大肠杆菌菌体蛋白质残留量的测定方法！本法系采用酶联免疫法测定大肠杆菌表达系统生产的重组制品中菌体蛋白质残留量。⒈试剂（1)包被液（P H9.6碳酸盐缓冲液） 称取碳酸钠0.32g、碳酸氢钠0 .5 8 6 g ,置200ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度。(2 )磷酸盐缓冲液（p H 7 . 4 )称取氯化钠8g、氯化钾0.2g、磷酸氢二钠1.44g、磷酸二氢钾0.24g，加水溶解并稀释至500ml, 121°C灭菌15分钟。(3 )洗涤液（pH7.4) 量取聚山梨酯20 0.5ml，加磷酸盐缓冲液至500ml。(4 )稀释液（p H 7 . 4 )称取牛血清白蛋白0.5g，加洗涤液溶解并稀释至100ml。(5 )浓稀释液称取牛血清白蛋白l.O g , 加洗涤液溶解并稀释至100ml。(6 )底物缓冲液（pH 5 .0枸橼酸-磷酸盐缓冲液） 称取磷酸氢二钠（Na2HP04 . 12H20 )1 . 84g、枸橼酸 0. 51g，加水溶解并稀释至100ml。(7 )底物液取邻苯二胺8mg、30%过氧化氢30^1，溶于底物缓冲液20ml中。临用时现配。(8 )终止液lm o l/L硫酸溶液。⒉标准品溶液的制备  按菌体蛋白质标准品说明书加水复溶，精密量取适量，用稀释液稀释成每lm l中含菌体蛋白质500ng、250ng、125ng、62. 5ng、31. 25ng、15. 625ng, 7. 8125ng的溶液。⒊供试品溶液的制备  取供试品适量，用稀释液稀释成每l m l中约含2 5 0 ug 的溶液。如供试品每l m l中含量小于500ug时，用浓稀释液稀释1倍。⒋测定法 取兔抗大肠杆菌菌体蛋白质抗体适量，用包被液溶解并稀释成每lm l中含10ug 的溶液，以100ul/ 孔加至9 6孔酶标板内，4 °C放置过夜（16~1 8小时）。用洗涤液洗板3次；用洗涤液制备1%牛血清白蛋白溶液，以200u1/孔加至酶标板内，37°C放置2 小时；将封闭好的酶标板用洗涤液洗板3 次；以100u1/孔加人标准品溶液和供试品溶液，每个稀释度做双孔，同时加入2 孔空白对照（稀释液），37°C放置2 小时；用稀释液稀释辣根过氧化物酶（HRP)标记的兔抗大肠杆菌菌体蛋白质抗体1000倍，以100u1/ 孔加至酶标板内，37°C放置1 小时，用洗涤液洗板1 0次，以l00ul/孔加人底物液，3 7 °C避光放置4 0 分钟，以5 0 p l /孔加入终止液终止反应。用酶标仪在波长4 9 2 n m 处测定吸光度，应用计算机分析软件进行读数和数据分析，也可使用手工作图法计算。以标准品溶液吸光度对其相应的浓度作标准曲线，并以供试品溶液吸光度在标准曲线上得到相应菌体蛋白质含量，⒌按以下公式计算：供试品菌体蛋白质残留量（％) = (c×n)/（T×106）×100式中 c为供试品溶液中菌体蛋白质含量，ng/ml;     n为供试品稀释倍数；     T为供试品蛋白质含量，mg/ml。注：也可采用经验证的酶联免疫试剂盒进行测定。为了更好的服务社会，创造双方利益zuida化，我们特设了微生物菌种查询网！专业为各企事业单位，科研院所，各级学校提供微生物菌种产品查询、购买服务！网站主要提供的产品：质控菌种，标准菌种，中国微生物菌种4万多株，细胞系/株1万多株其中金黄色葡萄球菌，大肠埃希氏菌（大肠杆菌），沙门氏菌，黑曲霉，铜绿假单胞菌，枯草芽孢杆菌，链球菌，白色念珠菌，志贺氏菌等为常用菌株。

                 贴壁细胞的保藏方法！百欧博伟生物所谓细胞虐我千百遍，我待细胞如初恋。细胞培养过程中，总是会出现各种意想不到的问题，一不留神就会全盘皆输。对于实验操作不太熟悉的朋友，与其一边做着科研一边拜着上帝祈祷实验成功，不如看看百欧博伟生物技术老师如何操作。今天要学习的是贴壁细胞的保藏方法，大家赶紧拿出小本本认真听讲吧！一、观察细胞状态贴壁细胞密度达到80%，即可以细胞冻存形式进行保藏，拍照，记录细胞状态；二、细胞清洗培养皿表面消毒后，转移至生物安全柜中，去除培养皿中培养液，加入12mlPBS，轻轻摇晃培养皿清洗细胞，随后吸除PBS清洗液；三、细胞消化将2ml胰酶加入培养皿中，完全覆盖细胞，置于显微镜下观察（期间禁止摇晃培养皿），当细胞刚开始脱落时，立即转移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余约0.5ml胰酶，转移至培养箱内继续消化，每30秒肉眼观察细胞状态，至细胞成流沙状完全脱落，转移至生物安全柜中，加入12ml完全培养基，终止消化；四、细胞离心将终止消化后的细胞悬液吹打均匀，吸取至15ml离心管中，1000r/min（110g），离心3min；五、细胞冻存离心后去除细胞上清液，按照冻存细胞量5*10^5/ml，吸取冻存液重悬细胞沉淀，吹打均匀后分装至相应的冻存管中，进行冻存；六、细胞保藏冻存管做好标记，放至程序降温盒中，于4℃冰箱放置30min，转移至-80℃超低温冰箱过夜，将过夜后的冻存细胞转移至液氮中保藏。中国微生物菌种查询网是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                     浮游菌的监测方法与注意事项！空气微生物采样类型：被动沉降类：自然沉降法、沉降式静电采样器动力分离类：狭缝式采样器            离心式采样器            针孔式采样器            过滤式采样器            静电采样器其它类：温差迫降采样器、生物类采样器1、方法《医药工业洁净室（区）浮游菌的测试方法》（GB/T16293-2010）计数浓度法：通过收集悬浮在空气中的生物性粒子于专门的培养基中，经若干时间，在适宜的生长条件下使其繁殖到可见的菌落并进行计数。2、仪器狭缝式采样器离心式采样器针孔式采样器——以上为GB/T16293中收载的采样器，包括无油抽气气泵、较低的气流流速和较大的采样流量）过滤式采样器是利用抽气装置使空气通过滤材而使微生物粒子阻留在滤材上。仪器的核心是滤膜，根据滤膜的孔径和材质确定其用途。优点是捕获率较高，对话宁温度没太多要求；缺点是不适用于不耐干的微生物，因阻塞导致的气流量不稳定和采样膜的二次处理有可能降低采集效率。3、监测1）仪器的校准：定时器、转盘转速、流量计等2）仪器的清洁与消毒穿孔盖和防尘盖可121℃灭菌20分钟仪器表面清洁或在洁净室准备和存放（保护罩）可用蘸70-80%乙醇或异丙醇擦拭，足以保证无细菌残留。采样头内部清洁可在超净工作台内进行。在采样头上方喷洒适量酒精，让机器空转5分钟左右即可（约采样500l）。3）培养皿表面消毒4）人员的清洁、消毒和着装5）在温度、湿度、压力的测试之后进行6）明确测试状态，静态测试人员不得多于2人，一般应动态监测。7）开启净化空调系统单向流、静态10min以上；非单向流30min以上8）采样点数（最少）面积      A级       B级     C级       D级静态      动态＜10     2~3       2~3        2 2       2≥10~＜20   4        4       2           2≥20~＜40   8        8         2         2注：A级（单向流）面积指送风口表面积；任何小的洁净区采样点不得少于2个9）采样位置：工作区：离地面0.8-1.5m左右，高于工作面送风口：离开送风口30cm关键设备或关键区域，可增加采样点10）采样次数：每次点1次11）采样量（最少）A级        B级        C级        D级静态      动态最小采样量（L/次）1000   1000      500 500         1004、注意事项1）采取一切措施防止采样污染和其他人为行为对样本的污染2）采样注意事项 同悬浮粒子监测3）培养基质量 同沉降菌监测4）阴性对照试验 每次或每个区域取1个对照培养皿5、结果判断每个测点的浮游菌平均浓度必须低于所选定评定标准中的界限。在静态测试时，若某测点的浮游菌的平均浓度超过评定标准，应重新采样两次，两次测试结果均合格才能判为符合。欢迎访问中国微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium )：杆状，末端圆，单个或呈短链排列。1.2-1.5×2.0-4.0微米，严格好氧，能运动，革兰氏阳性，芽孢1.0-1.2×1.5-2.0微米，椭圆形，中生或次端生。芽孢从椭圆形到长形不等；不能生成乙酰甲基甲醇；菌株能运动，但运动缓慢，需要游离氧；发酵葡萄糖产酸；DNA的G+C含量为36%-38%。接触酶阳性；水解淀粉和酪素；V-P反应和卵黄反应阴性。琼脂平板微波状，平隆，浅黄白色转浅灰白色至浅灰褐色，表面略有光泽，在马铃薯块上生长，由浅黄灰色变为灰色。液化明胶慢、胨化牛奶、水解淀粉、不还原硝酸。 工业上用于生产葡萄糖异构酶，巨大芽孢杆菌在回收贵重金属方面有着重要作用，还能降解土壤中难溶的含磷化合物，使之成为作物能吸收的可溶物巨大芽孢杆菌与球形芽孢杆菌混合培养时具有固氮增效作用，非常适合制成微生物肥料。形态特征培养12h内，菌体呈粗大杆状，细胞柱状到椭圆或梨形，两端钝圆大小为2.6-6.0μm×1.5-2.0μm。有时链状，稍能游动，革兰氏染色阳性，严格好氧；24h后，菌体内逐渐形成芽孢失去游动性。芽孢椭圆形，大小为1.1-1.2μm×0.7-1.7m，位于杆状菌体中部48h菌体开始溶化，芽孢散出，不宜着色。菌落有光泽或稍暗，有时稍有皱纹。随菌龄增长，常呈黄色，长时间培养后，菌落和培养基变褐色或黑色。培养特性在营养琼脂培养基上，在孢子囊内形成不多于1个的抗热芽孢，为中生到端生，形状为椭圆形或圆形不等；菌落生长丰富，不扩展，有光泽或较暗，有时微皱，生长后期一般带黄色，长时间培养生长物和培养基可变成褐色或黑色。 在马铃薯葡萄糖琼脂培养基上菌落为圆形，开始半透明，后成乳白色，扁平内凹，时间长了成浅褐色。在合成培养基上透明凸起，约有臭味，属于氨化细菌一类。在液体培养基中菌液稍变混浊，液面不生成菌膜。在卵磷脂琼脂斜面上，菌苔较厚，带状，边缘整齐，灰白色，表面光滑。在卵磷脂琼脂平板上的菌落周围形成透明溶解圈。生理特性能利用多种糖类，水解淀粉，发酵葡萄糖、乳糖，蔗糖，产酸不产气，液化明胶，呈漏斗形，石蕊牛乳产酸并脒化。生长适温37℃， 25-30℃也能生长：生长pH范围6.0-8.0，最适pH为7.0-7.5。需氧性。分布范围孢子发生在土壤中。这个种的细菌也可存在于植物种子、马铃薯块茎中，但对植物无影响。主要价值1935年苏联学者P.A.蒙金娜发现巨大芽孢杆菌能分解卵磷脂或核酸等有机磷化合物，并将其用于分解土壤中的有机磷化合物，开始了人工制造磷细菌肥料的研究。 巨大芽孢杆菌作为一种重要解磷细菌被广泛应用于农业生产中，将其优化培养制成菌剂肥料使用，可以提高土壤肥质，增产增收。近年来，随着微生物肥料在农业上的广泛应用，巨大芽孢杆菌以其在土壤中的解磷作用而被深入研究，是工业上生产解磷固钾肥的常用菌种，同时在水体处理和提高烟叶发酵增香效果上有独特作用。 巨大芽孢杆菌能降解有机磷农药和黄曲霉毒素。张广志等人从长期受有机磷农药污染的土壤中分离出3株能降解甲胺磷和甲基对硫磷的芽孢杆菌，其中2株为巨大芽孢杆菌。孙丰芹发现巨大芽孢杆菌TRS-3对黄曲霉毒素AFB1有去除作用，其发酵上清液降解AFB1的能力达到78.55%。 从生姜田土分离的细菌B1301鉴定为巨大芽孢杆菌。在盆栽条件下，B1301处理种姜能够有效地防治由茄伯克氏菌引起的生姜细菌性青枯病。前苏联等国研究结果表明，微生物巨大芽孢杆菌等细菌及其代谢产物—各种氨甚酸能有效地从矿石中溶解金。用巨大芽杆菌、肠膜芽孢杆菌等细菌浸出细粒浸染金2-3个月，浸出液中金浓度达到1.5-2. 15mg/L。 主要危害巨大芽孢杆菌属于耐热嗜冷菌，也是兼性厌氧菌，是冷藏食品中的腐败细菌之一。  巨大芽孢杆菌禾谷致病变种(B. megateriumpv.cerealis)能引起小麦的白色斑点病。 也为常见的油中腐生菌。

