三氯蔗糖是以蔗糖为原料经氯代而制得的一种非营养型强力甜味剂，甜度为蔗糖的600倍，极易溶于水，具有甜味纯正，化学稳定性好，在人体内几乎不被吸收，是糖尿病人的甜味代用品等优点。因此，广泛应用于酱油、饮料、乳制品、饮料酒和果酱等加工食品中。我国 2011 版《食品添加剂使用卫生标准》中规定可以在调味乳、饮料、糖果等 27 种产品中使用三氯蔗糖，但均有限量规定。三氯蔗糖结构式检测方法：本试验参考GB 22255-2014食品中三氯蔗糖（蔗糖素）的检测方法，采用高效液相色谱-蒸发光散射检测法，对酱油和酸奶中三氯蔗糖的前处理方法及分析条件进行验证。实验步骤：1、试剂准备甲醇（CH3OH）：色谱纯乙腈（CH3CN）：色谱纯正己烷（C6H14）水：超纯水乙酸锌：Zn(CH3COO)2.2H2O亚铁氰化钾：K4Fe(CN)6.3H2O中性氧化铝（100-200目）2、溶液配制乙酸锌溶液（219 g/L）：准确称取21.9 g乙酸锌，加入3 mL乙酸，加水溶解至100 mL。亚铁氰化钾溶液（106 g/L）：称取10.6 g亚铁氰化钾，加水溶解至100 mL。甲醇水溶液（75+25）：准确量取75 mL甲醇，加25 mL水，混匀。乙腈水溶液（11+89）：准确量取11 mL乙腈，加89 mL水，混匀。3、样品提取3.1 酱油基质称取2 g试样（精确到0.01 g）于50 mL离心管中，加入1 g中性氧化铝，再加入3 mL水和15 mL甲醇，涡旋混合30 s，在3000 r/min的条件下离心10 min，移取上清液于另一离心管中，往沉淀物中加5 mL甲醇水，重复提取一次，合并上清液于150 mL分液漏斗中。往分液漏斗中加入30 mL的正己烷，摇晃3 min后静置分层，待分层结束后将下层水相70℃氮吹至约1 mL，再加入9 mL的水，离心10 min，最后取上清液待净化。3.2 酸奶基质称取2 g试样（精确到0.01 g）于50 mL离心管中，加入5 mL的水和15 mL的甲醇，混匀，再加入0.5 mL的乙酸锌和亚铁氰化钾溶液；后续步骤同酱油基质提取方法，最后上清液待净化。4、净化SPE柱：SelectCore HLB固相萃取柱（200 mg/6mL）活化：  依次用5 mL的甲醇和水活化；上样：  加入提取好的全部上清液；淋洗：  用1 mL的超纯水溶液进行淋洗；洗脱：  用3 mL甲醇水溶液（75+25）进行洗脱，收集洗脱液，在50℃下用氮气吹至近干，用1 mL乙腈水溶液（11+89）复溶后，过0.45 μm PES滤膜后上机检测。5、液相色谱仪器条件Column:         ChromCore C18, 5 μmDimension:     4.6×150 mmMobile Phase: H2O:ACN=89:11（v/v）Flow Rate:      1.0 mL/minTemperature:  35 ℃Injection:       20 μLDetection:      ELSDNebulizer Temperature: 60 ℃Evaporator Temperature: 80℃Gas Flow Rate: 1.6 L/min6、实验图谱及加标回收率图1：0.4 mg/mL三氯蔗糖对照品溶液色谱图图2：酱油空白基质色谱图图3：添加水平200 mg/kg的酱油基质色谱图图4：酸奶空白基质色谱图图5：添加水平200 mg/kg的酸奶基质色谱图样品加标回收率实验结果：样品名称化合物加标量（mg/kg）平均回收率%酱油三氯蔗糖20097.98%酸奶三氯蔗糖20090.79%7、实验结论由以上实验数据可得，选择纳谱分析的SelectCore HLB 200mg/6mL固相萃取柱和ChromCore C18 5μm，4.6×150 mm分析柱，酱油和酸奶样品中三氯蔗糖的测定数据稳定、分离度良好、回收率较高，符合国标检测要求。产品描述货号ChromCore C18 5μm, 4.6×150mmA001-050018-04615SSelectCore HLB 200mg/6mL; 30/pkgHLB060-060200-1

1、基线漂移基线漂移是色谱工作者普遍遇到的问题，在实际工作中，我们经常会遇到基线漂移的情况，特别是在梯度洗脱的时候，基线漂移是常有的事。一般说来，机器刚启动时，基线容易漂移，大概要30min的平衡时间，如果你用了缓冲溶液或缓冲盐，还有就是在低波长下（220nm以下）平衡时间相对会比较长，如果你在实验过程中发现基线漂移，则可以考虑下面的原因：01柱温波动控制好色谱柱和流动相的温度，检查是否有打开的窗户或空调对着柱温箱(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动，特别是示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器)。控制好色谱柱和流动相的温度,在检测器之前使用热交换器；02流通池被污染或有气体流通池被污染，一般基线是向同一方向漂移的，可以用异丙醇或其他强极性溶剂冲洗流通池（最好断开柱子）；如有需要，可以用1N的硝酸（不要用盐酸）；03紫外灯能量不足更换新的紫外灯；04流动相污染、变质或由低品质溶剂配成检查流动相的组成，使用高品质的化学试剂及HPLC级的溶剂；要特别注意在流动相的配置过程中，是否引入了污染，比如使用了不干净的玻璃器皿什么的。05样品中有强保留的物质强保留的物质（高K’值）以馒头峰样被洗脱出，从而表现出一个逐步升高的基线。如有必要，在进样之前，使用保护柱；在分析过程中，定期用强溶剂冲洗柱子；06检测器没有设定在最大吸收波长处将波长调整至最大吸收波长处；流动相里的有机相的截止波长最好要大于检测波长20nm以上，这一点切记，比如甲醇的截止波长是210nm，乙腈是190nm。当使用230nm以下的检测波长时，如果条件允许，最好使用乙腈，可以避免基线波动，其余类推；07流动相的PH值没有调节好加适量的酸或碱调至最佳PH值；08流动相不均匀流动相条件变化引起的基线漂移大于温度导致的漂移，使用HPLC级的溶剂,高纯度的盐和添加剂，流动相在使用前进行脱气，使用中采用氦气进行脱气；09检测器出口阻塞高压造成流通池窗口破裂，产生噪音基线，可取出阻塞物或更换管子，具体可参考检测器手册更换流通池窗；10流动相配比不当或流速变化更改配比或流速，为避免这个问题可定期检查流动相组成及流速；11柱平衡慢特别是流动相发生变化时用中等强度的溶剂进行冲洗，更改流动相时，在分析前用10～20倍体积的新流动相对柱子进行冲洗；12使用循环溶剂,但检测器未调整重新设定基线，当检测器动力学范围发生变化时，或使用新的流动相。2、基线噪音对于紫外检测器，氘灯光源打开后要预热30min以上，基线才能稳定。噪声是指与被测物无关的检测器输出信号的随机扰动变化，分短期噪声和长期噪声两种。氘灯用的过久，接近寿命期时(氘灯的寿命约1000h)，会使基线噪音明显增加，此时应及时更换氘灯。除光源外，流路中的气泡也会产生噪音。对于判断基线噪声增大是由于光源灯的老化还是来自流路中的气泡的问题，可将泵关上，继续走基线，如果噪声立即停止，基线呈一条直线，说明基线噪声来自流动相中的气泡，应设法排气；若停泵后仍有噪音出现，应考虑是灯的问题。电化学检测器中的工作电极(安培型)对气泡十分敏感，仪器的平衡时间较长。流路中如果有气泡存在，不仅基线会出现尖峰，还会影响检测。因此，做电化学检测时，流动相的配制要很严格，水要超纯、除还原物，配好后一定要过滤脱气，还应现用现配。如果泵系统不是PEEK材料，即电化学分析专用仪器，而是普通的高效液相色谱不锈钢泵，应对系统中的不锈钢材料的输液泵、进样器和管道，在分析前用6mol·L-1硝酸溶液钝化(注意断开分离柱)，可缩短基线平衡时间。还可在流动相中加入EDTA离子隐蔽剂，也是可以的。如果有较大的气泡进到检测器中，光靠泵冲可能太慢，可暂时将泵停止,关上电化学检测器，拆下工作电极，用超纯水冲洗电极表面，也很奏效的，但对液相色谱技术不太熟练的技术员要小心操作，不宜反复这样拆卸。基线噪音(规则的)01在流动相、检测器或泵中有空气在正式进样之前,需要对流动相脱气，冲洗系统以除去检测器或泵中的空气；在出口处使用0.009"的管路；02漏液检查管路接头是否松动；泵是否漏液；是否有盐析出和不正常的噪音，如有必要，更换泵密封圈；检查的方法就是对系统进行压力测试：将系统从某个地方用死堵堵上，如泵出口，或者自动进样器出口，将压力升高到350bar后停泵，监测压力下降的情况。一般低于2-3bar/min或者15%/10min的下降，均是正常水平。03流动相混合不完全对于等度的方法，非常简单，预混流动相就可以了。对于梯度的方法，部分预混流动相也会帮助更好的混合，怎么做呢？看下面的例子。方法要求乙腈/水比例从10%走到85%。 那可以将流动相A配成10%的乙腈，流动相B配成85%的乙腈，然后A/B梯度从0%走到100%。 这就是部分预混。增大Mixer的体积。一般Mixer的体积从几百ul到几个ml都有，在允许的延迟时间下，更换一个体积更大的Mixer，能够有效提高混合的效率，但是相应延迟体积就越大，会造成梯度的延迟。04温度影响检查是否是柱温过高，检测器未加热；加上热交换器；05在同一条线上有其他电子设备断开LC、检测器和记录仪，检查干扰是否来自于外部，加以更正；06泵振动在系统中加入脉冲阻尼器。基线噪音(不规则的)01漏液检查接头是否松动，泵是否漏液，是否有盐析出和不正常的噪音。如有必要，更换密封圈，检查流通池是否漏液；检查的方法就是对系统进行压力测试：将系统从某个地方用死堵堵上，如泵出口，或者自动进样器出口，将压力升高到350bar后停泵，监测压力下降的情况。一般低于2-3bar/min或者15%/10min的下降，均是正常水平。02流动相污染、变质或由低质溶剂配成每次更换一种流动相，看基线结果。重新配置所有流动相。这种方式比较快，但可能无法找到根本原因。要特别注意在流动相的配置过程中，是否引入了污染，比如使用了不干净的玻璃器皿什么的。03流动相各溶剂不相溶选择互溶的流动相，也可以选择可同时与不互溶溶剂都能相溶的溶剂，作为中间溶剂。下图是溶剂互溶表；04检测器/记录仪电子元件的问题断开检测器和记录仪的电源，检查并更正；05系统内有气泡用强极性溶液清洗系统；检测器内有气泡，清洗检测器，在检测器后面安装背景压力调节器；06流通池污染流通池内即使是极少的污染物也会产生噪音，用异丙醇或其他强极性溶剂冲洗流通池。如有需要，用硝酸清洗流通池（不要用盐酸）；07检测器灯能量不足更换灯;08色谱柱填料流失或长期使用造成的污染更换色谱柱；在每批样品后，用甲醇或者乙腈长时间冲洗色谱柱。另外，专柱专用也是一个好的习惯。09流动相混合不均匀或混合器工作不正常对于等度的方法，非常简单，预混流动相就可以了。对于梯度的方法，部分预混流动相也会帮助更好的混合，怎么做呢？看下面的例子。方法要求乙腈/水比例从10%走到85%。 那可以将流动相A配成10%的乙腈，流动相B配成85%的乙腈，然后A/B梯度从0%走到100%。 这就是部分预混。增大Mixer的体积。一般Mixer的体积从几百ul到几个ml都有，在允许的延迟时间下，更换一个体积更大的Mixer，能够有效提高混合的效率，但是相应延迟体积就越大，会造成梯度的延迟。3、Cyclic基线01温度影响隔离热源；搬离临近的通风口；增加流动池温度；02混合问题更换一个体积更大的混合器（Mixer），以增加系统体积；03流动相中的气体溶剂脱气；04泵不稳定调出压力曲线，观察吸光度曲线和压力曲线是否一致，如一致，证明是泵的原因，检查维修泵；05管路堵塞分段检查管线系统的问题，冲洗系统，排除并除去堵塞源头；06电问题改变电路除去根源。基线上的毛刺01气泡溶剂脱气，并重新灌注泵，流动相脱气越好，基线就会越好；02信号连接不好，连线变松 清洁并拧紧检测器上的导线；检查连线是否有损坏；或更换铲形接线片；03灯继电器试图点燃熄灭的灯更换灯；04电噪音更换电路除去根源。

左氧氟沙星         左氧氟沙星是喹诺酮类药物中的一种，具有广谱抗菌作用，抗菌作用强，对多数肠杆菌科细菌，如大肠埃希菌、克雷伯菌属、变形杆菌属、沙门菌属、志贺菌属和流感嗜血杆菌、嗜肺军团菌、淋病奈瑟菌等革兰阴性菌有较强的抗菌活性。对金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌、化脓性链球菌等革兰阳性菌和肺炎支原体、肺炎衣原体也有抗菌作用，但对厌氧菌和肠球菌的作用较差。近年来，喹诺酮类药物的严重不良反应报告数量居高不下，左氧氟沙星药物的不良反应居该类药物首位，药物不良反应除药物自身理化性质外，与药物中的杂质也有密切关系，因此对左氧氟沙星药物进行杂质分析很有必要。检测方法：本次参考中国药典2015版二部标准，采用液相色谱法，选用纳谱分析ChromCore 120 C18色谱柱对此类物质进行检测，检测图谱如下：结论选用纳谱分析ChromCore 120 C18色谱柱对此类物质进行检测，各组分杂质具有良好的峰形和分离度，结果准确可靠，满足中国药典要求，为此类药物的质量控制提供了依据。详细产品信息产品类型货号产品描述分析柱A001-030012-04625SChromCore 120 C18 3μm, 4.6×250mm

