SepaBean machine T快速液相制备色谱

润滑油一般由基础油和添加剂两部分组成。基础油是润滑油的主要成分，决定着润滑油的基本性质，添加剂则可弥补和改善基础油性能方面的不足，赋予某些新的性能，是润滑油的重要组成部分。润滑油基础油主要分矿物基础油、合成基础油以及生物基础油三大类。矿物基础油应用广泛，用量很大（约95%以上），但有些应用场合则必须使用合成基础油和生物油基础油调配的产品，因而使这两种基础油得到迅速发展。合成润滑油具有低温性能优异，润滑性能好和使用寿命长等特点,可适用于高负荷、高转速、高真空、高能辐射和强氧化介质等环境。润滑油是用在各种类型汽车、机械设备上以减少摩擦，保护机械及加工件的液体或半固体润滑剂，主要起润滑、辅助冷却、防锈、清洁、密封和缓冲等作用，本文中所介绍案例为合成润滑油。

糖类化合物亦称碳水化合物，是多羟基（2个以上）的醛、酮类化合物或在水解后能产生这类化合物的物质，是自然界数量最多的有机化合物。糖类化合物是植物、动物和微生物的重要组分，与人类生活密切相关，是人体能量的主要来源，当然与药物研究也密不可分，如：葡萄糖注射液、右旋糖酐作血浆制剂等。近年来糖类化合物的研究有两个方向： ①化学家致力于糖类化合物的人工合成，这主要是为社会发展作长远打算，使人类食物将有可能逐步摆脱对农业的依赖。②研究糖类化合物与生命的关系，因为在生命体内糖与蛋白质、核酸常不可分离。

在样品纯化过程中你是否遇到过五花八门的难点，这个问题对于做制备纯化的小孙来说有太多值得吐槽的地方，如样品极性太小正相模式不保留、样品极性太大硅胶固定相洗脱不下来、样品溶解度太差纯化过程析出或拖尾严重及洗脱不下来等情况。在分离纯化的过程中，难免会碰到溶解性比较差的物质，这类物质有时会对分离纯化造成一些负面的影响，如由于拖尾而影响分离度，甚至是直接析出导致管路堵塞，或者少量试剂不能完全溶解至澄清，而样品纯化之前一定要有解决溶解度的办法，否则带着问题上样纯化效果一定不会很理想。解决样品溶解度的问题没有固定答案，具体样品需要具体分析，本文主要和大家分享小孙在纯化过程中如何处理溶解度较差的样品。

在固体上样的方案中，通常的做法是在分离柱前通过转接头再接入一支上样空柱，空柱用来加入完成拌样处理的样品，这种方法的缺点是空柱以及转接头自身的死体积易导致样品的扩散，从而降低分离效率。针对上述问题，三泰科技推出了iLOK-SL系列上样分离一体柱，在分离柱前端预留15%的空间用于固体上样，从而将样品与分离填料之间的死体积降至最低，确保获得最佳的分离效果。下面以某合成中间体的纯化为例进行详细介绍。

苯二氮卓类药物是一种常用的处方药，结构式如图1所示。最常用于治疗焦虑症和恐慌症。有时它也用于治疗癫痫发作，甚至可以用于酒精和药品戒断。然而在苯二氮卓类化合物的合成过程中，副产物的去除对于获得高纯度的该化合物的成功至关重要。自动化快速色谱是研究规模最有效的纯化技术之一，该方法同样也可以应用于规模化生产。

脂质体（liposome）是一种人工膜，是由卵磷脂和神经酰胺等制得的脂质体(空心)，具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同。脂质体具有靶向性和淋巴定向性、缓释作用、降低药物毒性以及提高稳定性等特点，使脂质体具有广泛的应用。主要应用于转基因、药物递送，还可用作将染料递送至纺织品、杀虫剂至植物、酶和营养补充剂至食物以及化妆品至皮肤的载体等，具有广阔的应用领域。本案例中主要以来自某生物医药公司的脂质体样品为例，对其分离纯化方法进行简单的介绍。

在药物研发过程中，对药物中的杂质含量控制是药物质量控制的关键，而对杂质控制的核心是对药物中每一个杂质的活性逐一制定质量控制限度，这就要求对该药物中所有杂质进行分离纯化、结构确证并进行相关测试。

目前对大极性化合物的研究在医药、天然产物、生化、食品安全等方面的应用逐渐提升，对大极性化合物的纯化需求也越来越多。然而在色谱纯化中，最常用的反相模式对大极性组分的纯化有自己的短板——保留太弱，而亲水作用色谱（HILIC）则弥补了反相色谱的缺点，它可提高对极性物质的保留从而获得满意的纯化效果。

正相色谱和反相色谱是Flash制备色谱常用的两种分离模式，被广泛应用于各类有机合成产物的分离纯化中。在正相色谱中，采用极性固定相（如带有二醇基、氨基或氰基的固定相及硅胶、三氧化二铝等）并结合使用非极性流动相（如正己烷等），根据分子的极性大小将其分开。由于正相色谱以吸附效应作为分离的基础，因此也被称为吸附色谱。而在反相色谱中，采用非极性固定相（如带有C18基团的硅胶等）配合极性流动相对样品进行分离。这两种分离模式基于不同的分离机理，因此在将两种分离模式联用时可称之为正交色谱分离模式，从而获得对复杂样品更高的分辨力和更好的分离效果。本文中以某合成药物中间体为样品，利用SepaFlash系列正相硅胶柱及反相C18柱联合使用，实现了对样品的高效分离纯化，获得了满足纯度要求的目标产物，为此类复杂样品的快速制备纯化提供了新的思路。