               金黄色葡萄球菌肺炎的常规护理方法！一、金黄色葡萄球菌肺炎有哪些症状呢？⒈症状：⑴原发性：常见于流感、麻疹及抗菌素选用过程中，以发热、咳嗽、咳脓血痰、胸痛为主要症状，肺内可见单个或多个脓肿灶。⑵继发性：又称血源性，发病较慢，临床上以高热、寒战、呼吸困难等败血症症状为突出表现，重症右有神志障碍、呼吸衰竭和休克;肺内为多发性小脓肿，皮肤及其他部位可见原发性化脓病灶。葡萄球菌性肺炎尽管来势凶猛。但有些病情并不严重。个别病程较为缓慢。有时形成慢性肺炎或慢性肺脓肿。临床症状与肺炎球菌性肺炎的临床症状相似。葡萄球菌性肺炎的特点是容易引起反复寒战。组织坏死伴脓肿形成和肺囊肿(大多见于婴幼儿);病情急且有明显衰竭。脓胸较常见。金黄色葡萄球菌主要存在于胸廓切开后的脓胸或胸壁外伤后血胸使用引流的脓胸中。⒉诊断：根据全身毒血症状，咳嗽、脓血痰，白细胞计数增高、中性粒细胞比例增加、核左移并有中毒颗粒和X线表现，可作出初步诊断。细菌学检查是确诊的依据，可行痰、胸腔积液、血和肺穿刺物培养。二、金黄色葡萄球菌肺炎该怎样治疗呢？⒈加强支持疗法，有原发感染灶者尽早清除。⒉抗菌素治疗：应早期、联合、长疗程，选用青霉素G或万古霉素;对耐青霉的金葡菌可选用苯唑青霉素、头孢菌素类，或与新一代喹诺酮类抗菌素合用。抗菌药物至少用4周以上。⒊大多数金黄色葡萄球菌产生青霉素酶，且对甲氧西林的耐药性正在增加。一般主张用一种能抗青霉素酶的青霉素(如苯唑西林或萘夫西林2g，静脉注射，每4～6小时1次。另一类主要药物是头孢菌素：常用的为头孢噻吩或头孢孟多2g，静脉注射，每4～6小时1次，头孢唑啉0。5～1。0g，静脉注射，每8小时1次，或头孢呋辛750mg，静脉注射，每6～8小时1次。第三代头孢菌素的效果不如diyi代或第二代制剂。林可霉素600mg静脉注射，每6～8小时1次对90%～95%菌株有效。⒋一般认为，对甲氧西林耐药的菌株，对所有β-内酰胺抗生素均有抵抗力。在许多医院，此类菌株占医院获得性葡萄球菌的30%～40%，而仅占社区获得性感染的5%。如怀疑或经体外药敏试验证明对甲氧西林耐药，一般用万古霉素。常用剂量为1g静脉注射，每12小时1次;有肾功能衰竭时适当调整用量。三、金黄色葡萄球菌肺炎辨证论治⒈邪袭肺卫：治法：疏风解表，宣肺化痰。方药：三拗汤或桑菊饮加减。三拗汤用于外感风寒之邪。方中麻黄、杏仁、甘草可宣肺散寒。如寒邪化热，证见发热汗出、咳嗽、痰黄，则可用麻杏石甘汤，用以解表清热、宣肺止咳。桑菊饮用于外感风热之邪，方中桑叶、菊花、薄荷、连翘辛凉解表，桔梗、杏仁、甘草、芦根宣肺止咳、清热生津。内热盛加黄芩、鱼腥草清肺泄热;口渴咽干者，可加沙参、花粉清热生津。⒉痰热壅肺：治法：清热化痰止咳;方药：麻杏石甘汤合《千金》苇茎汤加减。方中麻黄、杏仁宣肺化痰，配石膏可清泄肺热，芦根、薏以仁、杏仁、桃仁、冬瓜仁清热化痰解毒。若痰热盛，可加鱼腥草、瓜蒌、黄芩等加强清热解毒之功。⒊热毒内陷：治法：清热解毒，清心开窍。方药：清营汤加减方中犀角、生地、丹参清营凉血，配伍竹叶、黄连、银花、连翘清热解毒，使营分邪热转出气分而解。麦冬、玄参养阴清热。若见烦躁、谵语，可加服紫雪丹，以加强清热熄风之功。⒋正虚邪恋：治法：养阴清热，润肺化痰。方药：竹叶石膏汤加减。方中半夏、石膏、竹叶清余热化痰止咳，人参、麦冬、甘草、粳米益气养阴。可随症加沙参、生地、地骨皮以增养阴清虚热之功，或加入杏仁、桑白皮、瓜蒌皮以加强化痰止咳之力。⒌正虚欲脱：治法：回阳救逆，益气养阴。方药：参附汤合生脉散。方中人参、附子益气回阳救逆，人参、麦冬、五味子益气养阴，共奏回阳固脱之功。吸入疗法：通过雾化器将中药药液喷入呼吸道而达到治疗目的。可用鱼腥草注射液、麻杏石甘汤雾化液等。四、金黄色葡萄球菌肺炎的护理措施⒈护理：⑴防止金黄色葡萄球菌污染食品。⑵防止带菌人群对各种食物的污染：定期对生产加工人员进行健康检查，患局部化脓性感染(如疥疮，手指化脓等)，上呼吸道感染(如鼻窦炎，化脓性肺炎，口腔疾病等)的人员要暂时停止其工作或调换岗位。⑶对肉制品加工厂，患局部化脓感染的禽，畜尸体应除去病变部位，经高温或其他适当方式处理后进行加工生产。⒉金黄色葡萄球菌肺炎饮食宜忌饮食适宜：1宜吃抗菌消炎作用的食物;2宜吃富含优质蛋白食物;3宜吃易于润喉化痰的食物。⑴宜吃食物柠檬 柠檬富含维生素C，对人体发挥的作用犹如天然抗生素，具有抗菌消炎、增强人体免疫力等多种功效，可以起到一定的辅助治疗的效果。 每天350-500ml为宜。鱼 乌鱼含有全面而优质的蛋白质，常食可增强抗病能力，对患者身体恢复有帮助。 每日300-400克为宜。西红柿 西红柿具有助消化、润喉化痰、润肠通便作用，帮助营养物质的吸收，有利于提高免疫力的作用。 每天200-300克为宜。生食 炒用均可饮食禁忌：①忌吃油腻的食物;如猪油、肥肉、羊油、牛油; ②忌吃辛辣刺激的食物;如辣椒、花椒、胡椒、大蒜、生姜; ③忌吃刺激性的饮料;如啤酒、白酒、咖啡、浓茶。⑵忌吃食物小麻椒 肥肉是含有大量的油脂，容易滋养细菌，导致炎症加重，容易导致呼吸道分泌痰液，导致痰液不易咳出，不利于身体的恢复。 宜吃低脂的食物。花椒 花椒属于刺激性比较大的食物，容易刺激胃肠粘膜导致肠道粘膜水肿，充血，导致肠道营养物质吸收不良，免疫力下降，影响身体的恢复。 宜吃清淡的食物。白酒 白酒含有酒精，容易抑制肠道对营养物质的吸收，刺激细菌大量分泌，不利于身体的恢复。 宜吃没有刺激性的饮料。微生物菌种查询网专业为各企事业单位，科研院所，各级学校提供微生物菌种产品查询、购买服务！网站主要提供的产品：质控菌种，标准菌种，中国微生物菌种4万多株，细胞系/株1万多株其中金黄色葡萄球菌，大肠埃希氏菌（大肠杆菌），沙门氏菌，黑曲霉，铜绿假单胞菌，枯草芽孢杆菌，链球菌，白色念珠菌，志贺氏菌等为常用菌株。

                     药用真菌的菌种保藏方法！百欧博伟生物：菌种保藏可以保持优良菌种的生活力和遗传性状，降低菌种的衰亡程度，确保菌种为纯培养，防止杂菌和螨类的污染。下面小编主要为大家介绍一下药用真菌的菌种保藏方法。1、菌种的保藏方法菌种保藏的原理是利用干燥、低温和缺氧等环境条件降低孢子或菌丝的代谢活动，扼制其繁殖，减少其变异，使之处于休眠状态达到保持菌种原有优良性状的目的。常见的菌种保藏方法有琼脂斜面低温保藏法、石蜡油保藏法、沙土管保藏法、孢子滤纸条保藏法、冷冻低温保藏法、超低温液氮保藏法等。菌种的长期保藏最好由专门的药用真菌研究或菌种保藏机构进行。2、菌种的退化、老化及复壮措施(1)菌种的退化、老化：在药用真菌菌种传代过程中，常常会出现长势弱、出菇迟、产量低、质量差等现象，原来优良的性状渐渐消失，这是由于菌种的老化或退化造成的。菌种的老化主要是由于养分等外界条件的恶化所造成的，不具有遗传性。菌种退化的本质是染色体的变异，具有遗传性。可以根据不同菌种的特性及其种性老化、退化的原因，采取一系列的相应措施，进行菌种的提纯复壮，以保证菌种的优良种性。(2)防止退化、老化措施：一旦菌株出现了异常现象，首先要分清是老化还是退化，采取相应的防止菌种退化、老化的措施：①减少扩接：控制菌种移接次数。当获得优良菌种后，转管扩接z多不要超过5次。②防止基因突变：低温保藏菌种，一般宜在0～4℃。目前国内、外为防止菌种退化，均采用液态氨在超低温条件下保藏。③分离纯化：对保藏的优质菌种需要经常分离纯化，一般每次出菇后，都应挑选符合本品种特征的优良子实体进行组织分离，每年进行一次孢子分离，并经出菇鉴定后，选择性状优良者再进行组织分离。④菌种复壮：当某一菌种因环境条件不适宜、生长发育不良时，给予适宜的条件，菌丝会比原来长得旺盛，就叫复壮。复壮的措施很多，如选择该菌种适合的培养基、培养温度、环境、pH值、防止杂菌污染及避免多品种混合栽培等。⑤活化移植：菌种在保藏期间，通常每隔3～4个月要重新移植1次，并放在适宜的温度下培养1周左右，待菌丝基本布满斜面后，再用低温保藏。但应在培养基中添加磷酸二氢钾等盐类，使培养基pH变化不大。⑥更新养分：连续使用同一种木屑培养基，会引起菌种退化，应注意变换不同树种和配方比例的培养基。也可在配制中添加VE，制作斜面培养基，可增强菌种新的生活力，促进良性复壮。⑦改善环境：在制种过程中，应创造适宜的温度，并注意通风换气，保持室内干燥，使其在适宜的生态条件下生长，保持性状稳定。⑧保证菌种的纯培养：不用被杂菌污染的菌种，不要用同一个药用真菌种类的不同菌株混合或近距离相连接培养。微生物菌种查询网是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

幽门螺杆菌病是一种螺旋形、微厌氧、对生长条件要求十分苛刻的细菌。1983年首次从慢性活动性胃炎患者的胃黏膜活检组织中分离成功，是目前所知能够在人胃中生存的唯一微生物种类。2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，幽门螺杆菌（感染）在一类致癌物清单中。所致疾病幽门螺杆菌病包括由幽门螺杆菌感染引起的胃炎、消化道溃疡、淋巴增生性胃淋巴瘤等。危害幽门螺杆菌病的不良预后是胃癌。胃癌是全球最常见的恶性肿瘤之一，在癌症死亡原因中位列第二。在我国，每年大约有16万人死于胃癌。临床表现预防和控制胃癌已日益引起人们的关注。研究指出，幽门螺杆菌生存于人体胃幽门部位，是最常见的细菌病原体之一。世界有多半人口受到过幽门螺杆菌的感染，而在有些国家几乎90%的人都感染过这种细菌。人们通常是在幼年时就受到感染，5岁以下达到50%。这种细菌感染首先引起慢性胃炎，并导致胃溃疡和胃萎缩，严重者则发展为胃癌。据统计，初次感染幽门螺杆菌年龄较早的人群萎缩性胃炎及胃癌发生率高，幽门螺杆菌感染与胃癌死亡率的高低呈现平行关系。幽门螺杆菌寄生在胃黏膜组织中，67%～80%的胃溃疡和95%的十二指肠溃疡是由幽门螺杆菌引起的。慢性胃炎和消化道溃疡患者的普遍症状为：食后上腹部饱胀、不适或疼痛，常伴有其他不良症状，如嗳气、腹胀、反酸和食欲减退等。有些患者还可出现反复发作性剧烈腹痛、上消化道少量出血等。据此，专家们认为，及早发现幽门螺杆菌感染者，及时而有效地用抗菌素杀灭幽门螺杆菌，对预防和控制胃癌有重大意义。防治医学家们认为，彻底消灭幽门螺杆菌并非难事，90%的细菌感染者经过1～2周治疗后，体内的幽门螺杆菌往往能被消灭殆尽。他们建议，应当进行全民普查，至少应该对接受过胃部手术、有过胃病、或亲属中有过胃癌的人进行幽门螺杆菌的检查，并对感染者进行杀菌治疗，这样有望控制胃癌。

                  香菇、平菇菌种的接种与培养方法！香菇、平菇等栽培中的杂菌污染，已成了食用菌生产者最为担忧的问题。为了解决日益严重的杂菌污染，实现四季周年化制种栽培的需要，现将用塑料袋简易制种的方法介绍如下：一、培养基配方母种、原种、栽培种培养基配方：木屑78%、麸皮20%、石膏和糖各1％、杀菌剂0.2%。料水比为1：1.2—1：1.3。二、培养基的配制按以上配方比例称取各成分，先将木屑、麸皮、石膏等干培养料放在清扫干净的光滑水泥地面上用铁锹反复翻拌均匀。然后，按料水比称取干净冷水倒人塑料盆等容器中，把杀菌剂、糖放入水中用光滑木棍等反复搅动，待其完全溶解混匀后施入拌均匀的干培养料中，反复拌匀后即可装料。三、装料与灭菌装料时应选用厚度0.04毫米以上、不易脆裂、无破漏、韧性较强的优质聚丙烯或聚乙烯塑料袋装料，装料应松紧适度，装完料后把袋口扎紧即可进行常压灭菌。如条件有限，生产数量少，装完料后，可将培养料袋口扎紧，再套一个稍大的塑料袋扎紧袋口后放入大铁锅内，盖上木板或盖子，并在上面压上重物防止漂浮，然后向铁锅中倒入水以淹没培养料袋，再点火升温至100℃，维持2小时—3小时，出锅后移入接种室内，待温度下降后脱去外袋。当温度降至25℃后，即可进行接种。四、接种与培养接种可采用一端接种或分层接种法。菌种应选用适应性、抗逆性及分解力较强的速生高产优质无污染的健壮菌种，并适当增大接种量。一端接种应尽量用菌种覆盖住培养料面，让菌种优先占领培养料面形成生长优势，较快地萌发生长并控制杂菌的污染，接种后立即扎紧袋口即可进行培养。培养室应选用保温、密闭、通风等性能较好的地方，培养料袋应竖直放于培养架上或横放于培养架上，培养温度尽量控制在25℃—27℃，并保持相对稳定。应定期进行翻袋换位和消毒，并做好保温、通风、降湿等工作，一般在适温条件下培养30天左右，菌丝即可发满塑料袋。当菌丝体变成浓白色，挖取易成块时即可搬出培养室使用或入库保存。中国微生物菌种查询网专业为各企事业单位，科研院所，各级学校提供微生物菌种产品查询、购买服务！网站主要提供的产品：质控菌种，标准菌种，中国微生物菌种4万多株，细胞系/株1万多株其中金黄色葡萄球菌，大肠埃希氏菌（大肠杆菌），沙门氏菌，黑曲霉，铜绿假单胞菌，枯草芽孢杆菌，链球菌，白色念珠菌，志贺氏菌等为常用菌株。

