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SepaBean machine快速制备液相色谱系统 应用于脂质体类化合物分离纯化应用案例

2023/08/02 12:44

阅读:83

分享:
应用领域:
制药/生物制药
发布时间:
2023/08/02
检测样品:
原料药
检测项目:
纯度
浏览次数:
83
下载次数:
参考标准:
/

方案摘要:

脂质体(liposome)是一种人工膜,是由卵磷脂和神经酰胺等制得的脂质体(空心),具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同。脂质体具有靶向性和淋巴定向性、缓释作用、降低药物毒性以及提高稳定性等特点,使脂质体具有广泛的应用。主要应用于转基因、药物递送,还可用作将染料递送至纺织品、杀虫剂至植物、酶和营养补充剂至食物以及化妆品至皮肤的载体等,具有广阔的应用领域。本案例中主要以来自某生物医药公司的脂质体样品为例,对其分离纯化方法进行简单的介绍。

产品配置单:

分析仪器

SepaBean machine T快速液相制备色谱

型号: SepaBean machine T-经济型

产地: 江苏

品牌: 三泰

¥10万 - 20万

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设备配件

键合相系列 SepaFlash快速液相制备色谱柱

型号:

产地:

品牌: 三泰

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方案详情:

SepaBean machine快速制备液相色谱系统

用于脂质体类合物分离纯化应用案例


脂质体(liposome)是一种人工膜由卵磷脂和神经酰胺等制得的脂质体(空心),具有的双分子层结构与皮肤细胞膜结构相同脂质体具有靶向性和淋巴定向性、缓释作用、降低药物毒性以及提高稳定性等特点,使脂质体具有广泛的应用。主要应用于转基因药物递送,还可用作将染料递送至纺织 品、杀虫剂 植物、酶和营养补充剂至食物以及化妆品 至皮肤的载体等,具有广阔的应用领域。本案例中主要以来自某生物医药公司的脂质体样品为例,对其分离纯化方法进行简单的介绍。

样品信息

来自某生物医药公司脂质体,样品呈白色粉末状,纯度98%,想要提高纯度至99.5%,溶解性较差,采用二氯甲烷加甲醇进行超声加热溶解(温度低于60度),且样品紫外吸收较弱,需要连接ELSD进行检测,因此采用SepaBean machine快速液相制备色谱系统搭配ELSD检测器进行分离纯化。


实验方案

先采用HPLC液相检测,根据其液相谱图确认进一步分离纯化方法,液相谱图结果为目标产物为 RT=12.918的峰,纯度98.4%,详情如图1所示。

图1.HPLC液相谱图



根据液相方法及结果进行进一步分离纯化的实验参数设置如表1所示

表1. Flash制备实验参数

SepaBean machine标准型 + ELSD

分离柱

120g SepaFlash键合相C18(40-63 µm, 100 Å, 订货号:SW-8201-120-IR)

检测波长

220 nm254 nmELSD

流动相

溶剂A

溶剂B:甲醇

流速

40ml/min

进样量

110mg

洗脱梯度




时间 (min)

溶剂B (%)

0

70

20

90

35

100


50

100

结果与讨论


该脂质体类样品由于其溶解性很差,因此降低上样量,上样量110mg,采用120g C18分离柱(40-63 µm, 100 Å, 订货号:SW-8201-120-IR)进行分离纯化。分离谱图可以看出,该物质紫外吸收较弱需要借助ELSD检测器进行检测,从分离谱图看其分离效果较好,目标组分满足客户检测纯度要求此次解决方案采用的是三泰科技的键合相系列色谱柱,仪器是SepaBean machine标准型制备液相色谱系统搭配ELSD检测器,为紫外吸收较弱的脂质体类化合物提供更多的分离纯化方案,同时也为其他种类紫外吸收较弱的化合物的分离纯化提供参考。

SepaFlash键合相系列分离柱订购信息

无定形C18,粒径40–63µm,孔径60Å

(碳含量17%,封端,比表面积500m2/g,上样量0.1–2%)

产品编码

柱尺寸

上样量

流速(ml/min)

柱长度(mm)

柱内径(mm)

最大工作压力(psi/bar)

SW-8201-004-IR

5.9 g

5.9 mg–118 mg

10–20

113.8

12.4

400/27.5

SW-8201-012-IR

23 g

23mg–0.46g

15–30

134.8

21.4

400/27.5

SW-8201-025-IR

38 g

38 mg–0.76 g

15–30

184

21.4

400/27.5

SW-8201-040-IR

55 g

55 mg–1.1 g

20–40

184.4

26.7

400/27.5

SW-8201-080-IR

122 g

122 mg–2.5 g

30–60

257.4

31.2

350/24.0

SW-8201-120-IR

180 g

180 mg–3.6 g

40–80

261.5

38.6

300/20.7

SW-8201-220-IR

340 g

340 mg–6.8 g

50–100

223.5

61.4

300/20.7

SW-8201-330-IR

475 g

475 mg–9.5 g

50–100

280.2

61.4

250/17.2

※ 兼容市场上所有快速液相制备色谱系统。 


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