气相色谱使用过程中，经常遇到各种各样的异常峰形，如忽然不出峰了、分离度下降、峰拖尾、峰高峰面积不重复、保留时间漂移、溶剂峰拉宽、平头峰、峰伸舌、柱效下降快、负峰、峰突然变小、灵敏度下降等，遇到这些问题，如何处理，一起来学习一下吧！无峰1）载气出现异常建议采取措施:a、确认载气是否进入仪器（包括色谱柱、检测器）。发现常规样品或常规溶剂进样不出峰应立即降低柱温，使用TCD时，必须将钨丝电流关闭，确认载气系统正常后再检查其他项目；b、确认载气流速正常，如不正常重新调整载气的流速。2）注射器不正常，堵了或者损坏造成进样失败；自动进样系统进样管线堵塞导致进样失败；建议采取措施:a、清洗、疏通注射器；b、使用新的或者无损坏的进样器；c、查找自动进样系统进样管线是否正常。3）进样后样品在进样口出发生渗漏建议采取措施:清洗进样口，拧紧松动的部分。4）量程范围、衰减倍数或灵敏度档设置异常建议采取措施:提高量程范围或降低衰减倍数，设置较高灵敏度档。5）色谱柱对样品主成份(溶质)的保持力太强建议采取措施:提高色谱柱箱温度试试，确认溶质从色谱柱溶出，更换适合的色谱柱6）样品的沸点太高不能直接分析时建议采取措施:通过裂解等进行样品前处理，使其适合气相分析7）样品的热稳定性较差，可能会在进样器内分解或化合建议采取措施:降低进样器温度8）检测器没有工作或者检测器没有与数据处理系统连接建议采取措施:观察检测器是否正常工作，例如判断FID的火焰是否点燃;检查检测器与数据处理系统之间的通讯连接。9）色谱柱连接在错误的检测器上或者进样口上，甚至色谱柱发生断裂建议采取措施:重新安装色谱柱或者更换色谱柱。分离度下降1）进样失败建议采取措施:a、检查泄漏，维修泄漏b、检查温度的适应性c、检查吹扫时间d、检查衬管是否积污e、检查衬管中的玻璃纤维2）样品浓度过高建议采取措施:a、稀释样品b、减少进样量c、采取高分流比3）色谱柱被污染建议采取措施:a、切除色谱柱柱头10厘米b、高温老化色谱柱c、溶剂清洗色谱柱，或者更换新的色谱柱4）固定相被破坏建议采取措施:更换色谱柱峰拖尾1）衬管、色谱柱被污染,或者有活性点建议采取措施:清洗、更换衬管2）衬管、色谱柱安装不当,存在死体积建议采取措施:注射惰性样品（如甲烷）如果出峰拖尾,表明色谱柱安装不当，重新安装色谱柱3）进样时间过长建议采取措施:缩短进样时间4）分流比低建议采取措施:增加分流比5）进样量过高建议采取措施:减少进样体积或者稀释样品6）温度是否正常建议采取措施:a、进样口温度是否能够保证样品充分气化；b、适当提高柱温箱温度和检测器温度。7）色谱柱柱头不平建议采取措施:用宝石头笔或者陶瓷切片平滑地切开色谱柱保护层,然后在刻痕处断柱体8）在样品流经的路线中冷阱建议采取措施:消除在样品流经的路线中的过低温度区9）衬管或者色谱柱中堆积切割碎屑建议采取措施:清理更换衬管。切除柱头10厘米10）固定相的极性指标与样品分析不匹配建议采取措施:选择其它型号的固定相。一般非极性或不干净的色谱柱分析极性样品时，经常发生峰拖尾11）酸胺，伯胺，叔胺和羟酸类物质的分析易产生拖尾建议采取措施:a、选择更适合的色谱柱，如检测胺类物质选择胺类专用柱b、对样品进行衍生处理峰高峰面积不重复1）来自基线的干扰建议采取措施:找出基线异常原因。2）样品浓度（特别是挥发性样品）是否因放置时间过长而起变化。建议采取措施:重新配置样品溶液。3）平行进样不重复，偏差大建议采取措施:加强手动进样练习，使用自动进样器。4）仪器系统参数设定的改变，如各种气体流量的设定值是否正常；进样器、柱箱、检测器等的温度是否稳定。建议采取措施:将参数设定标准化、规范化。5）其它峰型变化引起的峰错位、峰干扰建议采取措施:参见其它不正常峰的内容。保留时间漂移1）进样口泄漏建议采取措施:a、检查进样隔垫，如果损坏，立即更换b、判断其它泄漏处，维修泄漏处2）色谱柱被污染建议采取措施:a、切除色谱柱柱头10厘米b、高温老化色谱柱c、溶剂清洗色谱柱，或者更换新的色谱柱3）柱温变化建议采取措施:a、检测柱温箱的温度b、色谱柱的一部分是否与柱箱内壁的金属面存在接触现象4）气体流速变化建议采取措施:注射不保留，可用惰性样品(例如甲烷）测定载气的线速度，调节载气压力5）溶剂条件变化建议采取措施:样品与标准品使用同样条件的溶剂溶剂峰拉宽1）柱温低建议采取措施:提高柱温2）进样量高建议采取措施:a、提高气化室温度，保证进样后样品瞬间气化3）不分流进样时，初始温度过高建议采取措施:降低初始温度，使用高沸点的溶剂4）分流比低建议采取措施:提高分流比5）色谱柱安装失败建议采取措施:重新安装色谱柱6）样品渗漏建议采取措施:判断其渗漏点，维修渗漏点7）吹扫时间过长（不分流进样）建议采取措施:设置各段时间的吹扫程序平头峰1）检测器输出信号溢出建议采取措施:减少进样量或者对检测器的输出信号进行衰减。2）检测器过载，形成馒头峰，甚至平头峰建议采取措施:减少样品或者稀释样品。3）采用分流进样方式时，分流比异常建议采取措施:检查分流比及分析条件的设置是否正确。峰伸舌1）峰伸舌多数是因为色谱柱过载建议采取措施:可以减少样品的进样体积(有时需要响应地提高仪器的灵敏度，也可以选用大容量的色谱柱进行分析），大内径的厚膜柱有较大的样品容量,但是分离能力相反地会下降。2）样品与色谱柱固定相液膜极性不匹配建议采取措施:a、样品衍生后再分析b、更换选择性强色谱柱。3）柱箱温度和进样器温度太低建议采取措施:a、提高色谱柱箱的温度b、尝试提高进样器的温度，改善峰的形状柱效快速下降1）色谱柱在过高的温度下长期使用建议采取措施:更换色谱柱。降低使用温度至安全的范围内2）不挥发、难挥发物质对色谱柱的污染建议采取措施:防止不挥发、难挥发物质进入色谱柱中。建议使用保护柱3）有氧进入色谱柱中，特别在升温的过程中建议采取措施:a、使用纯净的载气b、查找气路中的泄漏点，并及时维修4）色谱柱断裂建议采取措施:重新安装色谱柱5）无机酸、碱对色谱柱的毒害建议采取措施:避免让无机酸、碱进入色谱柱中负峰1）如果样品组分的导热系统高于载气的导热系数,使用TCD检测器时,出现负峰应属正常现象建议采取措施:选择数据处理系统中的“负峰处理”。2）检测器与数据处理系统的信号连接极性相反,呈现几乎全部负峰建议采取措施:将信号连接倒置。3）ECD检测器在被污染后,可能在正峰的出现后跟随一个负峰建议采取措施:清洗或者更换ECD检测器。所有组分峰变小1）分析大分子量或者低挥发样品时,样品的汽化温度或者柱温低建议采取措施: 提高样品气化温度或柱温，使用升温程序时特别要注意色谱柱标示的最高温度。2）样品的挥发建议采取措施:调整样品的浓度或者选择合适的溶剂。3）采用不分流进样模式时，分流阀截至时间过程，或者色谱柱初始温度过高，都会阻碍样品的聚焦，而影响检测效果建议采取措施:增加进样过程中分流的截止时间。降低色谱柱的初始温度，或者使用低挥发溶剂，使初始柱温低于溶剂的沸点。4）吹扫气体流速过高或者进样分流比过大建议采取措施: 调整气体流速和分流比。5）进样针缺陷建议采取措施:使用新的或者无缺陷的进样针6）进样后样品渗漏,例如隔垫失效引起渗漏建议采取措施:判断样品渗漏点，并且进行维修7）NPD检测器中铷盐表面被二氧化硅覆盖。这层涂覆物一般来源于色谱柱中硅树脂的流失，或者色谱柱衍生过程中硅烷化试剂的残留建议采取措施:更换铷盐，尽量避免硅化物进入检测器中，铷盐表面的硅化物熔球一般只有六个月的寿命。8）NPD检测器的使用温度过高、气体不纯、或者关闭检测器时环境温度过高，都会造成铷盐的流失，直接影响检测器对样品的分析建议采取措施:a、 更换铷盐。b、当气体受阻或者被切时，立即关闭NPD检测器。  c、避免过高的使用温度。d、暂时停止使用NPD检测器时，可以在150度的温度下保持对检测器的加热状态。e、仪器长期停止使用时，使用于燥剂保存。9）检测器与样品不匹配建议采取措施:选择对样品有充分响应的检测器。10）输出信号幅度不足建议采取措施:检测信号输出的衰减设定或信号连接的输出端是否正确。对样品的检测灵敏度下降1）进样时的样品渗漏使样品中组分峰减小。对于易挥发的样品，相应造成的灵敏度下降尤其明显。建议采取措施:查找渗漏点。2）使用分流气化进样模式,色谱柱初始温度过高，致使样品气化后扩散加剧，对于低沸点样品，可能引起分析灵敏度的下降。建议采取措施:使用低于样品溶剂沸点的初始柱温；使用高沸点的溶剂。3）色谱柱衬管被污染，造成对于乙醇、胺类和羟酸等活性物质的选择性和灵敏度的下降。建议采取措施:a、清洗衬管。b、使用溶剂清洗色谱柱。对样品的选择性下降严重时，更换色谱柱。

单克隆抗体（mAb）药物在生物技术制药中占有重要地位，近年来发展迅猛。mAb治疗是诊断和治疗包括自身免疫性疾病、心血管 疾病、传染病、癌症和炎症在内的疾病的有效方法。在临床实践中，治疗性抗体虽然靶向性强，但是由于其分子量大对于实体瘤的治疗效果有限。小分子的化学药物虽然具备对癌细胞的高度杀伤效力，却也常常误伤正常细胞，引起严重的副作用。ADC（antibody-drug conjugate），即抗体药物偶联物，由单克隆抗体与小分子药物（细胞毒素）偶联而成，其作用机理是通过单克隆抗体的靶向作用特异性地识别肿瘤细胞表面抗原，然后利用细胞本身具备的内吞作用使药物进入肿瘤细胞体内发生药力，从而达到杀死肿瘤细胞的目的。ADC药物由于杀伤力强大的小分子药物进入肿瘤细胞体内才开始释放，因而不仅显著提高了药物的安全性，大幅度地降低了副作用，而且极大地增强了有效性，疗效远高于同靶标的普通单克隆抗体，代表着单克隆抗体和小分子药物的研究前沿和发展方向。ADC结构复杂，且具有高度非均一性的特点，为其结构表征和特性分析工作带来了巨大挑战。其中毒物抗体偶联比率（DAR）的测定、毒物偶联位点以及该位点偶联比率的分析相当复杂，测量这种分布(称为 DAR)对于确定所获得的ADC的效价至关重要。 BioCore HIC-Butyl是一款基于疏水相互作用分离原理的高性能蛋白分离柱，它采用先进的单分散大孔硅胶微球为基质，结合独特的表面键合技术，适用于单抗以及单抗偶联药物分子的分离表征。01特点独特的化学设计，对单抗偶联药物分子（ADC）具有良好的选择性 先进的单分散微球基质，柱效高 非特异性吸附低，回收率高 耐压及有机溶剂耐受性好 批次间一致性02色谱柱技术BioCore HIC-Butyl采用先进的色谱柱技术，并针对单抗偶联药物分离所需的选择性进行优化而成。固定相由在大孔、单分散、高纯硅胶微球表面键合一层中性亲水层，并在亲水层上接枝正丁基而成（图1） 。创新性的微球技术保证了色谱柱的高柱效、耐压性以及有机溶剂的兼容性。先进的键合技术有效地阻绝生物大分子与硅胶基球表面、最大限度地降低了生物大分子与固定相间不利的相互作用，提高了疏水相互作用分离所需的选择性。03参数信息点击链接，试用有壕礼，欢迎咨询！04应用实例图2显示了通过半胱氨酸连接的ADC：用作有效载荷的小分子连接到部分还原的单克隆抗体 (mAb) 的自由巯基上，导致多分散分布。疏水作用色谱（Hydrophobic Interaction Chromatography，HIC）是根据分子表面疏水性差别来分离蛋白质等生物大分子的常用方法，也是测定ADC中DAR的重要手段。在HIC模式下，高盐浓度将待分离的样品吸附在固定相上，然后线性或阶段降低流动相中盐浓度有选择性地将样品洗脱。图3.标准蛋白的分离图3显示分离过程中，随着流动相中盐浓度的降低，疏水性弱的蛋白先被洗脱下来，而疏水性强的蛋白随后才被洗脱下来。图4.单克隆抗体IgG1，IgG2 和 IgG4的分离图4显示3种IgG分子不同的疏水性的基线分离。图5.半胱氨酸偶联单抗药物图6.模拟单抗偶联药物如图5和6所示，BioCore HIC-Butyl对半胱氨酸偶联单抗药物中不同效价的分离具有很好的选择性。05质量保证 每个批次的BioCore HIC-Butyl 的填料都按照严格的质量管理体系生产，并且用相关生物大分子（IgG单抗）质检以确保分离性能和批次间一致性。每一支出厂的色谱柱都经过成熟的装柱工艺和严格质检，并附有填料合格证书和色谱柱测试色谱图。 06订货信息点击链接，试用有壕礼，欢迎咨询！

