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鱼肉中喹乙醇检测的固相萃取方法（Copure® HLB）
2021/11/29 10:31
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方案摘要：
产品配置单：
多管涡旋混匀仪
型号： SDC-3000
产地： 深圳
品牌： Biocomma
¥2.88万
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HN-32 全自动均质仪
型号： HN-32
产地： 深圳
品牌： Biocomma
¥15.8万
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方案详情：
一、样品提取
准确称取 5.00 g 匀浆鱼肉试样 ( 精确到 0.01 g) 于 50 mL 具塞塑料离心管中，加入 35 mL 甲醇 / 水溶液 (5:95, v/ v)，离心管置入摇床中，室温下恒温振荡器振荡速度 110 r/min，避光振荡 45 min。提取液在 3500 r/min 下离心 10 min，上清液经滤纸过滤，滤液加入 10 mL 正己烷，充分混 匀后，以 5000 r/min 离心 10 min，弃取上层溶液，下层溶 液待净化。
二、SPE 柱净化（Copure® HLB，60 mg/3 mL）
活化：HLB 固相萃取柱使用前依次使用 3 mL 甲醇和 3 mL 水 活化。
上样和洗脱：将待净化液的样品清液加入已活化好的固相萃 取柱中，以 1 mL/min的流速过柱，弃去滤液。依次用 3 mL 0.02 mol/L 盐酸溶液、0.1 mol/L 盐酸溶液、甲醇 / 水溶液 (5:95, v/v) 淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，用吸耳球吹出小柱中残 留液。用 5 mL 甲醇洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。
重新溶解：洗脱液于 40℃氮吹吹干，用 2 mL 甲醇定容，0.22 µm 微孔滤膜过滤，供 HPLC 上机测试。
三、仪器条件
设备：Waters Alliance 2695 色谱柱：XB-C18 （4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器：Waters 2487 紫外检测器 检测波长：380 nm 流动相：A：甲醇 B：0.1 mol/L 甲酸水溶液 洗脱方式：梯度洗脱，见表 1
表 1 梯度洗脱条件
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