客户提问：我手头使用的色谱柱出现检测异常，已经按照说明书进行日常和再生冲洗，但是色谱柱的检测性能不能恢复，请问还有其他的方法吗？色谱柱作为色谱分析中金贵的耗材，面对柱子污染的情况，我们总是想通过清洗与再生的方式让其恢复性能。月旭科技的技术人员建议各位老师按照说明书进行冲洗操作，但总有老师想要有更多让色谱柱起死回生的方法。今天，小旭就给各位老师带来液相色谱柱再生方法的升级版本，请各位注意哈，虽说本文并非造谣传谣，但也非官方方法，请各位老师斟酌后再采用。硅胶基质反相色谱柱的清洗与再生1、常规样品污染色谱柱清洗与再生被常规样品污染的硅胶基质反相色谱柱，已有各种清洗与再生方法。月旭科技在对普通常规反相柱子的异常冲洗中，一般建议客户用甲醇-乙腈-异丙醇-乙腈各项冲洗20倍柱体积的方法进行冲洗。市面上也有些公司推荐使用一些更强溶剂的洗脱方式。如用二氯甲烷：甲醇（96:4，V/V），加1%氢氧化铵冲洗，其中加入的氢氧化铵对聚集在柱头的污染物具有良好的清洗效果。再如，在用水冲洗色谱柱同时进4等份的200μL二氯甲砜，然后依次用甲醇、氯仿和甲醇冲洗。用N，N-二甲基甲酰胺、丙酮依次冲洗色谱柱。这些方法耗时短，但使用的特殊溶剂，如氢氧化铵、二氯甲砜、N，N-二甲基甲酰胺等，均对色谱固定相有一定的损伤。2、金属离子污染色谱柱的清洗当色谱柱被金属离子污染后，一般的清洗方法无法生效，需要用特殊的清洗方法。磷酸和0.1mol/L柠檬酸对色谱柱上吸附的金属离子具有较好的清洗效果，因此常被人们用来清洗被金属离子污染的色谱柱[1]乙二胺四乙酸（EDTA）能同许多金属离子形成配合物，0.05mol/L的EDTA水溶液也可以用来去除色谱柱中金属离子污染物。这些试剂虽然能去除金属污染物，但也存在一些缺陷，如水溶液对固定相的浸润性较差，清洗效果不太理想；磷酸对固定相上键合相有一定的破坏作用；EDTA带入钠离子，对固定相性能产生影响。3、蛋白质污染色谱柱的清洗蛋白质分子量大，同时具有亲水和疏水特性，对很多物理和化学因素敏感。一般情况下，纯有机溶剂如乙腈或甲醇不能很好溶解多肽和蛋白质，不能有效地清洗色谱柱，因而需要一些特殊的清洗方法。现常用方法是用不含缓冲盐的流动相-0.1%TFA（三氟乙酸）水溶液-乙腈：异丙醇（1:2，V/V，含0.1%TFA）各项冲洗20倍柱体积，或用0.1%TFA（三氟乙酸）：乙腈（1:1，V/V）用0.2mL/min流速，过夜冲洗色谱柱。当上述方法无效时，可使用一些苛刻的试剂，如盐酸胍、二甲基甲酰胺及表面活性剂等。如用50%异丙醇水溶液冲洗时，将6mol/L盐酸胍水溶液与异丙醇按1:1混合，进样250μL；或者用30%二甲基甲酰胺水溶液清洗，时间不超过30min，处理后反复用水、甲醇冲洗。在常规流动相冲洗色谱柱时，注射500μL的1%十二烷基硫酸钠（SDS），然后用5%~95%乙腈水（含0.1%TFA）梯度冲洗，去除蛋白污染物效果也较好。[2]若已确定蛋白质污染种类，可将对应蛋白水解酶（如1%胰蛋白酶或木瓜蛋白酶）注入色谱柱，将蛋白质水解为肽，再用盐溶液洗脱。蛋白质污染色谱柱，不论是用高浓度的磷酸盐溶液，还是用尿素或胍来清洗色谱柱，对色谱柱都会产生较大损伤，同时损害色谱仪器。其中使用注射1%SDS法清洗色谱柱，不仅节省时间，还能得到较好的效果，是现有清洗方法中较优的选择。离子交换色谱柱的清洗与再生离子交换色谱柱在极端pH范围和高盐浓度条件下长时间使用，或者分析蛋白等生物类样品后，盐离子及蛋白质会吸附于固定相表面，导致色谱柱分离能力下降，柱压升高，峰形变差。对于污染的离子交换色谱柱，月旭科技的Ultimate® XB-SCX和Ultimate® XB-SAX建议用不含有缓冲盐的流动相-10%甲醇冲洗20倍柱体积。