单克隆抗体(mAb)是快速增长的生物药物市场的重要组成部分，近年来发展迅猛。mAb治疗是诊断和治疗广泛疾病的有效方法，包括自身免疫性疾病、心血管疾病、传染病、癌症和炎症。在生物药物的开发和生产过程中，必须检测、表征和量化杂质以及结构变异和修饰，并监测产品的稳定性，这是证明监管机构所要求的安全性和有效性的关键。由于翻译后修饰(PTMs)的原因，mAbs通常表现出复杂的微观异质性，包括糖基化（glycosylation），末端修饰（modifications on the termini），氧化（oxidation），脱酰胺（deamidation），异构化（isomerization），二硫键的还原（reduction of disulfide bond），聚体形成（aggregation）。mAbs的质量控制和稳定性评价是一项极具挑战性的任务，需要一整套不同分离模式的高性能色谱柱来支撑，包括Protein A，体积排阻（SEC），离子交换（IEX），疏水保留（HIC）和反相（RP）。由于大部分mAb的等电点pI在6-10范围内，其电荷异质体的分离主要由阳离子交换(CEX)来实现。离子交换色谱是基于分离介质和被分析物之间电荷相互作用原理的常用分离方法，在生物大分子的分离纯化中应用广泛。在离子交换模式下，被分离物质所带的电荷可与离子交换分离介质（固定相）所带的相反电荷结合，这种带电分子与固定相之间的结合作用是可逆的。在改变pH或者用逐渐增加离子强度的缓冲液洗脱时，固定相上结合的物质可与洗脱液中的离子发生交换而被洗脱到溶液中。由于不同物质的电荷不同，与固定相间的结合能力也不同，所以被洗脱到溶液中的顺序也不同，从而达到分离。离子交换生物分离柱的种类包含阳离子交换（WCX，SCX）和阴离子交换（SAX，WAX）。纳谱分析BioCore WCX 是一款以先进的单分散、无孔聚合物微球为基质，结合独特的表面键合技术而成的高性能弱阳离子交换蛋白分离色谱柱，适用于单抗、双抗以及单抗偶联药物中电荷异质体的分离，广泛地应用于生物制药，医疗，科研等领域。特点对单抗类分子电荷异质体选择性好、分离度高先进的单分散微球技术，柱效高、批次间一致性佳独特的表面修饰工艺，非特异性吸附低、回收率高对酸，碱和有机溶剂有良好的耐受性色谱柱技术BioCore WCX采用了先进的色谱柱技术，并针对单抗类生物大分子电荷异质体的选择性进行优化。其固定相是由在无孔、单分散、高交联度的聚苯乙烯-二乙烯基苯聚合物微球表面键合一层中性亲水层，并在亲水层上接枝的羧酸官能团。其创新性的微球技术保证了色谱柱的高柱效、耐压性、耐热性、化学稳定性以及有机溶剂的兼容性；先进的键合技术有效地阻绝生物大分子与疏水性基球的接触、最大限度地降低了生物大分子与固定相间不利的相互作用、确保单抗电荷异质体分离所需的选择性。图1. BioCore WCX 弱阳离子交换色谱柱技术参数信息点此链接，试用有壕礼，欢迎咨询！应用实例BioCore WCX色谱柱对IgG1, IgG2 和IgG4单抗中的电荷异质体具有优良的分离度，并在磷酸盐和MES缓冲体系中都显示出很好的选择性。测试图谱如下：图2.IgG1（Rituximab Biosimilar）电荷异质体分离图3.IgG2 单抗的电荷异质体分离图4.IgG2 单抗的电荷异质体分离图5.IgG4 单抗的电荷异质体分离质量保证 每个批次的BioCore WCX的填料都按照严格的质量管理体系生产，并且用相关生物大分子（IgG单抗）质检以确保分离性能和批次间一致性。每一支出厂的色谱柱都经过成熟的装柱工艺和严格质检，并附有填料合格证书和色谱柱测试色谱图。订货信息点此链接，试用有壕礼，欢迎咨询！

  合成色素检测的重要性食品的色彩是食品感观品质的一个重要因素。人们在制作食品时常会使用一种食品添加剂－食用色素。目前使用的食用色素有天然食用色素和合成食用色素两大类。合成食用色素即人工合成的色素，其优点不少，如色泽鲜艳，着色力强，但它对人体也有一定的危害，如具有一定的毒性、致泻性、致突性（基因突变）和致癌性。鉴于食用合成色素的不安全性，国家也加强了对合成色素的监管，制订了食品添加剂使用标准（GB 2760-2011），对合成色素的检测非常重视。检测方法GB5009.35-2016食品中合成着色剂的测定的方法是采用聚酰胺吸附法测定，但是该方法有一定的局限性，实验中对温度有一定要求，且吸附力不稳定。本实验采用的聚合物基质的弱阴离子交换法，针对目标分析的8种人工合成色素中含有苯磺酸和苯甲酸结构，可以和离子基团更好的结合，这样对于样品有着更好的净化能力，并且保证了测定的稳定性，更适用于复杂基质的食品的检测。ChromCore C18-AC色素专用柱系纳谱分析基于食品安全国家标准（GB 5009.35-2016 食品中合成着色剂的测定）的色谱条件基础上研发出的一款色素专用色谱柱。其采用了独特的固定相键合技术，各色素组分均具有良好的峰形及分离度，具有更长的使用寿命。样品制备1、取8种色素样品各20 mg，分别溶于10%的乙醇水溶液中，根据HPLC的出峰峰高调整相应浓度，配置成50 ppm浓度的混标溶液，待用。2、取果冻基质4g于离心管内，加入10 mL的提取液（乙醇：氨水：水=7:2:1），震荡混匀1min，在4000转的条件下离心5min，提取上清液，重复三次，收集上清液备用。3、取果冻基质的上清液2 mL于两个10 mL容量瓶中，用超纯水定容至10 mL，加入200 uL50 ppm的混标溶液，用柠檬酸溶液调节至pH=6（±0.1），作为上样液备用。前处理实验1上样液基质的全部液2活化依次用6 mL 甲醇、6 mL10%甲酸水溶液活化;(视频如下，图左为SelectCore WAX (150 mg/6 mL)SPE柱，图右为Brand W SPE柱）  活化，图左为SelectCore WAX (150 mg/6 mL)SPE柱，图右为Brand W SPE柱3上样上样液注入SPE小柱中，弃去流穿液；(视频如下图，图左为SelectCore WAX SPE柱，图右为Brand W SPE柱，为果冻基质上样）  上样，图左为SelectCore WAX  SPE柱，图右为Brand W SPE柱，为果冻基质上样4淋洗移取6 mL的水溶液注入SPE小柱中，弃去淋洗液;5洗脱移取6 mL的5%氨水甲醇液注入SPE小柱中，收集洗脱液；(视频如下，图左为SelectCore WAX SPE柱，图右为Brand W SPE柱，视频中为色素回收实验中的色素洗脱环节）  洗脱，图左为SelectCore WAX  SPE柱，图右为Brand W SPE柱6收集氮气吹干，用10%乙醇水溶液定容至1 mL，过0.45μm有机滤膜，上HPLC检测。HPLC仪器条件流动相A：乙腈      流动相B：0.02mol/L 乙酸铵水溶液色谱柱：ChromCore C18-AC色素专用柱 5μm，4.6×250mm波长：    254 nm进样量：5 uL柱温箱：35℃梯度设置：实验谱图及加标回收率数据实验结论据实验结果显示，纳谱分析的SelectCore WAX柱 (150 mg/6 mL)固相萃取柱对八种人工色素具有很好的保留效果，且在样品前处理过程中发现，相较于Brand W的SPE柱，纳谱的SelectCore WAX在流速上占有明显的优势---快且均匀，回收率也较为理想，结合纳谱分析的ChromCore C18-AC 5μm，4.6×250mm色素专用分析柱进行分析，峰型对称，分离度良好，可以满足食品中八种人工合成着色剂的测定。详细产品信息，欢迎选购：

防腐剂和甜味剂在食品加工过程中，为了食品的保存以及改善食品品质和味道的需求，食品中通常会加入少量的防腐剂和甜味剂。甜味剂是一类广泛应用于食品、饮料、药物等产业来赋予商品以甜味的添加剂，按照来源分为天然甜味剂和合成甜味剂，大多数的合成甜味剂几乎不会被人体转化，所以又被称为无热量的糖；防腐剂是能抑制微生物活动，防止食品腐败变质的一类食品添加剂。01安赛蜜Acesulfame Potassium，又称AK糖，化学式C4H4KNO4S，化学名称乙酰磺胺酸钾，白色结晶性粉末，易溶于水，微溶于乙醇，对光、热稳定，pH值适用范围较广,是目前世界上稳定性最好的甜味剂之一，广泛应用于各种食品中，主要赋予食品甜味，但是不会引起剧烈血糖反应。安赛蜜在1983年被FAO／WHO联合食品添加剂专家委员会（JECFA）列为A级食品添加剂，并推荐日均摄入量（ADI）为0-15 mg/kg。02苯甲酸Benzoic acid，又名安息香酸，分子式为C6H5COOH，是苯环上的一个氢被羧基（-COOH）取代形成的化合物，在酸性条件下对酵母、霉菌、细菌等有明显的抑制作用。在《食品添加剂使用卫生标准》（GB2760-2014）中对其在各类食品中的最大使用量有明确规定。03山梨酸Sorbic acid，化学式C6H8O2，又称为清凉茶酸、2,4-己二烯酸、2-丙烯基丙烯酸。山梨酸对霉菌、酵母菌和好气性细菌均有抑制作用，并可参与机体的正常代谢，是迄今为止国际公认的最好防腐剂之一。在《食品添加剂使用卫生标准》（GB2760-2014）中对其在各类食品中的最大使用量有明确规定。04糖精钠Saccharin Sodium，又名邻苯甲酰磺酰亚胺钠，化学式C6H4SO2NNaCO，是有机化工合成产品，是食品添加剂而不是食品，除了在味觉上引起甜的感觉外，对人体无任何营养价值。当食用较多时，会影响肠胃消化酶的正常分泌，降低小肠的吸收能力，使食欲减退。在《食品添加剂使用卫生标准》（GB2760-2014）中对其在各类食品中的最大使用量有明确规定。05脱氢乙酸Dehydroacetic Acid（DA），化学式C8H8O4，别名α,γ-二乙酰基乙酰乙酸，属于广谱防腐剂，能有效抑制霉菌和酵母菌的繁殖，从而起到延长保质期的作用。我国《食品添加剂使用卫生（GB 2760-1996）规定：脱氢乙酸可用于腐乳、酱菜、原汁桔浆，最大使用量为0.30g/kg。检测方法本次采用液相色谱法，选用纳谱分析ChromCore C18-P防腐剂专用柱，该款专用柱是纳谱分析基于食品安全国家标准和地方标准（GB5009.28-2016 食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定和DBS13/ 006-2016食品中苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸、糖精钠和乙酰磺胺酸钾（安赛蜜）的测定）的色谱条件基础上研发出的一款专用色谱柱，其采用了独特的固定相键合技术，在等度的洗脱模式下能够保证上述五种物质的良好分离。检测图谱和色谱条件如下：结论     选用纳谱分析ChromCore C18-P防腐剂专用柱，在国标规定条件下能同时测定安赛蜜、苯甲酸、山梨酸、糖精钠和脱氢乙酸，各组分均具有良好的分离度和对称性，适用于该类物质的检测。详细产品信息，欢迎选购：

药物分析中我们总会遇到些难题，在束手无策时如果学到这些小技巧，那绝对是豁然开朗。1在做中药材的浸出物的检测时，一定要按标准控制好溶剂的浓度（如乙醇等），否则检验结果会差异很大。2做原料残留物检测的时候，如果主药对杂质有干扰，现有方法无法检出，需要自己建方法的话，要优先考虑利用理化性质将杂质分离出来再进行测定。往往有意想不到的效果。3在药材薄层色谱鉴别时应该考虑一下展开剂的温度与配制顺序，有时会影响色谱的结果。4做药品有机溶剂残留量检查时，可以不拘泥于规定的色谱柱，通常的BP-624可以满足要求，取样量也可以灵活调整，标准溶液浓度根据限度做相应调整就可以了。5在采用HPLC法测物质含量时，如若流动相中用了缓冲盐，一定要注意其pH值，放置过程中可能会产生变化，而某些药物对这种变化很敏感。6在温度低的环境下做一些中药制剂的萃取时，往往会出现乳化现象，即两相不容易分层，这时可加入少量的饱和氯化钠溶液或者用电吹风对分液漏斗加温或用热抹布敷，可以加速其分层。7非水滴定中，试剂的含水量对结果有较大影响，如更换不同厂家的冰醋酸，试验结果会出现不同结果。8中药制剂的溶液（比较稠或量少）要用滤纸过滤时，可以先通过离心的方法使之分层，再去过滤。这样可以加快过滤，减少有机溶剂的挥发（环境温度高时）。9用高效液相色谱仪检测人参、麻黄的含量时因检测波长为边缘波长（203、207nm）往往一次不能成功，特别是使用一段时间后的检测器。可卸掉色谱柱，直接连接检测器，用0.1%的盐酸清洗检测池4小时，效果会好些。10在做不溶性微粒的时候是可以进行超声的，药典也有要求，可以进行30秒的超声。特别是像冻干粉针这样的品种，进行超声或者放置可以使不溶性微粒的数值减小，大家可以实验一下，放置后数据明显降低。11当用高效液相测定肽类时，使用梯度条件情况下，在做第一针样品前，最好走一个空梯度，这样保留时间会一致些。12做油性基质提取时，由于受温度影响严重，常出现乳化现象，分层时间长，可上离心机只要几分钟。13中药做薄层鉴别时，需要检测的主要成分，其性质应该与提取方法、展开剂极性、显色条件相适应。比如生物碱类成分，多显碱性，因此提取方法多为碱性氯仿回流，展开剂中肯定有浓氨或二乙胺，显色用碘化铋钾试液。再如黄酮类，不论是黄酮苷还是苷元，分子结构中都有酚羟基而显酸性，所以提取方法多为用乙酸乙酯在酸水中萃取，展开剂多用甲苯-乙酸乙酯-甲酸系列，显色剂5%三氯化铝乙醇溶液或1%三氯化铁乙醇溶液。另外，做薄层时，建议用甲醇处理一份供试品溶液备用，他的内容囊括了你需要检验的所有成分，如果某个薄层你做不出来，就可以用这份供试品溶液复核，如果有斑点，改进一下你的制备方法就可以了；如果还没有，就考虑是你样品的问题了。14样品为西林瓶装的粉针剂在做无菌实验时，往往由于压力很难吸出来，但在加入无菌注射用水之前，先用无菌注射器推入少许空气，再加注射用水，就很容易用无菌注射器将样品溶液吸出来。15在做中药材的浸出物的检测时，药材的颗粒大小要过筛，过大的块状影响浸出效果。16铺聚酰胺板时其中粘合剂宜选用可溶性淀粉，可溶性淀粉先溶于热水中，晾凉后加入聚酰胺粉研磨就OK了。铺出来的板子没什么裂纹。聚酰胺粉大概0.7克左右，加可溶性淀粉0.3克左右溶于10毫升左右的水中。17测定各种中药材或中成药含量测定时，配制对照品前，除特殊规定外，对照品一般要在五氧化二磷减压干燥12小时以上。18采用蒽酮法测核糖含量时，蒽酮要现用现配，棕色瓶装，稀释硫酸应于30-40度时加入蒽酮液中混匀。标准葡萄糖于60度干燥2小时配制。19中药注射剂检验树脂项时，用的氯仿最好用优级的，不同的试剂对结果影响很大，同时在提取放置的时间尽量长些，使其完全分开。20在用高氯酸滴定药品含量的时候，如果实验室条件有限，实验室的环境温度与滴定液的标定时的温度相差较大的时候，可以用电炉在通风橱旁边的地上加热，这样可以适当提高实验的环境温度，而又不会使温度过高，使实验结果更加精确。21有些对照品溶解性很低，配制时最好不要采用稀释法，而要采用一次配制法并且最好加热或者超声处理，例如槐角碱、橙皮苷等。22用氨试液萃取水饱和正丁醇提取的三七类皂苷类成分时极易乳化，可在50度左右加热促进分层，效果非常好。23按照药典标准在进行氢氧化钠的铝盐与铁盐的检查时，滤渣用水洗净这一步非常重要，如清洗不干净容易造成结果超标。建议用硝酸银溶液测定一下流出液的氯离子浓度，判断滤渣是否洗净。24抗生素效价测定时，加液时特别要控制好加液量，使用相同的钢管和用加液枪定量加入相结合，保证加液量的一致，这样平行性好的不得了。25抗生素的效价测定时加菌量一定要准确，否则结果会相差很大，不建议使用10ml的刻度吸管。26中药材及制剂的的浸出物检测，温度影响相当大，误差有时会达到100！27做薄层展开的时候，特别是中药的品种，一定要注意温度的变化！比如人参就得再10度一下才能分开。再就是预饱和，这个环节也很重要！28配制溴麝香草酚蓝指示液时不能超声或剧烈振摇，否则会变色。29在做头孢类原料药时，头孢他啶，头孢呋辛、头孢泊肟、头孢拉定等，一定要临做配对照品溶液或供试品溶液，因为头孢类普遍不稳定。此外，很多其它的药品也存在对温度、光照、湿度等敏感的现象，要特别注意影响因素。对于这类不稳定的药品，有时可能要做系统适应性试验，考察主成份与降解产物的分离度等等。30在对药品进行检验时，有时不能完全按照质量标准检验出来时，最简单的办法就是对比，选取正品或是质量较高的药品对比进行试验，因为有些标准制定不太标准，特别是以前卫生部标准。31环氧乙烷残留检测时显色反应应在暗室存放。32生物碱的薄层鉴别显色问题，薄层展开后，取出晾干，若太干则稀碘化铋钾显色剂吸附较大，背景干扰大。稍干后，效果较好。33在做药材含量时，有的要求用索氏提取器提取到溶液无色而且很多没有时间规定，在实际操作过程中比较麻烦。经过多次反复多样品对比实验，实际上回流2.5个小时和回流5、6个小时所得的结果差不多。还不如直接回流3小时。34做液相有关物质分析时，有时不知道样品峰里是杂质峰还是溶剂峰。可以做个小实验，加大溶剂里面不同溶剂组分的比例再分别进样，这样可以在色谱峰中看到溶剂峰有明显增高的现象。（当然是说某些品种或某些试剂才会这样体现的）。35如果展开剂成分比较复杂，板也要放里面饱和，这样RF值重现性会比较好。36在溶出度时，特别是磷酸盐的介质，需测定pH值，一些药物对pH值比较敏感，不同的的pH值下溶出度数值完全有差别。37化学原料药鉴别试验要选择专属性较强的项目，首选红外、次选HPLC保留时间，原则上选择了专属性较强的项目，其他专属性次些的没必要放进去。38中药液相测含量时，因每次配制的流动相有差异，按标准配制的流动相，有时峰分不开，可以适当调整比例，改善效果。39药物分析，所用的试剂质量很关键，我们做抗生素的聚合物含量时，经常在聚合物出峰的时间也出现倒峰，查找了所有仪器和溶剂，最后确定是一个化学试剂厂生产的磷酸二氢钠的原因。40在做中药材薄层层析时，很多药材因为含有羧基或者氨基会造成跑板拖尾现象或者重叠，这将难以和标准品比对。建议大家含羧基的药可在展开剂里面加少量羧酸，含氨基的药可以在展开剂里面加少量三乙胺。41有人误将浓硝酸（在空气中有“发烟”现象）作为“发烟硝酸”使用，进行托哌生物碱药物的硝化－氢氧化钾呈色鉴别反应，结果不能得到正确的颜色反应，造成假阴性结果。该呈色反应的机理为利用样品的水解产物莨菪酸，经发烟硝酸加热硝化为三硝基衍生物，在氢氧化钾的醇溶液中形成醌型化合物而呈色。“发烟硝酸”是指含HNO3达86－97.5%以上的浓硝酸。而“浓硝酸”虽有"发烟"现象，但其HNO3仅为69%－71%，用于上述呈色反应，会因为硝酸浓度不足而使反应不完全，形成假阴性结果。

