土壤β-葡萄糖苷酶(S-β-GC)活性检测试剂盒 微量法

土壤 β-葡萄糖苷酶（S-β-GC）活性检测试剂盒说明书

微量法

规格：100T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

1、 试剂一：自备甲苯；

2、 试剂二：临用前每瓶加入 13 mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂仍-20℃保存；

3、 标准液：5 mmol/L 的对硝基苯酚溶液；

4、 标准液的准备：取 100 μL 标准液，加入到 400 μL 试剂三中，得到 1 mmol/L 标准液，再用蒸馏水十倍稀释到 100 μmol/L。

产品简介：

S-β-GC 能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。

S-β-GC 能够催化对-硝基苯-β-D 吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，产物略显黄色，在 400nm 有特征光吸收。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、恒温培养箱、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、30-50目筛、冰、研钵、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作步骤：

一、样品处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干，过 30~50 目筛。

二、测定步骤

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 400nm，蒸馏水调零。

2、 用蒸馏水倍比稀释：50、25、12.5、6.25μmol/L。100、50、25、12.5、6.25μmol/L 做标准液。

3、 加样表：

三、S-β-GC 酶活的计算

1、标准曲线建立：

根据标准管的浓度（y）和吸光度 ΔA=A 标准管-A 空白管（x），建立标准曲线。根据标准曲线，将 ΔA（x）带入公式计算样本浓度（μmol/L）。

2、S-β-GC 酶活的计算：

单位的定义：每天每 g 土样中产生 1μmol 对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。

S-β-GC 酶活（U/g 土样）=y×V 反总÷W÷T=0.36×y

T：反应时间，1h=1/24d；V 反总：反应体系总体积：3×10-4L；W：样本质量，0.02g。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！