【应用分享】14种喹诺酮类药物的残留检测

1、试剂准备

甲醇（CH3OH）：色谱纯

乙腈（CH3CN）：色谱纯

乙二胺四乙酸二钠（EDTA）：色谱纯

甲酸（HCOOH）：色谱纯

水：GB/T 6682规定的一级水

柠檬酸：分析纯

磷酸氢二钠：分析纯

1-1、仪器

1·高效液相色谱-串联质谱仪

2·电子天平：感量0.0001g

3·电子天平：感量0.01g

4·旋涡混合器

5·冷冻离心机

6·聚丙烯离心管

7·氮吹仪

8·固相萃取装置

1-2、溶液配制

5%甲醇水溶液：准确量取5mL的甲醇，倒入100mL的容量瓶中，用水溶液定容至刻度，摇匀。

0.2%甲酸水：取2mL的甲酸，加入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。

0.1%甲酸水：取1mL的甲酸，加入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀。

0.1mol/L柠檬酸水溶液：准确称取21.01g柠檬酸，加入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀

0.2mol/L磷酸氢二钠水溶液：准确称取71.63g磷酸氢二钠，加入1000mL容量瓶中，用水定容至刻度，摇匀

Mcllvaine缓冲溶液：将1000mL的0.1mol/L柠檬酸水溶液与625mL的0.2 mol/L磷酸氢二钠水溶液混合，必要时用盐酸或者氢氧化钠调节pH为4.0±0.05。

0.1mol/L EDTA-Mcllvaine缓冲溶液：准确称取60.5g乙二胺四乙酸二钠，放入1625mL的Mcllvaine缓冲溶液中，摇晃混匀。

2、样品提取

牛奶和鸡蛋

称取均质试样5.0g（精确到0.01g）置于50mL离心管中，加入40mL 0.1mol/L EDTA-Mcllvaine 缓冲溶液，1000r/min涡旋混合1min，超声提取10min，10000r/min离心5min（温度低于5℃），取上清液。

3、净化

SPE柱：SelectCore HLB固相萃取柱（200mg/6mL）

活化：依次用6mL的甲醇和水活化；

上样：加入提取好的全部上清液；

淋洗：2mL5%甲醇水溶液进行淋洗，淋洗结束后再减压抽干；

洗脱：6mL甲醇溶液进行洗脱，洗脱液在40℃下用氮气吹干，用1mL 0.2%甲酸水复溶后过0.22μm有机滤膜，上机。

4、液相色谱仪器条件

色谱柱：ChromCore  C18 3μm，2.1×100mm

柱温：40°C

进样体积：1μL

流速：0.4mL/min

流动相：A相：0.1%甲酸水溶液；B相：乙腈

洗脱梯度：

5、质谱条件

离子源: 电喷雾离子源（Electrospray ionization，ESI）正离子扫描

监测方式：多反应监测（Multiple Reaction Monitoring，MRM）

雾化气流量：3L/min

加热器流量：10L/min

干燥气流量：10L/min

接口温度：300℃

DL温度：250℃

加热块温度：400℃

6、实验谱图