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解决方案

使用 NovoCyte Advanteon 流式细胞仪 进行高灵敏度 SSC 和荧光检测

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

的细胞外囊泡 (extracellular vesicle, EV) 和微球
本应用介绍了 Agilent NovoCyte Advanteon 流式细胞仪分析小颗粒的性能,包括由细胞形成的细胞外囊泡 (extracellular vesicle, EV) 和微球。NovoCyte Advanteon 流式细胞仪配备了先进的检测器,能够提供高灵敏度的侧向角散射 (side scatter, SSC)和荧光检测,获得比传统流式细胞仪更出色的检测结果。

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Agilent NovoCyte Advanteon 流式细胞仪

NovoCyte Advanteon

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在 NovoCyte Advanteon 流式细胞仪上 使用 16 色免疫表型分析 Panel 对激活后的 T 细胞状态进行全面分析

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

分化、活化、衰竭和通过脱颗粒及细胞因子的表达分析其功能
T 细胞是免疫应答的重要组成部分,能够识别和清除外来病原体和肿瘤细胞。然而,为了防止产生自身免疫和免疫病理学问题,必须严格控制 T 细胞应答。我们开发了一款用于 Agilent NovoCyte Advanteon 流式细胞仪的 16 色免疫表型分析 panel,可同时分析 T 细胞的分化、活化、衰竭和通过脱颗粒及细胞因子的表达分析其功能。理论上,这种方法可以全面分析 T 细胞在免疫应答中的功能。

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Agilent NovoCyte Advanteon 流式细胞仪

NovoCyte Advanteon

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单克隆抗体多个关键质量属性的评估和可比性评估

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

关键质量属性 (CQAs)
基于多属性方法 (MAM) 的 LC/MS 肽谱分析在生物制药分析领域受到了广泛的关注。本应用展示了使用 LC/MS 肽谱分析方法对不同单克隆抗体 (mAb) 的关键质量属性 (CQAs) 进行的表征和定量分析。将肽谱分析结果与传统方法进行了比较,结果表明,肽谱分析与传统方法对赖氨酸截短、氧化、脱酰氨基化、N 端环化和糖基化程度的估算高度相似。

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Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统

1290 Infinity II

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优化用于极性代谢物的发现代谢组学液质联用方法

应用领域

生物产业

检测样品

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检测项目

异构体色谱分离
为了在分析中实现对多种常见内源性代谢物类别的全面覆盖,开发了高 pH 和低 pH亲水相互作用色谱 (HILIC) 法。这些方法适用于高分辨率的精确质量数 LC/Q-TOF 质谱仪 (MS)。靶向代谢物类别包括维生素、氨基酸、聚胺、糖、磷酸糖、有机酸、核苷酸和辅酶 A (CoA) 衍生物。对液相色谱梯度和离子源进行了系统优化,以获得良好的异构体色谱分离效果,并获得所研究的所有代谢物类别的最佳信号响应。为验证此方法的稳定性,使用 HILIC LC/Q-TOF MS 方法运行 25 小时对酵母提取物进行了评估。

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Agilent 6545 Q-TOF 液质联用系统

6545

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延长 Bio-Monolith Protein A 色谱柱在滴度测定中的使用寿命

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

蛋白质浓度
Bio-Monolith Protein A 色谱柱经过微小修饰减少了堵塞,极少或没有出现宿主细胞蛋白的非特异性结合。这些色谱柱表现出极小的残留和出色的使用寿命,即使在进样 750 次细胞培养上清液原液后,峰形也几乎没有变差。 这为快速、准确地测定抗体滴度水平提供了出色的工具,适用于一次筛选数百个样品。

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Agilent 1260 Infinity II 液相色谱系统

