EB替代物——6XSafe Dye Loading Buffer

目前国内大多数实验室使用的最普遍的核酸染料包括EB (溴化乙啶）、SYBR Green和GoldView，而这几种染料在安全性、稳定性和灵敏性方面都存在着不可忽视的缺点。其中EB是目前使用最广泛的核酸染料，其灵敏度相对较高，但它是一种剧毒且具有高诱变性的化学物质，极大的危及实验人员的身体健康；而SYBR Green稳定性差，在微碱性的电泳缓冲液中极易降解；市面上的GoldView则灵敏度较差，会影响实验结果的真实性。为解决上述问题，海基研发的全新一代EB替代染料-Safe Dye，安全、灵敏度高、稳定性好，使用Safe Dye EB替代染料配制而成的Loading Buffer和DNA Marker具有安全、灵敏度高、稳定性好、使用方便等优点。

使用Safe Dye EB替代染料时，在制胶过程中无需加入EB 、SYBR Green和GoldView等核酸染料，只需将DNA(PCR产物、质粒或基因组DNA)与Loading Buffer充分混合即可进行凝胶电泳。由于Safe Dye EB替代染料的激发波长与EB激发光波长相同，故无需更换实验设备。海基推出的Safe Dye真正实现了安全、灵敏度高、稳定性好的保证，成为真正的EB替代染料，是广大实验室工作人员的最佳选择。

主要特征

安全保证：是EB、SYBR Green、GoldView染料新型的代替物，经细胞学试验证明Safe Dye EB替代物不能穿透细胞膜，具有极低的细胞毒性和诱变性。

高灵敏度：等于或稍高于EB，远远高于GoldView和SYBR Green。

使用方便：无需加入凝胶中，只需将DNA(PCR产物、质粒或基因组DNA)或RNA与Loading Buffer充分混合即可进行凝胶电泳，电泳后可直接进行观察。

简化制胶过程：1min即可制备琼脂糖凝胶。

由于该染料无需添加入凝胶中，使制备的凝胶可保存更长时间，从而节省凝胶的用量。

激发波长为300nm（或310nm），与EB激发光波长相同，无需更换实验室设备。

稳定性高于EB、SYBR Green、GoldView，可长期储存。

储存

室温避光长期保存，可保存两年。

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

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应用实例3：采用荧光酶活测定法在30℃和60℃条件下测定HotStart Bst 4.2，结果显示与未加入Aptamer的对照比较来看。HotStart Bst 4.2在30℃条件下酶活几乎无活性，而60℃条件下1min内酶活完全释放，恢复100%活性