Sau DNA Polymerase

Sau DNA聚合酶（Sau DNA Polymerase）是具有链置换活性的DNA恒温扩增聚合酶，主要应用于RPA重组酶扩增。重组酶UvsX与引物结合形成的蛋白-DNA复合物，能在双链DNA中寻找同源序列；一旦引物定位了同源序列，就会发生链交换反应，Sau DNA聚合酶启动DNA合成，对模板上的目标区域进行指数式扩增， 被替换的DNA链与SSB结合，防止进一步替换。

本Sau DNA 聚合酶来源于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus) DNA 聚合酶（Sau） I 基因, 是将其N端的1-293个AA截去而得。该酶保留了DNA聚合酶 的 5´-3´ 聚合酶活性，但是缺失了 5´-3´ 和3‘-5’核酸外切酶活性，可用于重组酶扩增。

应用

随机引物法标记

cDNA 第二条链的合成

单个 dA 的加尾

链置换的 DNA 合成

活性定义

在37℃条件下，30min内参入10nmol酸性不容物定义为1个活性单位。

1X Sau Reaction Buffer

50 mM NaCl ，10 mM Tris-HCl (Ph7.5) , 10 mM MgCl2 , 1 mM DTT。

储存

-20℃可保存2年，避免反复冻融。

热失活

75°C，20min。

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

‍

应用实例3：采用荧光酶活测定法在30℃和60℃条件下测定HotStart Bst 4.2，结果显示与未加入Aptamer的对照比较来看。HotStart Bst 4.2在30℃条件下酶活几乎无活性，而60℃条件下1min内酶活完全释放，恢复100%活性