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上海远慕生物科技有限公司
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解决方案
制备微生物检测培养基细节问题
应用领域
生物产业检测样品
生物发酵检测项目
培养基分装好的培养基应立即进行灭菌。灭菌的方法种类如下：
1. 高压蒸汽灭菌法
大多耐热培养基都可用此法，小量分装时，用121℃，15min;灭菌量大时，用121℃，30min灭菌;含糖类的培养基只能113~115℃，15min灭菌，避免糖类遭破坏。
2.煮沸灭菌法
对含有不耐高温物质的培养基，可使用此方法。
3.过滤除菌
以过滤的方法除菌，用无菌操作技术，定量加入培养基。血液、抗生素可用无菌操作技术抽取，加入冷却到50℃左右的培养基中。培养基含有不耐热的物质时，可用此法。
共2台
免疫荧光技术直接法测抗原实验步骤
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
免疫荧光技术实验步骤
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+”表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++”以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
共2台
高氏1号培养基制备的操作步骤
应用领域
生物产业检测样品
生物发酵检测项目
高氏1号培养基称量和溶化 按配方先称取可溶性淀粉，放入小烧杯中，并用少量冷水将淀粉调成糊状，再加入少于所需水量的沸水中，继续加热，使可溶性淀粉完全溶化。然后再称取其他各成分，并依次溶化，对微量成分FeSO4 ．7 H2 O可先配成高浓度的贮备 液，按比例换算后再加入。待所有试剂完全溶解后，补充水分到所需的总体积。 配制固体培养基时，将称好的琼脂放入已溶的试剂中，在加热融化，最后补充所损失的水分。
共1台
血液琼脂培养基的制备实验
应用领域
生物产业检测样品
生物发酵检测项目
血液琼脂培养基的制备实验方法原理 血液培养基是一种含有脱纤维动物血（一般用兔血或羊血）的牛肉膏蛋白胨培养基，因此除培养细菌所需要的各种营养外，还能提供辅酶（如V因子），血红素（X因子)等特殊生长因子。 因此血液培养基常用于培养，分离和保存对营养要求苛刻的某些病原微生物。此外，这种培养基还可用来测定细菌的溶血作用。
共1台
实验人正确制备细胞周期实验样品
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
细胞周期分析细胞周期分析是分子生物学常用的实验方法，尤其在抗肿瘤药物研究上使用普遍。但细节若是处理不好，做得再多也做不出正确的、好看的分布图。今天远慕生物来测下如何准确制备细胞周期测试的样品，科研实验的小伙伴们一起来了解下！
共3台
【核酸染料选择】远慕教您选择符合实验要求的核酸染料
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
核酸检测核酸染料是一种灵敏、稳定和相对安全的荧光核酸染色试剂，是生物实验中不可或缺的一分子，尤其是在核酸检测相关试验中，所以核酸染料对于分子生物学相关专业的学生来说并不陌生，该如何选择适合自己使用的核酸染料呢？
共3台
提取RNA时如何去除DNA的污染
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
分离纯化 注意事项：
从少量样品（1-10mg组织或102-104细胞）中提取RNA时可加入少许糖原以促进RNA沉淀。例如加800ml TRIzol匀浆样品，沉淀RNA前加5-10μg RNase-free糖原。糖原会与RNA一同沉淀出来，糖原浓度不高于4mg/ml是不影响第一链的合成，也不影响PCR反应。
匀浆后加氯仿之前样品可以在-60至-70℃保存至少一个月。RNA沉淀可以保存于75% 酒精中2-8℃一星期以上或-5至-20℃一年以上。
分层和RNA沉淀时也可使用台式离心机，2600×g离心30-60分钟。
预期产量：1mg组织或1×106细胞提取RNA分别为：
肝和脾6-10μg，肾3-4μg，骨骼肌和脑组织1-1.5μg，胎盘1-4μg，上皮细胞8-15μg，成纤维细胞5-7μg 。
共2台
毒性噬菌体和温和噬菌体有什么区别？
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
荧光成像毒性噬菌体指在宿主菌体内复制增殖，产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌。毒性噬菌体的增殖方式是复制，其增殖过程经历吸附穿入、生物合成和成熟释放3个阶段。
共1台
BCIP NBT碱性磷酸酶显色试剂盒实验
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
碱性磷酸酶显色BCIP NBT碱性磷酸酶显色试剂盒(BCIP/NBT?Alkaline?Phosphatase?Color?Development) 是一种用于免疫组化显色、Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS鉴定等的试剂盒。BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物,在碱性磷酸酯酶的催化下,BCIP会被水解产生强反, 该产物会和NBT发生反应,形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。
BCIP/NBT?Alkaline?Phosphatase?Color?Development̳可用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定, 也可用于Western等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测\细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。
共5台
植物体内游离脯氨酸含量的测定