1260 Infinity II

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小分子治疗性蛋白的高分离度体积排阻色谱分析

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

重组 hGH 和hG-CSF 治疗性蛋白质
涉及聚集的蛋白质变性过程是阻碍稳定蛋白质药物制剂开发的因素之一。使用体积排阻色谱 (SEC) HPLC 测定这些蛋白质的纯度和聚集体是一种相对简单的技术。定期校准 SEC 方法可确保更好的重现性,从而提高准确性,还可及早发现样品及批次中的潜在问题。本简报将 Agilent AdvanceBio SEC 120 Å 1.9 μm 色谱柱与其他供应商的亚 2 μm 填料色谱柱进行了比较。对重组人生长激素 (hGH)、人粒细胞集落刺激因子 (hG-CSF) 以及干扰素 α-2b (INF α-2b) 蛋白的分析结果表明,AdvanceBio 色谱柱在小分子蛋白质治疗药物应用方面具有卓越性能。

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Agilent 1260 Infinity II Prime HPLC 液相色谱系统

1260 Infinity II Prime

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使用反相高效液相色谱-蒸发光散射法(RP-HPLC-ELSD) 对 PEG 偶联重组蛋白注射剂中的吐温 20(聚山梨酯 20)进行分析

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

吐温 20(聚山梨酯 20)
本文介绍了利用 Agilent 1260 Infinity Ⅱ 四元液相色谱系统、Agilent 1290 Infinity Ⅱ ELSD 检测器和 Agilent Poroshell 120 SB-C18, 3.0 mm × 150 mm, 2.7 μm 色谱柱对 PEG 偶联重组蛋白注射剂中的吐温 20 进行定量分析的简单灵敏的方法。该方法采用含三氟乙酸(0.1% TFA) 的乙腈和水溶液为流动相,以梯度条件对注射剂中吐温 20 进行分离分析。该方法操作方便,灵敏度高,具有良好的线性关系、精密度和准确度,为生物制药企业测定PEG 偶联的一类重组蛋白制剂中的吐温 20 辅料提供一种可选的解决方案。

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安捷伦 1260 Infinity II 四元液相色谱

1260 Infinity 四元

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使用 Agilent 7900 ICP-MS 在 scICP-MS 模式下进行单细胞分析

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

四种元素
扩展对金属在细胞生物学中的作用的了解是一个新兴的研究领域。许多元素对细胞健康至关重要,元素不平衡、缺乏或过量可能会破坏自然细胞过程。用于测量细胞中金属的传统整体性分析方法依赖于样品溶解、提取或消解,然后利用原子光谱进行分析。这些样品前处理步骤破坏了细胞结构,因此报告的金属浓度结果为数千个细胞的平均值。 在单细胞 ICP-MS (scICP-MS) 中,样品溶液中包含的完整细胞被雾化,各个细胞悬浮在气溶胶液滴中。使用与通过 ICP-MS (spICP-MS) 进行单纳米颗粒分析的成熟方法类似的方法将各个细胞引入等离子体中。

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Agilent 7900 电感耦合等离子体质谱仪

7900

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利用安捷伦 6550 iFunnel Q-TOF LC/MS 系统进行高通量、高效率的代谢物分析

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

小分子化合物
安捷伦 6550 iFunnel Q-TOF LC/MS 系统 (6550 Q-TOF) 结合流动注射分析 (FIA) 方法对 96 个生物提取样品中的小分子化合物进行分析。本实验展示了这一仪器分析系统的优越性能,与上一代 Q-TOF 仪器的检测结果相比,本分析系统在检测离子数量方面增加了一个数量级。同时灵敏度和分辨率的大大提高,使得大肠杆菌代谢组学研究的覆盖范围增加了六到七倍,而且提供了更详细的代谢途径分析。

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Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统

1290 Infinity II

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为热熔实验提供更快的升温速率——使用 Cary 3500 紫外-可见分光光度计在任意升温速率下获得相同结果

