土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）活性检测试剂盒 微量法

土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）活性检测试剂盒说明书

微量法

注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

规格：100T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

1、 试剂二：临用前取 1 瓶加入 1.875 mL 丙酮溶解，用不完的试剂 2-8℃保存一周。

产品说明：

S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。

S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺，后者在405nm有最 大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、离心机、水浴锅、研钵、甲苯（不允许快递）、丙酮（不允许快递）、30-50目筛、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

取新鲜土样自然风干或 37℃烘干，过 30-50 目筛。

二、测定步骤

1、 分光光度计/酶标仪预热30min以上，波长调至405nm，分光光度计蒸馏水调零。

2、 加样表：

三、酶活计算公式

实验实例：

1、 称取两管 0.03g 三叶草土样，分别记为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用 96 孔板测得计算ΔA=A 测定管-A 对照管=0.6-0.17=0.43，计算酶活得：

S-LAP 活性（U/g 土样）=0.507×ΔA÷W=0.507×0.43÷0.03=7.267 U/g 土样。

2、 称取两管 0.03g 土样，分别记为测定管和对照管，按照测定步骤操作，用 96 孔板测得计算ΔA=A 测定管-A 对照管=0.569-0.128=0.441，计算酶活得：

S-LAP 活性（U/g 土样）=0.507×ΔA÷W=0.507×0.441÷0.03=7.4529 U/g 土样。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！