合成色素检测的重要性
食品的色彩是食品感观品质的一个重要因素。人们在制作食品时常会使用一种食品添加剂-食用色素。目前使用的食用色素有天然食用色素和合成食用色素两大类。合成食用色素即人工合成的色素,其优点不少,如色泽鲜艳,着色力强,但它对人体也有一定的危害,如具有一定的毒性、致泻性、致突性(基因突变)和致癌性。鉴于食用合成色素的不安全性,国家也加强了对合成色素的监管,制订了食品添加剂使用标准(GB 2760-2011),对合成色素的检测非常重视。
检测方法
GB5009.35-2016食品中合成着色剂的测定的方法是采用聚酰胺吸附法测定,但是该方法有一定的局限性,实验中对温度有一定要求,且吸附力不稳定。本实验采用的聚合物基质的弱阴离子交换法,针对目标分析的8种人工合成色素中含有苯磺酸和苯甲酸结构,可以和离子基团更好的结合,这样对于样品有着更好的净化能力,并且保证了测定的稳定性,更适用于复杂基质的食品的检测。
ChromCore C18-AC色素专用柱系纳谱分析基于食品安全国家标准(GB 5009.35-2016 食品中合成着色剂的测定)的色谱条件基础上研发出的一款色素专用色谱柱。其采用了独特的固定相键合技术,各色素组分均具有良好的峰形及分离度,具有更长的使用寿命。
样品制备
前处理实验
1
上样液
基质的全部液
2
活化
依次用6 mL 甲醇、6 mL10%甲酸水溶液活化;(视频如下,图左为SelectCore WAX (150 mg/6 mL)SPE柱,图右为Brand W SPE柱)
活化,图左为SelectCore WAX (150 mg/6 mL)SPE柱,图右为Brand W SPE柱
3
上样
上样液注入SPE小柱中,弃去流穿液;(视频如下图,图左为SelectCore WAX SPE柱,图右为Brand W SPE柱,为果冻基质上样)
上样,图左为SelectCore WAX SPE柱,图右为Brand W SPE柱,为果冻基质上样
4
淋洗
移取6 mL的水溶液注入SPE小柱中,弃去淋洗液;
5
洗脱
移取6 mL的5%氨水甲醇液注入SPE小柱中,收集洗脱液;(视频如下,图左为SelectCore WAX SPE柱,图右为Brand W SPE柱,视频中为色素回收实验中的色素洗脱环节)
洗脱,图左为SelectCore WAX SPE柱,图右为Brand W SPE柱
6
收集
氮气吹干,用10%乙醇水溶液定容至1 mL,过0.45μm有机滤膜,上HPLC检测。
HPLC仪器条件
流动相A:乙腈 流动相B:0.02mol/L 乙酸铵水溶液
色谱柱:ChromCore C18-AC色素专用柱 5μm,4.6×250mm
波长: 254 nm
进样量:5 uL
柱温箱:35℃
梯度设置:
实验谱图及加标回收率数据
实验结论
据实验结果显示,纳谱分析的SelectCore WAX柱 (150 mg/6 mL)固相萃取柱对八种人工色素具有很好的保留效果,且在样品前处理过程中发现,相较于Brand W的SPE柱,纳谱的SelectCore WAX在流速上占有明显的优势---快且均匀,回收率也较为理想,结合纳谱分析的ChromCore C18-AC 5μm,4.6×250mm色素专用分析柱进行分析,峰型对称,分离度良好,可以满足食品中八种人工合成着色剂的测定。
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