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

溶解温度
升高温度可诱导双链核酸分离为单链。在一定温度下,碱基对之间的氢键发生断裂。热熔实验利用了腺嘌呤-胸腺嘧啶 (A=T) 与鸟嘌呤-胞嘧啶 (GΞC) 核苷酸之间氢键数的差异。由于 GΞC 核苷酸含有三个氢键,解离所需热能大于 A=T 对所需的热能。这表示含有更多 GΞC 对的 DNA 要在更高的温度下才能熔解。熔解温度 (Tm) 可指示样品中的碱基组成(GΞC 与 A=T 的比例)。制造商和研究人员常将 Tm 用作 QC 校验指标。 使用紫外-可见分光光度法测定熔点,利用的是单链核酸在 260 nm 处的吸光度高于双链核酸的原理。图 1 显示了使用小干扰 RNA (siRNA) 样品的示例,与 25 °C 相比,85 °C 下 260 nm 处的吸光度明显更高。

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Agilent Cary 3500 紫外可见分光光度计

Cary 3500

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Cary 3500 多池紫外-可见分光光度计用于蛋白质分析的优势——提高极小体积样品定性和定量测量的效率和重现性

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

定性和定量
紫外-可见分光光度计测量为样品的质量控制检查提供了一种快速可靠的方法。它们还可用于计算比活性或估算纯化后的产率,并鉴定含有蛋白质和氨基酸的组分。 含有芳香侧链氨基酸的蛋白质,在接近 280 nm 处产生吸收。因此可以使用紫外-可见分光光度计进行定量分析。当吸收系数已知时,可根据比尔-朗伯定律 (1) 确定含有这些氨基酸的蛋白质的浓度。通常蛋白质的样品量有限,以最少体积进行测量对于样品的保存至关重要。通过波长扫描可提供潜在污染物的信息。 Cary 3500 多池紫外-可见分光光度计具有永久光学准直的集成式多池支架,与超微量比色皿(图 1)配合使用,非常适用于可靠且可重现的定性及定量测量。

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Agilent Cary 3500 紫外可见分光光度计

Cary 3500

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靶向序列捕获和新一代测序前对福尔马林固定石蜡包埋组织及新鲜冷冻组织进行 DNA 质量控制

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

DNA 质量控制
本文将介绍利用 Agilent 2100 生物分析仪系统的微流控芯片电泳,在新一代测序工作流程的 SureSelect 靶向序列捕获之前或期间,对福尔马林固定石蜡包埋组织及新鲜冷冻组织的 DNA 样品进行质量控制。借助 2100 生物分析仪系统可靠的 DNA 电泳技术,可提供弥散条带谱及详细的文库统计信息,例如峰高、平均弥散条带分子量、分子量分布和 DNA 浓度。FFPE DNA 样品的结果与新鲜冷冻组织和对照 DNA 的 DNA 分析结果具有可比性。

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Agilent 2100 生物分析仪

2100

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使用 Agilent 7200 系列 GC/Q-TOF 进行酵母类固醇的代谢轮廓分析

应用领域

生物产业

检测样品

生物发酵

检测项目

代谢轮廓
使用安捷伦7200 系列GC/Q-TOF 系统和Mass Profiler Professional(MPP)软件对酵母类固醇进行了代谢轮廓分析,用来精确测定新型潜在抗真菌药物的靶酶。将相对浓度的麦角甾醇生物合成中间体的靶标分析和非靶标分析相结合,再赋予精确质量的高分辨 GC/Q-TOF 技术,可以获得最全面的结果。电子电离(EI)的全采集模式质谱图结合 MS/MS 产物离子质谱数据,进一步确保了酵母中药物治疗蓄积化合物定性的准确性。

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Agilent GC 7890B 气相色谱仪

7890B

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采用 LC/MS、GC/MS 和 NMR 技术的安捷伦代谢组学工作流程解决方案

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

鉴定和定量
安捷伦科技公司是代谢组学解决方案领域名符其实的领导者。代谢组学是对代谢物,即参与细胞内生物学过程中的有机小分子进行鉴定和定量的技术。这些分子是生物学功能的重要指标,通过研究这些分子,可以获得有关细胞生理学、代谢及毒性的独特见解。 由于不同种类的代谢组学实验需要不同的技术方法,因而安捷伦提供了几种不同的工作流程解决方案。这些工作流程采用液相色谱/质谱 (LC/MS)、气相色谱/质谱 (GC/MS)以及核磁共振 (NMR) 仪器采集数据,利用代谢组学化合物数据库进行化合物鉴定,并用软件进行数据分析和生物学解析。 本文将对这些代谢组学工作流程的各个部分进行概述。同时还讨论了在选择各种方法时需要考虑的问题。例如,实验的多个技术因素如灵敏度要求、样品复杂性、样品前处理,以及目标代谢物的化学性质等都会影响到最终的技术决策。这些因素以及其它一些因素都会在后面的章节中一一进行详细阐述。