食品安全新标准农业农村部与国家卫生健康委员会、国家市场监督管理总局联合发布GB 31660.1~9-2019 食品安全国家标准，涉及畜禽产品、水产品、牛奶等动物性食品的检测，并将于2020年4月1日正式实施。为了帮助您轻松应对全新食品安全标准，纳谱分析快速响应，推出满足标准要求的前处理耗材及色谱柱配置方案，供您参考，为您的扩项增添助力！2019版新增项目如有需求，点此联系，试用有礼，等你来拿！2020年国抽检相关应用01果冻中8种人工合成着色剂的提取和测定02鸡肉中乙氧酰胺苯甲酯的提取与检测03果汁中展青霉素的残留检测04银耳中米酵菌酸的提取与检测05奶制品中乳铁蛋白的测定06辣椒红色素、辣椒油树脂中的苏丹红提取07动物组织中五氯酚残留的提取与检测08婴儿奶粉中乳铁蛋白的提取与检测09辣椒粉、辣椒酱、辣椒油中的苏丹红提取和检测10猪肉中四种β受体激动剂的提取与检测 11油脂中苯并（a）芘的测定12鸡蛋中土霉素﹑四环素﹑金霉素﹑强力霉素的测定

全新体验，试用有礼纳谱分析第一届有奖征文活动纳谱分析技术（苏州）有限公司（以下简称“纳谱分析”）成立以来，坚持以高性能的色谱分离产品和专业的技术支持服务回报用户。其中，四大产品系列以优异的表现赢得挑战，获得市场赞誉：1、ChromCore系列HPLC色谱柱（小分子分离）2、BioCore系列生物分离柱（蛋白分离）3、UniChiral系列手性色谱柱（手性拆分）4、SelectCore系列SPE固相萃取柱（样品前处理）真金不怕火来炼，纳谱分析四大系列色谱分离产品，从样品前处理到色谱分离，全方位满足各种样品分析需求，欢迎您的参与及反馈，接受市场检验！纳谱分析第一届有奖征文活动 活动时间：即日起至2020.6.15活动内容使用纳谱分析ChromCore、BioCore、UniChiral、SelectCore四大系列产品（试用或购买渠道均可参加），应用于药物、食品、环境、科研等领域的用户，均可投稿。投稿邮箱：marketing@nanochrom.com投稿形式包含但不仅限于（1）文章——一次高质量的产品体验或技术经验分享，包含谱图、色谱条件、心得等；（2）谱图——需按照我公司《谱图信息反馈表》模板如实填写；（3）心得体验——产品体验心得或成功经验分享，不低于500字。注：投稿时请一并提供个人信息（单位、姓名、电话）及色谱柱信息（所采用色谱柱型号及序列号），以便我们核实情况并及时与您取得联系。评选方式及奖项本次活动的评委小组由纳谱分析技术型管理人员与仪器信息网知名论坛版主组成，确保评选结果公平公正。评选小组公平评定选出最佳的10篇稿件，网络公示并以线上投票的方式决胜出最终的排名：特等奖、一等奖、二等奖和三等奖。凡符合上述条件的投稿者均可获得参与奖一份。特等奖1名   奖品：华为mate30 Pro 5G手机一等奖1名   奖品：苹果ipad mini 5（256G WIFI）二等奖3名   奖品：小米米家扫地机器人II / 米家电动滑板车（30km续航） （任选一件）三等奖5名   奖品：kindle电子书阅读器 / 三星1T Type-C移动固态硬盘 / 飞利浦（PHILIPS）电动剃须刀 S9111/12 （任选一件）参与奖：凡符合条件的投稿者均可获得   奖品：欧乐B（Oralb）电动牙刷 / 米家自动洗手机 /小米充电宝/ 米家保温杯/ 小米蓝牙耳机青春版 （任选一件）活动说明1. 活动期间，纳谱分析提供液相色谱柱和固相萃取柱免费试用。您可通过微信识别下面二维码，直接申请试用2. 提醒：投稿时请一并提供个人信息（单位、姓名、电话）及色谱柱信息（所采用色谱柱型号及序列号），以便我们核实情况并及时与您取得联系。3. 前10作品将于2020年6月31日前在纳谱分析官网、官方微信公众号上公布，且发起公开投票，根据票数选出奖项名次。4. 奖品不叠加发放。5. 来稿默认您同意稿件内容可能应用于纳谱分析的宣传场所，当然，未获授权的情况下我们将对您的公司及个人信息进行保密。6. 本活动最终解释权归 纳谱分析技术（苏州）有限公司 所有。试用柱申请如此壕礼，心动不如行动，赶紧识别二维码获取免费试用柱吧。《谱图信息反馈表》下载进入纳谱分析官网-服务与支持-资料库-《谱图信息反馈表》下载。官网：http://www.nanochrom.com奖项及奖品1、特等奖1名奖品：华为mate30 Pro 5G手机2、一等奖1名奖品：苹果ipad mini 5（256G WIFI）3、二等奖3名奖品：小米米家扫地机器人II / 米家电动滑板车（30km续航） （任选一件）3、三等奖5名奖品：kindle电子书阅读器 / 三星1T Type-C移动固态硬盘 / 飞利浦（PHILIPS）电动剃须刀 S9111/12 （任选一件）4、参与奖：凡符合条件的投稿者均可获得奖品：欧乐B（Oralb）电动牙刷 / 米家自动洗手机 /小米充电宝/ 米家保温杯/ 小米蓝牙耳机青春版 （任选一件）

比对2020药典色谱内容美国药典usp，欧洲药典ep2020版中国药典即将出炉，其中对于色谱的要求有所更改和新增，我们对比美国药典usp和欧洲药典ep来看下：1高效液相色谱法：1. 固定相中国药典2020：不得改变固定相的理化性质，如填料材质，表面修饰及键合相均需保持一致；从全多孔填料到表面多孔填料的改变，在满足上述条件的前提下是被允许的美国usp和欧洲ep：无2. 色谱柱长度中国药典2020：改变色谱柱粒径和柱长后，l/dp值(或n值)应在原有数值 的-25%～+50%范围内美国usp和欧洲ep：±70%3.内径中国药典2020：无美国usp：可调整，但线速度不变欧洲ep：±25%4.粒径中国药典2020：同色谱柱长度项下要求美国usp和欧洲ep：可以减小50%，不能增加5.流速中国药典2020：在此基础上可以根据实际使用时系统压力和保留时间，允许流速在±50%的范围内进行调整美国usp：±50%，线速度不变，调整幅度可以更高欧洲ep：±50%6.柱温中国药典2020：当温度有规定时，可在±10℃范围内调整美国usp：±10℃欧洲ep：±10%7.进样量中国药典2020：并根据灵敏度的需求进行调整。即便没有对色谱柱尺寸进行调整，进样体积也可调整以满足系统适用性的要求美国usp和欧洲ep：可以减小（lod和重复性没问题）8.ph中国药典2020：除另有规定外，流动相中水相ph值可在±0.2ph范围内进行调整美国usp：±0.2欧洲ep：±0.2（中性物质±1）9.检测波长中国药典2020：不允许改变美国usp和欧洲ep：不允许调整10.缓冲液中盐浓度中国药典2020：可在±10%范围内调整美国usp和欧洲ep：±10%11.流动相组成中国药典2020：等度洗脱流动相比例：最小比例的流动相组分可在相对值±30%或者绝对值±2%的范围内进行调整（两者之间选择最大值）；最小比例流动相组分的比例需小于（100/n）%，n为流动相中组分的个数；梯度洗脱程序：保持不同规格色谱柱的洗脱体积倍数相同，从而保证梯度变化相同，并需要考虑不同仪器系统体积的差异美国usp：少量组分（＜50%）相对变化量±30%的相对值，不得超过±10%的绝对值变化欧洲ep：少量组分（＜50%）相对变化量±30%的相对值或±2%的绝对值，取较大者，不得超过±10%的绝对值变化中国药典2020备注：f1：原方法中的流速 f2：调整后方法中的流速 dc1：原方法中色谱柱的内径dc2：调整后方法中色谱柱的内径 dp1：原方法中色谱柱的粒径 dp2：调整后方法中色谱柱的粒径vinj1：原方法中进样体积vinj2：调整后方法中进样体积l1：原方法中色谱柱柱长 l2：调整后方法中色谱柱柱长 tg1：原方法的梯度段洗脱时间 tg2：调整后的梯度段洗脱时间可通过相关软件计算表1中流速、进样体积和梯度洗脱程序的调整范围，并根据色谱峰分离情况进行微调。若调整超出上表中规定的范围，调整的方法应进行相应的方法学验证。无论调整后的方法验证与否， 当对其测定结果产生异议时，应以品种项下规定的色谱条件的测定结果为准。2气相色谱法：1. 色谱柱长度中国药典2020：不涉及美国usp和欧洲ep：±70%2. 色谱柱内径中国药典2020：不涉及美国usp和欧洲ep：±50%3.粒径中国药典2020：不涉及美国usp：允许变化必须通过系统适用性实验欧洲ep：-50%，不得增大4.液膜厚度中国药典2020：不涉及美国usp和欧洲ep：-50~100%5.流速中国药典2020：不涉及美国usp和欧洲ep：±50%6.柱温中国药典2020：不涉及美国usp和欧洲ep：±10 %7.进样量中国药典2020：不涉及美国usp和欧洲ep：可以减小（如果lod和重复性没问题）3系统适用性试验：色谱系统的适用性试验通常包括理论板数、分离度、灵敏度、拖尾因子和重复性等五个参数。按各品种正文项下要求对色谱系统进行适用性试验，即用规定的对照品溶液或系统适用性试验溶液在规定的色谱系统进行试验，必要时，可对色谱系统进行适当调整，以符合要求。1.理论板数（n）：中国药典2020：式中tr为色谱峰的保留时间，w为峰宽，w1,h/2为半高峰宽；按上面公式计算色谱柱的理论板数。tr、w、wh/2可用时间或长度计（下同），但应取相同单位。美国usp：计算公式同《中国药典》，峰谷比（p/v）用于当分离两峰的基线无法达到时，作为在有关物质的测定时的系统适用性参数。欧洲ep：仅收录了半峰宽的计算公式峰谷比同usp2.分离度r：中国药典2020：除另有规定外，待测物质色谱峰与相邻色谱峰之间的分离度应大于1.5。分离度的计算公式为：r=2(tr2-tr1)/(w1+w2)或r=2(tr2-tr1)/1.70( w1,h/2+ w2,h/2)式中tr2为相邻两色谱峰中后一峰的保留时间；tr1为相邻两色谱峰中前一峰的保留时间；w1、w2及w1,h/2、w2,h/2分别为此相邻两色谱峰的峰宽及半高峰宽当对测定结果有异议时，色谱柱的理论板数（n）和分离度（r）均以峰宽（w）的计算结果为准。美国usp：当使用电子积分仪时，r=1.18(tr2-tr1)/(w1,h/2+ w2,h/2)，其它同《中国药典》欧洲ep：对于基线分离，分离度应大于1.5，r=1.18(tr2-tr1)/(w1,h/2+ w2,h/2)如果不是基线分离，上述公式不适用3.灵敏度：中国药典2020：定量测定时，信噪比应不小于10；定性测定时，信噪比应不小于3。美国usp和欧洲ep：定量测定时，信噪比应不小于10；定性测定时，信噪比应不小于3定量限需满足准确度和精密度的相关要求。4.拖尾因子t：中国药典2020：t=w0.05h/2d1式中w0.05h为5％峰高处的峰宽；d1为峰顶在5%峰高处横坐标平行线的投影点至峰前沿与此平行线交点的距离。以峰高作定量参数时，除另有规定外，t值应在0.95～1.05之间。以峰面积作定量参数时，一般的峰拖尾或前伸不会影响峰面积积分，但严重拖尾会影响基线和色谱峰起止的判断和峰面积积分的准确性，此时应在品种正文项下对拖尾因子作出规定。美国usp：计算公式同《中国药典》欧洲ep：计算公式同《中国药典》通常对称因子要求0.8-1.55. 重复性中国药典2020：除另有规定，外标法，连续5针rsd应不大于2.0%；内标法，配制80%、100%、120%三种不同浓度溶液，分别至少进样2次，平均校正因子的rsd不得过2.0%，当待测成分是微量或痕量，进样量少或其色谱峰响应值较小时，对相对标准偏差的要求可适当放宽。美国usp和欧洲ep：含量测定随数值、重复进样次数不同，rsd限值也不同