                    布鲁氏菌知识解析及其检测方法！荧光偏振方法(Fluorescence polarisation assay， FPA)是以荧光素标记物作为示踪剂来检测抗原/抗体相互作用的一种简便技术，该方法属于同源性分析，分析物不需进行分离，因而该法简便快捷。FPA 诊断布鲁氏菌的特异性和敏感性几乎和竞争 ELISA (Competitive enzyme-linked immunosorbent assay，C-ELISA)相同，一次检测仅需15 min，即可完成上百份样品的检测，可应用于动物群体布鲁氏菌病的检疫、筛查和净化。FPA 检测方法在某些发达国家已经得到了大量应用，并经研制开发了商品化 FPA 检测试剂盒。而我国对 FPA 检测方法的研究起步较晚，目前尚无商品化 FPA 检测试剂盒，进出口贸易中牛、羊布鲁氏菌病 FPA 检测方法均依赖于使用进口试剂盒，因此开发布鲁氏菌荧光偏振抗体检测方法有其现实意义。本研究使用异硫氰酸荧光素 (Fluorescein isothiocyanate，FITC)标记的布鲁氏菌光滑型 LPS 的小分子片段脂多糖-O-链(O-polysaccharide，OPS) 作为抗原，通过对标记抗原、反应条件、结果判断标准等多方面条件的优化，建立敏感性和特异性良好的布鲁氏菌荧光偏振方法，为多种动物布病检测提供快速高通量的新技术手段。材料与方法一、材料⒈菌种：猪布鲁氏菌 S2 菌株(CVCC 70502)由本实验室保存。⒉实验用血清：布鲁氏菌病阳性血清国家标准品由本实验保存，布鲁氏菌病阴、阳性血清样本由本实验采集并保存。⒊主要试剂和仪器： 布鲁氏菌荧光偏振试剂盒购自 Diachemix 公司；胰大豆肉汤(TSB)和胰大豆琼脂(TSA)购自美国BD公司；异硫氰酸荧光素(FITC)、表面活性剂脱氧胆酸钠(Sodium deoxycholate)、三乙胺购自 Sigma 公司；SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒购自康为世纪公司。低温离心机购自 Sigma 公司；超声破碎仪购自新芝生物科技有限公司；Powerpac Universal 通用型电源购自美国 Bio-Rad 公司。二、方法⒈OPS 的提取及标记：(1) OPS 提取。鉴定合格的 B. suis 2 株二级种子，大量培养并灭活，参照世界动物卫生组织(OIE)编著的《陆生动物诊断试验和疫苗手册》提取 OPS。上清液置 100 倍蒸馏水透析过夜，用 PEG 8000 浓缩 40 倍，再次置于蒸馏水透析过夜，收集透析袋内容物，分装成 2 mL/瓶冻干保存，此即提纯的 OPS。 (2) OPS 鉴定与标记。参照徐先栋等改良的脂多糖快速银染方法对其进行银染。银染鉴定的 OPS进行标记，步骤如下：将4 mg OPS加入到2 mL 0.5% (体积比)的三乙胺溶液中，置 4 °C 超声处理 15 min，超声后加入 200 μL 100 mmol/L 的 EDTA 溶液，并用 10 μL 1 mol/L 的盐酸将溶液 pH 调为 5.0。取 20 mg FITC (异构体 I)溶解于 800 μL 0.25 mol/L 的硼酸溶液(pH 10.5)中，然后全部加入到 OPS 溶液中，继续超声处理 1 min。加入 1 mL 1.6%脱氧胆酸钠溶液，37 °C 搅拌孵育 18 h。4 °C、10 000×g 离心 30 min，浓缩，透析，将透析物用 PD-10 柱脱盐，收集所有 FITC-OPS 标记物，合并后再浓缩，透析，收集透析后产物 4 °C 保存，即为标记抗原原液。⒉FPA 试剂盒条件优化：(1) FPA 步骤。取反应板，将待检血清、阳性对照血清和阴性对照血清分别加入到 ELISA 板中，20 μL/孔，其中阳性对照血清加 1 孔(孔 1)和阴性对照血清各加 3 孔 (孔 2、3、4)。加样过程要注意避免产生气泡。每孔加 180 μL 样品稀释液，充分混匀。室温下孵育反应板 3−5 min。读取每孔的空白值。每孔立即加入 10 μL 荧光标记抗原，充分混匀。室温下孵育反应板 3−5 min。读取每孔偏振值。(2) 布鲁氏菌荧光偏振(FPA)检测试剂盒阴、 阳性对照血清的制备。采用虎红平板凝集试验、试管凝集试验及补体结合试验检测临床牛。3 种方法均检测为阴性的牛作为制备阴性血清的候选牛。对 3 种方法均检测为阳性的牛进行强毒株 M28 免疫，当效价超过 800 IU/mL 时制备阳性血清。(3) 布鲁氏菌荧光偏振试剂盒(FPA)标记抗原浓度及稀释液的选择。棋盘法分别采用阴性和阳性血清各两份，通过稀释抗原浓度与选用不同的样品稀释液确定该方法的抗原稀释浓度和zuijia样品稀释液。⒊临界值的确定：取经虎红平板凝集试验、试管凝集试验、补体结合试验检测均为阳性的血清 148 份、阴性血清 155 份，测定偏振值。采用 SPSS17.0 软件对检测结果进行分析。使用非参数法构建 ROC 曲线，并以 Youden 指数zuida的切点作为阴性和阳性判断的临界点，同时确定该试剂盒的敏感性和特异性。⒋重复性试验及保存期试验：制作 3 批试剂盒 (分别命名为 201506、201507、201508)，使用由本实验室采集并保存的阳性血清测定试剂盒批内和批间的重复性。⒌临床样本检验：将临床采集的 400 份样品分别使用本实验建立的 FPA 方法和进口 FPA 试剂盒进行检测，比较其差异性。中国微生物菌种查询网是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

链格孢属是一种在自然界广泛分布的暗色真菌，是土壤、植物、食品、工业材料上常见的腐生菌，也是实验室常见污染菌。链格孢属隶属于真菌界、子囊菌门、子囊菌亚门、座囊菌纲、格孢腔目、孢腔菌科。属内有50多个种，最常见的为互格链格孢。 链格孢(Alternaria Nees) 是经济上重要的真菌属之一。大多数种类兼性寄生于植物上，引起多种经济植物病害，造成田间和产后损失。有几个链格孢小孢子种可侵染人和动物，引起皮癣、甲癣、颚骨髓炎等疾病。链格孢产生的某些真菌毒素是重要的致癌因素。另一方面，链格孢也是有应用潜力的生物资源，如一些链格孢次生代谢物具有杀虫、杀菌和杀原生生物活性。长柄链格孢中某些菌株分生孢子壁中含有激发子组份，可被用来制成防治烟草赤星病的生防制剂等。简介链格孢属(Alternaria Nees)是全球分布最广，经济上重要的半知菌类真菌之一。95%以上的种类兼性寄生于植物上，引起多种植物病害，造成全球性的田间和产后巨大的经济损失，链格孢还会引起水果腐霉病。有几个链格孢小孢子种可侵染人和动物，引起皮癣、甲癣、颚骨髓炎等疾病。链格孢产生的某些真菌毒素是重要的致癌因素。另一方面，链格孢也是有应用潜力的生物资源，某些链格孢种高产纤维素酶或可开发为生防制剂，作为植物内生菌的一些链格孢可产生长春碱、紫杉醇等抗癌药物。由于链格孢属真菌中绝大多数种类有性世代的不明或缺失，造成鉴定和分类的困难。传统的分类主要是以分生孢子和产孢结构的形态为根据的，而形态特征受营养基质和温、湿、光、pH等条件的影响，变异幅度大，难于准确鉴定到种，因而导致了大量的模糊种名和该属真菌分类的混乱状况。特征外观：菌落絮状，生长迅速，初期暗白色，老后变暗；背面褐色。光学显微镜下：菌丝及分生孢子梗褐绿色，具横隔。分生孢子倒棒状，表面具横隔和纵隔，成壁砖状结构，横隔较粗，多数为3个，末端喙短，排成较长的直链或斜链；褐绿色，大小较一致，约35～42μm×6～20μm，空气中多见。有性态链格孢属真菌的有性态在自然条件下难以见到, 仅有十余种链格孢的有性态在实验室条件下被发现。虽然有多个属被认为是链格孢的有性态， 但Simmons通过对其有性态及相似属的比较研究后，认为都属于李维菌属(Lewia Barr& simmons)。生物学特性对梨黑斑病病原菌链格孢菌(Alternaria alternata)生物学特性的研究结果表明，不同菌株在PSA 平板上培养，平均日生长速率、产孢量、菌落颜色以及菌落厚度有显著不同。病原菌生长适宜温度为20～30℃，最适温度为28℃，孢子萌发的最适温度为28℃；孢子萌发必须具备相对湿度98%以上的高湿条件，在水滴中萌发率最高；病原菌菌丝适宜生长的pH值为4～12，最适生长pH 值为7～8，孢子萌发最适pH 值为7～8，病原菌培养一段时间后培养基的pH 值会发生改变。该病原菌对多种单糖、双糖和多糖等碳源及有机氮、无机氮均可利用，最适碳源为蔗糖，最适氮源为蛋白胨，硫酸胺和氯化胺会抑制病原菌菌丝生长。发生规律链格孢霉菌丝黑色，大量存在于土壤、空气和作为培养料的各种有机质上。其孢子通过空气传播。在灭菌不彻底，无菌操作不严及培养料含水量偏高和温度大的条件下，有利于发生。

               菌种保藏的目的与原理及常用的方法！菌种保藏(culture preservation，culture collection)是指保持微生物菌株的生活力和遗传性状的技术。目的在于把从自然界分离到的野生型，或经人工选育得到的变异型纯种，使其存活、不丢失、不污染杂菌、不发生或少发生变异，保持菌种原有的各种特征和生理活性。基本原理是使微生物的生命活动处于半永久性的休眠状态，也就是使微生物的新陈代谢作用限制在zuidi范围内。干燥、低温和隔绝空气是保证获得这种状态的主要措施。有针对性地创造干燥、低温和隔绝空气的外界条件，就是微生物菌种保藏的基本技术。常用的方法有冻干保藏法、深低温保藏法、液氮保藏法、矿油封藏法、固体曲保藏法、砂土管保藏法、琼脂穿刺保藏法等。日常工作中，常选用4℃冰箱进行短时间的菌种保藏。 一、目的微生物在使用和传代过程中容易发生污染、变异甚至死亡，因而常常造成菌种的衰退，并有可能使优良菌种丢失。菌种保藏的重要意义就在于尽可能保持其原有性状和活力的稳定，确保菌种不死亡、不变异、不被污染，保持菌株优良性状不退化，保持优良菌株存活，以达到便于研究、交换和使用等诸方面的需要。 二、原理菌种保藏有多种方法，其原理大多大同小异，主要是运用一些方式尽量降低生物体内的代谢，达到延长生命，减少变异的目的。通常采用的方法为低温、缺氧、干燥。低温主要对菌种产生两方面的影响，首先，较低的温度可以减缓机体细胞的酶活，降低新陈代谢，达到保藏菌种的目的。其次，低温同时会导致菌体诱发菌丝自溶机制，如果降温过程失误，同样会造成机体的机械损伤和溶质损伤。微生物具有容易变异的特性，因此，在保藏过程中，必须使微生物的代谢处于最不活跃或相对静止的状态，才能在一定的时间内使其不发生变异而又保持生活能力。低温、干燥和隔绝空气是使微生物代谢能力降低的重要因素，所以，菌种保藏方法虽多，但都是根据这三个因素而设计的。  三、具体方法⒈传代培养保藏法包括又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等，培养后于4-6℃冰箱内保存。其中斜面培养法是将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后，棉塞部分用油纸包扎好，移至2-8℃的冰箱中保藏。保藏时间依微生物的种类而有不同，霉菌、放线菌及有芽孢的细菌保存2-4个月，移种一次。酵母菌两个月，细菌zuihao每月移种一次。此法为实验室和工厂菌种室常用的保藏法，优点是操作简单，使用方便，不需特殊设备，能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异与污染杂菌等。缺点是容易变异，因为培养基的物理、化学特性不是严格恒定的，屡次传代会使微生物的代谢改变，而影响微生物的性状，污染杂菌的机会亦较多。⒉液体石蜡覆盖保藏法液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法，能够适当延长保藏时间，它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡，一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，另一方面可阻止氧气进入，以减弱代谢作用。本方法的原理是在长好的斜面菌上覆盖灭菌的液体石蜡，达到菌体与空气隔绝，使菌处于生长和代谢停止状态，同时石蜡油还防止水分蒸发，在低温下达到较长期的保藏菌种的目的。保藏温度要求在-4-4℃下，液体石蜡法适用于不产孢子的菌种。具体的操作方法：⑴将液体石蜡分装于三角烧瓶内，塞上棉塞，并用牛皮纸包扎，1.05kg/cm，121℃灭菌30分钟，然后放在40℃温箱中，使水汽蒸发掉，备用。⑵将需要保藏的菌种，在最适宜的斜面培养基中培养，使得到健壮的菌体或孢子。⑶用灭菌吸管吸取灭菌的液体石蜡，注入已长好菌的斜面上，其用量以高出斜面顶端1cm为准，使菌种与空气隔绝。 ⑷将试管直立，置低温或室温下保存（有的微生物在室温下比冰箱中保存的时间还要长）。 此法实用而效果好。霉菌、放线菌、芽孢细菌可保藏2年以上不死，酵母菌可保藏1-2年，一般无芽孢细菌也可保藏1年左右，甚至用一般方法很难保藏的脑膜炎球菌，在37℃温箱内，亦可保藏3个月之久。此法的优点是制作简单，不需特殊设备，且不需经常移种。缺点是保存时必须直立放置，所占位置较大，同时也不便携带。从液体石蜡下面取培养物移种后，接种环在火焰上烧灼时，培养物容易与残留的液体石蜡一起飞溅，应特别注意。⒊载体保藏法载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体，如土壤、沙子、硅胶、滤纸上，而后进行干燥的保藏法，例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。（一）沙土保藏法⑴取河沙加入10%稀盐酸，加热煮沸30分钟，以去除其中的有机质。⑵倒去酸水，用自来水冲洗至中性。⑶烘干，用40目筛子过筛，以去掉粗颗粒，备用。⑷另取非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土，加自来水浸泡洗涤数次，直至中性。⑸烘干，碾碎，通过100目筛子过筛，以去除粗颗粒。（二）滤纸保藏法⑴将滤纸剪成0.5×1.2cm的小条，装入0.6×8cm的安瓿管中，每管1-2张，塞以棉塞，1.05 kg/cm，121℃灭菌30分钟。⑵将需要保存的菌种，在适宜的斜面培养基上培养，使充分生长。⑶取灭菌脱脂牛乳1-2ml滴加在灭菌培养皿或试管内，取数环菌苔在牛乳内混匀，制成浓悬液。⑷用灭菌镊子自安瓿管取滤纸条浸入菌悬液内，使其吸饱，再放回至安瓿管中，塞上棉塞。⑸将安瓿管放入内有五氧化二磷作吸水剂的干燥器中，用真空泵抽气至干。⑹将棉花塞入管内，用火焰按图Ⅶ-13熔封，保存于低温下。⑺需要使用菌种，复活培养时，可将安瓿管口在火焰上烧热，滴一滴冷水在烧热的部位，使玻璃破裂，再用镊子敲掉口端的玻璃，待安瓿管开启后，取出滤纸，放入液体培养基内，置温箱中培养。细菌、酵母菌、丝状真菌均可用此法保藏，前两者可保藏2年左右，有些丝状真菌甚至可保藏14-17年之久。此法较液氮、冷冻干燥法简便，不需要特殊设备。⒋寄主保藏法寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物，如病毒、立克次氏体、螺旋体等，它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代，此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。冷冻保藏法可分低温冰箱（-20—-30℃，-50—-80℃）、干冰酒精快速冻结（约-70℃）和液氮（-196℃）等保藏法，其中最常见的是甘油管冷冻保藏法。甘油管冷冻保藏法是利用微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理达到保藏目的。其方法是将80%的甘油高压蒸汽灭菌待用。将培养好的斜面菌种用无菌水制成高浓度的菌悬液。取1ml灭菌甘油放入与甘油充分混匀，使甘油浓度约为10%-30%，于-70℃下冻存。-20℃保存时间较短。或采用体积比为8：2的甘油-生理盐水，加入新鲜培养的菌体肉汤，混合均匀后至-20℃冰箱保存。该方法适用于一般细菌的保存，同时也适用于链球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌种，适用范围广，操作简便，效果好，无变异现象发生。甘油-生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液，其原因可能是加入生理盐水适当降低了甘油的高渗作用，且有肉汤培养物适量增加保存液的营养成分，从而更好地保护了待保存的菌株。⒌冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度（-70℃左右）下快速冷冻，然后在减压下利用升华现象除去水分（真空干燥），其中真空冷冻干燥法最常见。真空冷冻干燥保藏法是兼具低温、干燥、除氧三方面菌种保藏的主要因素，除不宜于丝状真菌的菌丝体外，对病毒、细菌、放线菌、酵母及丝状菌孢子等各类微生物都适用，不宜用冻干法保存的微生物不到2%。真空冷冻干燥法是在低温下快速将细胞冻结，然后在真空条件下干燥，使微生物的生长和酶活动停止。为了防止在冷冻和水分升华过程中对细胞的损害，要采用保护剂来制备细胞悬液，使菌在冻结和脱水过程中起到保护作用的溶质，通过氢键和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。即是使样品中的水分在冰冻状态下，抽真空减压，使冻结的冰直接升华为水蒸气，使样品达到干燥。干燥后的微生物在真空下封装，与空气隔绝，达到长期保藏的目的。 北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

