液，弃去流出液； 加入 5 mL 水淋洗，弃去淋洗液；抽干。5 mL 15% 乙腈水溶 液洗脱，收集洗脱液。（整个上样淋洗洗脱过程中流速保持 1 mL/min） 上机测试：洗脱液取 1 mL，0.22 µm滤膜过滤，供 HPLC上样测试。

SPE 柱净化（Copure® MAX，60 mg/3 mL） 活化：MAX 固相萃取柱使用前用 3 mL 甲醇、3 mL 水活化。 上样和洗脱：在 MAX 固相萃取柱上加入 5 mL 备用样品，弃去 流出液；用 3 mL 2% 氨水溶液（v/v）、3 mL 甲醇淋洗，弃去 淋洗液；抽干小柱；用 2 mL 5% 甲酸甲醇溶液洗脱，收集洗脱 液（整个上样、洗脱过程保持流速 1 mL/min）。 重新溶解：洗脱液过 0.45 µm 滤膜，上机测试

SPE 柱净化（Copure® ALB，500 mg/6 mL） 活化：碱性氧化铝柱使用前用 5 mL 乙腈活化。 上样和洗脱：取 5 mL 备用滤液过柱，弃去流出液，吹干小柱； 用两次 2 mL 流动相洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程 控制流速在 1 mL/min 内）。 上机测试：洗脱液用流动相定容至 4 mL，经 0.22 µm滤膜过滤， 供上机测试。

SPE 柱净化（Copure® HLB，200 mg/6 mL） 活化：HLB 柱使用前用 5 mL 甲醇活化，5 mL 水平衡。 上样和洗脱：取备用液加入固相萃取柱中，弃去流出液；各 取 5 mL 水、40% 甲醇水淋洗，弃去淋洗液；抽干小柱，用 10 mL 乙腈洗脱，收集洗脱液，于 50℃氮吹至近干（整个上样、 洗脱过程控制流速在 1 mL/min 内）。 重新溶解：加 1 mL 流动相（53% 乙腈水溶液）混匀，经 0.45 µm 滤膜过滤，供上机测试。

SPE 柱净化（Copure® Silica，2000 mg/12 mL） 活化：Silica 柱使用前用 10 mL 乙酸乙酯活化，10 mL 正己烷 平衡。 上样和洗脱：取备用液加入固相萃取柱中，弃去流出液；取 5 mL淋洗液（乙酸乙酯：正己烷 =5:95）分两次淋洗，弃去流出液； 抽干小柱；取 20 mL 乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液，于 50℃氮 吹至近干（整个上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min 内）。 重新溶解：加 1 mL甲醇重新溶解、混匀，经 0.22 µm滤膜过滤， 供上机测试。

SPE 柱净化（Copure® MAX，200 mg/6 mL） 活化：MAX 固相萃取柱使用前依次用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入备用液；加入 5 mL 水淋洗， 抽干小柱；加入 8 mL 甲醇洗脱，收集洗脱液（整个上样洗脱 过程控制流速在 1 mL/min 内）。 重新溶解：洗脱液于 40℃氮吹近干，用乙酸 / 水溶液 (1:25, v/v) 定容至 2 mL，涡旋混匀，过 0.22 µm 滤膜，供 HPLC 测试。

SPE 柱净化（Copure® MAX，150 mg/6 mL） 活化：MAX 使用前用 5 mL 甲醇活化，3 mL 水，3 mL 提取液（同 上）平衡。 上样和洗脱：取 5 mL 备用液过柱，弃去流出液；分别加 3 mL 淋洗液 (0.1 mol/L 氢氧化钾溶液：乙腈：水 =3:50:47)，3 mL 水，3 mL 甲醇淋洗小柱，弃去流出液，抽干小柱；用 5 mL 洗 脱液 ( 甲醇：乙腈：甲酸：水 =40:50:7.5:2.5) 洗脱，收集洗 脱液（整个上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min 内）。 上机测试：洗脱液于 50℃下用氮气吹干，用 1 mL 初始流动 相（2% 乙酸水溶液：乙腈 =50.5:49.5）定容，经 0.22 µm 滤 膜过滤，供上机测试。

SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 活化：HLB 使用前用 3 mL 甲醇，3 mL 水活化。 上样和洗脱：取 10 mL 备用液过柱，弃去流出液；加 5 mL 水 淋洗小柱，弃去流出液，抽干小柱用 4 mL 甲醇洗脱，收集洗 脱液（整个上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min 内）。 上机测试：洗脱液于 50℃下氮气吹干，用 1 mL 10% 甲醇水溶 液定容，经 0.22 µm 滤膜过滤，供上机测试。

、SPE 柱净化（Copure® HLB，150 mg/6 mL） 活化：净化前用 5 mL 甲醇活化，5 mL 的水平衡。 上样和洗脱：取 10 mL 进行上样，将提取液以 2 mL/min 的 速度过柱，弃去滤液，依次用 5 mL 水，5 mL 甲醇淋洗，弃 去淋洗液，将小柱抽干，再用 10 mL 甲醇洗脱并收集洗脱液。 重新溶解：40℃缓慢氮吹至近干，加 1 mL 乙腈溶解。涡旋混 合 1 min，过 0.22 µm 有机滤膜，待上机测试。

免疫亲和柱净化（Copure® 赭曲霉毒素 A 免疫亲 和柱，3 mL） 上样：取待净化样品 2 mL 过柱，弃掉流出的液体。 淋洗和洗脱：加入 20 mL 水淋洗柱子，分两次淋洗，弃掉流 出的液体，抽干小柱；加入 2 mL 甲醇缓慢洗脱亲和柱，流速 约为 2-3 秒 / 滴。 重新溶解：40℃下氮吹至近干，加 1 mL 初始流动相复溶，0.22 µm 滤膜过滤，供 HPLC 分析。

免疫亲和柱净化（Copure® 呕吐毒素免疫亲和柱，3 mL） 上样：将 20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端，取待净化液样 品液 1 mL 以 1-2 滴 / 秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的 液体。 淋洗和洗脱：加 20 mL 水淋洗柱子 , 分两次淋洗，弃掉流 出的液体，抽干小柱；加入 4 mL 甲醇缓慢洗脱（先浸泡约 30s），分两次洗脱，流速约为 2-3 秒 / 滴，收集流出液。 重新溶解：在 50℃下氮吹至近干，加 20% 甲醇水溶液 1 mL 重 新溶解。经 0.22 µm 滤膜过滤，待上机测试。

免疫亲和柱净化（Copure® 玉米赤霉烯酮免疫亲和柱， 3 mL） 上样：将 20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端，取待净化样品 1 mL 以 1-2 滴 / 秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。 淋洗和洗脱：加入 20 mL 水淋洗柱子，分两次淋洗，弃掉流 出的液体；抽干小柱；加入 3 mL 甲醇缓慢洗脱亲和柱，流速 约为 2-3 秒 / 滴。 重新溶解：50℃下氮吹至近干，加 1 mL 50% 乙腈水溶液溶解， 0.22 µm 滤膜过滤，供 HPLC 分析。

免疫亲和柱净化（Copure® 黄曲霉毒素 M1 免疫亲 和柱，1 mL） 上样：将 20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端，取待净化液以 1-2 滴 / 秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。 淋洗和洗脱：加 10 mL水淋洗柱子，弃掉流出的液体；抽干小柱； 加入 4 mL 乙腈分两次缓慢洗脱，流速约为 2-3 秒 / 滴。 重新溶解：在 40℃下氮吹至近干，加初始流动相定容至 1 mL，过 0.22 µm 滤膜，待上机测试。

免疫亲和柱净化（Copure® 黄曲霉毒素 B1 免疫亲 和柱，3 mL） 上样：将 20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端，取待净化液样 品液以 1-2 滴 / 秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。 淋洗和洗脱：用 20 mL 水淋洗柱子，分两次淋洗，弃掉流出 的液体；抽干小柱；加入 2 mL 甲醇缓慢洗脱亲和柱，流速约 为 2-3 滴 / 秒；50℃下氮吹至近干，待衍生。

免疫亲和柱净化（Copure® 黄曲霉毒素 B1 免疫亲 和柱，3 mL） 上样：将 20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端，取待净化液样 品液以 1-2 滴 / 秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。 淋洗和洗脱：用 20 mL 水淋洗柱子，分两次淋洗，弃掉流出 的液体；抽干小柱；加入 2×2 mL 甲醇缓慢洗脱亲和柱，流速 约为 2-3 秒 / 滴；50℃下氮吹至近干，待衍生。