色谱可以用来初步定性化合物，即在同一条件下具有相同保留时间的色谱峰有较大的几率为相同化合物（当然其紫外吸收，分子量都一致）。但是，往往在色谱分析中，保留时间会产生飘移，一般根据经验漂移在0.5min以内可以认为是同一化合物。保留时间异常漂移的几种最常见的原因如下：1色谱柱平衡 如果我们观察到保留时间漂移，首先应考虑色谱柱是否已用流动相完全平衡。通常平衡需要10-20个柱体积的流动相，但如果在流动相中加入少量添加剂（如离子对试剂）则需要相当长的时间来平衡色谱柱。如果你在使用未修饰的硅胶柱做正相色谱，那么这是最可能发生的问题。正相色谱的保留时间容易受到硅胶表面吸附的水含量的影响，然后是溶解在流动相中的水的作用。因为水在正己烷或二氯甲烷等试剂中的溶解度非常低，所以色谱柱平衡需要很长时间。通常解决硅胶和水的平衡问题的办法就是使用与水“半饱和”的试剂。制备方法是把1体积的疏水试剂用水饱和后，再与相同体积的“干燥”试剂混合。这个方法可以极大的加快平衡时间。2流路系统异常流路系统的异常分为两种情况，保留时间的漂移有可能是流路系统有漏泄导致的，需要检查流路系统的各连接部件以及泵的密封是否正常。除此之外，还有流动泵头发生的气阻，导致保留时间随机的漂移，往往要么是保留时间延迟，要么是保留时间提前。为了防止泵头的气阻发生，对流动相的脱气是非常必要的。3流动相组成或污染流动相的比例的细微变化也有可能会导致保留时间的漂移，有的时候，企业往往会比较喜欢通过比例阀对各缓冲液与有机溶剂进行等比例混合，这样会比较节省流动相配置的时间以及相对来说比较节约成本。但是相对而言，采用预先混匀的方式将流动相混合在一个容器中，可以获得较为一致的保留时间。如果你需要采用比例阀进行流动相的混合，不要忘记定期对比例阀分配流动相的准确度进行再确认。发现保留时间有单方向的漂移，也不妨试着通过预先配置流动相的方法排除一下是否是比例阀的问题。流动相组成的缓慢变化也是保留时间漂移的常见原因。如流动相中易挥发组分的挥发及循环使用流动相等。如果你没有使用仪器的在线混合装置，那么流动相的组分可能在缓慢的蒸发。当你用氦气流喷射流动相的方法赶气泡的时候，你必须控制喷射的速率最小。 流动相污染也可能是原因之一。溶于流动相中的少量污染物可能慢慢富集到色谱柱上，从而造成保留时间的漂移。应注意：水是很容易污染的流动相成分。在极个别的情况下，如果样品溶液与流动相不相容，也有可能会导致保留时间的漂移，很好理解，样品在进样的时候，并没有达到溶解平衡的状态，自然会导致峰型的异常（比如峰的分裂）以及保留时间的不一致。4固定相稳定性固定相的稳定性都是有限的，即使在推荐的PH范围内使用，固定相也会慢慢水解。要保持固定相的水解稳定性，最好是在中性PH值，低温下PH3-5左右，等度条件好于梯度条件。当等度条件下发生水解时，键合相通常会自我吸附，达成一种区域平衡。然而，在使用高浓度的有机溶剂时，例如在梯度洗脱或者冲洗色谱柱的过程中，这种平衡被打破，键合相会被冲洗出色谱柱。水解速度与流动相类型和配体有关。双官能团配体和三官能团配体比单官能团配体的键合相要稳定；长链键合相比短链键合相稳定；烷基键合相比氰基键合相稳定的多。     经常清洗色谱柱亦会加速色谱柱固定相的水解。其他硅胶基质键合相在水溶液环境中也可以发生水解，如氨基键合相等。5色谱柱污染保留时间漂移的另一个常见原因是色谱柱污染。HPLC色谱柱是非常有效的吸附性过滤器，它可以过滤并吸附流动相携带的任何物质。污染源可以是：流动相本身，流动相容器，连接管、泵、进样器和仪器密封垫，以及样品等。通常通过实验可判断污染的来源。     样品中如果存在色谱柱上保留很强的组分，就可能是使保留时间漂移的潜在根源。这些根源通常是样品基质。如：配药中的赋形剂，生化样品（如血清）中的蛋白及类脂类化合物，食品样品中的淀粉，环境水样中的腐殖酸等。通常样品中的强保留组分具有较高的分子量，在此情况下，保留时间漂移的同时或其后会有反压的增加。可以通过使用固相提取（SPE）等样品前处理方法来去除样品基质的影响。    避免色谱柱污染最简单的方法是防患于未然。相比之下，找到问题的所在并设计有效的清洗步骤以去除污染物要困难的多。通常使用在给定色谱条件下的强溶剂，但并非所有污染物都可以在流动相中溶解。如THF可去除反相色谱柱中的许多污染物，但蛋白在THF中就不能溶解。DMSO常常用于去除反相色谱柱中的蛋白。    使用保护柱是个非常有效的方法。反冲色谱柱仅是不得已时采用的办法。6疏水坍塌当小孔径、端基封口良好的反相填料色谱柱使用接近100%的水为流动相时，有时会发生分离突然丧失及被分析物质保留明显降低或完全不保留的现象，这就是疏水坍塌。此现象是由流动相不浸润固定相表面而致。挽救的办法实现用含大量有机组分的流动相浸润固定相，再用高水含量的流动相进行平衡。由是色谱柱长期储存也会发生此现象。使用内嵌极性基团的反相色谱柱或非端基封口的色谱柱也可避免发生坍塌。7样品成分的诱导作用如果样品中含有大共轭体系化合物，可以形成较强的π-π键，在较大的化合物比例下，量较少的成分被量大的成分所诱导，削弱了化合物于色谱柱之间的作用力，从而减弱了色谱柱的筛选作用导致保留时间漂移。8温度变化如果你的样品是自动分析过夜或者过了周末的，那么你得到的保留时间漂移的结果可能和实验室温度变化有关。在许多地方，室温的设置在晚上或者周末通常是不一样的。通常来讲，1℃的变化导致保留时间漂移大约1%到2%。    保留时间不重现有两种不同的情况：即保留时间漂移和保留时间波动。前者是指保留时间仅沿单方向发生变化，而后者指保留时间无固定规律的波动。将此两种情况区分开来对找到问题的原因往往很有帮助。如保留时间漂移的多半原因是不同机理的色谱柱老化，如固定相流失（例如通过水解），色谱柱污染（由样品或流动相所致）等，而柱老化不可能引起保留时间的无规律波动。

气相色谱法是现代分析技术中发展最快、应用最广的分析方法之一，自1952年诺贝尔化学奖获得者英国化学家James和生物学家Martinzui早发明气液色谱以来，气相气谱仪已成为医药、化工、生物、材料及基因工程等领域必不可少的检测工具，并随着分析成分的复杂性发挥着越来越重要的作用。 在日常色谱定量分析中，出现色谱峰形异变或鬼峰，不但严重影响定量精度，甚至使分析工作无法进行，为此我们把峰形异变常见类型加以分析，并给出可能原因，供色谱工作者参考。在怀疑峰形异变寻找可能原因、排除方法之前最好先做以下工作：仔细核查操作条件，与分析方法要求是否一致;和当初分析所存的标准色谱图对照，判断是否真出了问题;逐项仔细观察仪器或设备工作状态，看有无操作失误而引起的出峰失常；然后在依据以下18种异常峰形分析可能原因与排除方法。进样不出峰01(1) 未点着火（FID）：首先检查氢气、氮气、空气的密封情况是否完好，是否有漏气现象；其次用皂沫流量计校正流速；(2) 微量进样器损坏：换用新的进样器；(3) 进样口泄漏：更换隔垫或检查进样衬管是否损坏；(4) 进样器、柱箱或检测器温度设置不当：检查温度设置，并根据需要进行调整；(5) 无载气流：检查气源压力调节器，检查有无泄漏，并调节载气流速；(6) 柱断裂：如果断裂发生在色谱柱始末两端附近则切去柱断裂部分，并重新安装；(7) 载气未接入检测器或检测器被污染：检查色谱柱与进样器、检测器是否连接正确或清洗检测器；(8) 色谱柱选择不正确，样品被固定相吸附。如PLOT 5A分子筛吸附CO2气体，导致色谱柱永久性中毒。原来能分开的峰分不开02(1)色谱柱安装不合要求 ;(2)色谱柱被污染，需重新活化 ;(3)色谱柱寿命已到，需更换;(3)新更换的气源，纯度不佳;(4)过滤器失效，重新老化或更换;(5)色谱柱温度和载气流量需要微调优化(色谱分析一般允许);(6)检测器工作状态变化(如ECD漏气、FID气流比欠佳);(7)汽化室被污染，注射垫漏气;(8)样品处理不当，杂质干扰物太多;(9)进样技术差;(10)进样量超出了色谱柱容量;(11)数据处理的判峰参数，半峰宽或斜率设置不合理;(12)放大器量程或衰减设置失误。只有溶剂峰03（1）注射器有损坏：更换新注射器；（2）载气泄漏或流速太低：用肥皂水检查载气气路并调节流速；（3）样品浓度太稀或进样量太少：提高样品浓度或加大进样量；（4）柱箱温度过高：检查温度，并根据需要进行调整；（5）样品被柱或进样器衬套吸附：更换衬套或去掉柱进口端1～2圈，并重新安装；（6）气相柱不具备将溶剂与样品分离的性能：更换较厚涂层或不同极性的色谱柱。宽溶剂峰04（1）柱安装不当，进样口死体积较大：根据色谱柱安装说明，检查并重新安装；（2）进样技术差（进样太慢）：快速平稳进样；（3）进样器温度偏低：适当调节进样器温度；（4）色谱柱内残留样品溶剂：更换样品溶剂或老化色谱柱；（5）隔垫清洗不当：老化或更换隔垫；（6）分流比设置不当或分流排气流速不足：调整分流比或流速。前沿峰05(1) 样品超载平衡破坏：降低样品浓度或减少进样量；(2) 载气流量小：(3) 进样技术差(挥发性组分的进样速度太慢)：平稳快速进样；(4) 样品在柱头有冷凝或色谱柱被污染;色谱柱性能不良：更换色谱柱；(5) 两个化合物共洗脱：减少进样量或增加分流比，以使峰分开；(6) 汽化室被污染，样品有吸附效应;柱温过低样品冷凝：检查汽化室和柱箱温度，并适当提高；(7) 样品分解：适当调低进样器温度；(8) 峰前出现了“鬼”峰。拖尾峰06(1) 载气泄漏或流速过高：检查载气气路系统并设置适当的流速；(2) 进样量过大：减少进样量或增大分流比；(3) 色谱柱严重流失或进样端污染：将柱进口端去掉1～2圈，再重新安装；(4) 汽化室死体积太大：适当调节色谱柱在进样口中的位置，减少死体积；(5) 汽化室或色谱柱温度太低：适当提高进样器或柱箱温度；(6) 进样器污染：清洗进样器或更换进样器衬套；(7) 进样技术差(如速度不合适);(8) 正好有干扰峰(鬼峰)出现(如误用被污染的注射针)。鬼峰(怪峰，多余峰，记忆峰)07(1) 柱吸附样品，随即解吸：更换衬管，或去掉柱进样口端1～2圈，并重新安装；(2) 注射器污染：清洗或更换注射器；注射垫未经老化或无隔垫清洗而出的污染峰;(3) 进样量太大：减少进样量或增大分流比；(4) 进样技术差：快速平稳进样；(5) 汽化温度太高或严重污染致使样品某些组分分解；(6) 样品某些组分与被污染固定相产生了作用；(7) 色谱柱温度太高固定相分解；(8) 样品预处理不完善或用错溶剂；(9) 样品中有空气，TCD、ECD等密封性差(漏气);(10) 电源不稳，对控温或放大器有不良影响；(11) 上一次进样的高沸点杂质峰自然流出;延长做样时间，等所有物质都流出。负峰08(1)TCD用氮做载气，由于待测组分在N2中浓度不同，热传导值呈现非线性而可能出现负峰,有时可以通过改变载 气流量或进样量克服;(2)操作ECD时进样量过大而出负峰，这是由于工作原理由电子捕获转变为电离检测，此时灵敏度还会大大降低;(3)操作FID，低电离效率的溶剂(如CS2)或杂质出现，使原基流较高的输出基线减小而显示为负峰;(4)操作FID，在无极化电压，样品量较大可能出现负峰;(5)操纵NPD、FPD时气流比不合适，溶剂或某些组分会出现负峰;肩峰09（1）进样量过大：减少进样量或选择合适的分流比；（2）进样速度太慢：快速平稳进样，防止造成两次进样；（3）载气流速太大：检查并降低载气流速；（4）进样器或柱箱温度不当：提高汽化室温度并适当降低色谱柱温度；（5）进样系统死体积较大：适当调节色谱柱连接位置，先选择相应的汽化室（如不分流进样要 选择不分流结构汽化室）；（6）色谱柱分离度太低：选择柱径更小、柱长更大的色谱柱增加分离度。基线出现波浪状峰10(1)高灵敏度操作仪器未稳定之前;(2)操作TCD、ECD时，柱箱或检测器箱温度周期变化;(3)环境温度对仪器控温影响;(4)电压不稳，对柱温控制精度影响;(5)过温保护设置低于控制温度;(6)压力(流量)调节阀失调，周期变化;圆顶宽峰11(1)样品量大超出了色谱柱容量;(2)汽化温度低;(3)色谱柱没按要求安装;(4)检测器工作状态不对，如载气太小、没开补充气;(5)数据处理装置的判峰参数(半峰宽)设置偏大;出峰后基线下移12(1)样品量大，特别是溶剂改变了工作状态;(2)FID被污染状况发生改变，或气流比发生变化;(3)系统出现漏气，或出现堵塞;(4)色谱柱被污染;(5)样品处理不当，如：样品中有些物质和固定相发生作用;基流增加(漂移大)，噪声增加13(1)色谱柱需重新老化或失效;(2)新换载气纯度欠佳;(3)过滤器失效;(4)样品前处理不当，如：杂质干扰物太多;(5)灵敏度太高；(6)数据处理装置的判峰参数设置不合理。"N" 或 “W”峰14(1)TCD操作，用N2作载气由于热传导率非线性引起;(2)FID操作时，样品溶剂电离效率低(如CS2)，或气流比欠佳时;(3)ECD操作时，由于检测器被污染，溶剂峰或待测组分含量较高，或脉冲电源有毛病。台阶峰15(1)TCD热丝被样品中所含卤素、氧、硫等元素腐蚀;(2)气体流量突变如：注射垫突然漏气，气路受阻等;(3)记录色谱峰装置故障如：拉线松。带毛刺峰16(1)仪器工作不稳定，噪声大于要求;(2)数据处理装置的判峰参数，半峰宽和斜率设置太小;(3)极化电压(FID)不稳。直角峰17(1)仪器输出负信号超出了数据处理的范围;(2)数据处理装置零点未校正，或量程设置太大无法判断基线位置;(3)数据处理装置输入信号极性接反，零点设置不对。峰高不稳定，相差很大18(1) 如果是FID检测器有可能是连接检测器的石英喷嘴裂缝了，处于半封闭状态，一下高一下低；(2) 检测器电压不稳，最坏的可能是检测器的放大板烧了；(3) 隔垫漏气，或者隔垫没装好；换新的隔垫或者重新安装；(4) 是否开了分流，分流是否已稳定；(5) 使用何种溶剂，是否是溶剂的膨胀系数差大的影响；(6) 洗过的针是否没干燥导致；(7) 衬管堵了或者破了。此处讨论的峰形异变是指在色谱分析方法确定后，与曾经记录的已知色谱图比较时，出现某些色谱峰形的偏离畸变或多余峰。或者说，对于已经设立好的色谱分析方法，由于不要求或出于无奈时有些峰分离不开、拖尾或峰形不对称等并不影响方法的实施情况，不属于上述因仪器故障、经验不足或操作失误造成的峰形异变。

