【应用分享】动物组织中五氯酚残留的提取与检测

 本方法（参考GB23200.92-2016）适用于猪肉、猪肝、猪肾、牛奶、鱼肉、虾等动物源食品中五氯酚残留的检测。

1. 试剂准备

甲醇（CH3OH）：色谱纯

乙腈（CH3CN）：色谱纯

三乙胺（C6H15N）

甲酸（HCOOH）：色谱纯

氨水（NH3.H2O）

溶液配制

乙腈水溶液：准确量取700 mL乙腈和300 mL水，超声震荡摇匀；

5%三乙胺乙腈水溶液：准确量取50 mL的三乙胺，倒入1000 mL的容量瓶中，用乙腈水溶液（7:3）定容至刻度，摇匀；

5%氨水：量取200 mL浓氨水，转入1000 mL的容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀；

4%甲酸甲醇：量取10 mL的甲酸至250 mL的容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；

2%甲酸甲醇水溶液：取一定体积的4 %甲酸甲醇溶液与等体积的水溶液混合；

0.1%甲酸水：取1 mL的甲酸溶液加入1000 mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。

2、样品提取

称取均质试样2 g置于50 mL离心管中，加入6 mL 5% 三乙胺的乙腈水溶液，充分震荡（鸡肉和鱼肉震荡时间为2 min；肝脏、肾脏、虾和蟹样品为1 min），并超声提取5 min，离心机以3000 r/min的条件离心5 min，收集上清液于离心管中，离心后的残渣用6 mL 5 %三乙胺的乙腈水溶液重复一次上述提取步骤，合并上清液，混匀。

3、净化

SPE柱：SelectCore MAX（60mg/3mL）固相萃取柱

活化：依次用5 mL的甲醇和水活化；

上样：加入提取好的全部上清液；

淋洗：依次用5 %氨水溶液、甲醇、2 %甲酸的甲醇-水溶液各5 mL进行淋洗，淋洗结束后再减压抽干5 min以上

洗脱：用4 mL 4 %甲酸甲醇溶液进行洗脱，洗脱液在40 ℃下用氮气吹至1 mL，加水定容至2 mL后过0.22 μm有机滤膜，上机。

4、液相色谱仪器条件

色谱柱：ChromCore C18 1.8 μm 2.1×50mm

柱温：30 ℃

进样体积：2 μL

流速：0.4 mL/min

流动相：A相：0.1 %甲酸水溶液；B相：乙腈

洗脱梯度：

5、质谱条件

离子源: 电喷雾离子源（Electrospray ionization，ESI）负离子扫描

监测方式：多反应监测（Multiple Reaction Monitoring，MRM）

电喷雾电压：- 4000 V

干燥气：N2 （11 L/min，300 ℃）

雾化气压力：35 psi

图1：10 ng/mL 五氯酚钠标准溶液的多反应监测（MRM）色谱图

图2：空白样品里的五氯酚钠残留量的多反应监测（MRM）色谱图

图3：虾基质中添加量为2.0μ g/kg 五氯酚钠标准溶液的多反应监测（MRM）色谱图

图4：猪肉基质中添加量为2.0 μg/kg 五氯酚钠标准溶液的多反应监测（MRM）色谱图

样品加标回收率实验结果

（添加水平为2. 0μg/kg）

由以上数据和图谱可知，纳谱分析SelectCore MAX小柱能有效去除杂质的干扰，对目标物质有良好的保留和洗脱能力，回收率较好，符合国标动物源食品中五氯酚残留的检测要求。