若常规的方法无法改善色谱柱性能的，可根据色谱柱性质及具体污染情况，选择强酸性或强碱性溶液、高盐溶液、含有机溶剂的缓冲溶液、含尿素等溶剂或表面活性剂（非离子型表面活性剂）的缓冲盐溶液、某些蛋白质变性剂（如盐酸胍和尿素等）以及蛋白酶中一种或几种组合进行清洗和再生。体积排阻色谱柱的清洗与再生体积排阻色谱是基于分子尺寸大小将物质分离的一种色谱模式。月旭Xtimate® SEC的柱子，日常的冲洗建议用10%乙腈或5%乙腈-90%乙腈冲洗20倍柱体积。但当多次使用后，某些样品可能会吸附到入口筛板或填料上。当积累至一定程度时会出现压力升高并伴随峰形展宽的异常现象，需要进行特殊的冲洗。该冲洗的清洗溶液选择的基本原则：1）低pH的盐溶液有助于移除碱性蛋白；2）有机溶剂有助于移除疏水蛋白；3）助溶剂有助于去除在固定相上强吸附的物质（如通过氢键作用等）。注意：只有在中性盐溶液或有机溶剂没有明显改善效果的情况下，使用助溶剂（如：6-8M的尿素或0.2-0.3%十二烷基硫酸钠）。参考文献[1] 张玉奎，张维冰，邹汉法. 分析化学手册[M].第6分册.液相色谱分析。北京：化学工业出版社，2000.[2] Ralph A Grohs，F Vincent Warren Jr, Brain A Bidlingmeyrer. Analysis of drugs in the presence of serum albumin by liquid chromatography with eluents containing surfactants [J]. Anal Chem, 1991, 63(4): 384-390.

遇到过样品堆积如山，因为仪器小小的密封件罢工而抓狂吗?体验过制备柱堵塞的无奈吗？是否也深陷制备纯化分离效果不理想的窘境？今天小编就带着在线过滤器来拯救你的不开心。为什么在线过滤器能解决这些问题？工作原理在线过滤器主要由筛板、密封圈、卡套组成，当液体流经在线过滤器时，粒径大于筛板孔径的颗粒物都会被筛板截留，确保流出的液体无大颗粒物，使其不能进入色谱柱和检测器，防止由于大颗粒物导致的制备柱堵塞，从而延长制备柱的使用寿命，同时也可以减少密封件的磨损情况。以月旭科技WelPacker DAC的47mm在线过滤器为例，蓝色箭头指的这个就是在线过滤器的筛板，是在线过滤器的核心部件，体积不大，作用不小，对于大颗粒物起到拦截的作用，保证液体进入色谱柱常规的筛板孔径是3μm，为制备液相系统筑起一道防线，就像一个坚实的盾牌一样。WelPacker DAC在线过滤器有20，47和100mm等多种规格，适用于不同流速和体系的液相系统，其产品优势如下：筛板可清洗反复使用。提高制备效率，防止因为色谱柱堵塞导致实验暂停。减少由于柱子堵塞后反复装填造成的耗材损耗。在线过滤器应该怎么选择？如果您的制备色谱上已经有在线过滤器，那应该如何进行产品维护呢：请勿用手触摸筛板。当在线过滤器工作一段时间后，筛板上截留了一定的大颗粒物，需要定时超声清洗。具体步骤如下：打开在线过滤器卡套，取下筛板，根据污染程度分别用甲醇和超纯水超声清洗，然后放回卡套，如往常一样使用。如发现在线过滤器损坏，需马上更换。

时光飞逝又一载，春夏秋冬岁末来。暖心仪器大礼包，献给月旭朋友们。抄底价还有延保！来年工作定无忧。仪器产品线促销啦！分析色谱类仪器、制备纯化类仪器，制剂检测类仪器还有处理类仪器，齐登场，超低的价格，优异的性能，更有部分产品延保服务，真正做到售后无忧，快来看一看，瞧一瞧……01低至55折起，高效科研必备好物！Wisys5000高效液相色谱仪是月旭科技自主研发的新一代高效液相色谱，拥有智能化，系统化的创新，具有极高的灵活性和适用性，获得德国 IF红点奖、中国红星设计奖。上市以来备受客户好评。