食品中沙门氏菌的检测方法研究！

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沙门氏菌是一个统称，泛指2 000多种有紧密连系的细菌，包括引起食物中毒，导致胃肠炎、伤寒和副伤寒的细菌。虽然只有少数人因沙门氏菌而患病，但是，在世界范围内的细菌性食物中毒事件中，由沙门氏菌引起的占大多数。因此，采用科学、合理的方法检验食品中沙门氏菌，已经成为了人们较关心的问题之一。本文缔一生物为您从选择性增菌、分离培养、生化与血清学确证试验3个方面入手，带你了解沙门氏菌检测技术。

沙门氏菌检验方法

按照GB 4789.4―2016中的要求，沙门氏菌检验有5个基本步骤：前增菌、选择性增菌、选择性平板分离（BS，36 ℃±1 ℃，40～48 h；XLD或HE或沙门氏菌显色培养基，36 ℃±1 ℃，18～24 h）；生化试验，鉴定到属；血清凝集试验。

1.前增菌、选择性增菌试验

BPW，即前增菌，所使用的增菌液会使受损的沙门氏菌复苏，增菌时间为8～18 h，增菌时间不适合太长，否则杂菌也会相应增多。

选择性增菌液SC中的亚硫酸盐可以起到抑菌的作用，胱氨酸可以促进沙门氏菌的生长，最适的增菌温度为36 ℃，时间为18～24 h。

TTB中的主要抑菌剂为四硫磺酸钠和磺绿，最适增菌温度为42 ℃，时间为18～24 h，比较适合其他沙门氏菌的增菌。因此，需要同时使用SC和TTB，这样可以提高目标菌的检出率。

用途培养基品名货号

前增菌缓冲蛋白胨水MV614

选择性增菌TTB增菌液（四硫磺酸钠煌绿）M1255，M032，M327

SC增菌液（亚硒酸盐胱氨酸）MV025

2.分离培养试验

分离培养试验中，不同培养基的选择性强弱不同，1种培养基不可能适合所有的沙门氏菌，所以，要同时使用2种以上的培养基，必须用1个BS培养基，再用1个XLD或HE或显色培养基，形成互补，提高检出率，以防漏检。

根据特异性的酶底物反应，可对沙门氏菌一步清晰鉴别。沙门氏菌呈淡紫色菌落，并有紫色光晕，大肠杆菌和其他β-葡萄糖醛酸酶阳性菌都显示为蓝色，其他微生物菌落为无色，且添加的是植物源蛋白胨，有效避免了传播疯牛病风险，产品特异性强。

3.生化试验和血清学试验　

在生化试验和血清学试验中，要注意以下几点：

①分离纯化可疑菌落，这一步至关重要，它需要多次纯化，如果菌落不纯，会直接影响生化试验的结果，尤其像山梨醇、甘露醇这类观察接种前后颜色变化的项目。

②TSI易制成高层斜面，采用18 mm×180 mm的试管，高层斜面琼脂分装量约为试管容量的1/3，并且斜面与底层柱高的比例为1∶2，如果底层柱高部分过少，就会影响穿刺后底层现象的观察效果。

③在靛基质试验中，用到的蛋白胨水中应含有丰富的色氨酸，因此，每批蛋白胨应先用已知菌种鉴定后方可使用。

④在血清学鉴定中，做玻片凝集试验时，需要检查培养物有无自凝性，即生理盐水对照。

生理生化试验，耗时较长，过程繁琐可采用试剂盒检测，这里推荐一款沙门氏菌鉴定试剂（卡）盒——HiMedia公司沙门氏菌鉴定试剂盒（KB0011），该试剂盒含12项检查，包括7项传统的生化检查和5项糖发酵检查。通过微生物发酵反应，培养基颜色发生变化。

该试剂盒包含12个小孔，每个小孔包含一种生化反应，一次性可出结果，大大减少了试验试剂配制时间。

鉴定的沙门氏菌物种：

Most serotypes

Serotype Typhi

Serotype Choleraesuis subsp. choleraesuis

Serotype Paratyphi A

Serotype Gallinarum

Serotype Pullorum

S. serotype Typhimurium

S. choleraesuis subsp. arizonae

S. choleraesuis subsp. diarizonae

S. choleraesuis subsp. houtenae

S. choleraesuis subsp. indica

S. choleraesuis subsp. salamae

S. enterica subsp. salamae, Group II

S. enterica subsp. arizonae, Group IIIa

S. enterica subsp. diarizonae, Group IIIb

S. enterica subsp. houtenae, Group IV

S. bongori，Group V Strains

S. enterica subsp. indica，VI Strains

沙门氏菌病是公共卫生学中具有重要意义的人畜共患病种之一，其病原沙门氏菌属于肠道细菌科，高效的检测方法，对人类健康有至关重要。

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