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Agilent GC 7890B 气相色谱仪

7890B

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自动化液质联用样品前处理:通过安捷伦 AssayMAP Bravo 平台实现高通量溶液内酶解和多肽纯化

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

酶解和多肽纯化
适用于液质联用 (LC/MS) 分析的蛋白质和多肽样品前处理的工作流程由于依赖于连续的手工操作而效率低下,导致试验方案缺乏通量、可扩展性和可转移性。这类工作流程通常依赖于技能非常娴熟的从业人员以达到可接受的重现性,或者在很多情况下,鉴于工作流程的特殊性,较大的差异是可被勉强接受的。为解决这些问题,可以采用安捷伦 AssayMAP Bravo 平台及其蛋白质组学工具套件实现 LC/MS 蛋白质组学工作流程常规样品处理工作的自动化,使 LC/MS 样品前处理具有可重现性、可扩展性、方案可移植性和易用性。本平台由顶级的液体处理器、一次性微量色谱柱和简单的用户可定制方案组成,可高通量地进行蛋白质酶解和多肽纯化。BSA 经酶解后纯化所得的分析性能数据表明 25 种 BSA 目标多肽的日间重现性良好, % CV 小于 5% 此外,我们还展示了用于多肽纯化的 AssayMAP RP-S 和 C18 反相柱的所有特性。

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Agilent AssayMAP Bravo 蛋白质样品前处理平台

AssayMAP Bravo

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采用 GC/Q-TOF 进行蓝藻固碳突变体代谢组学研究

应用领域

生物产业

检测样品

生物能源

检测项目

固碳突变体代谢物
使用非靶向代谢组学评估蓝藻细长聚球蓝细菌模型的突变体,从而对可实现蓝藻更高效生长的可能表型变化进行鉴定。采用Agilent 7200 系列GC/Q-TOF 分析突变体,通过 Mass Profiler Professional 中的安捷伦通路结构软件分析代谢物谱的变化。本方法鉴定了多个代谢途径以及能够解释突变体改良表型的可能目标物。

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Agilent GC 7890B 气相色谱仪

7890B

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自动化液质联用工作流程:采用 AssayMAP 技术进行溶液内蛋白酶解、肽段纯化以及肽段的强阳离子交换分馏

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

肽段
液质联用鉴定肽段的样品制备,通常由多步骤工作流程组成,包括溶液内蛋白酶解、肽段纯化,以及肽段分馏。该过程通常需要根据样品特性及分析目的( 即定量或表征)定制为具体的应用方法。样品制备工作流程的自动化可提高样品处理能力、降低差异性,并且无需熟练操作人员执行重复工作。然而,自动化平台通常并不用于最初的分析开发,这是因为分析开发者很少具有开发复杂自动化方案的经验。相反,分析通常是采用湿式工作台相关技术进行开发,然后在自动化专家的帮助下移植到自动化平台。 采用 AssayMAP 肽段样品制备解决方案,无需掌握专门的技术也能实现自动化操作。开发者可通过一个简单的软件用户界面和灵活的实验方案对关键实验变量进行完全控制,从而能够专注于科学分析研究。如今,分析开发者、科学家或技术员无需具备自动化专业知识也能实现可扩展、精确的自动化操作。采用 AssayMAP 平台,整个工作流程可直接在相同的硬件上进行开发,如需实现高通量样品前处理,也易于对硬件进行扩展,从而可减少或避免已有实验方案实现自动化所需的额外时间和资源。本文将介绍发现(鸟枪法)蛋白组学研究的一种常规液质联用工作流程,包括溶液内酶解、反相肽段纯化,以及肽段的强阳离子交换分馏 (SCX),所有这些操作均由 AssayMap Bravo 液体处理器完成。采用 SCX 小柱通过增加 pH 或离子强度对大肠杆菌蛋白裂解液进行逐步洗脱,在六个 SCX 馏分中鉴定出 15000 多条特定肽段序列,其中 64-67% 的肽段可专属性地在其中一个馏分中得到鉴定。

