葡萄糖氧化酶(GOD)活性检测试剂盒 微量法

葡萄糖氧化酶（GOD）活性检测试剂盒说明书

微量法

注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

规格：100T/96S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

1、 工作液的配制：取 15 mL 试剂一和 3 mL 试剂二混匀（现配现用）；

2、 试剂三：融化后可分装-20℃保存。

产品说明：

GOD（EC 1.1.3.4）广泛存在于动物和植物中，催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸，并产生H₂O₂，是生物体中产生活性氧的代谢途径之一。

GOD催化葡萄糖产生H₂O₂，过氧化物酶在有氧存在时催化H2O2分解产生的氧又将邻联茴香胺氧化生成有色物质，颜色深浅与葡萄糖氧化酶活性成线性关系。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

（1）组织处理：称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

（2）细菌、细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声波破碎（功率 20%或 200w，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）。8000g 4℃离心 10 分钟，取上清，置冰上待测。

（3）血清（浆）：直接检测。

二、测定步骤

1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至500nm，蒸馏水调零。

2、 加样表：

样本测定前将 GOD 工作液与试剂三放入 37℃水浴中保温，然后将上述试剂按顺序加入微量比色皿/96 孔板中，加样本的同时开始计时；在500nm波长下记录20秒时的初始吸光度A1及2小时20秒时的吸光度A2。计算ΔA=A2-A1。

三、GOD 活力单位的计算

注意事项：

1、 不同匀浆组织中 GOD 活力不一样，做正式试验之前请做 1-2 次预试验，若 A2-A1>0.8，则说明组织活力太高，必须用提取液稀释成适当浓度匀浆上清液，使 A2-A1<0.8，以提高检测灵敏度。实验过程中若出现 A1> A2 现象请将样本用提取液稀释成适当浓度。

2、 最好两个人同时做此实验，一个人比色，一个人计时，以保证实验结果的准确性。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！