                   食品中沙门氏菌的检测方法研究！ 沙门氏菌是一个统称，泛指2 000多种有紧密连系的细菌，包括引起食物中毒，导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。虽然只有少数人因沙门氏菌而患病，但是，在世界范围内的细菌性食物中毒事件中，由沙门氏菌引起的占大多数。因此，采用科学、合理的方法检验食品中沙门氏菌，已经成为了人们较关心的问题之一。本文缔一生物为您从选择性增菌、分离培养、生化与血清学确证试验3个方面入手，带你了解沙门氏菌检测技术。沙门氏菌检验方法按照GB 4789.4―2016中的要求，沙门氏菌检验有5个基本步骤：前增菌、选择性增菌、选择性平板分离（BS，36 ℃±1 ℃，40～48 h；XLD或HE或沙门氏菌显色培养基，36 ℃±1 ℃，18～24 h）；生化试验，鉴定到属；血清凝集试验。1.前增菌、选择性增菌试验BPW，即前增菌，所使用的增菌液会使受损的沙门氏菌复苏，增菌时间为8～18 h，增菌时间不适合太长，否则杂菌也会相应增多。选择性增菌液SC中的亚硫酸盐可以起到抑菌的作用，胱氨酸可以促进沙门氏菌的生长，最适的增菌温度为36 ℃，时间为18～24 h。TTB中的主要抑菌剂为四硫磺酸钠和磺绿，最适增菌温度为42 ℃，时间为18～24 h，比较适合其他沙门氏菌的增菌。因此，需要同时使用SC和TTB，这样可以提高目标菌的检出率。用途培养基品名货号前增菌缓冲蛋白胨水MV614选择性增菌TTB增菌液（四硫磺酸钠煌绿）M1255，M032，M327SC增菌液（亚硒酸盐胱氨酸）MV0252.分离培养试验分离培养试验中，不同培养基的选择性强弱不同，1种培养基不可能适合所有的沙门氏菌，所以，要同时使用2种以上的培养基，必须用1个BS培养基，再用1个XLD或HE或显色培养基，形成互补，提高检出率，以防漏检。根据特异性的酶底物反应，可对沙门氏菌一步清晰鉴别。沙门氏菌呈淡紫色菌落，并有紫色光晕，大肠杆菌和其他β-葡萄糖醛酸酶阳性菌都显示为蓝色，其他微生物菌落为无色，且添加的是植物源蛋白胨，有效避免了传播疯牛病风险，产品特异性强。3.生化试验和血清学试验　在生化试验和血清学试验中，要注意以下几点：①分离纯化可疑菌落，这一步至关重要，它需要多次纯化，如果菌落不纯，会直接影响生化试验的结果，尤其像山梨醇、甘露醇这类观察接种前后颜色变化的项目。②TSI易制成高层斜面，采用18 mm×180 mm的试管，高层斜面琼脂分装量约为试管容量的1/3，并且斜面与底层柱高的比例为1∶2，如果底层柱高部分过少，就会影响穿刺后底层现象的观察效果。③在靛基质试验中，用到的蛋白胨水中应含有丰富的色氨酸，因此，每批蛋白胨应先用已知菌种鉴定后方可使用。④在血清学鉴定中，做玻片凝集试验时，需要检查培养物有无自凝性，即生理盐水对照。生理生化试验，耗时较长，过程繁琐可采用试剂盒检测，这里推荐一款沙门氏菌鉴定试剂（卡）盒——HiMedia公司沙门氏菌鉴定试剂盒（KB0011），该试剂盒含12项检查，包括7项传统的生化检查和5项糖发酵检查。通过微生物发酵反应，培养基颜色发生变化。该试剂盒包含12个小孔，每个小孔包含一种生化反应，一次性可出结果，大大减少了试验试剂配制时间。鉴定的沙门氏菌物种：Most serotypesSerotype TyphiSerotype Choleraesuis subsp. choleraesuisSerotype Paratyphi ASerotype GallinarumSerotype PullorumS. serotype TyphimuriumS. choleraesuis subsp. arizonaeS. choleraesuis subsp. diarizonaeS. choleraesuis subsp. houtenaeS. choleraesuis subsp. indicaS. choleraesuis subsp. salamaeS. enterica subsp. salamae, Group IIS. enterica subsp. arizonae, Group IIIaS. enterica subsp. diarizonae, Group IIIbS. enterica subsp. houtenae, Group IVS. bongori，Group V StrainsS. enterica subsp. indica，VI Strains沙门氏菌病是公共卫生学中具有重要意义的人畜共患病种之一，其病原沙门氏菌属于肠道细菌科，高效的检测方法，对人类健康有至关重要。欢迎访问中国微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens ) 又称灵杆菌，一种产生鲜红色素的细菌，存在于空气和水中，可生长在动、植物性食品中。为细菌中最小者，约0.5×(0.5～1.0)微米。近球形短杆菌，但形态多样。 粘质沙雷氏菌广泛分布于自然界，是水和土壤中的常居菌群，亦是临床上常见的条件致病菌，在机体免疫功能降低时可引起肺部和尿道感染以及败血症。形态特征菌株的菌落基本上是凸起，中心不透明，边缘不规则，大小为1~2.5 mm，均产生红色色素(图版Ⅰ-3)。.在营养琼脂平板上可产生树枝状向左旋的特别菌落(图版Ⅰ-1)；在特殊条件下培养时可出现由小逐渐变大、连续有序排列的双列菌落(图版Ⅰ-2)。菌体为革兰氏阴性短杆菌，大小为(1~1.3)μm×(0.7~1.0)μm，周生鞭毛，有动力，无荚膜，无芽孢。生理生化特征28℃下培养产生红色色素，37℃下培养不产红色色素而恢复在28℃下培养又产生红色色素；革兰氏阴性，周生鞭毛；从耐紫外线照射试验中发现菌株中具有抗紫外线的物质存在；左旋状菌落和双列菌落如何形成尚未清楚。生防特点以黄胫小车蝗成虫为供试虫对HBZBS-1菌株进行了室内毒力测定。结果表明,该菌株对黄胫小车蝗有很高的杀虫毒力。HBZBS-1菌株培养原液对黄胫小车蝗成虫有很好的杀虫效果,感染4d后的死亡率达87%。室内重复试验结果表明,该菌株对黄胫小车蝗成虫的杀虫效果稳定。将培养液稀释10倍后,对黄胫小车蝗的杀虫效果已明显降低,这说明初始感染量是影响其杀虫效果的重要因子。含少量活菌体的上清液的杀虫效果明显高于不含活菌体的上清液的杀虫效果;纯活菌体菌液对黄胫小车蝗成虫的防治效果为83%,与培养母液的杀虫效果基本相当,明显高于其他处理液的防治效果。由此可见，对黄胫小车蝗起主要杀虫作用的是活菌体,纯菌体代谢产物也表现出一定的杀虫毒力,但杀虫活性较低。经100℃水浴处理的含少量菌体的上清液对黄胫小车蝗成虫无杀虫活性,但经紫外线处理的含少量菌体的上清液仍具有一定的杀虫活性。说明HBZBS-1菌株及具有杀虫活性的代谢产物经一定强度的紫外线照射而不至丧失活性,但耐热性较差。代谢产物灵菌红素（Prodigiosin，正式名称为2-methyl-3-pentyl-6-methoxyprodiginine）是Prodiginin（中文名不详）的一种。它具有Prodiginin的基本结构，也就是三吡咯环，其中的一个吡咯环C2上带有一个甲基，C3上则有一个戊基。灵菌红素是一种红色物质，可由粘质沙雷氏菌（Serratia marcescens）等细菌合成的次级代谢产物。虽然其对于生产者的作用和意义还不是彻底明了，但它已被发现具有多种生物活性作用，能抗癌，抗微生物，抗疟疾，抗霉，免疫抑制的作用。其中抗癌方面，因为其具有癌组织的高针对性和对正常细胞则表现的低毒害作用，而成为一种非常有潜力的抗癌物质

                BIOBW生物常用培养基的制作方法！1、细菌培养基配方一 牛肉膏琼脂培养基牛肉膏 0.3克 蛋白胨 1.0克氯化钠 0.5克 琼脂 1.5克水 1000毫升在烧杯内加水100毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。待烧杯内各组分溶解后，加入琼脂，不断搅拌以免粘底。等琼脂完全溶解后补足失水，用10%盐酸或10%的氢氧化钠调整pH值到7.2～7.6,分装在各个试管里，加棉花塞，用高压蒸汽灭菌30分钟。配方二 马铃薯培养基取新鲜牛心（除去脂肪和血管）250克，用刀细细剁成肉末后，加入500毫升蒸馏水和5克蛋白胨。在烧杯上做好记号，煮沸，转用文火炖2小时。过滤，滤出的肉末干燥处理，滤液pH值调到7.5左右。每支试管内加入10毫升肉汤和少量碎末状的干牛心，灭菌，备用。配方三 根瘤菌培养基葡萄糖 10克 磷酸氢二钾 0.5克碳酸钙 3克 硫酸镁（ ） 0.2克酵母粉 0.4克 琼脂 20克水 1000毫升 1%结晶紫溶液 1毫升先把琼脂加水煮沸溶解，然后分别加入其他组分，搅拌使溶解后，分装，灭菌，备用。2、放线菌培养基配方一 淀粉琼脂培养基（高氏培养基）可溶性淀粉 2克 硝酸钾 0.1克磷酸氢二钾 0.05克 氯化钠 0.05克硫酸镁 0.05克 硫酸亚铁 0.001克琼脂 2克 水 1000毫升先把淀粉放在烧杯里，用5毫升水调成糊状后，倒入95毫升水，搅匀后加入其他药品，使它溶解。在烧杯外做好记号，加热到煮沸时加入琼脂，不停搅拌，待琼脂完全溶解后，补足失水。调整pH值到7.2～7.4，分装后灭菌，备用。配方二 面粉琼脂培养基面粉 60克 琼脂 20克水 1000毫升把面粉用水调成糊状，加水到500毫升，放在文火上煮30分钟。另取500毫升水，放入琼脂，加热煮沸到溶解后，把两液调匀，补充水分，调整pH值到7.4，分装，灭菌，备用。3、真菌培养基配方一 萨市（Sabouraud’s）培养基蛋白胨 10克 琼脂 20克麦芽糖 40克 水 1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后，加热，不断搅拌，待琼脂溶解后，加入40克麦芽糖（或葡萄糖），搅拌，使它溶解，然后分装，灭菌，备用。本培养菌是培养许多种类真菌所常用的。配方二 马铃薯糖琼脂培养基把马铃薯洗净去皮，取200克切成小块，加水1000毫升，煮沸半小时后，补足水分。在滤液中加入10克琼脂，煮沸溶解后加糖20克（用于培养霉菌的加入蔗糖，用于培养酵母菌的加入葡萄糖），补足水分，分装，灭菌，备用。把这培养基的pH值调到7.2～7.4，配方中的糖，如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。配方三 黄豆芽汁培养基黄豆芽 100克 琼脂 15克葡萄糖 20克 水 1000毫升洗净黄豆芽，加水煮沸30分钟。用纱布过滤，滤液中加入琼脂，加热溶解后放入糖，搅拌使它溶解，补足水分到1000毫升，分装，灭菌，备用。把这培养基的pH值调到7.2～7.4，可用来培养细菌和放线菌。配方四 豌豆琼脂培养基豌豆 80粒 琼脂 5克水 200毫升取80粒干豌豆加水，煮沸1小时，用纱布过滤后，在滤液中加入琼脂，煮沸到溶解，分装，灭菌，备用。4、食用菌菌种培养基配方一 马铃薯-蔗糖–琼脂培养基20%马铃薯煮汁 1000毫升蔗糖 20克 琼脂 18克把马铃薯洗净去皮后，切成小块。称取马铃薯小块200克，加水1000毫升，煮沸20分钟后，过滤。在滤汁中补足水分到1000毫升，即成20%马铃薯煮汁。在马铃薯煮汁中加入琼脂和蔗糖，煮沸，使它溶解后，补足水分，分装，灭菌，备用。使用该培养基对pH值要求不严格，可以不测定。配方二 综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁 1000毫升磷酸二氢钾 3克 硫酸镁 1.5克葡萄糖 20克 维生素 10毫克琼脂 18克先配制20%马铃薯煮汁，方法同上。在煮汁中加入上述各种组分，加热溶解后补足水分，调整pH值到6。分装，灭菌，备用。该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。中国微生物菌种查询网是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                    生物安全柜的分类与工作原理！一、生物安全柜的概念生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时，用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料，使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计。作用是防止操作者和环境暴露于实验过程中产生的生物气溶胶的负压过滤排风柜，是防止实验室获得性感染的主要设备。二、生物安全柜的工作原理将柜内空气向外抽吸，使柜内保持负压状态，通过垂直气流来保护工作人员；外界空气经高效空气过滤器过滤后进入安全柜内，以避免样品被污染；柜内的空气也经过过滤器的过滤后再排到大气中，以保护环境。注：气溶胶指悬浮在气体介质中、粒径一般为0.001μm~100μm的固态和液态微粒所形成的胶溶态分散体系。三、生物安全柜的分类我国于2006年正式实施《中华人民共和国医药行业标准：生物安全柜》（YY0569~2005），根据气流及隔离屏障设计结构，将生物安全柜分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级。1、一级生物安全柜：可保护工作人员和环境而不保护样品，其气流原理和实验室通风橱基本相同，不同之处在于排气口安装有HEPA过滤器，将外排气流过滤进而防止微生物气溶胶扩散造成污染。一级生物安全柜本身无风机，依赖外接通风管中的风机带动气流，由于不能保护柜内产品，目前已较少使用。2、二级生物安全柜：目前应用*为广泛的柜型，按照《中华人民共和国医药行业标准YY0569-2005生物安全柜》中的规定，二级生物安全柜依照入口气流风速、排气方式和循环方式可分为4个级别：A1型，A2型，B1型和B2型，所有的二级生物安全柜都可提供工作人员、环境和产品的保护，A1型安全柜前窗气流速度*小量或测量平均值应至少为0.38m/s。无内部循环气流，*的气体通过排气口过滤排出。A2型安全柜前窗气流速度*小量或测量平均值应至少为0.5m/s。70%气体通过HEPA过滤器再循环至工作区，30%的气体通过排气口过滤排出。二级B型生物安全柜均为连接排气系统的安全柜：连接安全柜排气导管的风机连接紧急供应电源，目的在断电下仍可保持安全柜负压，以免危险气体泄漏如实验室。其前窗气流速度*小量或测量平均值应至少为0.5m/s(100fpm)。B1型70%气体通过排气口HEPA过滤器排除，30%的气体通过供气口HEPA过滤器再循环至工作区。B2型为*全排型安全柜，无内部循环气流，可同时提供生物性和化学性的安全控制，可以操作挥发性化学品和挥发性核放射物作为添加剂的微生物实验。3、三级生物安全柜：为生物安全防护等级为4级实验室而设计的，柜体完全气密，工作人员通过连接在柜体的手套进行操作，俗称手套箱（Golvebox），试验品通过双门的传递箱进出安全柜以确保不受污染，适用于高风险的生物试验，如，进行SARS、埃博拉病毒相关实验等；根据生物安全柜的强制性行业标准《中华人民共和国医药行业标准YY0569-2005生物安全柜》规定，只有获得国家食品药品监督管理局颁发的三类医疗器械注册证的产品才能真正保护操作人员、实验室环境和操作样本；生物安全柜提供对人/样品及环境的三重保护。北京百欧博伟生物技术有限公司拥有Biolog微生物鉴定系统，超低温冰箱，生物安全柜等仪器设备可进行对微生物分离、鉴定等常规的分子实验研究。对我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展的需求进行积极的面对社会乃至国外收集保藏提供微生物菌种资源。在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供微生物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。除此之外，我们还拥有对菌种、细胞、培养基、配套试剂等产品需求者的极优质服务，对购买项目的前期资料提供,中期合同保证,后期货物跟踪到最终售后的确保项目准确到位，都有相关人士进行维护,确保您在中国微生物菌种查询网中获得z优质服务！也正因为此，北京百欧博伟生物技术有限公司与国内外多家研制单位、生物制药、第三方检测机构和科研院所院校、化工企业有着良好、长期和稳定的合作关系！

阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)是肠杆菌目肠杆菌科肠杆菌属的一种细菌，广泛存在于自然界中，在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出，是肠道正常菌种之一。基本信息阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae)广泛存在于自然界中，在人和动物的粪便水、泥土、植物中均可检出是肠道正常菌种之一，但可作为条件致病菌随着头孢菌素的广泛使用阴沟肠杆菌已成为医院感染越来越重要的病原菌，其引起的细菌感染性疾病，常累及多个器官系统，包括皮肤软组织感染、泌尿道感染呼吸道感染以及败血症等由于阴沟肠杆菌能产生超广谱β-内酰胺酶(extended-spectrum β-lactamases，ESBLs)和Amp C酶耐药情况严重，给临床治疗带来了新的挑战。发病机制作为革兰阴性细菌内毒素起着致病作用除此之外该菌对消毒剂及抗生素有强烈的抵抗能力这是渐增多的医院感染的重要因素。其原因是它能很快获得对抗生素，尤其是对β-内酰胺类抗生素的耐药性应引起临床医师的重视。1.宿主防御功能减退(1)局部防御屏障受损：烧伤、创伤手术某些介入性操作造成皮肤黏膜的损伤，使阴沟肠杆菌易于透过人体屏障而入侵。(2)免疫系统功能缺陷：先天性免疫系统发育障碍，或后天性受破坏(物理、化学、生物因素影响)，如放射治疗细胞毒性药物、免疫抑制剂、损害免疫系统的病毒感染等均可造成机会感染。2.为病原体侵袭提供了机会 各种手术、留置导尿管静脉穿刺导管内镜检查机械通气等的应用使得阴沟肠杆菌有了入侵机体的通路从而可能导致感染3.阴沟肠杆菌产生β-内酰胺酶 阴沟肠杆菌既可产生ESBIs，又可产生Amp C酶导致其对多种抗生素高度耐药给临床治疗带来困难。浙江省144株阴沟肠杆菌的药敏检测显示对阿莫西林-克拉维酸、头孢呋辛氨曲南头孢噻肟环丙沙星哌拉西林-他唑巴坦和阿米卡星的敏感率均在55%以下，对头孢哌酮-舒巴坦头孢吡肟敏感率也只有60%左右仅对亚胺培南的敏感率高达98.61%，其中高产Amp C酶菌株占24.31%，产ESBLs菌株占36.81%。预防预后： 早期合理选择敏感抗菌药物治疗预后良好，如伴有基础疾病或免疫力低下者病死率达21%～71%提示阴沟肠杆菌感染者预后较差。预防：1.加强劳动保护，避免外伤及伤口感染保护皮肤及黏膜的完整与清洁。2.做好医院各病房的消毒隔离及防护工作，勤洗手防止致病菌及条件致病菌在医院内的交叉感染慢性带菌的医护人员应暂调离病房并给予治疗。3.合理使用抗菌药物及肾上腺皮质激素注意防止菌群失调。出现真菌和其他耐药菌株的感染时应及时调整治疗。4.在进行各种手术、器械检查、静脉穿刺留置导管等技术操作时，应严密消毒，注意无菌操作。5.积极控制、治疗白血病糖尿病慢性肝病等各种易导致感染的慢性疾病。

                    光合细菌的生长环境与作用原理！光合细菌(Photosynthetic Bacteria,简称PSB)是地球上出现最早、自然界中普遍存在、具有原始光能合成体系的原核生物，是在厌氧条件下进行不放氧光合作用的细菌的总称，是一类没有形成芽孢能力的革兰氏阴性菌，是一类以光作为能源、能在厌氧光照或好氧黑暗条件下利用自然界中的有机物、硫化物、氨等作为供氢体兼碳源进行光合作用的微生物。光合细菌广泛分布于自然界的土壤、水田、沼泽、湖泊、江海等处，主要分布于水生环境中光线能透射到的缺氧区。⒈生长环境在水产养殖中，能够降解水体中的亚硝酸盐、硫化物等有毒物质，实现充当饵料、净化水质、预防疾病、作为饲料添加剂等功能。光合细菌适应性强，能忍耐高浓度的有机废水，对酚、氰等毒物有一定忍受和分解能力，具有较强的分解转化能力。它的诸多特性，使其在无公害水产养殖中具有巨大的应用价值。⒉作用原理光合细菌在有光照缺氧的环境中能进行光合作用，利用光能进行光合作用，利用光能同化二氧化碳或其他有机物，与绿色植物不同的是,它们的光合作用是不产氧的。光合细菌细胞内只有一个光系统，即PSI，光合作用的原始供氢体不是水，而是H2S （或一些有机物），这样它进行光合作用的结果是产生了H2，分解有机物，同时还能固定空气的分子氮生氨。光合细菌在自身的同化代谢过程中，又完成了产氢、固氮、分解有机物三个自然界物质循环中极为重要的化学过程。这些独特的生理特性使它们在生态系统中的地位显得极为重要。 除此之外，细胞内还含有碳素储存物质糖原和聚β一羟基丁酸、辅酶Q、抗病毒物质和生长促进因子，具有很高的饲料价值，在养殖业上有广阔的应用前景。 PSB在厌氧光照条件下，能利用低级脂肪酸、多种二羧酸、醇类、糖类、芳香族化合物等低分子有机物作为光合作用的电子受体，进行光能异养生长。在黑暗条件下能利用有机物作为呼吸基质进行好氧或异养生长。光合细菌不仅能在厌氧光照下利用光能同化CO2，而且还能在某些条件下进行固氮作用和在固氮酶作用下产氢。另外，有些菌种在黑暗厌氧条件下经丙酮酸代谢系统作用也可产氢。光合细菌还能利用许多有机物质如有机酸。醇、糖类转化某些有毒物质如 H2S和某些芳香族化合物等。 PSB通过生物转化，可合成无毒、无副作用且富含各类营养物质的菌体蛋白，不仅改善了生态环境，还为养殖业提供了高质量的饲料原料。 PSB菌体中对动物生长有促进作用的维生素B12、生物素、泛酸、类胡萝卜素、叶绿素以及与造血、血红蛋白形成有关的叶酸的含量远高于一般微生物，尤其含有人工不能合成的生物素D一异构体。这些物质在动物机体内都具有显著生理活性 在水产养殖中，养殖池按水中溶解氧含量的大小由表层向底部可分为好氧区和厌氧区。表层生物繁殖旺盛，水质一般较好；底层则积累了鱼虾的排泄物和未消耗尽的食物残料，有机质丰富，造成微生物的大量繁殖，消耗了水中大量的氧气，导致地底层形成无氧环境，硫酸盐还原菌大量繁殖，产生对鱼虾有毒害作用的硫化氢、酸性物质等。养殖地底层的这种环境正好是适于光合细菌生存的条件：一是具有厌氧条件，二是光线通过上面覆盖的有氧水层这个光线过滤器，使光合细菌可以吸收到适宜生长的450－600nm波长光。光合细菌利用地底的鱼虾排泄物、食物残料以及有毒有害的硫化氢、酸性物质作为基质大量繁殖，调节pH，并使氨氮、亚硝酸态氮、硝酸态氮含量降低，池底淤泥蓄积量减少，有益于藻类和微型生物数量的增加，使水体得以净化。 PSB可进行光合成、有氧呼吸、固氮、固碳等生理机能，且富含蛋白质、维生素、促生长因子、免疫因子等营养成分，在功能上可与抗生素相媲美，并且更具有安全性，是生物工程具有前景的研究领域之一。光合细菌制剂还具有独特的抗病、促生长功能，大大提高了生产性能，在应用方面显示了越来越巨大的潜力。其它在净化水质、鱼虾养殖、畜禽饲养、有机肥料及新能源的开发方面有着广阔的应用前景。欢迎访问中国微生物菌种查询网，本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司，单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购及服务！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

                 一级菌种培养基的实验目的与步骤！一、实验目的1．了解一级菌种培养基配制的原则；2．掌握一级菌种培养基配制的工艺流程；3．学会一级菌种培养基配制的具体方法步骤；4．学会棉塞的制作方法和手提式高压蒸汽锅的使用方法。二、实验设备、工具和材料手提式高压锅、1000～1500W电炉、感量1／10g的粗天平、1000mL量杯、玻璃漏斗、漏斗架各一个，8～10cm长乳胶管一根，止流夹一个，20mm×200mm试管150支左右，铁丝筒两个，小刀和剪子一把，普通棉花250g，牛皮纸、马铃薯、琼脂和葡萄糖或蔗糖适量。三、实验步骤(1)取适量马铃薯，削去皮，挖去芽眼。称取200g，切成薄片或小块，用清水淘洗之后，放入锅内，加水1200mL，用文火煮沸20～30min，用四层纱布过滤，取滤液1000mL，如不足加水补足1000mL。(2)称取琼脂20g，洗净剪碎，加入马铃薯煮出液中，用文火加热，边煮边搅拌，直至全部琼脂融化，再用四层纱布过滤，并用热水补足1000mL，加入预先溶解的葡萄糖水，搅拌之后煮2min后停火。(3)分装试管。根据要求，用1%盐酸或1%氢氧化钠溶液调整酸碱度后，将培养基趁热分装在试管中。先在玻璃漏斗嘴上套一段长8～10cm的乳胶管，卡上止流夹，将培养基倒入漏斗中（其余培养基要置电炉上保温）。左手握住3～5支试管，让乳胶管伸入试管中部，右手拇指和食指按下止流夹，逐一注入培养基，装入量以试管长度的1/5～1／4为宜。分装时不要让培养基沾在试管口上，若已沾上，要用干净纱布擦干净。(4)塞棉塞。培养基分装试管后，要塞上棉塞。制作棉塞的方法很多，这里介绍一种常用的方法。取适量棉片，在桌上铺成长12～15cm，宽12cm左右的薄棉垫，先将棉垫下部1／3向上折叠，再将上部1／3向下折叠，然后将长棉垫逆时针方向转90°，让光滑的一边向左用右手持棉垫并用拇指按住，左手拇指和食指向外旋卷，并将参差不齐的棉纤维缠住呈一圆柱形。用右手按顺时针方向将棉塞塞进管口内，塞入部分为棉塞长度的2/3。(5)捆扎试管。塞好棉塞之后，应将试管捆成束，并用牛皮纸将棉塞部分包扎好，装进高压锅内灭菌。(6)灭菌。用手提式高压蒸汽灭菌锅灭菌。其步骤如下。①加水。先向锅内加水，略超过支架。②装锅。将包扎好的试管直立放在内筒中，不要装得过紧、过满。③关严锅盖。先将软管对好内筒插孔，盖严锅盖，对角旋紧旋钮。④加热。插上电炉插头或推上电闸加热。⑤排放冷空气。开始加热时将放气阀打开，待看到有大量蒸汽排出后关上放气阀。⑥升压保压。排放冷空气之后，继续加热，当压力表指针达到0.11MPa时，开始计时，维持30min。⑦降压排气。维持30min之后，拔下电源插头或拉开电闸，使其自然冷却，或从电炉上把锅提下来，待压力表指针降到零时，打开放气阀，排放蒸汽。⑧出锅。排完气后，松开旋钮，将锅盖揭开一小缝，待培养基温度降至60℃左右时，取出试管。⑨摆斜面。试管从锅内取出后，要将试管一支一支地散放在桌面上的小木条上，使之冷却成斜面。斜面长度为试管长度的2/3。(7)空白实验。将灭菌后的斜面试管，各组随机抽取几支，放在28～32℃温箱中空白培养48～72h，如无任何杂菌生长，说明灭菌彻底，才可使用。中国微生物菌种查询网是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！与国内外多家研制单位，生物医药，第三方检测机构，科研院所有着良好稳定的长期合作关系！欢迎广大客户来询！