固相萃取 固相萃取是基于色谱分离的样品前处理方法，是近年来应用最为普遍成熟的样品预处理方法。固相萃取包括固相（具有一定官能团的固体吸附剂）和液相（样品及溶剂）。由于固相萃取吸附剂具有不同的官能团，能将特定的化合物吸附并保留在固相萃取柱上。    根据使用的目的我们可以将固相萃取划分为两种模式。一种是经典的固相萃取模式，spe柱主要是用于吸附目标物，叫做目标物吸附式化合物；另一种是杂质吸附式固相萃取，指的是spe柱吸附样品中的杂质，目标物质流穿不保留。固相萃取的作用★分离富集将目标物从大量的样品基质中分离出来，并除去样品基质，同时将样品转化为仪器能够接受的形式之后才能进行仪器分析。固相萃取既适合用于小体积样品中的目标化合物分离及基质去除，也适用于对大体积样品中的微量目标化合物富集。净化样品前处理主要目的之一就是要除去样品中对仪器或分析有干扰的成分或杂质。转换溶剂固相萃取中没有乳化的问题，没有发生有机溶剂和水相的直接作用。纳谱分析SelectCore固相萃取柱     固相萃取技术已经成为许多实验室必不可少的前处理手段，全世界实验室每年消耗数以吨计的固相萃取材料。固相萃取柱，主要是由柱管、填料、筛板组成。      纳谱分析SelectCore系列固相萃取柱，小小萃取柱，蕴藏大科学。固相萃取柱的选择选择合适的萃取柱一般从两方面进行考量：吸附剂和柱规格的选择。适宜的吸附填料可以让干扰物质与目标组分得到良好的分离，并满足回收要求。而吸附剂所能吸附的化合物质量是有限的，一旦样品量过大，则会出现“超载”，使得目标物直接“穿透”萃取柱不被保留。吸附剂主要可根据目标化合物性质和基质性质进行选择。      吸附剂的选择则大致可由以上两种方式进行选择，对于具体实例，可依据“区分目标化合物和主要干扰物”的原则进行选择。      选择出适宜的吸附剂后，还需要根据检定所需的样品量选择合适的柱规格。由于萃取柱的吸附剂能吸附的化合物质量是有限的，一旦超过了这个数值，目标物就不能被有效保留，使得洗脱效果大打折扣。因此，根据样品中的组份量选择合适的柱规格，是很有必要的。萃取柱的上样容量及洗脱参数，以供参考：国标推荐固相萃取柱

辣椒红色素和辣椒油树脂是从辣椒中提取的可作为天然着色剂的食品添加剂，广泛应用于各类食品的着色。但是很多不法商家为了获得颜色更加鲜艳的着色剂以牟取利润，在辣椒中添加苏丹红这种非法染料，导致本身安全无毒的天然着色剂变成了毒染料，并且这种毒染料严重危害人体健康。国标GB/T19681-2005中有针对辣椒制品中苏丹红的检测方法，但因辣椒红色素和辣椒油树脂颜色较深，基质组成较为复杂，导致国标中的检测方法难以适用，纳谱分析SelectCore SDR-2固相萃取柱可以快速、高效的提取、检测辣椒制品中的苏丹红，方法具有灵敏度高、重现性好、试剂用量少、油脂去除率高等优点。本实验针对两种不同来源（辣椒红色素、辣椒油树脂）的苏丹红进行提取和检测。适用范围该方法参照GB/T 19681-2005食品中苏丹红染料的检测方法-高效液相色谱法，用于测定辣椒制品中苏丹红的含量。实验步骤样品制备     辣椒红色素和辣椒油树脂：称取5 g无水硫酸钠于15 mL离心管中，加入0.5 g样品，再加入10 mL甲醇，漩涡混匀1 min后，4000 r/min离心后取上清液备用。     其他辣椒制品：参照国标GB/T 19681-2005中样品制备方法。净化（1）活化：SelectCore SDR-2固相萃取柱，规格500mg /6mL，依次使用4 mL乙酸乙酯、4 mL甲醇、4 mL纯水活化小柱；（2）上样：加入制备好的上清液，弃去流出液；（3）淋洗：使用10 mL 70%甲醇水溶液淋洗，弃去淋洗液；（4）洗脱：加入8 mL洗脱液，洗脱液配比为乙酸乙酯：甲醇：甲酸=89：9：2（体积比），收集全部洗脱液；（5）洗脱液于50 °C下氮气吹干，使用1 mL乙腈定容，过滤膜后用于液相色谱分析。液相色谱仪器条件色谱柱：ChromCore C18  3 μm，4.6 ×150 mm检测波长：520 nm柱温：30 °C进样体积：20 μL流速：1.0 mL/min流动相：流动相A：0.1%甲酸水溶液，流动相B：0.1%甲酸乙腈溶液洗脱梯度：实验谱图及加标回收率数据加标回收率结论使用中性氧化铝固相萃取柱测定辣椒红色素的加标回收率，由图8可以看出4种苏丹红受基质干扰大，目标物与杂质的分离度较差，影响检测；4种苏丹红的加标回收率分别为40.94%、27.29%、36.96%、24.15%，不符合检测要求。由以上色谱图和加标回收率数据可以看出，SelectCore SDR-2固相萃取柱特别适合于复杂基质的辣椒制品检测，并且净化样品效果优良，加标回收率符合检测要求。

样品预处理的重要性★时间      样品预处理所用时间远大于色谱分离时间；据统计，检测过程常常将60%的时间花在样品前处理上。样品分析过程中各程序所花费的时间为：准确性    样品预处理是实验的重复性和准确性最差的环节，是影响实验结果好坏的最重要因素。而色谱分析过程中的误差来源如下表所示：成本  消耗大量的溶剂和其它化学品，占分析消耗总成本最大。样品预处理的目的　   1、富集浓缩被测痕量组分(ppm，ppb， ppt 级)的作用，提高方法的灵敏度，降低最小检测限。　　2、消除基体对测定的干扰，提高方法的选择性　　3、使被测组分从复杂的样品中分离出来，制成便于测定的溶液形式　　4、通过衍生化的前处理方法，可以使一些在正常检测器上没有响应或响应值较低的化合物转化为具有很高效应值的化合物。　　5、样品经前处理后就变得容易保存和运输　　6、可以除去对仪器或分析系统有害的物质，如强酸或强碱性物质，如生物大分子等，延长仪器使用寿命，使分析测定能长期保持在稳定、可靠的状态下进行。样品预处理的原则1、在样品预处理过程中，尽可能防止和避免与待测组分发生化学反应；2、在样品预处理过程中，如果与待测组分进行化学反应，那么这一反应必须是已知的，而且可以定量的完成；3、在样品预处理过程中，要防止和避免待测组分被玷污，尽可能减少无关化合物引入制备过程；4、样品的处理过程应尽可能简单易行，所采用的样品处理装置尺寸应与样品处理量相适应；5、采样之后应尽可能快的进行样品的分析测定，或使用合适的方法消除可能的变化和干扰。样品预处理的方法1湿消化法      湿消化法是在适量的食品样品中，加入氧化性强酸，加热破坏有机物，使待测的无机成分释放出来，形成不挥发的无机化合物，以便进行分析测定。湿法消化是目前应用比较广泛的一种食品样品前处理方法，该方法实用性强，几乎所有的食品都可以用该方法消化。　  在实验过程中，只要控制好消化温度，大部分元素一般很少或几乎没有损失。例如，在测定酱油中的砷含量时采用湿法消化加入了硝酸高氯酸混合酸和硫酸，加标回收率为95%以上。即便像“汞”等极易挥发的元素，只要正确掌握消化温度，也不会有损失。　  但是湿消化法也有一定的缺陷：样品氧化时间较长，且实验过程中一次不能消化超过10个样品。其次，样品消化时常使用的试剂硝酸、高氯酸、过氧化氢，硫酸都是具有腐蚀性且比较危险的。由于氧化反应过程中加入了浓酸，这些酸可能会对仪器产生损害进而影响试验结果，因此消解结束后需要排酸。2干灰化法　 干法灰化具有操作简单，并且可以一次处理大批量样品的优点。但是干法灰化也有其局限性，首先，由于灰化温度比较高，一般都在500摄氏度左右，可能会有部分元素因为蒸发而损失掉，从而导致元素的部分损失。其次，实验过程比较长，样品碳化时间需要1个小时左右，灰化时间在4-6小时之间，中途如果灰化效果不好还需要加入助灰化剂。3微波消解法     微波消解是指利用微波的穿透性和激活反应能力，使样品温度升高，同时采用密封装置，在加入一定量的酸溶液，达到使样品中有机物质分解的目的。　  消化时间短，比传统的加热方式既快速又效率高，消化时间只需数十分钟，大大提高了反应速率，缩短样品制备的时间，与此同时微波消解还可以控制反应条件，使制样精度更高; 微波消化是在密闭容器内进行，易挥发元素损失少，回收率高，耗酸量减少(3-5ml)，空白值大为降低，从而挺高了结果的准确性。最值得注意的是由于使用的是微波加热，实验过程中要防止微波的泄露。微波消解法具有待测元素不易损失的优点，但是处理成本较高，同时应注意操作安全。4酸提取法　　酸提取是指选用某种酸将样品中的待测元素提取出来。与上面三种方法不同的是，这种方法并没有破样品里的有机物质，而是直接用酸提取，因此该方法具有速度快、操作简便的优点 同时由于该方法不需要加热，因此也就避免了待测元素的损失。　　酸提取法直接进样技术具有操作简便、速度快、不污染环境、避免被测元素的挥发损失等优点，但只能应用于部分分析技术，食品检验工作者可以根据样品种类和实验室条件综合考虑采用何种前处理方法。5固相萃取       固相萃取是通过采用选择性吸附和选择性洗脱对样品进行富集、分离和净化，可以将其近似地看作一种简单的液固色谱过程。是近年来应用最为普遍成熟的样品预处理方法；6固相微萃取       固相微萃取是基于涂敷在纤维上的高分子涂层或吸附剂和样品之间的吸附－解吸平衡原理，集采样、萃取、浓缩和进样于一体的无溶剂的样品微萃取方法。有直接固相微萃取、顶空固相微萃取、膜固相微萃取和毛细管固相微萃取等。7超临界流体萃取(SFE)        超临界流体萃取是利用超临界流体对物质的特殊溶解性能原理而建立的萃取方法。速度快、效率高、几乎不消耗溶剂，但装置价格昂贵，不易推广普及。8液相微萃取       液相微萃取是基于样品和微升级甚至纳升级有机溶剂之间的分配平衡原理，集采样、萃取和浓缩于一体的环境友好的样品微萃取方法。有直接液相微萃取、中空纤维液相微萃取和顶空液相微萃取等。9免疫亲和色谱(IAC)       免疫亲和色谱(IAC)是目前净化和富集效能最强的样品处理技术，但尚处探索阶段，仍限于常规技术净化困难的重要残留组分样品处理过程;10吹扫捕集技术(SCD)        吹扫捕集技术(SCD)是不使用有机溶剂,不污染环境,操作简便,取样少,富集效率高,适合于大多数挥发性和半挥发性有机物的分离富集。吹扫捕集技术可以与很多仪器联用,如气相色谱电子捕获检测器、氢焰离子化检测器、质谱检测器及电感耦合等离子体发射光谱检测器等。吹扫捕集是无溶剂制备与处理技术的一种。对环境不造成污染，具有取样量少、富集效率高、受基体干扰小及容易实现在线检测等优点，但其除水技术尚存在较大缺陷;11衍生化      1.GC中化学衍生化法：药物的化学衍生化前处理对GC十分必要，衍生化可使药物分子中的极性基团，如羟基、氨基、羧基等变成无极性的、易于挥发的药物，从而使GC的温度不必很高即可适合GC的分析要求。主要的衍生化反应有烷基化、酰化、硅烷化等。其中以硅烷化用得最广泛。异构体的分离也是十分重要的。分离光学异构体的方法之一，就是采用不对称试剂，使其生成非对映异构体衍生物，然后用GC法或HPLC法进行分析测定。　　2.HPLC中化学衍生化法：当采用HPLC法时，其衍生化目的是为了提高药物的检测灵敏度。一些在紫外、可见光区没有吸收或者摩尔吸收系数小的药物，可以使其与衍生成对可见-紫外检测器、荧光检测器及电化学检测器等具有高灵敏度的衍生物。12过滤、离心      常用的滤膜材质有纤维素、聚四氟乙烯和聚酰胺。其中聚酰胺应用最广。13加速溶剂萃取      加速溶剂萃取是在提高温度（50～200℃）和压力（10.3～20.6MPa）下，用溶剂萃取固体或半固体样品。