SPE 柱净化（Copure® SAX，1000 mg/6 mL） 活化：SAX 固相萃取柱使用前用 6 mL 甲醇、6 mL 水活化。 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入提取备用液，弃去流出液； 加入 5 mL 水淋洗，弃去淋洗液；2 mL 固相萃取柱洗脱液（6% 盐酸 - 水溶液）洗脱，收集洗脱液。（整个上样淋洗洗脱过程 中流速保持 <1 mL/min） 重新定容：洗脱液定容至 2 mL，0.22 µm 滤膜过滤，供 HPLC 上样测试。

SPE 柱净化（Copure® Silica，500 mg/6 mL） 活化：Silica 柱使用前用 5 mL 甲醇洗去杂质，再 5 mL 丙 酮活化，5 mL 正己烷平衡。 上样和洗脱：取备用液全部过柱，弃去流出液；加 5 mL 正 己烷到提取管中，混匀，全部转移到柱中，弃去流出液； 加 5 mL 20% 乙酸乙酯 / 正己烷溶液（1:4, v/v）淋洗， 弃去流出液，抽干小柱；用 4 mL 甲醇洗脱，收集洗脱液（上 样、洗脱过程流速控制在 1 mL/min 内）。 上机测试：洗脱液用甲醇定容至 4 mL，经 0.22 µm 滤膜过滤， 供上机测试。

SPE 柱净化（Copure® MAX，150 mg/6 mL） 活化： 上样和洗脱： MAX 固相萃取柱依次加 6 mL 甲醇，6 mL 水活化。 加入待净化液 10 mL，弃去流出液；用 6 mL 5% 氨水，6 mL 甲醇淋洗，弃去流出液，抽干小柱；加 6 mL 5% 甲酸 - 甲醇溶液洗脱，收集流出液（整个过程控制流速为 1 mL/min）。 重新溶解：于 40℃氮气缓慢吹至近干，加 1 mL 初始流动相溶 解，经 0.22 µm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

SPE 柱净化（Copure® MAX，60 mg/3 mL） 活化：MAX 固相萃取柱使用前依次用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。 上样和洗脱：在 MAX 固相萃取柱上加入待净化样品，弃去流 出液；用 5 mL 水、5 mL 甲醇淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱； 用 6 mL 2% 甲酸甲醇溶液洗脱，收集洗脱液（上样、洗脱过程 控制流速在 1 mL/min 以内）。 重新溶解：洗脱液于 40℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用 1 mL 甲醇溶液溶解，经 0.22 µm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

SPE 柱净化（Copure® MAX，60 mg/3 mL） 活化：MAX 固相萃取柱使用前用 3 mL 甲醇、3 mL 水活化。 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入 5 mL待净化液，弃去流出液； 加入 5 mL 5% 甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液；再加入 4.5 mL 甲酸 / 甲醇 / 水溶液（5:20:75, v/v/v）进行洗脱 , 收集洗脱 液（整个上样淋洗洗脱过程中流速小于 1 mL/min）。

SPE 柱净化（Copure® MAX，60 mg/3 mL） 活化：MAX 固相萃取柱使用前依次用 3 mL 甲醇、3 mL 水活化。 上样和洗脱：在 MAX 固相萃取柱上加入待净化溶液，依次用 3 mL 2% 氨水溶液，3 mL 甲醇溶液淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱； 用 5 mL 5% 甲酸甲醇溶液洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱 过程保持流速 1 mL/min）。 重新溶解：洗脱液于 50℃下氮吹至近干，用甲醇定容至 2 mL，0.22 µm 滤膜过滤，供上机测试。

SPE 柱净化（Copure® MAX，60 mg/3 mL） 活化：MAX 固相萃取柱使用前用 3 mL 甲醇、3 mL 水活化。 上样和洗脱：在 MAX 固相萃取柱上加入 5 mL 备用样液，弃去 流出液。用 3 mL 2%氨水 -水溶液、3 mL甲醇淋洗，弃去淋洗液； 抽干小柱；用 2 mL 5% 甲酸 - 甲醇溶液洗脱，收集洗脱液（整 个上样、洗脱过程保持流速 1 mL/min）。 重新溶解：洗脱液过 0.45 µm 滤膜，上机测试。