粪肠球菌（Enterococcus faecalis）为革兰氏阳性，过氧化氢阴性球菌。其原属于链球菌属，因其与其他链球菌同源程度低，甚至不到9%，故将粪肠球菌与屎肠球菌从链球菌属中分离出来，将其归为肠球菌属。粪肠球菌是一种兼性厌氧型革兰氏阳性乳酸菌，菌体形态为球状或链状，直径大小，无荚膜，无芽孢，对环境适应力和抵抗力强，可耐受四环素、卡那霉素、庆大霉素等多种抗生素，生长条件要求不严格 [1]  。它可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸 [2]  。简介细菌分类学上，肠球菌属早期并不存在，现今的一些菌种本归属于链球菌属。肠球菌在分类学上已经过多次变迁。1930 年，肠球菌被归入 D 群链球菌。1984 年，DNA-DNA 杂交和 16SrRNA 测序表明屎链球菌（S．faecium） 和粪链球菌（S．faecalis）与其他链球菌显著不同。同年，Schle-ifer 等提出肠球菌应从链球菌中脱离出来，形成一个新的肠球菌属（Enterococcus）。到目前为止，以 16SrRNA 测序和 DNA-DNA 杂交作为分类基础，该属已增加到 28 种之多。不久之后，可能还会重新分类。粪肠球菌为该属中最常见的即为代表种。该属通常指粪便来的可以用氮钠分离鉴定的一群革兰氏阳性球菌。由于肠球菌的菌种均含有Lancefield的D群抗原，亦称D群粪肠球菌或D群肠球菌。肠球菌的DNA G+C含量33%-39%mol。粪肠球菌属于动物肠道内的正常菌群，一般认为粪肠球菌对动物或人的机体无害，是一种共生菌。近年研究已证实，部分粪肠球菌在长期进化中出现毒力基因，可引起广泛的感染。而且由于抗生素的长期和大量不规范使用，粪肠球菌获得性耐药性不断上升，治疗粪肠球菌感染日益困难。生物学特性形态与染色革兰阳性球菌，单个、成双或短链排列的卵圆形球菌，无芽孢、无荚膜。菌形圆或椭圆，可顺链的方向延长，直径0.5-1.0微米，大多数成双或短链状排列，通常不运动。在丰富培养基上菌落大而光滑，直径1-2毫米，全缘，罕见色素。培养特性在血琼脂平板上35℃培养18-24h，形成较小、灰白色、湿润、凸起、有α或γ溶血环的菌落。在麦康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落。在脑心浸液肉汤中均匀浑浊生长。其营养要求低，在普通营养琼脂上也可生长。能在10℃或45℃ pH 9.6或含6.5%NaCl肉汤培养基中生长，并能耐65℃ 30分钟。它可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸。生化反应触酶试验阴性，分解甘露醇，不分解阿拉伯糖，胆汁七叶苷试验阳性，在含65%NaCl的肉汤中生长，多数菌株PYR试验阳性，对杆菌肽耐药鉴别要点1.本菌特征革兰阳性球菌，触酶试验阴性，在65%NaCl中生长，胆汁七叶苷试验阳性，45℃中生长。2.与链球菌属和乳球菌属的鉴别肠球菌属能在pH9.6的肉汤和45℃环境中生长，胆汁七叶苷和盐耐受试验阳性，而链球菌属和乳球菌属则相反。3.与屎肠球菌、鸟肠球菌的鉴别粪肠球菌不分解L-阿拉伯糖，分解山梨觅醇。屎肠球菌能分解Ⅰ-阿拉伯糖，不分解山梨醇。鸟肠球菌分解L-阿拉伯糖、山梨醇 [5]  。4.与铅黄肠球菌、鹑鸡肠球菌的鉴别粪肠球菌不分解鼠李糖，亚碲酸盐试定验阳性，铅黄肠球菌、鹑鸡肠球菌则相反。铅黄肠球菌与鹑鸡肠球菌的区别，铅黄肠球菌产黄色素鹑鸡肠球菌则不产。分布粪肠球菌分布在畜、禽养殖场所和畜、禽产品生产加工的环境中，存在于人和动物上呼吸道、消化道、生殖道内，广泛分布于自然界中。物种价值《饲料添加剂品种目录（2013）》将粪肠球菌规定为可以添加到饲料中的菌种。粪肠球菌具有保护屏障功效。粪肠球菌可在肠道上皮细胞上形成生物膜，保护肠上皮细胞免受有害物质侵袭。粪肠球菌具有营养功效，刘艳(2008)研究表明，粪肠球菌菌体含多种小肽，能促进氨基酸及残基的吸收，提高组织蛋白的合成。粪肠球菌可产生抑菌物质，如细菌素。细菌素通过特异性吸附在敏感细胞表面受体，如形成离子通道引起离子渗漏，影响ATP的合成和特定物质的运输，最终抑制蛋白质和DNA等大分子物质的合成致使细胞死亡，从而起到抑菌杀菌作用。粪肠球菌产生的其中一类细菌素具有特异性，其抗菌谱窄，能够防止病原微生物接触肠黏膜细胞。粪肠球菌还可产生具有广谱抗菌特性的细菌素，对假单孢菌、沙门菌及志贺氏菌有较好的抑制作用。研究证实，粪肠球菌能够有效抑制李斯特菌和金黄色葡萄球菌生长，其原因是粪肠球菌代谢产生伏尔加霉素。给断奶仔猪中饲喂粪肠球菌，发现其粪便中大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的数量减少。饲用应用①粪肠球菌制备成微生物制剂可直接投喂养殖动物，有利于改善肠道内微生态平衡，防治动物肠道菌丛区系紊乱。 ②分解蛋白质为小肽、合成B族维生素等功效。③粪肠球菌也能增强巨嗜细胞的活性，促进动物的免疫反应，提高抗体水平。④粪肠球菌在动物肠道内可形成生物薄膜附着于动物肠道粘膜上，并且发育、生长和繁殖，可形成乳酸菌屏障，抵御外来病菌病毒及霉菌毒素等的副影响，而芽孢杆菌和酵母菌等都是过路菌，没有这个功能。 ⑤粪肠球菌能把部分蛋白质分解成酰胺和氨基酸，把大部分的碳水化合物的无氮浸出物转化为L型乳酸，可以对钙质合成L-乳酸钙，促进养殖动物对钙质的吸收。⑥粪肠球菌还能够将饲料中的纤维变软，提高饲料的转化率。⑦粪肠球菌能够产生多种抗菌物质，这些抗菌物质对动物体内常见的致病菌具有良好的抑制作用。危害粪肠球菌可引起医源感染，最常见为尿道感染（大部分与尿道器械操作、导尿等有关）。其次为腹部和盆腔等部位的创伤和外科术后感染。

                     可以净化水质的微生物有哪些？百欧博伟生物 水族馆、养鱼厂、育苗厂等人造水体的封闭循环系统中的关键技术与设备是作为净水微生物的“生物包”。当今生物包中的微生物有以下三大类：一、土著微生物是在当时当地水源水域中土生土长的微生物，在水中或固着在生物包的填料上形成生物膜，是在自然状态下形成的。传统的生物包不是利用人工培育的微生物，而是对自然生长的微生物群体加以驯化、自然选择繁殖利用。这类微生物包括细菌、真菌、藻类、原生动物和相应的分解污染物的酶体系。土著微生物，如活性污泥，zuida的问题是只降解碳系污染物有效，而对氮系污染物的作用不大。光合细菌也是水中土著菌，它能降解BOD的含碳废水，去除率98%，但对总氮的去除率仅为66.7%，比活性污泥略好，但不能解除人造水体的氮系污染物。　　二、外来微生物在自然界中，能有效降解水体中碳、氮、磷、硫系污染物的高效菌株生长在土壤中，因为那里有它们所需要的氮、磷、钾及其他必需的营养元素。而自然界的海、淡水原来未受污染，缺乏这些营养元素，就很少有这些细菌生长，对水体来说，它们都是外来菌，如氨化细菌、硝化细菌、反硝化细菌、固氮菌和纤维素分解菌，大多是好氧和兼性厌氧菌。从自然界严格分离筛选出的多种高效广普微生物，再经过互补、共生机制培育，是净水功能倍增。把它接种到生物包上，由于微生物之间的共生、竞争、排斥、偏害、拮抗，会受到土著微生物的攻击，因此需要用大量的外来菌才能形成优。一般水体(湖水)每毫升有细菌1000个到100万个，外来菌就应有10亿到 1000亿个，过几天就加一次营养液，并增加水中的溶氧量，搅拌水体，才能形成优势种群。也可采取先将原来土著微生物全部杀灭，3天后再加接外来有益菌群。这类微生物已广泛运用于水族馆、工业化育苗厂、豪华型水族馆。水族馆、养鱼厂等人造水体可以做到无土著菌，而把外来有意净水菌培养成那里的土著菌。一旦它们成为人造水体的当家菌和物质循环的主要微生物，就能使人造水体维持生态平衡，养鱼就可以终年不换水，不用药。净水外来菌主要是芽孢杆菌。它是土壤中的优势种群。它耐热、耐寒、耐压，可以在干燥状态下长期保存，在好氧厌氧条件下均能生存。它们中除个别菌种为病原菌外，绝大部分都是对动植物无害的腐生菌。它们具有很强的分解碳系、磷系、硫系污染物，分解蛋白质和复杂多糖的能力，对水溶性有机物分解也起着重要的作用。由于它的特性与功能优于光合细菌而成为光合细菌的替代产品。国外许多生物工程企业将它从土壤中分离出来，引入水体中，成为目前国际净水界的新宠。我国有益菌的研制、生产刚刚起步，存在问题主要是加工处理后稳定性差，细菌易失活，功效降低。　　三、基因工程菌　研究表明，从环境中分离筛选的菌种，其降解污染物的酶活性有限，要高效、快速超常发挥，就得用现代基因工程来改造微生物，形成基因工程菌，又称工程微生物。　运用生物工程技术，采用细胞融合、基因重组技术等遗传工程手段，可以将某种降解污染能力强的微生物的降解基因，转入繁殖能力强、适应性好的受体微生物中，构建出高效的具有广谱降解能力的基因工程菌。　　四、净水微生物主要有以下功能和特点：⒈去碳去氮如芽孢杆菌、碱杆菌属、假单胞菌、黄杆菌等复合菌有去除水中的碳、氮、磷系化合物的能力，并有转化硫、铁、汞、砷等有害物质的功能。⒉杀灭病毒如枯草杆菌、绿脓杆菌具有分解病毒外壳酶的功能而杀灭病毒。⒊降解鱼药的毒性如假单胞菌、节杆菌、放线菌、真菌有降解转化残留化学鱼药的功能。⒋絮凝作用如芽孢杆菌、产气杆菌、产碱杆菌、黄杆杆菌等有生物絮凝作用，可以将水体中的有机碎屑结合成絮状体，使重金属离子沉淀，很容易被过滤器截流而移出系统外，使水体清澈。⒌反硝化作用如芽孢杆菌、短杆菌、假单胞菌都是好氧菌和兼性厌氧菌，以分子氧作最终电子载体，在供氧不充分的时间与空间，可以利用硝酸盐为最终电子载体，起反硝化作用，将硝酸盐移出系统外，提高PH值。⒍彻底净化这种复合菌能利用水中浓度极低的营养物质，在水中硝酸盐、葡萄糖仅为1-10毫克/升时，这些水生细菌仍能利用和耗尽它，把氮和氨的浓度降至为0。

食品微生物检验GB4789.2-2016菌落总数测定及注意事项     菌落总数定义和卫生学意义     GB4789.2-2016菌落总数测定（平板法）      3. 质量控制和疑难解析       4. 菌落总数测试片法       5. 所需培养基试剂     食品微生物检验GB4789.3-2016大肠菌群计数及注意事项     大肠菌群定义和卫生学意义     GB4789.3-2016 大肠菌群MPN法和平板法     质量控制    大肠菌群测试片法    所需培养基试剂 食品微生物检验GB4789.29-2003 唐菖蒲伯克霍尔德氏菌（椰毒假单胞菌酵米面亚种）检验解决方案      检验流程（前增菌以及选择性分离过程）    检验流程初筛实验    唐菖蒲伯克霍尔德氏菌恒温荧光扩增试剂盒快速检测法    相关产品信息      食品微生物检验GB4789.4-2016 沙门氏菌检验及注意事项     沙门氏菌生物学特性及沙门氏菌检验流程    培养基原理解析    血清试验    沙门氏菌恒温荧光核酸快速检测    沙门氏菌检验所需培养基试剂      食品微生物检验GB4789.5-2012 志贺氏菌检验及注意事项     沙门氏菌生物学特性及沙门氏菌检验流程    培养基原理解析    志贺氏菌的生化鉴定    志贺氏菌的血清诊断    志贺氏菌检验所需培养基试剂如有需要查询其他产品，请直接联系销售蔡晓彤：18701098095（微信同步）QQ：2852776741，谢谢支持！

凝结芽孢杆菌（Bacillus coagulans），革兰阳性，属于硬（或厚）壁菌门。凝结芽孢杆菌分类学上属于芽孢杆菌属，细胞呈杆状，革兰氏阳性菌，端生芽孢，无鞭毛。分解糖类生成L-乳酸，为同型乳酸发酵菌。最适生长温度为45-50℃，最适pH为6.6-7.0。理化特性凝结芽孢杆菌是兼性厌氧菌，在有氧及无氧的环境下都可生长，能适应低氧的肠道环境，对酸和胆汁有较高的耐受性，能够进行乳酸发酵，产生的L-乳酸能降低肠道pH 值，抑制有害菌，并能促进双歧杆菌等有益菌的生长和繁殖。凝结芽孢杆菌能够形成芽孢，与其他不产乳酸的芽孢杆菌相比有利于恢复胃肠道的微生态平衡。凝结芽孢杆菌芽孢在人体中约4-6h便可萌发，其中85%的菌体可顺利通过消化系统，最终于肠道中萌发并繁殖。但值得关注的是，凝结芽孢杆菌不同于其它的益生菌，由于菌体在肠道上皮细胞的粘附性较弱，所以在自然条件下一般很难在肠道中存在。因此，作为肠道内的“移民”，凝结芽孢杆菌只能在肠道内做短暂的停留，一次性口服凝结芽孢杆菌后，经过大约4~7d时间肠道内的凝结芽孢杆菌便会通过排便而消失殆尽。所以只有持续服用凝结芽孢杆菌菌剂，才能使得该菌在肠道中充分发挥其益生作用。凝结芽孢杆菌在100℃高温下10min存活率达到96.4%；在pH2.0的酸性条件下，6h存活率达到48.2%；在0.9%胆盐条件下24h存活率达78.3%，0.3%胆盐条件下存活率达84.3%。在pH为1.0的情况下仍能存活，但在低pH条件下(pH4.0)，凝结芽孢杆菌对热耐受性下降。例如在酸性条件下(pH为4.0)，凝结芽孢杆菌的孢子对热几乎没有耐受性而且生长还会受到抑制。此外，Cerrutti等 也发现在pH 值小于4.5 和水活度0.96 条件下，凝结芽孢杆菌的生长受到抑制。药学研究无耐药性经中国药品生物制品检定所检定凝结芽孢杆菌TBC169菌株对氨苄青霉素、新霉素、头孢唑啉、头孢呋辛、头孢噻肟、氯霉素、呋喃唑酮（痢特灵）、复方新诺明和氟哌酸等抗菌药均敏感。凝结芽孢杆菌发酵的代谢产物口服后，凝结芽孢杆菌TBC169在盲、结和直肠定植，发酵产生大量抗菌凝固素、乳酸、氨基酸、维生素和多种消化酶。耐胃酸凝结芽孢杆菌TBC169经人工胃液（PH1.4）处理2小时后的存活率为95.29%（162/170），双歧杆菌存活率为5.20%（7.7/148），乳酸杆菌的存活率为5.50%（8.69/158）。研究表明凝结芽孢杆菌TBC169对人工胃液的酸性条件耐受性极强，其存活不受影响，明显优于其它微生态制剂，能顺利通过胃进入肠道，从而保证药效的正常发挥。稳定性高将凝结芽孢杆菌TBC169密封于塑料瓶内，置于55℃干燥箱内处理60小时后，测定活菌数的结果表明，仍不低于1亿 cfu/g，水分含量无明显改变，其他如性状、装量差异、杂菌检测各项指标均符合国家要求。说明本制品稳定性良好。这主要由于独特的发酵生产工艺，使凝结芽孢杆菌TBC169制剂对温度的耐受性强。凝结芽孢杆菌TBC169制剂可以在室温保存，有效期可达24个月。药理作用凝结芽孢杆菌并非肠内固有的微生物，其在肠道中所起的生理作用是通过分泌多种有益物质以及与肠道其他益生菌协同作用的结果，并非是某种物质起作用。凝结芽孢杆菌经口服进入胃后，在胃液的作用下被活化，芽孢衣膨胀，芽孢形状增大，水分增加，代谢加快。当凝结芽孢杆菌进入十二指肠时，其孢子萌发成营养细胞。营养细胞进入小肠后开始生长繁殖，大约30min 繁殖一代。凝结芽孢杆菌为兼性厌氧菌，当其进入肠道后会消耗游离氧而进行肠道繁殖，有利于厌氧微生物乳酸菌和双歧杆菌的生长，从而调节肠道内微生物菌群的平衡，提高机体的免疫力和抗病力，减少肠道疾病的发生。凝结芽孢杆菌在肠道繁殖的过程中还会分泌淀粉酶和蛋白酶，促进机体对营养物质的消化和吸收；其产生的B 族维生素、氨基酸、短链脂肪酸等物质能增加小肠的蠕动速度，从而改善肠道的消化功能。另外，凝结芽孢杆菌在肠道内定居后还能产生大量抑制有害菌的凝固素（Coagulin）和L（+）乳酸等抑菌物质，因此，对胃肠道炎症有一定的治疗作用。适应症治疗因肠道菌群失调引起的急、慢性腹泻、慢性便秘、腹胀和消化不良等症。