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Agilent AssayMAP Bravo 蛋白质样品前处理平台

AssayMAP Bravo

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用于 Spent Media 培养基分析的 Agilent AdvanceBio 工作流程

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

氨基酸和其他小分子代谢物
安捷伦的 AdvanceBio 色谱柱能够让您的生物技术实验室更轻松地分析用过的细胞培养基中的氨基酸和其他小分子代谢物,无论样品是否经过衍生化处理。用氨基酸对用于这两种解决方案的色谱柱进行测试,以确保其质量和性能。您只需选择满足您需求的工作流程。

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Agilent 1260 Infinity II Prime HPLC 液相色谱系统

1260 Infinity II Prime

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利用 AGILENT 6545 Q-TOF LC/MS 系统探究脂质组

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

脂质
通过测量生物基质中的脂质追踪其对疾病、药物、基因修饰和其他刺激因素的响应,需要采用具有较高分辨率、质量精度和灵敏度的四极杆飞行时间液质联用系统。 本应用采用 6545 Q-TOF 和 1290 Infinity 液相色谱系统分析来自慢性阻塞性肺病 (COPD) 患者的诱导痰脂质提取物。6545 Q-TOF 系统利用全新 Swarm 自动调谐功能进行调谐,可在脂质的 m/z 范围内获得最佳性能,并在具有参比质量校正功能的正负离子化模式下采集数据。

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Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统

1290 Infinity II

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使用 GCxGC 和 Agilent 7200 GC/ Q-TOF 对稻瘟病菌 Magnaporthe oryzae 进行非靶向代谢组学研究

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

代谢物
全二维气相色谱 (GCxGC) 可提供卓越的色谱分离度,与精确质量高分辨率质谱 (MS) 结合使用时可大大促进复杂基质中的化合物鉴定和结构解析。利用 GCxGC/Q-TOF MS 在配备 Zoex ZX2 热调制器的 Agilent 7890B GC 和 Agilent 7200 GC/Q-TOF 上进行非靶向代谢组学研究,可对多种可能在稻瘟病菌 M. oryzae 的致病机理中发挥重要作用的代谢物进行鉴定。

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Agilent GC 7890B 气相色谱仪

7890B

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在 AdvanceBio SEC 聚集体分析之后 进行 Protein A 亲和 IgG 捕获——采用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

聚集体分析
本应用简报介绍了使用 Agilent 1290 Infinity 二维液相色谱解决方案对生物治疗样品中聚集体的定量分析。Protein A 亲和捕获在第一维中进行,而体积排阻色谱在第二维中进行。多中心切割用于将样品从第一维转移到第二维。这项技术能够在一次分析中完成整个表征,无需进行馏分收集和多次进样。

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Agilent 1290 Infinity II 二维液相色谱解决方案