SPE 柱净化（Copure® ALN，1000 mg/6 mL） 上样和洗脱：ALN 固相萃取柱上加入全部备用样液，弃去流出 液；用流动相 20 mL 洗脱，收集洗脱液，用流动相定容至 25 mL, 过滤供上机测试。

SPE 柱净化（Copure® ALN，1000 mg/6 mL） 活化：中性氧化铝柱使用前使用 6 mL 正己烷活化。 上样和洗脱：取待净化液 10 mL 加入中性氧化铝小柱，1 滴 / 秒流速通过中性氧化铝小柱后，弃去溶液，加入 10 mL 正己烷淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱。取 10 mL 2% 氨水 - 甲醇溶液洗脱小柱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 50℃氮吹至干，用 1 mL 甲醇定容，0.22 µm 滤膜过滤，供 HPLC 上样测试。

SPE 柱净化 (Copure® WAX，60 mg/3 mL） 活化：WAX 使用前用 3 mL 甲醇活化，3 mL 水，3 mL 2% 的甲 酸水溶液平衡。 上样和洗脱：取上述备用液直接过柱，弃去流出液，依次加 3 mL 水，3 mL 甲醇淋洗，弃去流出液，抽干小柱；用 6 mL 10% 氨水甲醇洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min 内）。 上机测试：洗脱液于 40℃氮吹至近干，用 1 mL 水定容，经 0.22 µm 水系滤膜过滤，供上机测试。

样品净化（Copure® MCX，60 mg/3 mL） 活化：MCX 柱依次加入 3 mL 甲醇活化，3 mL 水平衡。 上样和洗脱：取上述待净化液 1 mL 加入经活化的小柱中，重 力作用下待液体流尽，依次加入 3 mL 0.1% 甲酸水溶液、3 mL 水，3 mL 甲醇淋洗固相萃取柱，弃去流出液。用 6 mL 5% 氨 水甲醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，于 45℃氮吹至尽干。 重新溶解：残渣用含 0.1% 甲酸的乙腈水溶液定容至 1 mL，混 匀过 0.22 µm 尼龙滤膜，供上机测试。

SPE 柱净化（Copure® MCX，60 mg/3 mL） 活化：使用前依次用 3 mL 甲醇、5 mL 水活化柱子。 上样和洗脱：将待净化液转移至固相萃取柱中。依次用 3 mL 水、3 mL 甲醇洗涤，抽至近干后，用 6 mL 5% 氨化甲 醇溶液洗脱。整个固相萃取过程流速不超过 1 mL/min。 重新溶解：洗脱液于 50℃下用氮气吹干，残留物用 1 mL 流 动相定容，涡旋混合 1 min，过微孔滤膜后，供 HPLC 测定。

SPE 柱净化（Copure® C18，500 mg/6 mL） 活化：C18 柱使用前用 5 mL 乙腈、5 mL 水活化。 上样和洗脱：取备用液全部过柱，弃去流出液；加 5 mL 水 淋洗，弃去流出液；抽干小柱，加 5 mL 乙腈洗脱，收集 洗脱液（上样、洗脱过程流速控制在 1 mL/min 内）。 上机测试：洗脱液于 50℃氮吹至近干，用 1 mL 80% 甲醇水溶 液溶解，经 0.45 µm 有机滤膜过滤，供上机测试。

SPE 柱净化（Copure® C18，500 mg/6 mL） 活化：C18 固相萃取柱使用前用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。 上样和洗脱：加入 10 mL 待净化液于固相萃取柱中，用 5 mL 混合提取液淋洗固相萃取柱，弃去流出液，抽干小柱；用 6 mL 甲醇洗脱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 40℃下氮吹至近干，用 1 mL 混合提取液 溶解，经 0.22 µm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

、SPE 柱净化（Copure® C18，500 mg/6 mL） 活化：C18 固相萃取柱使用前用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。 上样和洗脱：将待净化样品转移至固相萃取柱中，弃去流出液； 用 5 mL 水淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱；加入 8 mL 甲醇洗脱， 收集洗脱液（上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min 内）。 重新定容：40℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用水定容至 2 mL，0.22 µm 滤膜过滤，供 HPLC 分析。

