2021/12/13 11:30
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产品配置单:
多管涡旋混匀仪
型号: SDC-3000
产地: 深圳
品牌: Biocomma
¥2.88万
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12位固相萃取装置
型号:
产地:
品牌: Biocomma
¥6850
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呕吐毒素免疫亲和柱COAFDON103
型号:
产地:
品牌: Copure
¥3657
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Copure®呕吐毒素免疫亲和柱COAFDON101
型号:
产地:
品牌: Copure
¥4285
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方案详情:
一、样品提取
1、大米 称取粉碎后的大米 5.00 g(精确到 0.01 g)食品到 50 mL 离 心管,加 25 mL 70% 甲醇水溶液,振荡 30 min,4000 r/min 下离心 5 min,取上清液 5 mL 于 15 mL 离心管中,加 10 mL 磷酸缓冲液,混匀待净化。
2、食用油 称取 5.00 g(精确到 0.01g)食用油到 50 mL 离心管,加 1 g NaCl,20 mL 70% 甲醇水溶液,振荡 30 min,4000 r/ min 下离心 5 min,取上清液 1 mL,加入 4 mL 水,混匀待 净化。
3、酱油 称取 5.00 g(精确到 0.01 g)酱油到 50 mL 离心管,加 70% 甲醇水定容至 20 mL,超声 5 min,振荡 10 min,取上清液 1 mL,加入 4 mL 水,混匀待净化。
4、葡萄干 称取搅碎 5.00 g(精确到 0.01 g)葡萄干到 50 mL 离心管, 加提取液(称取 150.0 g 氯化钠、20.0 g 碳酸氢钠溶于约 950 mL 水中 , 加水定容至 1 L)20 mL,超声 5 min,振荡 5 min, 4000 r/min 离心 5 min,取上清液 1 mL 到 4 mL 磷酸缓冲溶液, 混匀待净化。
5、白酒 取白酒 5.00 g(精确到 0.01 g)到 50 mL 离心管,加碳酸氢 钠溶液(10 g/L)定容至 20 mL,振荡 15 min,取上清液 1 mL 到 4 mL 磷酸缓冲溶液,混匀待净化。 磷酸缓冲溶液:称取 8.0 g氯化钠、1.2 g磷酸氢钠、0.2 g磷酸二氢钾、0.2 g 氯化钾溶解于约 990 mL 水中 , 用浓盐酸调节 pH=7.0,用水稀释至 1 L。
二、免疫亲和柱净化(Copure® 赭曲霉毒素 A 免疫亲 和柱,3 mL)
上样:取待净化样品 2 mL 过柱,弃掉流出的液体。
淋洗和洗脱:加入 20 mL 水淋洗柱子,分两次淋洗,弃掉流 出的液体,抽干小柱;加入 2 mL 甲醇缓慢洗脱亲和柱,流速 约为 2-3 秒 / 滴。
重新溶解:40℃下氮吹至近干,加 1 mL 初始流动相复溶,0.22 µm 滤膜过滤,供 HPLC 分析。
三、仪器条件
设备:Waters Alliance 2695 色谱柱:Inertsustain-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器:Waters 2475 荧光检测器 检测波长:激发波长 : 333 nm 发射波长 : 447 nm 流动相:A:乙腈 B:2% 乙酸水溶液 洗脱方式:等度洗脱,A:B=49.5:50.5 流速:1 mL/min 进样体积:20 µL
四、实验结果
表 1 25.0 μg/kg 食品中赭曲霉毒素 A 的添加回收结果
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