1290 2D-LC

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蛋白(肽段)定量的原理及安捷伦的解决方案

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

定量
蛋白质作为所有生命周期的直接参与者,是生命现象和生物规律变化的标志物,在生命科学的大环节中占据着举足轻重的地位。从蛋白质的角度去描述生物的变化,业已成为研究生命科学的主要手段。处于不同时期、不同条件下的功能性蛋白质,其表现形式及丰度水平千变万化、生理功能模块和介导信号通路纷繁复杂,因此,深入研究蛋白质乃至对生物标志物监测充满着艰辛与挑战。与早期关注蛋白质的发现过程不一样,目前生物化学家越来越重视功能性蛋白质在表达量上的变化,蛋白丰度的变化更能体现出生命变化的多样性。 生化实验室最根本的分析任务之一就是蛋白的定量分析,但以往的抗体免疫化学法 (Western Blot) 表现出较差的特异性和较高的测量误差 (CV > 20 - 40%)。串联质谱多反应监测 (MRM/SRM)定量方法,一直以来就是定量的黄金标准,在小分子定量上早已成熟使用,随着液相色谱和串联质谱技术的提高,越来越多的生蛋白(肽段)定量的意义及出现 MRM 质谱技术平台的缘由化实验室开始大量采用串联质谱技术为基础的蛋白(肽段)定量流程。MRM 肽段定量方法的优点很多,它利用蛋白专属的肽段序列完成定量分析,一次运行可同时分析几十到几百种的蛋白,具备高通量的定量分析能力。特别是 2012 年,方法论领域的权威期刊《Nature Methods》将基于三重四极杆质谱 (QQQ) 平台的 MRM/SRM 定量思路的靶向蛋白质组学 (Targeted proteomics) 技术列为当年的年度方法,确立了目标蛋白定量分析的权威策略。近年来该杂志陆续发表了多篇论文,对 QQQ-MRM/SRM 思路成功应用于目标蛋白定量分析进行了持续报道。随着质谱灵敏度的大幅提高,以大流速常规液相色谱 (LC) 取代纳流液相色谱 (Nano-LC) 所组成的 MRM 肽段定量方法,代表着蛋白定量分析的最高技术标准,极大地促进生物化学及各种新应用快速向前发展,广泛应用在蛋白质组学、生物制药等研究领域,并迅速朝着诸如食品、环境、临床等更宽的应用范围发展。

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Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统

1290 Infinity II

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Agilent SureSelectQXT WGS 文库制备的质量控制

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

分子量
本应用简报按照 Agilent SureSelectQXT WGS 文库制备方案,介绍了 Agilent 4200 TapeStation 系统在工作流程中的样品质量控制 (QC) 性能。基因组 DNA ScreenTape 分析法是对基因组 DNA 起始材料进行系列定量分析并提供完整性信息的可靠方法。安捷伦高灵敏度 D5000 ScreenTape 分析法可在测序前对扩增的标签文库进行分子量测定和定量分析。数据还表明,采用 DNA ScreenTape 分析法所获得的结果与使用 Agilent 2100 生物分析仪系统和 Qubit 荧光计进行分析所得到的信息相一致。

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Agilent 2100 生物分析仪

2100

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固相合成染料标记的或 FMOC 保护肽核酸的制备纯化

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

肽核酸
?This Application Note demonstrates: • Configuration of the Agilent 1200 Series Rapid Resolution LC (RRLC)analytical scale (AS) purification system. • Use of the Agilent 1200 Series RRLC AS purification system with anoptimized method for purification of peptide nucleic acids from solidphase synthesis.

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Agilent 1260 Infinity II 制备型液相色谱

1260 Infinity II Preparative

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用于单克隆抗体完整结构或亚基精确质量数测定的一体化工作流程

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

精确质量数
单克隆抗体 (mAb) 型药物代表了发展迅速的一类生物药物,对这类药物需要进行深入表征,以便获得临床试验和后续上市的批准。鉴于单克隆抗体具有分子量大及存在翻译后修饰(糖基化)的特征,精确质量数测定是单克隆抗体分析表征中最具挑战性的步骤。这些特性也使得修饰位置的测定更加复杂。 为了应对抗体质量数测定相关的挑战,人们使用了大量补充方法。可以用 PNGase F 处理抗体去除 N-糖链,后用 IdeS 等蛋白酶酶解获得抗体片段,也可还原单克隆抗体,以生成轻链和重链,随后进行质量数测定。这些技术可以各种组合加以应用。样品前处理可能费时费力,而且重现性不佳。本应用简报展示了如何使用 Agilent AssayMAP Bravo 的自动化功能简化这些方法,减少引入人为误差的可能性,提高重现性,并实现更长的无人值守时间。

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Agilent AssayMAP Bravo 蛋白质样品前处理平台