SPE 柱净化（Copure® C18，500 mg/6 mL） 活化：分别用 5 mL 甲醇，5 mL 水活化柱子。 上样和洗脱：吸取 10 mL 上清液上柱，用 5 mL 水淋洗，抽 干小柱，再用 4 mL 甲醇洗脱，收集流出液（整个上样、洗脱 过程控制流速在 1 mL/min 内） 重新溶解：洗脱液于 40℃氮吹至近干，用水定容至 1 mL，过 0.45 µm 滤膜上机。

SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 活化：HLB 使用前用 3 mL 甲醇，3mL 水活化。 上样和洗脱：取备用液过柱，加 3 mL 水到梨形瓶清洗一次再 全部转移到柱子，收集全部流出液，抽干小柱（整个上样、洗 脱过程控制流速在 1 mL/min 内）。 上机测试：流出液加水定容至 6 mL，经 0.22 µm 滤膜过滤， 供上机测定。

SPE 柱净化（Copure® HLB，150 mg/6 mL） 活化：HLB 使用前用 6 mL 甲醇活化，6 mL 水平衡。 上样和洗脱：取 5 mL 饮料直接过柱，弃去流出液，取 5 mL 5% 甲醇水淋洗，弃去流出液，抽干小柱；用 5 mL 80%甲醇水洗脱， 收集洗脱液（整个上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min 内）。 上机测试：洗脱液经 0.22 µm 滤膜过滤，供上机测试。

、SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 活化：HLB 固相萃取柱依次加 5 mL 甲醇，5 mL 水活化。 淋洗和洗脱：加入待净化液，弃去流出液；用 10 mL 5% 甲醇 水溶液淋洗，弃去流出液，抽干小柱；加入 4 mL 甲醇洗脱， 收集流出液（整个过程控制流速为 1 mL/min）。 重新溶解：40℃缓慢氮气流条件下吹至近干，加 1 mL甲醇溶解， 经 0.22 µm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

SPE 柱净化（Copure® HLB，200 mg/6 mL） 活化：分别用 5 mL 甲醇，5 mL 水活化柱子。 上样和洗脱：吸取10 mL上清液上柱，用5 mL水淋洗，抽干小柱， 再用 4 mL 甲醇洗脱，收集流出液（整个上样、洗脱过程控制 流速在 1 mL/min 内）。 重新溶解：洗脱液于 40℃氮吹至近干，用水定容至 1 mL，过 0.45 µm 滤膜上机。

SPE 柱净化（Copure® PA，500 mg/6 mL） 活化：聚酰胺小柱使用前用 6 mL 甲醇、6 mL 水活化。 上样和洗脱：在聚酰胺小柱上加入 10 mL 待净化样品，控制 流速在 1-2 滴 / 秒，弃去流出液。依次用 6 mL 甲醇、6 mL 水 淋洗，弃去流出液，抽干。然后用 6 mL 10%氨化甲醇进行洗脱， 控制流速在 1-2 滴 / 秒，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 45℃氮吹至干，加 1 mL 水定容，混匀， 过 0.45 µm 水系滤膜，待上机测试。 注：建议使用 PTFE 亲水材质滤膜过滤，避免其他材质滤膜 对色素有吸附造成回收率偏低现象。

SPE 柱净化（Copure® PA，500 mg/6 mL） 活化：净化前用 5 mL 甲醇、5 mL 去离子水活化。 上样和洗脱：将提取液以 1 mL/min 的速度过柱，弃去滤液， 用 5 mL 淋洗液（甲醇：甲酸：水 =4:2:4）淋洗，弃去淋洗液， 将小柱抽干，再用 6 mL 10%氨化甲醇溶液洗脱并收集洗脱液。 重 新 溶 解：45℃缓慢氮吹至近干，加 2 mL 混合流动相 （A:B=1:1）溶解。涡旋混合 1 min，过 0.45 µm 亲水 PTFE 滤膜， 待上机测试。

