SepaBean machine U200快速制备液相色谱

在分离纯化的过程中，相信大家都会遇到极性很接近的样品，对于此类样品一般解决办法有很多如减少上样量、降低流速以及改变流动相的配比等，这些措施都能有效提升样品的分离度。若上述方法也不能改善分离度还可通过增加柱长来解决，增加柱长可直接更换大规格的色谱柱或者同内径色谱柱串联使用，当实验过程中没有大规格色谱柱时可选用同内径色谱柱串联的方法，现提供一个相关案例说明色谱柱串联的使用效果。

在固体上样的方案中，通常的做法是在分离柱前通过转接头再接入一支上样空柱，空柱用来加入完成拌样处理的样品，这种方法的缺点是空柱以及转接头自身的死体积易导致样品的扩散，从而降低分离效率。针对上述问题，三泰科技推出了iLOK-SL系列上样分离一体柱，在分离柱前端预留15%的空间用于固体上样，从而将样品与分离填料之间的死体积降至最低，确保获得最佳的分离效果。下面以某合成中间体的纯化为例进行详细介绍。

目前对大极性化合物的研究在医药、天然产物、生化、食品安全等方面的应用逐渐提升，对大极性化合物的纯化需求也越来越多。然而在色谱纯化中，最常用的反相模式对大极性组分的纯化有自己的短板——保留太弱，而亲水作用色谱（HILIC）则弥补了反相色谱的缺点，它可提高对极性物质的保留从而获得满意的纯化效果。

本文中待纯化的样品来自某制药公司，为氨基多环糖类物质，结构类似于氨基糖苷类抗生素，其极性很大，易溶于水，其分子结构式示意图参见图1，粗品纯度约为88%（HPLC分析结果）。对于此类大极性化合物的分离纯化，根据我们之前的制备纯化经验，样品分子在普通C18分离柱上的保留很弱，因此，考虑采用C18AQ柱对其进行分离纯化。

羧酸类化合物尤其是苯甲酸类化合物是许多活性药物成分（Active Pharmaceutical Ingredients, API）的关键中间体，例如解热镇痛药物阿司匹林等，具有广泛的应用价值。使用传统硅胶作为固定相的色谱柱来分离纯化这类化合物是一类难题。常州三泰科技有限公司的SepaFlash C18反相柱结合快速液相制备色谱系统SepaBean machine具有良好的分离性能。本文利用SepaFlash C18反相柱分离并纯化了两种强极性的苯甲酸类化合物(结构式如图 1所示)，结果表明混合物样品得到了很好的分离，为此类具有一定极性与亲水能力的化合物的快速分离纯化提供了一种经济实用的解决方案。

在本文中，三泰科技的研发人员利用快速液相制备色谱系统SepaBean machine配合SepaFlash C18反相分离柱对红豆杉植物提取物进行了分离纯化，获得了满足制备需求的目标产品，可用于后续的进一步科学研究中，为此类天然产物的快速制备纯化提供了经济高效的解决方案。

在本应用案例中，样品分子结构中含有噻嗪类母体结构，普通正相硅胶柱或反相C18 柱均不适合对其进行分离纯化，三泰科技的应用工程师利用SepaFlash HILIC ARG柱配合快速液相制备色谱系统SepaBean® machine成功对其进行了分离，获得了满足纯度要求的目标产物，为此类样品的分离纯化提供了便捷高效的解决方案。

在本应用案例中，样品为极性很强的谷氨酰胺类衍生物，不易溶于正己烷、乙酸乙酯等常用正相流动相，而其在普通C18反相柱上几乎没有保留。针对样品的具体性质，三泰科技的应用工程师利用亲水性的SepaFlash® C18AQ柱配合快速液相制备色谱系统SepaBean® machine，成功对样品进行了纯化制备，获得了满足制备需求的目标产物，为极性很强的谷氨酰胺类样品的分离纯化提供了一种可行的方案。

常州大学食品学院的邹老师目前正致力于从植物种皮或叶子中提取花青素，前期采用传统的乙醇萃取法，经初步提取后，发现提取液中除主要成分外，还含有少量水溶性杂质，HPLC分析图谱如图2所示。为了去除这些杂质，进一步提高提取的花青素纯度，邹老师联系到三泰科技的应用技术研究中心，希望我们能帮他解决这一难题。

在本应用案例中，样品为极性很强的某合成低聚糖类分子，在普通C18反相柱上保留很弱，此外，其紫外吸收非常弱，不适合利用UV检测器对其进行检测。针对样品的具体性质，三泰科技的应用工程师利用SepaFlash HILIC ARG柱配合快速液相制备色谱系统SepaBean machine并与外接ELSD检测器联用，成功对样品进行了纯化制备，获得了满足制备需求的目标产物，为极性很强的低聚糖类样品的纯化制备提供了一种可行的方案。

C18AQ柱在Flash制备纯化样品中的一个典型应用是脱盐操作，即除去样品溶剂中的盐或缓冲液组分，以方便样品应用于后续研究中。在本案例中，某大极性化合物作为样品在C18AQ柱上进行了分离纯化，去除了粗品中所含的盐类杂质，且将样品从水相溶剂中转移至有机相体系中，从而方便了后续的旋蒸等操作，节省了溶剂及操作时间。