粪肠球菌的鉴别要点

粪肠球菌（Enterococcus faecalis）为革兰氏阳性，过氧化氢阴性球菌。其原属于链球菌属，因其与其他链球菌同源程度低，甚至不到9%，故将粪肠球菌与屎肠球菌从链球菌属中分离出来，将其归为肠球菌属。粪肠球菌是一种兼性厌氧型革兰氏阳性乳酸菌，菌体形态为球状或链状，直径大小，无荚膜，无芽孢，对环境适应力和抵抗力强，可耐受四环素、卡那霉素、庆大霉素等多种抗生素，生长条件要求不严格 [1]  。它可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸 [2]  。

简介

细菌分类学上，肠球菌属早期并不存在，现今的一些菌种本归属于链球菌属。肠球菌在分类学上已经过多次变迁。1930 年，肠球菌被归入 D 群链球菌。1984 年，DNA-DNA 杂交和 16SrRNA 测序表明屎链球菌（S．faecium） 和粪链球菌（S．faecalis）与其他链球菌显著不同。同年，Schle-ifer 等提出肠球菌应从链球菌中脱离出来，形成一个新的肠球菌属（Enterococcus）。到目前为止，以 16SrRNA 测序和 DNA-DNA 杂交作为分类基础，该属已增加到 28 种之多。不久之后，可能还会重新分类。粪肠球菌为该属中最常见的即为代表种。该属通常指粪便来的可以用氮钠分离鉴定的一群革兰氏阳性球菌。由于肠球菌的菌种均含有Lancefield的D群抗原，亦称D群粪肠球菌或D群肠球菌。肠球菌的DNA G+C含量33%-39%mol。

粪肠球菌属于动物肠道内的正常菌群，一般认为粪肠球菌对动物或人的机体无害，是一种共生菌。近年研究已证实，部分粪肠球菌在长期进化中出现毒力基因，可引起广泛的感染。而且由于抗生素的长期和大量不规范使用，粪肠球菌获得性耐药性不断上升，治疗粪肠球菌感染日益困难。

生物学特性

形态与染色

革兰阳性球菌，单个、成双或短链排列的卵圆形球菌，无芽孢、无荚膜。

菌形圆或椭圆，可顺链的方向延长，直径0.5-1.0微米，大多数成双或短链状排列，通常不运动。在丰富培养基上菌落大而光滑，直径1-2毫米，全缘，罕见色素。

培养特性

在血琼脂平板上35℃培养18-24h，形成较小、灰白色、湿润、凸起、有α或γ溶血环的菌落。在麦康凯琼脂平板上形成较小、干燥、粉红色菌落。在脑心浸液肉汤中均匀浑浊生长。

其营养要求低，在普通营养琼脂上也可生长。能在10℃或45℃ pH 9.6或含6.5%NaCl肉汤培养基中生长，并能耐65℃ 30分钟。它可利用精氨酸为能源，发酵山梨醇，不发酵阿拉伯糖。在简单的培养基上生长不需叶酸。

生化反应

触酶试验阴性，分解甘露醇，不分解阿拉伯糖，胆汁七叶苷试验阳性，在含65%NaCl的肉汤中生长，多数菌株PYR试验阳性，对杆菌肽耐药

鉴别要点

1.本菌特征

革兰阳性球菌，触酶试验阴性，在65%NaCl中生长，胆汁七叶苷试验阳性，45℃中生长。

2.与链球菌属和乳球菌属的鉴别

肠球菌属能在pH9.6的肉汤和45℃环境中生长，胆汁七叶苷和盐耐受试验阳性，而链球菌属和乳球菌属则相反。

3.与屎肠球菌、鸟肠球菌的鉴别

粪肠球菌不分解L-阿拉伯糖，分解山梨觅醇。屎肠球菌能分解Ⅰ-阿拉伯糖，不分解山梨醇。鸟肠球菌分解L-阿拉伯糖、山梨醇 [5]  。

4.与铅黄肠球菌、鹑鸡肠球菌的鉴别

粪肠球菌不分解鼠李糖，亚碲酸盐试定验阳性，铅黄肠球菌、鹑鸡肠球菌则相反。铅黄肠球菌与鹑鸡肠球菌的区别，铅黄肠球菌产黄色素鹑鸡肠球菌则不产。

分布

粪肠球菌分布在畜、禽养殖场所和畜、禽产品生产加工的环境中，存在于人和动物上呼吸道、消化道、生殖道内，广泛分布于自然界中。

物种价值

《饲料添加剂品种目录（2013）》将粪肠球菌规定为可以添加到饲料中的菌种。粪肠球菌具有保护屏障功效。粪肠球菌可在肠道上皮细胞上形成生物膜，保护肠上皮细胞免受有害物质侵袭。粪肠球菌具有营养功效，刘艳(2008)研究表明，粪肠球菌菌体含多种小肽，能促进氨基酸及残基的吸收，提高组织蛋白的合成。粪肠球菌可产生抑菌物质，如细菌素。细菌素通过特异性吸附在敏感细胞表面受体，如形成离子通道引起离子渗漏，影响ATP的合成和特定物质的运输，最终抑制蛋白质和DNA等大分子物质的合成致使细胞死亡，从而起到抑菌杀菌作用。粪肠球菌产生的其中一类细菌素具有特异性，其抗菌谱窄，能够防止病原微生物接触肠黏膜细胞。粪肠球菌还可产生具有广谱抗菌特性的细菌素，对假单孢菌、沙门菌及志贺氏菌有较好的抑制作用。研究证实，粪肠球菌能够有效抑制李斯特菌和金黄色葡萄球菌生长，其原因是粪肠球菌代谢产生伏尔加霉素。给断奶仔猪中饲喂粪肠球菌，发现其粪便中大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的数量减少。

饲用应用

①粪肠球菌制备成微生物制剂可直接投喂养殖动物，有利于改善肠道内微生态平衡，防治动物肠道菌丛区系紊乱。 ②分解蛋白质为小肽、合成B族维生素等功效。

③粪肠球菌也能增强巨嗜细胞的活性，促进动物的免疫反应，提高抗体水平。

④粪肠球菌在动物肠道内可形成生物薄膜附着于动物肠道粘膜上，并且发育、生长和繁殖，可形成乳酸菌屏障，抵御外来病菌病毒及霉菌毒素等的副影响，而芽孢杆菌和酵母菌等都是过路菌，没有这个功能。 

⑤粪肠球菌能把部分蛋白质分解成酰胺和氨基酸，把大部分的碳水化合物的无氮浸出物转化为L型乳酸，可以对钙质合成L-乳酸钙，促进养殖动物对钙质的吸收。

⑥粪肠球菌还能够将饲料中的纤维变软，提高饲料的转化率。

⑦粪肠球菌能够产生多种抗菌物质，这些抗菌物质对动物体内常见的致病菌具有良好的抑制作用。

危害

粪肠球菌可引起医源感染，最常见为尿道感染（大部分与尿道器械操作、导尿等有关）。其次为腹部和盆腔等部位的创伤和外科术后感染。