SPE 柱净化（Copure® PA，500 mg/6 mL） 活化：聚酰胺柱使用前用 5 mL 甲醇活化，5 mL 水平衡。 上样和洗脱：取 5 mL 备用液过柱，弃去流出液；用 3 mL 水 淋洗，再用足量甲醇 / 甲酸溶液 (6:4, v/v) 淋洗至流出液 透明，弃去流出液，抽干小柱；用 5 mL 10% 氨水甲醇洗脱， 收集洗脱液。（整个上样、洗脱过程控制流速在 1 mL/min内）。 上机测试：将洗脱液定容至 5 mL，取 1 mL 经 0.22 µm 水系滤 膜过滤，供上机测试。 注：建议使用 PTFE 亲水材质滤膜过滤，避免其他材质滤膜对色素 有吸附造成回收率偏低现象。

样品净化（Copure® CPC 着色剂专用柱，500 mg/6 mL） 活化：小柱依次用 5 mL 甲醇活化，5 mL 水平衡。 上样和洗脱：将上述待净化液过柱，弃去流出液；然后依次 加入 5 mL 0.1% 甲酸水溶液，5 mL 水淋洗、小柱，弃去流出液； 抽干小柱，再加入 8 mL 15% 氨水甲醇溶液进行洗脱，收集洗 脱液。 重新溶解：将上述洗脱液于 45℃氮吹至约 1 mL，加水定容至 2 mL，涡旋混匀，过 0.45 µm PTFE 滤膜供上机测定。 注：建议使用 PTFE 亲水材质滤膜过滤，避免其他材质滤膜 对色素有吸附造成回收率偏低现象。

SPE 柱净化（Copure® 蜂蜜检测柱，6 mL） 活化：25 mL 水，过柱速度 1 秒 / 滴。 上样和洗脱：当液面到达柱面上 2 mm，抽负压使溶液通过柱子， 待液面下降到柱面以上 2 mm 时，用 7% 乙醇 25 mL 淋洗，弃去 淋洗液。再用 50% 乙醇 10 mL 洗脱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 65℃水浴中减压浓缩至干，残渣加 30% 乙醇 1 mL 使之溶解，作为供试品溶液

SPE 柱净化（Copure® ACE，500 mg/6 mL） 活化：固相萃取柱使用前依次用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入合并上清液，收集流出液； 再加入 4 mL 水洗脱，收集合并洗脱液（整个上样和洗脱过程 流速控制在 1 mL/min 内）。 上机分析：洗脱液用水定容至 10 mL，摇匀，取 1 mL 过 0.22 µm 滤膜，供 HPLC 测试。

、SPE 柱净化（Copure® ATO，2000 mg/12 mL） 活化：抗氧化剂专用柱使用前用 5 mL 甲醇、5 mL 乙腈活化。 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入待净化液，收集流出液； 加入 10 mL 乙腈 - 甲醇溶液（2:1, v/v）洗脱，收集洗脱液， 合并。 重新溶解：洗脱液于 40℃下旋蒸至近干，用 1 mL 乙腈溶解， 经 0.22 µm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

SPE 柱净化（Copure® BAP，22 g/60 mL） 活化：苯并芘检测柱使用前用 30 mL 正己烷活化。 上样和洗脱：在苯并芘检测柱上加入待净化样品，收集流出 液，然后用 40 mL 正己烷 - 二氯甲烷溶液（3:1, v/v）洗脱， 收集流出液，合并流出液。（在上样洗脱的过程中，要注意 柱体不能干涸) 重新溶解：流出液 50℃减压蒸馏至近干，加 1 mL 乙腈定容， 过 0.45 µm 滤膜，待上机测试。

SPE 柱净化 （Copure® MIP SuDan，500 mg/6 mL） 活化：苏丹红分子印迹柱使用前用 5 mL 正己烷活化。 上样和洗脱：往柱中加入待净化液；再加入 5 mL 正己烷淋洗， 弃去流出液，再加 5 mL 乙酸乙酯进行洗脱，收洗脱液。 重新溶解：洗脱液 40℃氮吹近干，1 mL 乙腈定容，涡旋 1 min，经滤膜过滤供 HPLC 测试。

