【知识分享】各国药典色谱规定内容对比-快来学习！

高效液相色谱法：

1. 固定相

中国药典2020：不得改变固定相的理化性质，如填料材质，表面修饰及键合相均需保持一致；从全多孔填料到表面多孔填料的改变，在满足上述条件的前提下是被允许的

美国usp和欧洲ep：无

2. 色谱柱长度

中国药典2020：改变色谱柱粒径和柱长后，l/dp值(或n值)应在原有数值 的-25%～+50%范围内

美国usp和欧洲ep：±70%

3.内径

中国药典2020：无

美国usp：可调整，但线速度不变

欧洲ep：±25%

4.粒径

中国药典2020：同色谱柱长度项下要求

美国usp和欧洲ep：可以减小50%，不能增加

5.流速

中国药典2020：

在此基础上可以根据实际使用时系统压力和保留时间，允许流速在±50%的范围内进行调整

美国usp：±50%，线速度不变，调整幅度可以更高

欧洲ep：±50%

6.柱温

中国药典2020：当温度有规定时，可在±10℃范围内调整

美国usp：±10℃

欧洲ep：±10%

7.进样量

中国药典2020：

并根据灵敏度的需求进行调整。即便没有对色谱柱尺寸进行调整，进样体积也可调整以满足系统适用性的要求

美国usp和欧洲ep：可以减小（lod和重复性没问题）

8.ph

中国药典2020：除另有规定外，流动相中水相ph值可在±0.2ph范围内进行调整

美国usp：±0.2

欧洲ep：±0.2（中性物质±1）

9.检测波长

中国药典2020：不允许改变

美国usp和欧洲ep：不允许调整

10.缓冲液中盐浓度

中国药典2020：可在±10%范围内调整

美国usp和欧洲ep：±10%

11.流动相组成

中国药典2020：

等度洗脱流动相比例：最小比例的流动相组分可在相对值±30%或者绝对值±2%的范围内进行调整（两者之间选择最大值）；最小比例流动相组分的比例需小于（100/n）%，n为流动相中组分的个数；

梯度洗脱程序：

保持不同规格色谱柱的洗脱体积倍数相同，从而保证梯度变化相同，并需要考虑不同仪器系统体积的差异

美国usp：少量组分（＜50%）相对变化量±30%的相对值，不得超过±10%的绝对值变化

欧洲ep：少量组分（＜50%）相对变化量±30%的相对值或±2%的绝对值，取较大者，不得超过±10%的绝对值变化

气相色谱法：

1. 色谱柱长度

中国药典2020：不涉及

美国usp和欧洲ep：±70%

2. 色谱柱内径

中国药典2020：不涉及

美国usp和欧洲ep：±50%

3.粒径

中国药典2020：不涉及

美国usp：允许变化必须通过系统适用性实验

欧洲ep：-50%，不得增大

4.液膜厚度

中国药典2020：不涉及

美国usp和欧洲ep：-50~100%

5.流速

中国药典2020：不涉及

美国usp和欧洲ep：±50%

6.柱温

中国药典2020：不涉及

美国usp和欧洲ep：±10 %

7.进样量

中国药典2020：不涉及

美国usp和欧洲ep：可以减小（如果lod和重复性没问题）

系统适用性试验：

色谱系统的适用性试验通常包括理论板数、分离度、灵敏度、拖尾因子和重复性等五个参数。按各品种正文项下要求对色谱系统进行适用性试验，即用规定的对照品溶液或系统适用性试验溶液在规定的色谱系统进行试验，必要时，可对色谱系统进行适当调整，以符合要求。

1.理论板数（n）：

中国药典2020：

式中tr为色谱峰的保留时间，w为峰宽，w1,h/2为半高峰宽；按上面公式计算色谱柱的理论板数。tr、w、wh/2可用时间或长度计（下同），但应取相同单位。

美国usp：计算公式同《中国药典》，峰谷比（p/v）用于当分离两峰的基线无法达到时，作为在有关物质的测定时的系统适用性参数。

欧洲ep：仅收录了半峰宽的计算公式

峰谷比同usp

2.分离度r：

中国药典2020：除另有规定外，待测物质色谱峰与相邻色谱峰之间的分离度应大于1.5。分离度的计算公式为：

r=2(tr2-tr1)/(w1+w2)

或r=2(tr2-tr1)/1.70( w1,h/2+ w2,h/2)

式中tr2为相邻两色谱峰中后一峰的保留时间；

tr1为相邻两色谱峰中前一峰的保留时间；

w1、w2及w1,h/2、w2,h/2分别为此相邻两色谱峰的峰宽及半高峰宽

当对测定结果有异议时，色谱柱的理论板数（n）和分离度（r）均以峰宽（w）的计算结果为准。

美国usp：当使用电子积分仪时，r=1.18(tr2-tr1)/(w1,h/2+ w2,h/2)，其它同《中国药典》

欧洲ep：对于基线分离，分离度应大于1.5，r=1.18(tr2-tr1)/(w1,h/2+ w2,h/2)

如果不是基线分离，上述公式不适用

3.灵敏度：

中国药典2020：定量测定时，信噪比应不小于10；定性测定时，信噪比应不小于3。

美国usp和欧洲ep：

定量测定时，信噪比应不小于10；定性测定时，信噪比应不小于3

定量限需满足准确度和精密度的相关要求。

4.拖尾因子t：

中国药典2020：

t=w0.05h/2d1

式中w0.05h为5％峰高处的峰宽；d1为峰顶在5%峰高处横坐标平行线的投影点至峰前沿与此平行线交点的距离。

以峰高作定量参数时，除另有规定外，t值应在0.95～1.05之间。

以峰面积作定量参数时，一般的峰拖尾或前伸不会影响峰面积积分，但严重拖尾会影响基线和色谱峰起止的判断和峰面积积分的准确性，此时应在品种正文项下对拖尾因子作出规定。

美国usp：计算公式同《中国药典》

欧洲ep：计算公式同《中国药典》通常对称因子要求0.8-1.5

5. 重复性

中国药典2020：除另有规定，外标法，连续5针rsd应不大于2.0%；内标法，配制80%、100%、120%三种不同浓度溶液，分别至少进样2次，平均校正因子的rsd不得过2.0%，当待测成分是微量或痕量，进样量少或其色谱峰响应值较小时，对相对标准偏差的要求可适当放宽。

美国usp和欧洲ep：

含量测定随数值、重复进样次数不同，rsd限值也不同