14种喹诺酮类药物残留来源养殖环节用药不当是造成兽药残留的最主要原因，尽管我国农业部对养殖方法有明文规定，但是总有养殖户为了追求最大的经济效益，违背相关法律法规进行养殖，例如将禁用药物（盐酸克伦特罗）当作添加剂添加到猪饲料中，从而引起瘦肉精中毒。兽药残留产生的危害会影响很多方面，最主要的是会在人体内蓄存以致发生急慢性中毒；对于动物体而言，反复接触抗菌药物，其体内的敏感菌株会产生抗药性，使得常规药物在临床上的治疗效果越来越差；其次，接触了药物以后的动物，它们的粪便和尿液随着排泄会稳定的存在于在周围环境中，从而造成环境污染。此类药物如何检测参照GB/T21312-2007，适用于猪肉、猪肝、猪肾、牛奶、鸡蛋等动物源性食品中氟罗沙星、氧氟沙星、依诺沙星、诺氟沙星、环丙沙星、恩诺沙星、达氟沙星、奥比沙星、双氟沙星、沙拉沙星、司帕沙星、奥索利酸、萘啶酸、氟甲喹等14种喹诺酮类兽药残留的检测。本应用采用纳谱分析SelectCore HLB固相萃取柱，可以帮助快速高效地进行前处理，大大提高检测效率。实验步骤1、试剂准备甲醇（CH3OH）：色谱纯乙腈（CH3CN）：色谱纯乙二胺四乙酸二钠（EDTA）：色谱纯甲酸（HCOOH）：色谱纯水：GB/T 6682规定的一级水柠檬酸：分析纯磷酸氢二钠：分析纯1-1、仪器1·高效液相色谱-串联质谱仪2·电子天平：感量0.0001g3·电子天平：感量0.01g4·旋涡混合器5·冷冻离心机6·聚丙烯离心管7·氮吹仪8·固相萃取装置1-2、溶液配制5%甲醇水溶液：准确量取5mL的甲醇，倒入100mL的容量瓶中，用水溶液定容至刻度，摇匀。0.2%甲酸水：取2mL的甲酸，加入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。0.1%甲酸水：取1mL的甲酸，加入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。0.1mol/L柠檬酸水溶液：准确称取21.01g柠檬酸，加入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀0.2mol/L磷酸氢二钠水溶液：准确称取71.63g磷酸氢二钠，加入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀Mcllvaine缓冲溶液：将1000mL的0.1mol/L柠檬酸水溶液与625mL的0.2 mol/L磷酸氢二钠水溶液混合，必要时用盐酸或者氢氧化钠调节pH为4.0±0.05。0.1mol/L EDTA-Mcllvaine缓冲溶液：准确称取60.5g乙二胺四乙酸二钠，放入1625mL的Mcllvaine缓冲溶液中，摇晃混匀。2、样品提取牛奶和鸡蛋称取均质试样5.0g（精确到0.01g）置于50mL离心管中，加入40mL 0.1mol/L EDTA-Mcllvaine 缓冲溶液，1000r/min涡旋混合1min，超声提取10min，10000r/min离心5min（温度低于5℃），取上清液。3、净化SPE柱：SelectCore HLB固相萃取柱（200mg/6mL）活化：依次用6mL的甲醇和水活化；上样：加入提取好的全部上清液；淋洗：2mL5%甲醇水溶液进行淋洗，淋洗结束后再减压抽干；洗脱：6mL甲醇溶液进行洗脱，洗脱液在40℃下用氮气吹干，用1mL 0.2%甲酸水复溶后过0.22μm有机滤膜，上机。4、液相色谱仪器条件色谱柱：ChromCore  C18 3μm，2.1×100mm柱温：40°C进样体积：1μL流速：0.4mL/min流动相：A相：0.1%甲酸水溶液；B相：乙腈洗脱梯度：5、质谱条件离子源: 电喷雾离子源（Electrospray ionization，ESI）正离子扫描监测方式：多反应监测（Multiple Reaction Monitoring，MRM）雾化气流量：3L/min加热器流量：10L/min干燥气流量：10L/min接口温度：300℃DL温度：250℃加热块温度：400℃6、实验谱图    实验结论由以上数据和图谱可知，纳谱分析SelectCore HLB小柱能有效去除杂质的干扰，对目标物质有良好的保留和洗脱能力，回收率也较好，符合国标动物源性食品中14种喹诺酮类兽药残留的检测要求。

2019年11月25日，2019制药工艺（苏州）高峰论坛暨第六届制药分离纯化及质量控制论坛论坛圆满闭幕。纳谱分析技术（苏州）有限公司全程负责杂质分析与质量控制分会场，邀请了近二十位分析质量领域顶级大咖带来精彩的报告，聚集了国内诸多的专家学者和先进企业代表，现场座无虚席，场面热烈，参会老师不时相互交流沟通，充满热情。会议的最后，纳谱分析技术（苏州）有限公司刘晓东博士为杂质分析与质量控制分会场作了总结，并对参会的专家、学者、企业代表和参会人员表达了由衷的感谢。

 抑郁症是情感活动发生障碍的精神失常症，表现为情绪异常低落，具有强烈的自杀倾向，并有自主神经或躯体伴随性症状。抗抑郁药用于治疗抑郁症或抑郁状态，按作用机制，从靶点分析可分为单胺氧化酶抑制剂（MAOI）、选择性5-羟色胺重摄取抑制剂（SRI）、去甲肾上腺素重摄取抑制剂（新三环类抗抑郁药）和其他类。其中三环类抗抑郁药是紧接单胺氧化酶抑制剂之后的另一类抗抑郁药，以丙咪嗪为代表。它的化学结构与氯丙嗪相似，原以为可能是一种新的抗精神病药，但临床试验结果大出所料，该药对精神分裂症无效，却能改善抑郁心境。以后又经大量，双盲安慰剂对照研究证实，从而取代单胺氧化酶抑制剂，一跃成为抑郁症治疗的首选药，垄断抗抑郁药市场长达30年之久。         该类药品结构上均具有三环，并有一叔胺或仲胺侧链，从化学结构上可分为二苯并氮杂?类、二苯并氧氮杂?类及二苯并环庚二烯类，具有相似的药理作用，通过抑制神经突触前端NE和5-HT的重摄取发挥作用。     此类物质在进行分析时较易产生拖尾的现象，在pH10的流动相中拖尾的情况可缓解，但高pH的流动相对于色谱柱的寿命也是一大考验，选用ChromCore C18色谱柱不仅可以对上述几种抗抑郁药品进行分离，在高pH的流动相中也可以拥有良好的重现性和稳定性。

1洗脱方式的分类     洗脱方式一般分为等度洗脱和梯度洗脱两种。     等度洗脱是指实验过程中（做样过程）从头到尾只用一种流动相。梯度洗脱是指在同一个分析周期中随着时间的变化按一定程序梯度性地改变洗脱液的比例(浓度配比、成分、离子强度、溶液极性等)或pH，以期将色谱柱上不同的组分洗脱出来的方法。从而可以使一个复杂样品中性质（极性）差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。2洗脱方式的科学选择      液相“圣经”---实用高效液相色谱方法建立（第2版），作者建议在液相色谱方法开发之前先运行一个全范围的线性梯度洗脱，它会给后续采用等度洗脱还是梯度洗脱提供非常重要的信息。比如设计方法（色谱柱：ChromCore 120 C18 5μm, 4.6×250mm；流速：2 ml/min；柱温：35 ℃；流动相方法：5-100%乙腈-水，梯度时间60 min）来分析取代苯胺样品，最早流出的峰的保留时间tRa晚于2倍t0，晚流出峰tRz早于梯度结束，表明该液相色谱法适合分析该样品。下一步可以通过谱图标出的第一个峰和最后一个峰的保留时间（图中的tRa和tRz）来确定梯度还是等度洗脱更合适。如果我们设定保留时间差ΔtR = tRz-tRa，则比值ΔtR/tG可以决定等度分离是否可行,TG为跑梯度时间：当要求0.5 3梯度洗脱在以下情况下，明显优于等度洗脱1. 当样品中各成分性质差异很大2. 分析大分子样品，比如多肽、蛋白、合成聚合物等，一般采用梯度洗脱分离效果会更好，特别是用反相分离条件时。因为这些样品的等度保留往往对流动相的组成（B%）的变化非常敏感，难以将保留值控制在合理的范围内；3. 当样品中存在强保留的干扰物时，可能会污染色谱柱或者干扰后续的分析，这时设计梯度洗脱方法可以在下一次进样前将这些晚流出的物质快速洗脱出色谱柱；因此在制备HPLC中，常常使用梯度洗脱；4.有些样品出峰靠后的峰的峰宽较大，灵敏度偏低。当选择等度方法时，可以通过增大B%来加快出峰，从而减小峰宽来提高灵敏度。但是由于t0附近的干扰峰和极限波动，使这种方法的应用受到限制，而使用梯度方法时这些情况就可以避免；5. 对于溶解于弱溶剂（避免出现强溶剂效应）中的稀样品，使用梯度方法可以采用大体积进样，而不会引起明显的峰展宽，这种情况下，样品在柱入口处就实现了柱上浓缩，因此可以大体积进样；等度洗脱也可以进行类似的柱上浓缩，但是由于进样过程中样品直接与洗脱能力强的流动相的混合，使样品体积过大，引起样品峰严重展宽。4不同洗脱方式的优缺点：等度洗脱    优点：流速不发生变化，压力稳定，实验结果准确、可靠；    缺点：多组分检测或有杂质干扰情况下分离度可能会差，而且不容易优化，对于某些复杂样品分析时间长，峰形差。梯度洗脱    优点：a. 多组分检测或有杂质干扰情况下提高分离能力b. 缩短某些复杂样品的分析时间c. 改善峰形，减少拖尾d. 提高柱效，增加检测灵敏度     缺点：a. 梯度洗脱方法运行后都需要重新平衡色谱柱，耗时较长b. 由于不同的HPLC仪器存在不同的体积滞后，所以梯度洗脱方法在不同仪器间转移时可能会出现分离结果的差异c. 流速变化得由程序控制，有时会出错d. 压力可能会不稳定e. 混合时可能会产生气泡，影响基线噪声及漂移f. 高压混合时可能会产生热量g. 对混合器要求很高，如果混合不好，基线噪声和漂移会很大h. 由于流动相比例发生变化，基线可能会漂移i. 实验准确度、稳定性没有等度高j. 故障率高于等度

低分子量肝素为低分子量的硫酸氨基葡萄糖，平均分子量4000~6000，由各种解聚分组分法制成的短链肝素制剂，根据分子量、链末端结构和化合物结合盐类的不同，可以分为不同的商品制剂，目前中国市场上使用的主要有达肝素钠、依诺肝素钠和那曲肝素钙，均为无色或淡黄色的澄明液体。       低分子量肝素具有明显而持久的抗血栓作用，其抗血栓形成活性强于抗凝血活性。因而在出现抗栓作用的同时出血的危险性较小。其机制在于通过与抗凝血酶Ⅲ（AT Ⅲ）及其复合物结合，加强对Xa因子和凝血酶的抑制作用。但由于其分子链较短，对抗Xa活性较强而久，对凝血酶抑制作用较弱。此外，还能促进组织型纤维蛋白溶解酶激活物（t-PA）的释放，发挥纤溶作用，并能保护血管内皮，增强抗栓作用。对血小板的功能影响较小。临床药理表明低分子量肝素生理活性与其副作用跟其链状结构有关系，即与所使用的肝素平均分子量存在直接联系。为保证临床用药的安全性和有效性，对其分子量分布范围监控则显得尤其重要。本方法参考欧洲药典方法EP 9.8采用纳谱分析分子排阻色谱柱BioCore SEC-150对肝素分子量进行了分析。      参照CRS标准表对谱图进行处理，使用GPC模拟软件，以保留时间为横坐标，分子量的对数值为纵坐标，拟合三次方程，建立肝素分子量校准曲线方程：y=-0.003061T^3+0.1315T^2-2.06T+15.45，相关系数：R=0.9996，表明其线性范围和准确度均符合药典要求，纳谱分析BioCore SEC-150色谱柱适用于肝素的分子量测定。

色谱柱耐用性差、寿命短如果您的色谱柱经常出现这些问题色谱系统压力升高色谱柱塌陷、填料变色这时您可能需要加根保护柱！  90%以上的不能完全通过色谱柱流出的杂质都会集中在柱入口端1cm左右的填料中，所以加保护柱是保护分析柱的有效办法。保护柱位于进样器与分析柱之间，作用主要有两方面： 1. 截留不溶性颗粒 2. 吸附样品基质中的杂质以下两种情况建议使用保护柱： 1. 中药、天然产物及合成中间体等基质较复杂的样品分析——因溶解性差异导致样品析出而污染分析柱的情况比较严重，梯度洗脱时影响更大。2. 生物样品分析——因样品的不可逆吸附导致的污染，保护柱可先于分析柱承受这种污染，从而延长分析柱寿命。保护柱的选择       第一，保护柱长短。保护柱与分析柱的体积比应在 1:15 至 1:25 之间。对于大部分分析工作来说，一支1cm长的保护柱便能提供充分的保护作用。但是，如果样品非常不清洁，或工作中要经常更换保护柱，那么就应该选择2cm或3cm长的保护柱。但是，随着保护柱的加长，保留时间也会变长。 　　第二，保护柱内径。我们要选择与使用的液相色谱柱内径相同或者相当的保护柱，否则可能会影响到目标物质分析的结果。 　　第三，保护柱填料。 除非特殊情况，一般选择填料基质与分析柱基质完全相同的保护柱。 　　第四，保护柱的结构设计。目前保护柱的结构设计可分为独立式以及直连式3种类型。独立式保护柱是保护柱和分析柱之间用一段管路连接，不用担心与分析柱在连接上的匹配问题。直连式结构可以直接将保护柱与色谱柱进行连接和使用，死体积小，UPLC分析时建议选择直连式保护柱。保护柱使用注意事项    1. 独立式保护柱与分析柱连接时，连接管路尽可能短，且接口切面平滑，尽量减少死体积以降低柱外展宽效应。    2. 卡套式保护柱一般未标注液流方向，使用时最好自行标注，并按照标注方向来使用，以免正反向使用后，截留的杂质污染分析柱。    3. 直接填装的短柱型保护柱，出现柱压升高或峰型变差时，可不接分析柱进行反向清洗，清洗溶剂可参考分析柱清洗溶剂。    4. 卡套式保护柱，柱芯替换时，注意柱芯与柱套是否存在方向上的匹配，同时不易旋拧过紧，以防滑丝。    5. 保护柱或柱芯一般不建议超声清洗，因可能对填料表面修饰有影响。    6. 如同一保护柱配不同的分析柱使用，每次使用前，保护柱需先清洗并用流动相平衡保护柱一段时间后，再接分析柱使用。保护柱的更换时间   保护柱是消耗品,当满足下列条件之一时就应该考虑更换保护柱。色谱柱的理论塔片数下降15%以上； 色谱柱柱前压上升15%以上；最难分离的物质对分辨率下降15%以上； 样品进样次数超过150次； 流动相通过1500倍的色谱柱体积。