一、样品提取 准确称取粉碎好的猪肉 2.0 g 于 50 mL QuEChERS 提取管中， 加入 QuEChERS 盐包 (Cat.No.COQ050051H)，加入 10 mL 1% 乙 酸乙腈，涡旋 10 min，5000 r/min 离心 5 min。上层乙腈层待 净化。 二、样品净化 取待净化的上层乙腈层 6 mL 于 15 mL QuEChERS 净化管 (Cat. No.COQ015601H) 中，涡旋 1 min，5000 r/min 离心 5 min。取 上清液 4 mL 转移至另一试管中，40℃下氮吹至干，用 1 mL 三 氟乙酸水 / 甲醇溶液 (1:19, v/v) 复溶，过 0.22 µm 滤膜，待 上机测试。

SPE 柱净化（Copure® 对乙酰氨基酚专用柱） 活化：对乙酰氨基酚专用柱使用前用 5 mL 甲醇、5 mL 水活化。 上样和洗脱：将提取备用液过柱，弃去流出液，加入 5 mL 5% 甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱；加入 8 mL甲醇洗脱， 收集洗脱液（上样、洗脱过程保持流速 1 mL/min）。 重新溶解：洗脱液在 40℃下氮吹至近干，1 mL 甲醇定容，0.22 µm 滤膜过滤，滤液待上机测试。

SPE 净化（Copure® PBA, 100 mg/3 mL） 活化：向 PBA 柱中依次加入 3 mL 乙腈，3 mL 0.25 mol/L 乙 酸铵缓冲液（pH=8.5）进行活化。 上样和洗脱：取上述待净化液过柱，控制流速不超过 1 滴 / 秒， 然后用 3 mL 0.25 mol/L 乙酸铵缓冲液（pH=8.5）淋洗小柱， 弃去全部流出液，抽干小柱，用 2 mL 0.1 mol/L 甲酸水溶液 洗脱，抽干小柱，收集全部洗脱液。 上机：取上述洗脱液过 0.22 µm PES 水系滤膜，供上机分析。

SPE 柱净化（Copure® Silica，500 mg/6 mL） 活化：用 6 mL 正己烷活化 Silica 固相萃取柱。 上样和洗脱：取待测液，通过 Silica 固相萃取小柱富集， 弃去流出液。用 6 mL 正己烷淋洗固相萃取柱，真空抽干 5 min，弃去流出液。用 6 mL 正己烷 - 丙酮溶液 (6:4, v/v) 洗 脱萃取柱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 40℃氮气吹干，加 20% 乙腈水溶液 2.0 mL 溶解残余物，过 0.22 µm 滤膜，供高效液相色谱测定。

、SPE 柱净化（Copure® ALA，1000 mg/3 mL；Copure® PRS，500 mg/3 mL） 活化：按照 ALA 柱在上，PRS 柱在下顺序将两柱串联，固相萃 取柱使用前使用 5 mL 乙腈活化。 上样和洗脱：将梨形瓶中的待净化液转移至 ALA 柱中净化， 梨形瓶使用 5 mL 的乙腈分两次洗，弃去 ALA 柱，吹 PRS 柱 至近干，在不抽真空的情况下，加入 5 mL　5% 氨水乙腈溶 液进行洗脱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液 45℃氮吹至近干，用 1 mL 乙腈定容， 过 0.45 µm 滤膜，待上机测试。

SPE 柱净化（Copure® MCX，60 mg/3 mL） 活化：MCX 柱依次用甲醇 2 mL 和 2 mL 0.1 mol/L 盐酸溶液 活化。 上样和洗脱：取备用液过柱，控制流速 1 mL/min。依次用 1 mL 0.1 mol/L 盐酸溶液和 2 mL 50% 甲醇乙腈溶液淋洗，弃去 淋洗液。用 4 mL 5% 氨化甲醇洗脱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 40℃氮气吹干，加 1.0 mL 0.1％甲 酸乙腈溶液溶解残余物，滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

SPE 柱净化（Copure® MCX，60 mg/3 mL） 活化：MCX 固相萃取柱使用前用 5 mL 甲醇、5 mL 5% 乙酸水溶 液活化。 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入待净化液，弃去流出液， 加 5 mL 5%乙酸水溶液、5 mL甲醇淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱； 加 15 mL 5% 氨化甲醇洗脱，收集流出液（上样、洗脱过程保 持流速 1 mL/min）。 重新溶解：洗脱液 40℃下氮吹至近干，用 1 mL 甲醇溶解， 经 0.22 µm 滤膜过滤，供 HPLC 测试。

SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 活化：HLB 固相萃取柱使用前用 3 mL 甲醇、3 mL 水活化。 上样和洗脱：在 HLB 固相萃取柱上加入 10 mL 备用样液，弃 去流出液，用 3 mL 5%甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱； 用 8 mL甲醇 -乙酸乙酯溶液（1:9, v/v）洗脱，收集洗脱液（整 个上样、洗脱过程保持流速 2 mL/min）。 重新溶解：洗脱液 40℃氮吹吹干，1 mL 甲醇定容，过 0.45 µm 滤膜，上机测试。

SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 活化：HLB 固相萃取柱使用前用 3 mL 甲醇、3 mL 水活化。 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入提取备用液，弃去流出液； 加入 3 mL 35% 甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液，抽干小柱；加 6 mL 甲醇洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程保持流速 1 mL/min）。 重新溶解：40℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用 1 mL 甲醇 溶解，经 0.22 µm 滤膜重新过滤，供 HPLC 测定。

SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 活化：HLB 固相萃取柱使用前依次使用 3 mL 甲醇和 3 mL 水 活化。 上样和洗脱：将待净化液的样品清液加入已活化好的固相萃 取柱中，以 1 mL/min的流速过柱，弃去滤液。依次用 3 mL 0.02 mol/L 盐酸溶液、0.1 mol/L 盐酸溶液、甲醇 / 水溶液 (5:95, v/v) 淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，用吸耳球吹出小柱中残 留液。用 5 mL 甲醇洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 40℃氮吹吹干，用 2 mL 甲醇定容，0.22 µm 微孔滤膜过滤，供 HPLC 上机测试。

SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 活化：HLB 柱依次用 5 mL 甲醇和 5 mL 水活化。 上样和洗脱：准确吸取 10 mL 备用液以 1 滴 / 秒的速度过 HLB 固相萃取柱，待样液全部流出后，依次用 5 mL 水和 5 mL 甲醇 - 水 (5:95, v/v) 淋洗，弃去全部流出液。2.0 kPa 以 下减压抽干 5 min，最后用 10 mL 甲醇 - 乙酸乙酯溶液 (1:9, v/v) 洗脱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 40℃氮气吹干，加 10 mmol/L 三氟乙酸 水溶液 1.0 mL 溶解残余物，水系滤膜过滤，供高效液相色谱 测定。

SPE 柱净化（Copure® C18，500 mg/6 mL） 活化：C18 固相萃取柱使用前依次使用 5 mL 甲醇和 5 mL 水 活化，保持柱体湿润。 上样和洗脱：将待净化液加入已活化好的固相萃取柱中，以 2 mL/min 的流速过柱，弃去滤液，用 5 mL 水淋洗固相萃取 柱，弃去淋洗液，抽干小柱。用 6 mL 甲醇洗脱固相萃取柱， 收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 45℃氮吹吹干，用 1 mL 甲醇溶解，0.22 µm 微孔滤膜过滤，供 HPLC 上机测试。

邻苯二甲酸酯类是一种脂溶性物质，样品进行提取是多采取非极性溶剂进行提取，对于含脂肪等杂质较多的食品在进行提取时会有大量的脂类物质被提取出来，从而干扰后续的分析工作，故对提取的样品溶液在仪器检测前必须进行净化处理。 Freestyle Series全在线预浓缩-GPC净化-SPE净化-定量浓缩多联机系统进行样品前处理，有效去除油脂等大分子干扰物质，由于样品提取物中不仅有大分子杂质还有小分子杂质，有时样品提取物仅仅经GPC净化还是不能达到很好的净化结果， Freestyle Series多联机系统还提供SPE净化模式，能很好地去除样品中杂质，并同时完成样品的定量浓缩，为后续仪器检测数据的可靠提供更有力的保障。

SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL） 活化：HLB 固相萃取柱使用前用 1 mL 甲醇、1 mL 水活化。 上样和洗脱：在 HLB 固相萃取柱上加入 1 mL 血清样品，弃去 流出液；用 1 mL 5%甲醇水溶液、淋洗，弃去淋洗液；抽干小柱； 用 2 mL 甲醇溶液洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程保 持流速 1mL/min）。 重新溶解：50℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用 1 mL 甲醇 复溶。经 0.22 µm 滤膜重新过滤，供高效液相色谱测定。