                  表面微生物监测的目的、方法与步骤！一、目的目的是确定各种重要表面存在的活体微生物，包括层流工作台，实验设备（集菌仪），实验室人员。二、方法：接触碟法、擦拭法1、接触碟法：是将充满规定的琼脂培养基的接触碟对规则表面或平面进行取样，然后至合适的温度下培养一定时间并计数。适用范围：实验人员及实验台面等接触碟：直径55cm取样面积：约为25cm2结果报告：CFU/碟培养基：种类、培养条件、培养基质量同沉降菌监测自制接触碟与之接触碟（商品化）三层严密包装，内层真空封装高压灭菌+钴60辐射灭菌，确保产品无菌培养基应具有极强的弹性、持水性，不会出现渗水现象。2-8摄氏度保存，一般保质期半年可根据客户需求在培养基中添加青霉素酶等催化酶，用于去除生产中产生的抗生素粉尘的抗菌性。监测步骤：1）从冷藏柜中取出接触皿，并恢复至室温。2）将包装整体送入取样地点，在此过程中逐步去掉外面两层包装，zuihou一层真空包装在操作间打开。3）打开接触皿上盖，使培养基充分接触待测表面，必要使用手指轻轻按压接触皿外侧底部中心约10秒，轻轻抬起，将上盖从接触皿一侧小心盖上。4）在接触皿磨砂区域标记取样地点、取样时间和取样人。5）取样后的清理：用消毒剂或杀孢子剂擦拭测试区域，以消除培养基的残留。6）将接触皿从洁净室取出，按规定的温度和时间倒置培养。7）观察、计数注意：1）表面微生物检测要在实验结束后进行。2）消毒剂残留物对监测的影响测试表面接触时，接触皿往往会接触清洗或消毒洁净室的消毒剂残留物。数百种不同的杀菌剂用于世界各地的制药设施，事实上许多监管机构希望看到轮流使用不同消毒原理的两种消毒剂，这些不同的消毒物质会抑制接触板上污染物的生长。为抵制这些消毒剂的生长抑制性质，中和剂被添加到培养基中。卵磷脂，聚山梨醇酯80，组氨酸和硫代硫酸钠的适当组合被认定能中和高达80%的常用消毒剂。3）方法验证的问题环境中分离的代表菌；代表性试验表明；回收率4）取样部位头部、口罩、肩部、前胸、前臂、手腕、腿部/靴子、眼罩5）限度的理解：A级＜1cfu/碟举例：监测了4个部位（人员）（左上臂接近手腕处，右上臂接近手腕处、前胸、口罩外表面）不合格结果：4个接触碟平均菌落数≥1cfu2、擦拭法：采用合适尺寸的无菌模板或标尺确定擦拭的面积，无菌拭子取样后，拭子置合适的缓冲液或培养基中，充分振荡，再用适应的方法计数。是接触碟法的补充。浸湿液：通常为无菌生理盐水或0.1%的蛋白胨溶液约5毫升培养基：TSA计数法：平皿涂布法、平皿浇注法、薄膜过滤贴膜法拭子头：材料类型包括聚酯、聚氨酯、尼龙和棉棉签头：需要灵活、耐足够长的时间，达到难以达到的地点，如管道内部。操作：1、浸湿拭子：开启装有约为5ml的无菌浸湿液的小试管（到带有螺旋帽的），将拭子头部浸湿，紧贴管内壁转动，挤压出多余的溶液。2、擦拭表面：拿住拭子柄与待测物表面成30度角，缓慢并全部涂抹待测物表面三次，没涂抹一次注意翻转拭子头的方向。3、涂抹后折断拭子头放入浸湿液试管中盖上帽，充分振荡带拭子的试管10秒，取出1ml混悬液接种到灭菌平皿中。4、浇注灭菌TSA培养基 ，培养，计数。注意：1）表面微生物检测要在试验结束后进行2）消毒剂残留物对监测的影响3）取样位置4）取样方式5）方法验证问题北京百欧博伟生物技术有限公司的中国微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台，并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站，自设设备及技术的微生物菌种保藏中心！欢迎广大客户来询！

益生菌是一类通过改善宿主肠道微生物菌群的平衡而发挥作用的活性微生物，是人体肠道重要的生物菌，能够促进肠内微生物菌群的生态平衡，具有改善肠道菌群结构、促进肠道中有益菌的增殖。抑制有害菌的生长、消除致癌因子、提高机体免疫力、降低胆固醇等重要生理功效，对于高血压、高血脂、心脏病、糖尿病和癌症的防治有着重要的意义。  随着人们保健意识的增强及微生态学相关科技的发展，消费者也越来越意识到益生菌在促进人体健康和预防疾病方面的重要性。尤其近几年，益生菌在功能性食品中的开发应用成为功能食品的一个研究热点，并将成为功能食品发展的重要领域。  双歧杆菌与健康  双歧杆菌存在于人体消化道内的菌群可达100万亿，菌体总重量约1.0~1.5公斤，占人体总重的1/60~1/50，与人体的肝脏重量相当，而产生酶的量却远远超过了肝脏所产生的量。因此，人体的生理、免疫、营养、消化等都离不开其自身携带的微生物群。  婴儿出生2~3天后双歧杆菌开始增殖，5天后达到最高峰并占绝对优势，在肠道内菌丛中占99%。但随着人的年龄增高，双歧杆菌在人体内逐渐减少，体弱多病的老人肠道内该菌几乎消失，而健康的人仍能保持一定的双歧杆菌在肠道内存在。这也反映出人体肠道内双歧杆菌的数量乃是检验人是否健康的一个指标。  有关双歧杆菌能提高人体肠道抗病力这方面的生理功能已为人们所熟悉，如抗菌性、改善维生素的代谢、防止便秘、改善肝功能、增强免疫力、预防肠道肿瘤等。  目前，有关双歧杆菌生理活性研究的进展，作为双歧杆菌的潜在能力，最引人注目的是其生理活性，诸如免疫赋活作用、抗肿瘤、降血脂、抗癫痫病以至其亚细胞结构成分对机体免疫系统的调节机制等的研究都在不断深入，且方兴未艾。  研究报道显示双歧杆菌可通过调节机体的免疫系统发挥抗肿瘤的作用，利用双歧杆菌作为一种免疫调节剂，通过提高宿主的免疫力还可以开展对系列疑难病症如类风湿、强直性脊髓炎乃至癌症等的防治。佳木斯医学院张磊艺等的研究观察了双歧杆菌复合制剂对高脂血症患者脂质代谢的影响，结果表明双歧杆菌可以降低血清胆固醇和甘油二酯，具有改善脂质代谢紊乱的作用。  嗜乳酸杆菌的开发  嗜乳酸杆菌是乳酸菌家族中极为重视研究和开发的益生菌之一，被视为第三代乳酸发酵剂菌种，嗜乳酸杆菌是人体肠道中的重要微生物，与人体健康息息相关。当其达到一定数量时，可以起到健康促进效果。  嗜乳酸杆菌与肠黏膜上皮细胞相互作用、密切结合构成了生物屏障；同时，通过其自身及其代谢物与其他细菌之间的相互作用，调整菌群之间的关系，维持和保证菌群最佳优势组合以及这种组合的稳定，阻止了致病菌的定植和入侵，拮抗致病菌和有害微生物的生长及其毒素的黏附。  在乳酸菌发酵后产生的乳酸，可促进胃内食物消化，提高钙、磷、铁的利用率和维生素D的吸收；乳酸分解产生的半乳糖，是构成脑神经系统中脑苷脂的成分，与婴幼儿出生后的成长有密切的关系，同时产生的大量维生素B群能促进人体神经细胞的发育；提高人体肠内的?茁-半乳糖苷酶的活性，促进奶质中乳糖的吸收，从而缓解乳糖不耐症；能分泌蛋白酶，促进蛋白质的消化吸收。  之后产生的腐败性细菌作用于食物成分和胆汁酸盐类，能生成亚硝基化合物胆固醇及胆汁酸的代谢物、氨基酸代谢物等有机致癌物质。而嗜酸乳杆菌能改善肠道菌群，抑制致癌物质的产生，同时，嗜酸乳杆菌及其代谢物活化了免疫功能，抑制癌细胞的形成和增殖。  此外，嗜酸乳杆菌在肠内定殖，其代谢产生的乳酸菌能抑制人的衰老与肠内有害细菌产生的腐败物，使机体衰老的过程变得缓慢，保加利亚人长寿与长期服用酸奶有关系。  复合益生菌的应用  上述两种典型的复合益生菌的复合菌株，利用其互生关系，可以有很多优点。嗜乳酸杆菌在生长中需要醋酸盐、维生素B2和叶酸等作为营养物质，而双歧杆菌在发酵中除了能生成醋酸外，还能生成维生素B2、B1、B12和叶酸等多种维生素，刚好供给嗜酸乳杆菌的需要，促进嗜酸乳杆菌的生长增殖；嗜酸乳杆菌在微含氧的乳基质中生长快，可以逐步降低乳基质中氧化还原电位，并提供各种易分解利用的物质促进双歧杆菌的生长；同时，混合培养可以加快产酸，缩短了凝乳时间，且凝乳风味更佳。两菌在混合培养中有良好的生态关系。  在高度工业化的国家，消费者对“功能食品”和“营养保健品”的需求已呈增长态势，正缓慢、坚实地渗透到许多发展中国家的高收入消费阶层。含益生菌的功能食品也被视为重要的一类产品。  功能食品中常见益生菌主要指两大类乳酸菌群：一类为双歧杆菌，另一类是乳杆菌。现在成功上市的功能食品有很多，如婴儿食品及欧美国家将益生菌添加到强化食品中制成饮料粉末、果汁；有的制成片剂、胶囊等易携带和食用。膳食补充剂作为益生菌的另一类产品，如酸奶、冰淇淋等被广大消费者接受。  复合益生菌新技术的应用也在加快。如欧洲丹麦的科汉森公司研发的均乐原力素，优选进口菌株双歧杆菌BB-12和嗜酸乳杆菌LA-5，足量添加低聚果糖、膳食纤维等更有利于益生菌在人体定植生长的益生元，以世界领先工艺研发生产而成的科学配伍、黄金组合的复合益生菌配方产品。 　　 目前国内对复合益生菌在保健食品这一领域的应用已达到一定的阶段，随着国外越来越多的大型益生菌公司进驻中国，和国内外专业科研队伍的不断深入研发，复合益生菌在科技应用上一定能突破高的层次。  ---摘自网络文章--如有学术问题，请直接联系本公司，感谢！

鼠李糖乳杆菌( Lactobacillus rhamnosus)多存在于人和动物的肠道内，细菌分类学属于乳杆菌属，鼠李糖亚种，是厌氧耐酸、不产芽孢的一种革兰氏阳性益生菌。鼠李糖乳杆菌不能利用乳糖，可发酵多种单糖(葡萄糖、阿拉伯糖、麦芽糖等)，大多数菌株能产生少量的可溶性氨，但不产生吲哚和硫化氢 ，它具有耐酸、耐胆汁盐、 耐多种抗生素等生物学特点。简介鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus GG (简写为Lactobacillus GG或LGG )，1983年由美国北卡罗来纳州立大学的两名教授( Gorbach and Goldin )自健康人体中分离出来，并获得专利。 LGG在耐胃酸和胆汁方面的性能非常突出，可以活体进入人体肠道，而其他大部分益生菌种在进入肠道前就已经因胃酸和胆汁的作用而死亡。如：普通酸奶中保加利亚乳酸杆菌在pH3.0条件下，半小时后活菌数降为原来的5%左右，1小时后活菌数降为原来的0.5%左右。对双歧杆菌而言，30℃、pH4.0对其存活有较大影响，2小时后活菌数降低70%~90%以上，pH2.0时则衰减更快，嗜酸乳杆菌的情况与双歧杆菌相似。LGG可以定殖在人体内长达两周之久，能有效改善和调整人体胃肠道菌群群落，对人体健康非常有益。能否定殖于人体对于一种益生菌的生理作用发挥将有很大的影响，而其他大部分益生菌种均不能定殖于人体。 功能特性LGG在人类肠道环境中定殖和繁殖后，仅仅是依附于宿主的肠上皮细胞，能够成为肠道粘膜的一层生物屏障，从而达到提升宿主肠道粘膜屏障能力。而且，借助LGG能对宿主肠道内的微生态系群落结构和功能进行调节，并使之达到平衡状态，进而达到改善宿主消化道系统功能的目的。相关研究表明，LGG对成年人的黏着率明显高于小儿，主要是由于成年人的肠道环境更为成熟，适宜LGG黏着。提升机体免疫力人体免疫系统可以分为先天和适应性免疫系统，先天免疫系统主要是由巨噬细胞、白细胞等承担，如果先天免疫系统出现功能障碍，则适应性免疫系统发挥功能。二者共同作用，完成对人体的免疫，一旦宿主发生创伤和感染等情况，就会导致免疫系统功能障碍。预防和治疗腹泻借助LGG可以达到预防和治疗腹泻的方式，相关研究表明，29名患婴分别口服LGG制剂和普通牛乳后，在服用LGG婴儿的粪便中检测出LGG菌种。说明服用后，宿主借助LGG实现对肠道菌群的调节，且得到复用LGG制剂婴儿的腹泻治疗效果比服用普通牛乳的治疗效果好。主要价值乳酸是乳酸菌的主要发酵产物，可分为3种类型：L-乳酸、D-乳酸和DL-乳酸。由于人体内只有L乳酸脱氢酶，因此只能够代谢L乳酸。WHO规定，每人摄人D-乳酸量不得超过100mg/kg，而在3个月以下婴儿的食品中不得含有D型和DL型乳酸。鼠李糖乳杆菌LGG在发酵过程中只产生L-乳酸，而不会产生对产品的安全性和口感有影响的其它酸类，因此含有LGG的发酵食品不会使人(尤其是婴幼儿）产生不良反应，具有非常重要的价值。目前在国际市场上销售的LGG产品以发酵乳制品为主，此外还有保鲜奶、干酪、婴儿食品、果汁、果汁饮料以及药品等，并得到了广大消费者和医疗工作者的认可。发展前景鼠李糖乳杆菌（LGG）是一种无毒、无副作用的益生菌，其功能特性主要有调节肠道菌群、预防和治疗腹泻、毒素的排出和提升机体免疫力，具有较高的应用价值，符合现代人类健康保健的基本需求。鉴于鼠李糖乳杆菌的功能特性，使得LGG可以添加到发酵乳制品中，结合食品科学，具有极高的应用价值和发展前景。