AssayMAP Bravo

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从样品前处理到数据分析的单克隆抗体 N-连接糖链全面分析方法

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

N-连接糖链
单克隆抗体 (mAb) 及其衍生物包含一类非常重要的生物分子,它们具有广泛的应用。由于 mAb 的异质性,必须对此类生物分子进行全面的分析表征。分析包括测定 mAb 及其异构体的完整氨基酸序列,以及糖基化、氧化和脱酰氨基化等翻译后修饰 (PTM) 的表征。 糖基化在许多生物过程中起着重要的作用。它还会对治疗效果、稳定性、药代动力学和免疫原性产生影响。糖链表征通常会涉及到 NMR、HPLC 或质谱 (MS) 等技术。由于糖链在组成和结构方面十分多样,并且很难采用电喷雾电离,因此基于质谱方法的糖链表征具有挑战性。InstantPC 是一种 ProZyme Inc. 推出的新型荧光标签,已开发用于改善 N-糖链分子的 MS 电离效果和检测灵敏度。

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Agilent 1290 Infinity II 液相色谱系统

1290 Infinity II

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蛋白质的纯化和鉴定

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

纯化和鉴定
蛋白质的产率和纯度是衡量纯化是否成功的重要指标。除有效的色谱分离外,配置良好、可靠的仪器也能影响纯化的成功。制备型反相(RP)液相色谱由于具有高分离能力,经常被用做多肽和小分子亲水蛋白纯化流程的最后一步。虽然大家都知道反相液相色谱所用的溶剂条件会使蛋白结构变性,但也能通过调节适当的条件再使其复性,特别是小分子蛋白。Agilent 1100系列纯化系统是设计良好、合适的反相色谱的系统。

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Agilent 1290 Infinity II 制备型液相色谱

1290 Infinity II Preparative

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天然产物的纯化

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

刺芒柄花素和其它植物性雌激素
这是一个用Agilent 1100系列纯化系统AS和PS对红三叶中刺芒柄花素和其它植物性雌激素进行分析型和制备型分离的例子。分析型放大方法可用于在Agilent 1100系列纯化系统AS上分离复杂植物粗提物中的化合物。在这个方法的基础上,进行了按色谱峰收集馏分的制备型分离。 • 为了获得更多的植物雌激素物质,使用了Agilent 1100系列纯化系统的馏分合并功能 • 通过对馏分的再分析测定了所得化合物的纯度 • 根据分析结果将方法放大 • 为了在一次运行中得到更大量的目标化合物,在Agilent 1100系列纯化系统PS上用两种不同的色谱柱重复了纯化方法 制备规模的结果与在分析型系统上得到的结果相当。

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Agilent 1290 Infinity II 制备型液相色谱

1290 Infinity II Preparative

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对化合物库进行质谱引导的馏分收集

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

馏分收集与纯化
化合物库含有需要筛查生物活性的一系列结构类似的化合物。虽然,组合化学和常规合成化学相比,简化了合成过程,但仍然需要从其杂质和反应副产物中对化合物进行纯化。

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Agilent 1290 Infinity II 制备型液相色谱

1290 Infinity II Preparative

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使用 Agilent Captiva EMR-Lipid 96 孔板进行生物体液样品的蛋白质沉淀

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

蛋白质沉淀
蛋白质沉淀技术 (PPT) 是适于 LC/MS/MS 分析的生物体液样品前处理的最常用技术之一。将蛋白质沉淀应用于生物体液样品,可以从基质中有效去除蛋白质。本应用简报讨论了生物体液样品 PPT 的重要步骤、考虑因素和注意事项。本文重点介绍使用 Captiva EMR-Lipid 96 孔板的孔内 PPT,包括合适的沉淀溶剂、比例、添加剂、生物体液基质、生物体液样品等分和沉淀溶剂的板上添加顺序、内标 (IS) 添加,以及板中的样品混合。最后,对使用离心的传统 PPT 和用 Captiva EMR-Lipid 净化后 PPT的对比结果进行了详细讨论,包括时间、方法性能以及对仪器的影响。

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