五种核苷酸在奶粉中的作用1.营养作用，在乳代品中添加外源核苷酸，对婴儿特别是新生儿维持机体免疫系统功能、促进肠道成熟、肝脏的生长发育和代谢及脂质代谢等方面都发挥重要作用。2.机体免疫，许多研究者认为核苷酸是维持机体正常免疫功能的必须营养成分，可以增强婴儿的机体免疫力和抗感染能力。3.肠道影响，核苷酸对肠道营养有着重要的作用，能够促进肠道细胞的生长、发育和修复。4.促进代谢，研究表明饮食中添加核苷酸能促进新生儿，尤其是早产儿脂蛋白的合成或分泌。方法高效液相色谱法 (HPLC)     本实验采用高效液相色谱 (HPLC) 法，按照GB5413.40-2016婴幼儿食品和乳制品中核苷酸的测定方法，使用纳谱分析ChromCore 120 C18反相色谱柱对5种核苷酸混合标准溶液和某品牌婴幼儿奶粉供试品溶液进行分析测定。结论     如上述谱图所示，5种核苷酸分离度均大于1.5，能实现完全分离，奶粉供试品分离效果与国标标准谱图接近；纳谱分析ChromCore 120 C18反相色谱柱适用于婴幼儿奶粉中5种核苷酸的分析检测。

     气相色谱载气知多少  作为气相色谱载气的气体，要求其化学稳定性好、纯度高、价格便宜并易取得、能适合于所用的检测器。常用的载气有氢气、氮气、氩气、氦气、二氧化碳气等等。其中氢气和氮气价格便宜，性质良好，是用作载气的良好气体。载气在气相色谱中的主要作用与液相的流动相一样，提供分配的介质并提供各组分向检测器端移动的动力，不同的载气之间最大的区别在于具有不同的最低理论塔板高度，也即柱效，而基本上没有选择性的差异。载气           常用载气的特性  （1）氢气：由于它具有分子量小，分子半径大，热导系数大，粘度小等特点。如下表所示，氢气与氦气的扩散能力是氮气的4倍左右，而氢气的黏度则是氦气以及氮气的1/2左右，使用氢气作为载气的时候，分离的效率是最高的，大概是使用氦气的分离效率的2倍，是使用氮气的分离效率的四倍。这一点非常重要，如在使用气相手性分析色谱柱对异构体进行拆分的时候，虽然三种载气通过调整最佳线速度得到近乎相同的塔板高度以及柱效，但实际情况下，我们会发现氮气的色谱峰宽最大，氦气下的峰宽其次，氢气下的峰宽最小，表观柱效最高，分离情况最为让人满意。因此在使用TCD时常采用它作载气。在FID中它是必用的燃气。氢气在使用时，应特别注意安全。（2）氮气：由于它的扩散系数小，柱效比较高，致使除TCD外，在其他形式的检测器中，多采用氮气作载气。它之所以在TCD中用的较少，主要因为氮气热导系统小，灵敏度低，但在分析H2时，必须采用N2作载气，否则无法用TCD解决H2的分析问题。在使用MSD检测器的时候，最好不要使用氮气作为载气，因为其灵敏度大大降低，约下降20倍左右。（3）氦气：从色谱载气性能上看，与氢气性质接近，且具有安全性高的优秀特点。但由于价格较高，使用较少。当使用PDD检测器的时候，只能使用氦气.载气    无论选择何种气体作为载气，都要保证气体的纯度在99.999%以上，特别是对于FID这种碳敏感型检测器，极少量的杂质都会影响到基线噪音，甚至出现一些鬼峰。  气体纯度低的不良影响：     1）样品失真或消失：如H2O气使氯硅样品水解；     2）色谱柱失效：H2O，CO2使分子筛柱失去活性，H2O气使聚脂类固定液分解，O2使PEG断链。     3）有时某些气体杂质和固定液相互作用而产生假峰；     4）对柱保留特性的影响：如：H2O对聚乙二醇等亲水性固定液的保留指数会有所增加，载气中氧含量过高时，无论是极性或是非极性固定液柱的保留特性，都会产生变化，使用时间越长影响越大。     5）检测器：TCD：信噪比减小，无法调零，线性变窄，文献中的校正因子不能使用，氧含量过大，使元件在高温时加速老化，减少寿命。FID：特别是在Dt≤1×10-11/S下操作时，CH4等有机杂质，会使基流激增，噪声加大不能进行微量分析。ECD：载气中的氧和水对监测器的正常工作影响最大。实践证明：在操作ECD时，载气中的水含量低于0.02ppm，氧低于1ppm时可达到较理想的性能。FPD和NPD等常用检测器，由于他们属于选择性检测器，操作时要根据分析要求，特别注意被测敏感物质中杂质的去除。

头孢曲松钠头孢曲松钠Ceftriaxone Sodium (Rocephin)是第三代头孢菌素类抗生素，用于敏感致病菌所致的下呼吸道感染、尿路、胆道感染，以及腹腔感染、盆腔感染、皮肤软组织感染、骨和关节感染、败血症、脑膜炎等及手术期感染预防。近年来，由于市场需求量大、产品附加值高和临床疗效突出，头孢曲松钠成为引领头孢类抗生素市场的核心品种，一直是国内全身抗感染用药销售额排名首位的药物。本文按照中国药典2015 G-10等效SEC方法，测定头孢曲松钠中头孢曲松和头孢曲松聚合物的含量。结论：根据头孢曲松和头孢曲松聚合物的分子量差异，选用纳谱分析BioCore SEC-150体积排阻色谱柱在中性条件下进行分离，该方法专属性强、灵敏度高、重复性好，能有效检测头孢曲松钠原料药中聚合物的含量。

金秋十月，BCEIA第十八届北京分析测试学术报告会暨展览会在北京国家会议中心圆满落幕。在10.23-26短短的四天里，纳谱分析收获颇丰，不仅有老友前来参观、叙旧，更结识了许多新朋友、新客户，得到了国内外许多专家、媒体的关注和认可。   纳谱分析作为国内液相色谱柱的领跑者，展会现场人潮如织，洽谈气氛异常火爆，也有专业人士在现场为广大用户、合作商详细讲解。   纳谱分析刘晓东博士接受了中国品牌档案的专访，刘晓东博士主要介绍了纳谱分析的发展现状、应用前景及产品的优势。   纳谱分析姚立新总经理参加了BCEIA人才交流论坛，主要介绍了公司的热招职位及福利待遇。 本届展会26日圆满结束了，让我们期待下届的重逢，期待纳谱分析精彩的未来！！我们2021年见！

在现代生活中，五氯酚常作为除草剂和杀虫剂被广泛使用。该物质的毒性主要体现在，它会通过食物链在沉积物或者动物体中富集，影响农业和水产业等，进而影响人类。进入人体中的五氯酚会长时间在人体器官中，如肝，肾等蓄积，干扰内分泌，影响免疫系统，甚至还可能在遗传上有潜在威胁。探索一种简便高效的样品前处理方法，对该类物质的检测具有重要意义。适用范围 本方法（参考GB23200.92-2016）适用于猪肉、猪肝、猪肾、牛奶、鱼肉、虾等动物源食品中五氯酚残留的检测。 实验步骤1. 试剂准备甲醇（CH3OH）：色谱纯乙腈（CH3CN）：色谱纯三乙胺（C6H15N）甲酸（HCOOH）：色谱纯氨水（NH3.H2O）溶液配制乙腈水溶液：准确量取700 mL乙腈和300 mL水，超声震荡摇匀；5%三乙胺乙腈水溶液：准确量取50 mL的三乙胺，倒入1000 mL的容量瓶中，用乙腈水溶液（7:3）定容至刻度，摇匀；5%氨水：量取200 mL浓氨水，转入1000 mL的容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀；4%甲酸甲醇：量取10 mL的甲酸至250 mL的容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；2%甲酸甲醇水溶液：取一定体积的4 %甲酸甲醇溶液与等体积的水溶液混合；0.1%甲酸水：取1 mL的甲酸溶液加入1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。2、样品提取称取均质试样2 g置于50 mL离心管中，加入6 mL 5% 三乙胺的乙腈水溶液，充分震荡（鸡肉和鱼肉震荡时间为2 min；肝脏、肾脏、虾和蟹样品为1 min），并超声提取5 min，离心机以3000 r/min的条件离心5 min，收集上清液于离心管中，离心后的残渣用6 mL 5 %三乙胺的乙腈水溶液重复一次上述提取步骤，合并上清液，混匀。3、净化SPE柱：SelectCore MAX（60mg/3mL）固相萃取柱活化：依次用5 mL的甲醇和水活化；上样：加入提取好的全部上清液；淋洗：依次用5 %氨水溶液、甲醇、2 %甲酸的甲醇-水溶液各5 mL进行淋洗，淋洗结束后再减压抽干5 min以上洗脱：用4 mL 4 %甲酸甲醇溶液进行洗脱，洗脱液在40 ℃下用氮气吹至1 mL，加水定容至2 mL后过0.22 μm有机滤膜，上机。4、液相色谱仪器条件色谱柱：ChromCore C18 1.8 μm 2.1×50mm柱温：30 ℃进样体积：2 μL流速：0.4 mL/min流动相：A相：0.1 %甲酸水溶液；B相：乙腈洗脱梯度：5、质谱条件离子源: 电喷雾离子源（Electrospray ionization，ESI）负离子扫描监测方式：多反应监测（Multiple Reaction Monitoring，MRM）电喷雾电压：- 4000 V干燥气：N2 （11 L/min，300 ℃）雾化气压力：35 psi图1：10 ng/mL 五氯酚钠标准溶液的多反应监测（MRM）色谱图图2：空白样品里的五氯酚钠残留量的多反应监测（MRM）色谱图图3：虾基质中添加量为2.0μ g/kg 五氯酚钠标准溶液的多反应监测（MRM）色谱图图4：猪肉基质中添加量为2.0 μg/kg 五氯酚钠标准溶液的多反应监测（MRM）色谱图样品加标回收率实验结果（添加水平为2. 0μg/kg）实验小结由以上数据和图谱可知，纳谱分析SelectCore MAX小柱能有效去除杂质的干扰，对目标物质有良好的保留和洗脱能力，回收率较好，符合国标动物源食品中五氯酚残留的检测要求。订货信息本应用相关产品产品描述货号 固相萃取柱SelectCore MAX 60mg/3mL;50/pkgMAX060-030060-1分析柱ChromCore  C18 1.8μm，2.1 ×50mmA001-018018-02105S

高效液相色谱柱是消耗品，会随使用时间或进样的次数增加，出现色谱峰高降低，峰宽加大或出现肩峰，柱效下降。需要定期进行彻底清洗和再生，不同的色谱柱清洗方法各不相同。1.反相柱常用方法：分别用甲醇:水=90:10，纯甲醇（HPLC级），异丙醇（HPLC级），二氯甲烷（HPLC级）等溶剂作为流动相，依次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的色谱柱体积.然后再以相反的次序冲洗。2.正相柱分别用正己烷（HPLC级），异丙醇（HPLC级），二氯甲烷（HPLC级），甲醇（HPLC级）等溶剂做流动相，顺次冲洗，每种流动相流经色谱柱不少于20倍的柱体积(异丙醇粘度大，可降低流速，避免压力过高).注意使用溶剂的次序不要颠倒，用甲醇冲洗完后，再以相反的次序冲洗至正己烷，所有的流动相必须严格脱水。3.离子交换柱长时间在缓冲溶液中使用和进样，将导致色谱柱离子交换能力下降，用稀酸缓冲溶液冲洗可以使阳离子柱再生，反之，用稀碱缓冲溶液冲洗可以使阴离子柱再生。　　另外，还可以选择能溶解柱内污染物的溶剂为流动相做正方向和反方向冲洗。但再生后的色谱柱柱效是不可能恢复到新柱的水平的.如果柱子装反了，可以调回来，但可能会造成柱内担体塌陷.在不得已的情况下尽量不要反装色谱柱。

重 阳 节 /Double Ninth Festival 每年农历的九月九日为重阳节，又称重九节、踏秋，老人节。 重阳节正是一年的金秋时节，菊花盛开，在古代，文人雅士此时会包括出游赏秋、登高远眺、观赏菊花、遍插茱萸、吃重阳糕、饮菊花酒等活动。 菊花为菊科植物的干燥头状花序，有散风清热、平肝明目、清热解毒的功效，主产于浙江、安徽、河南等地。9-11月花盛开时分批采收，阴干或焙干，或熏、蒸后晒干，生用。菊花种类繁多，药材按产地和加工方法不同，分为“毫菊”、“滁菊”、“贡菊”、“杭菊”等，由于又有花的颜色不同，又有黄菊花和白菊花之分。菊花中绿原酸、木犀草苷、3,5-二咖啡酰基奎宁酸为主要成分，其中绿原酸具有抗菌、抗病毒、增高白血球、保肝利胆、抗肿瘤、降血压、降血脂、清除自由基和兴奋中枢神经系统等作用；木犀草苷有较强的呼吸道杀菌和降低胆固醇在动脉粥样硬化中的作用；3,5-二咖啡酰基奎宁酸则具有抗氧化的功效，这三种成分的含量决定着菊花的功效与质量，因此检测菊花中各组分的含量具有重要意义。中国药典2015规范了菊花的高效液相色谱分离方法。本应用依据药典方法，选用ChromCore C18反相色谱柱对菊花中成分进行分离，使各主要组分与其他未知组分间均有较好的分离度和峰型，符合药典规定。