奇异变形杆菌是变形杆菌属的一种主要病原菌。和摩根变形杆菌相似，经常存在于人粪便中，常由肠源性引起尿路感染。在普遍使用广谱抗生素后，变形杆菌已成为重要的条件致病菌，有时引起人类的严重感染，包括医源性感染，每每造成死亡。普通变形杆菌和奇异变形杆菌与临床关系较密切，奇异变形杆菌和普通变形杆菌是仅次于大肠埃希菌的泌尿系统感染的主要病原菌，肾结石和膀胱结石的形成可能与变形杆菌感染有关，有的菌株可引起败血症、食物中毒、腹膜炎、脑膜炎等。简介变形杆菌属包括普通变形杆菌、奇异变形杆菌、莫根变形杆菌、雷极变形杆菌和无恒变形杆菌。变形杆菌呈明显的多形性，有球形和丝状形，为周鞭毛菌，运动活泼。在固体培养基上呈扩散生长，形成迁徒生长现象。若在培养基中加入0.1%石碳酸或0.4%硼酸可以抑制其扩散生长，形成一般的单个菌落。在SS平板上可以形成圆形、扁薄、半透明的菌落，易与其它肠道致病菌混淆。培养物有特殊臭味，在血琼脂平板上有溶血现象。能迅速分解尿素。根据菌体抗原分群，再以鞭毛抗原分型。此属细菌X19、XK、X2的O抗原与某些立克次体的部分抗原有交叉，可替代立克次体抗原与患者血清作凝集反应，此反应称为外斐试验，用于某些立克次体病的辅助诊断。变形杆菌广泛存在于水、土壤腐败的有机物以及人和动物的肠道中，为条件致病菌，多为继发感染，如慢性中耳炎、创伤感染等，也可引起膀胱炎、婴儿腹泻、食物中毒等。病原本病的病原为奇异变形杆菌。本菌属肠道正常菌群，为条件性致病菌。在动物正常情况下，本菌无致病作用，动物不会发病，当肠道功能受到扰乱，或机体抵抗力下降时方可致病，故本病多在应激情况下发生。致病性同株奇异变形杆菌存在多种不同的生长状态。通过环形接种、点种传代、革兰染色和鞭毛染色等方法观察同株奇异变形杆菌的形态学变化。同株奇异变形杆菌的生长速度、迁徙能力、生长形态及鞭毛形态发生变化。同株奇异变形杆菌存在不同的生长形态。人类正面临着内、外环境的挑战，微生态环境作为一种重要的内环境对人体健康影响巨大。生命活动的本质是生物与内外环境形成的生态系统的平衡过程，而疾病多由各种干扰宿主的因素过度作用导致生态失调引起。奇异变形杆菌(Proteus mirabilis, PM)是一种重要的致病菌。检测方法奇异变形杆菌主要污染动物性食品，特别是肉类，因此应加大对动物性食品中奇异变形杆菌的监测力度，保障消费者的食用安全。有关奇异变形杆菌检测的通常采用传统的菌分离、生化反应进行鉴定，操作复杂，耗时较长，不适应日常食品卫生检测监督工作的需要。分子生物学方法如PCR、多重PCR 、实时荧光PCR等广泛应用于食源性致病菌的检测，克服了传统检测方法的不足。

中科院微生物所王军研究员团队利用已建立的肠道病毒组的研究方法（Cao et al, Medicine in Microecology, 2020, 4:100012）结合Nanopore三代测序技术,与解放军总医院第五医学中心杨鹏辉主任合作，首次解析了新冠肺炎（COVID-19）患者的肠道病毒组（Virome）的动态变化，并以小鼠为模型对其中的机制进行解释。 　　新型冠状病毒（SARS-CoV-2）引起的新冠肺炎疫情持续流行。根据世界卫生组织（WHO）统计，截止2021年3月，全球已有超过1亿COVID-19，死亡病例高达260多万。虽然COVID-19患者主要表现为呼吸系统的感染，引发呼吸系统的症状，甚至呼吸衰竭，但是该病毒也常常影响消化系统，尤其是肠道。值得注意的是，新冠病毒感染后COVID-19患者消化系统的症状先于呼吸系统，主要表现为腹泻。 　　已有研究表明新冠肺炎患者中肠道菌群存在着不同程度的肠道生态失衡，并且这种变化可以作为COVID-19疾病的诊断和治疗的生物标记物。肠道病毒作为肠道微生物的重要组成部分，已有证据表明其与炎症性肠道疾病密切相关，但是，对于COVID-19患者的肠道病毒变化，以及它们与SARS-CoV-2感染之间的关系现在仍不清楚。 　　至此，作者以北京地区新冠患者为研究对象，分别采集了患者的粪便及咽拭子。然后，以健康人作为参照，分析了COVID-19患者的肠道病毒组和细菌组的动态变化。结果发现，与健康人相比，COVID-19患者的肠道病毒和细菌存在较大差异，主要表现为患者的肠道菌群多样性显著降低。同时，不同疾病严重程度的患者之间细菌或病毒的组成不同。与轻症相比，重症患者中的条件致病菌显著增多，但产丁酸菌显著下降。此外，作者也在SARS-CoV-2感染的小鼠模型中复制了这一发现，证实了SARS-CoV-2感染导致的病毒组差异和细菌组失调，并观察到感染过程中免疫/感染相关基因在肠道上皮细胞中的表达不同，可能解释了病毒组和细菌组的动态。----摘自 中国科学院微生物研究所---如有学术问题，请直接联系本单位删除，感谢支持！

沙门氏菌是一种常见的食源性致病菌。沙门氏菌鉴定的传统方法主要是根据形态学特征、培养特征、生理生化特征、抗原特征、噬菌体特征等。1885年沙门氏等在霍乱流行时分离到猪霍乱沙门氏菌，故定名为沙门氏菌属。沙门氏菌属有的专对人类致病，有的只对动物致病，也有对人和动物都致病。沙门氏菌病是指由各种类型沙门氏菌所引起的对人类、家畜以及野生禽兽不同形式的总称。感染沙门氏菌的人或带菌者的粪便污染食品，可使人发生食物中毒。据统计在世界各国的种类细菌性食物中毒中，沙门氏菌引起的食物中毒常列榜首。我国内陆地区也以沙门氏菌为首位。沙门氏菌属菌体大小（0.6～0.9)×（1～3)微米无芽胞，一般无荚膜，除鸡白痢沙门氏菌和鸡伤寒沙门氏菌外，大多有周身鞭毛。营养要求不高，分离培养常采用肠道选择鉴别培养基。生化反应对本属菌的鉴别具有重要参考意义（见表）。不液化明胶，不分解尿素，不产生吲哚，不发酵乳糖和蔗糖，能发酵葡萄糖、甘露醇、麦芽糖和卫芽糖，大多产酸产气，少数只产酸不产气。VP试验阴性，有赖氨酸脱羧酶。DNA的G+C含量为50～53%。对热抵抗力不强，在60℃15分钟可被杀死。在水中存活2～3周。在5%的石炭酸中，5分钟死亡。本属菌按生化反应分为4个亚属。亚属Ⅰ是生化反应典型的和最常见的沙门氏菌；亚属Ⅱ和Ⅳ是生化反应不典型的沙门氏菌；亚属Ⅲ是亚利桑那沙门氏菌。沙门氏菌具有复杂的抗原结构，一般可分为菌体（O)抗原、鞭毛（H)抗原和表面（Vi)抗原3种。理化特性生化反应很活泼，能分解多种糖类和醇。培养特性1）需氧及兼性厌氧菌。2）在普通琼脂培养基上生长良好，培养24h后，形成中等大小、圆形、表面光滑、无色半透明、边缘整齐的菌落，其菌落特征亦与大肠杆菌相似（无粪臭味）。3）鉴别培养基（麦康凯、SS、伊红美蓝）：一般无色菌落。4）三糖铁琼脂斜面：斜面为红色，底部变黑并产气。生化特性1）发酵葡萄糖，麦芽糖，甘露醇和山梨醇产气；2）不发酵乳糖、蔗糖和侧金盏花醇；3）不产吲哚、V-P反应阴性；4）不水解尿素和对苯丙氨酸不脱氨。伤寒沙门氏菌、鸡伤寒沙门氏菌及一部分鸡白痢沙门氏菌发酵糖不产气，大多数鸡白痢沙门氏菌不发酵麦芽糖；除鸡白痢沙门氏菌、猪伤寒沙门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌、伤寒沙门氏菌和仙台沙门氏菌等外，均能利用枸橼酸盐。血清学特性沙门氏菌具有复杂的抗原结构，一般沙门氏菌具有菌体(O)抗原、鞭毛(H)抗原和表面抗原(荚膜或包膜抗原)三种抗原 。

                   金针菇的四大好处及功效作用！一、金针菇的四大好处1、降低胆固醇含量健康的人体内胆固醇含量是很正常的，但是这几年人们的生活水平提高了，人们在饮食的时候很不注意，导致体内的胆固醇含量增高，诱发各种心脑血管疾病，特别是一些中老年人的胆固醇含量很高，如果不能及时控制会影响到身体健康，平时老年多吃些金针菇可以有效的降低体内的胆固醇含量。2、缓解疲劳现象每天工作很劳累的人如果休息不好他们的身体很容易会出现慢性疲劳，我们要缓解疲劳其实不仅仅是通过休息而已，还可以通过饮食来缓解疲劳，有些食物对缓解疲劳的效果还是挺不错的，比如金针菇。平时工作太累的人在日常饮食的时候可以多吃些金针菇。3、可抑制癌细胞癌症对人类的危害是非常大，至今，癌症还没能完全治好，科学家们对很多癌症也无能为力。我们要预防癌症可以通过饮食来实现，很多食物都含有抑制癌细胞的效果。比如金针菇中含有一种叫多糖体朴菇素的物质，抗癌效果很不错，想要预防癌症的人平时也可以多吃金针菇。4、可提高身体免疫力我们都知道身体免疫力越强的人越不容易患病，很多体弱多病的人就是因为身体免疫力太差了。平时除了通过锻炼来提高自身的免疫力外，饮食也可以促进身体免疫力的提高，这里小编建议大家多食用金针菇来提高免疫力，因为金针菇中含有一种可提高免疫力的蛋白质。二、金针菇的功效作用金针菇性寒，味甘、咸，具有补肝、益肠胃、抗癌的功效，主治肝病、胃肠道炎症、溃疡、肿瘤等病症。金针菇中锌含量较高，对预防男性前列腺疾病较有帮助。而且金针菇还是高钾低钠食品，可防治高血压，对老年人也有益。  补肝，益肠胃，抗癌；主治肝病、胃肠道炎症、溃疡、癌瘤等病症，益智。中国微生物菌种查询网专业为各企事业单位，科研院所，各级学校提供微生物菌种产品查询、购买服务！网站主要提供的产品：质控菌种，标准菌种，中国微生物菌种4万多株，细胞系/株1万多株其中金黄色葡萄球菌，大肠埃希氏菌（大肠杆菌），沙门氏菌，黑曲霉，铜绿假单胞菌，枯草芽孢杆菌，链球菌，白色念珠菌，志贺氏菌等为常用菌株。

                细胞培养需要的设施器材及培养过程！一、细胞培养需要的设施器材设施：超净台、恒温培养箱、倒置显微镜、液氮储存罐、电热鼓风干燥箱、冰柜、电子天平、恒温水浴槽、离心机、压力蒸汽消毒器。器材：⒈玻璃器材培养皿、滴流瓶、刻度吸管、离心管、培养瓶、烧杯、量筒、三角烧瓶⒉塑料器材多孔培养板、培养皿、培养瓶⒊橡皮器材橡皮制品（zuihao是硅制品）做各种瓶或试管的塞子、盖子。⒋金属器材剪刀、镊子、手术刀、解剖刀、血管钳、组织镊、眼科镊及各种型号针头⒌其他物品纱布、注射器和针头 二、细胞培养的一般过程⒈准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试，具体内容可参阅有关文献。⒉取材在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器皿中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌，为减少污染可用抗菌素处理。由组织并分离分散细胞的方法可参阅有关文献。⒊培养将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。如系细胞培养，一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次，观察的内容包括细胞是否生长良好，形态是否正常，有无污染，培养基的PH是否太酸或太碱（由酚红指示剂指示），此外对培养温度和CO2浓度也要定时检查。一般原代培养进入培养后有一段潜伏期（数小时到数十天不等），在潜伏期细胞一般不分裂，但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。细胞长满瓶底后要进行传代培养，将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代”。二倍体细胞一般只能传几十代，而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。转化细胞可能具有恶性性质，也可能仅有不死性（Immortality）而无恶性。培养正在生长中的细胞是进行各种生物医学实验的良好材料。⒋冻存及复苏为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度—－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。冻存过程中保护剂的选用、细胞密度、降温速度及复苏时温度、融化速度等都对细胞活力有影响。 北京百欧博伟生物技术有限公司拥有Biolog微生物鉴定系统，超低温冰箱，生物安全柜等仪器设备可进行对微生物分离、鉴定等常规的分子实验研究。对我国生命科学研究、生物技术创新和产业发展的需求进行积极的面对社会乃至国外收集保藏提供微生物菌种资源。在保证生物安全和保护知识产权的前提下，为工农业生产、卫生健康、环境保护、科研教育提供微生物物种资源、基因资源、信息资源和专业技术服务。中国微生物菌种查询网