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
游离脯氨酸含量植物在正常条件下，游离脯氨酸含量很低，但遇到干旱、低温、盐碱等逆境时，游离脯氨酸便会大量积累，并且积累指数与植物的抗逆性有关。因此，脯氨酸可作为植物抗逆性的一项生化指标。
脯氨酸是水溶性最大的氨基酸，具有很强的水合能力，其水溶液具有很高的水势。脯氨酸的 疏水端可和蛋白质结合，亲水端可与水分子结合，蛋白质可借助脯氨酸束缚更多的水，从而防止 渗透胁迫条件下蛋白质的脱水变性。 因此脯氨酸在植物的渗透调节中起重要作用， 而且即使在含 水量很低的细胞内，脯氨酸溶液仍能提供足够的自由水，以维持正常的生命活动。正常情况下， 植物体内脯氨酸含量并不高，但遭受水分、盐分等胁迫时体内的脯氨酸含量往往增加，它在一定 程度上反映植物受环境水分和盐度胁迫的情况，以及植物对水分和盐分胁迫的忍耐及抵抗能力。
采用磺基水杨酸提取植物体内的游离脯氨酸，不仅大大减小了其他氨基酸的干扰，快速简便，而且不受样品状态（干或鲜样）限制。在酸性条件下，脯氨酸与茚三酮反应生成稳定的红色缩合物，用甲苯萃取后，此缩合物在波长520nm处有一最大吸收峰。脯氨酸浓度的高低在一定范围内与其消光度成正比。
共5台
大豆胰蛋白酶抑制因子的测定
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
主要成分含量实验原理
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大豆胰蛋白酶抑制因子（STI）水平。用纯化的大豆胰蛋白酶抑制因子（STI）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入大豆胰蛋白酶抑制因子（STI），再与HRP 标记的大豆胰蛋白酶抑制因子（STI）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大豆胰蛋白酶抑制因子（STI）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大豆胰蛋白酶抑制因子（STI）浓度。
共5台
植物有丝分裂染色体压片实验
应用领域
生物产业检测样品
生物农业检测项目
有丝分裂染色体压片实验实验方法原理:
细胞的有丝分裂是一个连续动态的变化过程，但可以通过它的形态变化，特别是细胞核中的染色体行为，人为地划分阶段，并进行比较研究。在自然状态下，一大群处于各个分裂期的细胞混杂在一起。必须仔细观察，寻找有丝分裂过程各期典型形态特征的细胞，从而建立起细胞周期的概念。
植物的分生组织（如根尖分生区、茎尖生长点等）细胞，能够通过有丝分裂增加其数目。依据植物细胞分裂周期中各个时期细胞中染色质或染色体的形态、数目、位置变化，确定该细胞所处的时期。为了看清染色体或染色质，要用碱性染料将其染色。
共4台
磷酸钙介导的高分子量基因组 DNA 转染细胞实验
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
磷酸钙介导的高分子量基因组 DNA 转染细胞实验下述方法是对Graham与VanderEb(1973)建立的磷酸转方法的改进，用高分子量基因组DNA代替了质粒DNA。这一方法对建立稳定的携带补充宿主染色体基因突变的转染基因的细胞系尤其有用（Segeetal.1984,Kingsleyetal.1986)。
共5台
谷胱甘肽琼脂糖亲和层析纯化融合蛋白实验
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
pGEX载体表达的外源蛋白与谷胱甘肽S转移酶法
谷胱甘肽-琼脂糖树脂的处理
1. 轻轻顛倒盛有谷胱甘肽-琼脂糖树脂的容器，将树脂混成匀浆。
2. 取部分匀浆放入 15 ml 聚丙烯管（每 100 ml 细菌培养物需要 2 ml 匀浆)。
3.4°C500 g(2100r/min Sorvall SS-34 转头）离心 5 min, 小心去掉上清。
4. 在树脂中加入 10 倍柱床体积的冷的 PBS, 顛倒数次，混合均匀，4°C 500 g(2100r/min SorvallSS-34 转头）离心 5 min, 小心去掉上清。
5. 每毫升树脂加入 lml 冷的 PBS, 制成 50% 匀浆，顛倒数次，混合均匀，悬液冰上放置待用。
共2台
细菌基因组DNA提取实验
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
细菌基因组DNA提取试验方法原理:
本试剂盒采用独特的细胞裂解和相分离技术，结合DNA 制备膜选择性地吸附DNA 的方法达到纯化基因组DNA 的目的。适合于从1.0x109 细菌中获得多至20 ug 的基因组DNA。用于PCR、Southern 印迹分析、RAPD、RFLD 等分子生物学实验。
共5台
细胞增殖检测——MTT法
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
细胞增殖——MTT法细胞增殖是指细胞在周期调控的因子下，通过DNA复制等反应，完成细胞分裂的过程。增殖检测一般是分析分裂中的细胞数量的变化，进而反应细胞的生长状态及活性，目前广泛应用于肿瘤生物学，分子生物学，药代动力学等领域。
共3台
共2台
亚硫酸氢盐修饰后测序法检测甲基化
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
亚硫酸氢盐修饰重亚硫酸盐使DNA中未发生甲基化的胞嘧啶脱氨基转变成尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶保持不变，用PCR扩增（引物设计时尽量避免有CpG，以免受甲基化因素的影响）所需片段，则尿嘧啶全部转化成胸腺嘧啶。最hou对PCR产物进行测序，并且与未经处理的序列比较，判断是否CpG位点的甲基化状态。
共4台
斑点金免疫渗滤测定（DIGFA）实验
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
斑点金免疫渗滤（DIGFA）分析实验目的:
斑点金免疫渗滤测定（DIGFA）可用于临床检验。
实验方法原理:
斑点金免疫渗滤测定实验是在斑点免疫渗滤测定法基础上，改用胶体金标记物代替酶，省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜（NC膜）为载体，将试剂及标本滴加在膜上，通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成，阳性结果在膜上呈红色斑点。
共4台
RNA干扰（转录后基因沉默）实验
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
干扰（转录后基因沉默）实验RNA干扰
1. 病毒基因、人工转入基因、转座子等外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内，并利用宿主细胞进行转录时，常产生一些dsRNA。宿主细胞对这些dsRNA迅即产生反应。其胞质中的核酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA（大约21-23 bp），即siRNA。siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链，继之由反义siRNA再与体内一些酶（包括内切酶、外切酶、解旋酶等）结合形成RNA诱导的沉默复合物（RNA-induced silencing complex，RISC）。RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性结合，RISC具有核酸酶的功能，在结合部位切割mRNA，切割位点即是与siRNA中反义链互补结合的两端。被切割后的断裂mRNA随即降解，从而诱发宿主细胞针对这些mRNA的降解反应。siRNA不仅能引导RISC切割同源单链mRNA，而且可作为引物与靶RNA结合并在RNA聚合酶（RNA-dependent RNA polymerase，RdRP）作用下合成更多新的dsRNA，新合成的dsRNA再由Dicer切割产生大量的次级siRNA，从而使RNAi的作用进一步放大，最终将靶mRNA完全降解。
共1台
微生物鉴定中常用的生化反应
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
生化反应实验方法原理:
1. 有些细菌具有合成淀粉酶的能力，可以分泌胞外淀粉酶。淀粉酶可以使淀粉水解为麦芽糖和葡萄糖，淀粉水解后遇碘不再变蓝色。
2. 细菌产生的脂肪酶能分解培养基中的脂肪生成甘油及脂肪酸。脂肪酸可以使培养基pH下降，可通过在油脂培养基中加入中性红做指示剂进行测试。中性红指示范围为pH6.8（红）——8.0（黄）。当细菌分解脂肪产生脂肪酸时，则菌落周围培养基中出现红色斑点。
共1台
丹磺酰化法分析蛋白质 N-末端氨基酸实验
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
α-氨基与丹磺酰氯蛋白质的α-氨基与丹磺酰氯(DNS-Cl 是一种荧光物质) 反应, 生成DNS-蛋白质, 经水解可生成DNS-氨基酸。通过聚酰胺薄膜层析分析DNS-氨基酸, 可确定蛋白质的N-末端氨基酸。此法灵敏度高, 也可用于蛋白质的氨基酸组成的测定。聚酰胺对极性物质的吸附作用是: 它能和被吸附物质间形成氢键, 这种氢键的强弱决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。层析时展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离物在聚酰胺表面发生吸附、解吸附、再吸附和再解吸附的连续过程, 就能导致分离物达到分离的目的。
共5台
动物组织中喳诺酮类残留量的测定方法实验
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
喹诺酮类残留物组织中喹诺酮类残留物主要是原形药物，故一般选择原形药物作指示残留。多数代谢产物代谢较快，如脱甲基产物，可能主要存在于排泄物中，一些喹诺酮类的代谢产物，如脱甲基二氟沙星、脱乙基恩诺沙星（即环丙沙星）仍具有较强的生物活性，应列入总残留物。
共5台
氯化锂沉淀法去除质粒DNA制备物中的小片段核酸
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
氯化锂沉淀法去除质粒制备物中小片段核酸（包括 DNA 和 RNA )质粒粗提物中的高分子质量 RNA 和蛋白质可在高浓度氯化锂溶液中形成沉淀，从而可通过低速离心加以分离（实例请见Kondo et al. 1991)。
共4台
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
制备实验实验方法原理:
取一定量的细胞悬液，先加入特异的第1抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，在加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体复合物，以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。
共4台
枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备实验
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
制备实验枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备可应用于：（1）建立枯草芽孢杆菌转化体系；（2）其基因改造；（3）提高枯草芽孢杆菌生产性能的相关研究。
共4台
细胞分裂的形态观察实验
应用领域
生物产业检测样品
其他检测项目
形态观察实验目的: 通过标本制备和观察了解生物体细胞的无丝分裂、有丝分裂形态特征及生殖细胞的减数分裂过程。
1.无丝分裂:
实验原理:
无丝分裂不仅是原核生物增殖的方式，而且雷马克(Remak)于1841年最早在鸡胚血细胞中也发现此现象，因为此过程没有出现纺锤丝和染色体的变化，故称无丝分裂(Ami- tosis)。其后无丝分裂又在各种动植物中陆续发现，尤其在分裂旺盛的细胞中更多见，但遗传物质平均分配否及其分裂的机制尚不十分清楚。
共1台
