2019/10/10 10:04
阅读:210
分享:
免费下载
方案摘要:
产品配置单:
吐温209005-64-5报价
型号: 10ml
产地:
品牌: 远慕
面议
参考报价
胶体金标记物保存稀释液
型号: 2X50ml/2X250ml
产地:
品牌: 远慕
面议
参考报价
HEPES-BSA溶液(HA)
型号: 100ml,500ml
产地:
品牌: 远慕
面议
参考报价
PBS-EDTA缓冲液(4×PE,pH7.4)
型号: 100ml,500ml
产地:
品牌: 远慕
面议
参考报价
方案详情:
实验目的:
斑点金免疫渗滤测定(DIGFA)可用于临床检验。
实验方法原理:
斑点金免疫渗滤测定实验是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。
实验材料 :
细胞样品
试剂、试剂盒:
PBS
吐温-20
BSA
特异性抗体 抗原
金标抗体
仪器、耗材:
渗滤装置
NC膜
实验步骤:
一、试剂及材料
1. 渗滤装置:为一塑料小盒(4x3x0.6 cm),分为底、盖两层,盖的中央有一个直径0.5 cm的小孔。盒底充填吸水性较强的垫料,盖孔下,紧贴垫料放置一片NC膜。紧闭盒盖,即为渗滤装置。在孔中的NC膜上点加1-2 ml特异性抗体(一抗)或抗原,室温自然干燥,保存于放干燥剂的密封塑料袋中备用。
2. 封闭液:含0.2%BSA和0.05%吐温-20的洗涤液。
3. 洗涤液:50 mol/L,pH7.2 PBS。
4. 特异性抗体(一抗)或抗原
5. 金标抗体
二、操作方法
1. 取出渗滤器,先在小孔的NC膜上,滴加2滴(约100 ml)封闭液;
2. 待其渗入盒内,在NC膜上,加待检标本1滴(约50 ml);
3. 待其渗入盒内,在NC膜上,滴加2滴(约100 ml)洗涤液;
4. 待其渗入盒内,在NC膜上,加金标抗体1滴(约50 ml),使其与NC膜上吸附的检品发生反应;
5. 待其渗入盒内,在NC膜上,滴加2滴(约100 ml)洗涤液;
6. 至洗涤液完全渗入盒内
三、结果观察
在小孔NC膜上出现红色反应时为阳性反应,阴性反应不着色。
注意事项:
1. 特异性抗体(一抗)或抗原、待检标本和金标抗体的用量事先都必须应用方阵法确定最适用量。
2. 盒底充填的垫料吸水性要强,否则影响结果。
下载本篇解决方案:
大肠杆菌表达体系出现无或低蛋白表达结果因素
大肠杆菌表达体系为什么会出现无或低蛋白表达的结果?诱导前后蛋白存在毒性或者表达过程中密码子有偏向性,都可能造成蛋白不表达或低表达的结果。
生物产业
2024/07/11
微生物菌种衰退原因分析+复壮方法
不适宜的培养和保藏条件是加速菌种衰退的另一个重要原因。不良的培养条件如营养成分、温度、湿度、pH值、通气量等和保藏条件如营养、含水量、温度、氧气等,不仅会诱发衰退型细胞的出现,还会促进衰退细胞迅速繁殖,在数量上大大超过正常细胞,造成菌种衰退。
生物产业
2024/07/09
复苏的细胞不贴壁问题解决
复苏细胞是否贴壁跟你冻存时的操作有直接关系。而且细胞的传代数越多,即细胞越老,越禁不起低温的折腾。复苏后,细胞有个休眠期,大约7-14天不等。只要不死,你就慢慢养着。突破了某个时间点,你会发现细胞又神奇的康复了。但要等到细胞状态良好,传2代以上再做实验。尤其是流式、RNA干扰之类的。
生物产业
2024/07/04
琼脂糖凝胶电泳常见问题解决
琼脂糖凝胶电泳是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。对于分子量较大的样品,如大分子核酸、病毒等,一般可采用孔径较大的琼脂糖凝胶进行电泳分离。
生物产业
2024/07/01