羧酸类化合物尤其是苯甲酸类化合物是许多活性药物成分（Active Pharmaceutical Ingredients, API）的关键中间体，例如解热镇痛药物阿司匹林等，具有广泛的应用价值。使用传统硅胶作为固定相的色谱柱来分离纯化这类化合物是一类难题。常州三泰科技有限公司的SepaFlash C18反相柱结合快速液相制备色谱系统SepaBean machine具有良好的分离性能。本文利用SepaFlash C18反相柱分离并纯化了两种强极性的苯甲酸类化合物(结构式如图 1所示)，结果表明混合物样品得到了很好的分离，为此类具有一定极性与亲水能力的化合物的快速分离纯化提供了一种经济实用的解决方案。

在本应用案例中，样品为合成反应获得的苯并 冠醚衍生物，该样品体系复杂，包含多种不同极性的 组分，利用常规二元溶剂梯度进行纯化时很难获得良 好的分离度。针对样品的具体性质，三泰科技的应用 工程师利用四元溶剂系统SepaBean machine T配合 SepaFlash 正相硅胶柱，通过不同极性溶剂的在线切 换，成功对样品进行了制备纯化，获得了满足制备需 求的目标产物，为此类组分极性差异很大的复杂样品体系的分离纯化提供了一种可行的方案。

在本应用案例中，样品为极性很强的谷氨酰胺类衍生物，不易溶于正己烷、乙酸乙酯等常用正相流动相，而其在普通C18反相柱上几乎没有保留。针对样品的具体性质，三泰科技的应用工程师利用亲水性的SepaFlash® C18AQ柱配合快速液相制备色谱系统SepaBean® machine，成功对样品进行了纯化制备，获得了满足制备需求的目标产物，为极性很强的谷氨酰胺类样品的分离纯化提供了一种可行的方案。

化学上，同分异构体是一种有相同化学式，有同样的化学键而有不同的原子排列的化合物。简单地说，具有相同分子式而结构不同的化合物互为同分异构体，很多同分异构体有相似的化学性质。异构体包含构造异构体（结构异构体）和立体异构体（构型异构体）。构造异构又分为（碳）链异构、位置异构和官能团异构（异类异构）。立体异构又分为非对映异构和对映异构。 在医药中间体的化学合成过程中，往往会同时合成出多种异构体，而由于其化学性质相似，导致分离纯化难度较大，因此常采用高压制备方法对其进行分离纯化，但高压制备成本较高，因此近些年逐渐有客户采用中低压反相制备的方法进行纯化，获得较好的效果，降低了研发成本，而本案例中尝试采用正相分离方案为异构体的纯化提供更多的选择。

在本应用案例中，样品为极性很强的某合成低聚糖类分子，在普通C18反相柱上保留很弱，此外，其紫外吸收非常弱，不适合利用UV检测器对其进行检测。针对样品的具体性质，三泰科技的应用工程师利用SepaFlash HILIC ARG柱配合快速液相制备色谱系统SepaBean machine并与外接ELSD检测器联用，成功对样品进行了纯化制备，获得了满足制备需求的目标产物，为极性很强的低聚糖类样品的纯化制备提供了一种可行的方案。

C18AQ柱在Flash制备纯化样品中的一个典型应用是脱盐操作，即除去样品溶剂中的盐或缓冲液组分，以方便样品应用于后续研究中。在本案例中，某大极性化合物作为样品在C18AQ柱上进行了分离纯化，去除了粗品中所含的盐类杂质，且将样品从水相溶剂中转移至有机相体系中，从而方便了后续的旋蒸等操作，节省了溶剂及操作时间。

提及ELSD在制备分离领域的应用，天然产物无疑是使用最为广泛的一个领域。由于ELSD的通用性，事实上在常规有机合成方面也是其合适的应用领域，本文以两种常规有机合成小分子为例，介绍了ELSD在这方面的应用，突出了其相对于传统的紫外检测器的优势。

本研究探讨使用SepaBean machine快速液相制备色谱系统检测技术对糖类化合物进行制备纯化，结合UV检测器和ELSD检测器（蒸发光散射检测器）共同检测。选取葡萄糖、果糖、乳糖三种样品，由于样品为极性很强的糖类分子，在普通C18反相柱上保留很弱，针对样品的具体性质，应用工程师利用Sepa Flash氨基柱配合快速液相制备色谱系统SepaBean machine并与ELSD检测器联用，成功对样品进行了纯化，为极性很强的糖类化合物的制备纯化提供了一种可行的方案。

实验参数同步《GB 5009.202-2016 食用油中极性组分（PC）的测定》的食品安全国家标准方法，配合常州三泰科技标准型快速分离正相硅胶柱进行制备。

有机电致发光器件（OLED）具有轻薄、低功耗、高对比度、自发光以及可柔性等优势，在显示与照明应用领域中大放异彩。有机电致发光材料作为OLED的核心组成部分有着较好的应用场景，然而对于蓝色材料而言，仍然存在诸多问题，因此提升蓝光OLED性能正受到广大研究人员越来越广泛的关注。本文主要讲述OLED领域蓝光材料类样品的分离纯化方法。