Wisys5000具有配置灵活的特点，可搭配多种不同检测器及手动或自动进样配置，总有一款适合你。02仅售RMB ?9999 马上提走！Welch ELSD5450蒸发光散射检测器适用于高效液相色谱法，优化了对非挥发性、热不稳定和半挥发性化合物的检测灵敏度。基于精密的低温雾化器和创新的流通池设计，最小化了谱带展宽。通过SAGA技术可以自动调整增益设置，以避免检测器的任何超量程的情况出现。可以与安捷伦、赛默飞、诺尔等多款液相色谱仪联用，正在现货促销中！03历史ZUI低价真正的抄底，仅售RMB 1?000 不用谢！WelView光化学衍生器是业内超高性价比的产品之一，具有友好的人机交互模式，双灯，良好的衍生效果，使用维护简单易操作，破冰价格，值得拥有引领光化学衍生新风尚。04意大利HTA产品，全线65折大促抄底正当时！快来选一款吧，让今后的工作效率翻个倍！1HT4000A液相色谱样品全自动处理器●一台可进行液体处理、样品追溯、涡旋、自动开关盖、称量等操作，实现液相色谱样品处理过程的自动化。可联用实验室任何品牌的液相色谱。2HT2800T三合一气相色谱自动进样器●集合了液体进样、顶空进样以及固相微萃取SPME的多功能气相色谱自动进样器。 由于其操作与安装灵活性，HT2800T可以轻松安装在岛津、安捷伦、PE、赛默飞、瓦里安等品牌的GC和GC / MS系统上。3HT1500U离子色谱自动进样器●把赛默飞、万通等品牌离子色谱仪升级为自动进样，让以后的工作，效率翻倍。01低至65折起，错过再等一年！GPC-1600全自动凝胶色谱仪有手动进样与自动进样两种配置可选，如您选择自动进样在优惠价格基础上额外赠送超级实用的制备柱架1个，让您的制备试验台更美观。0265折优惠，性能小金刚！WelPacker DAC50/100动态轴向压缩柱系统自动进样配置及月旭科技填料，立享超低折扣，（配置详询月旭科技销售和产品专员）。0365折优惠基础上，还送制备柱架！Sail1000 100mL制备液相色谱仪，可加配HT1500L自动进样器及自动馏分收集器，年度好物送给你！全线65折促销，再送1年延保！英国Copley制剂药品崩解溶出扩散检测产品、固体药品物性检测产品活动仅限今年，错过就真的错过了，快来选一款吧。以下列举部分仪器配置，具体可根据客户需求调整。01DTG 200i崩解仪（具有1~4个吊篮多种配置）02FRV200i脆度仪TBF100i硬度仪03CopleyJV 200i振实密度仪和堆密度仪2020版药典新方法，三法合一的成熟典范。04固有溶出度测试套件+溶出仪套餐6~8个固有溶出样品同时检测！05立式扩散+溶媒真空脱气系统套餐干加热，10个样品同时进行，小体积，高效率！半固体制剂检测的小利器！Watbule是月旭科技全能的处理类仪器专用商标，涵盖实验室用户样品前处理和后处理的各种应用场景，其中包括E9提取均质仪、免疫亲和纯化仪、磁珠纯化仪和进样小瓶清洗机等等，欢迎详询！01Watblue E9提取均质仪主要用于食品，药品，饲料以及土壤等样品的提取和均质处理，适用于各种检测样品的前处理步骤，能快速，高效的提取出需检测的成分，9个样品同时处理，不再有人为因素导致的差异。02Watbule P10全自动免疫亲和纯化仪是针对免疫亲和柱的过柱速度要求⾼、样品基质多、过柱流程的影响因素多等多种特点而研发⽣产的全⾃动处理设备。最多40个样品的批量纯化！03Watbule P11全自动磁珠纯化仪是我公司针对人工免疫亲和纯化样品浓缩比不够高，存在堵柱问题，样品预处理复杂、效率低、成本高、平行性差而研发⽣产的全⾃动处理设备。智能系统标准化操控，全程⽆需⼈员值守，界⾯简洁易操作，主要用于黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、赭曲霉毒素A、脱氧雪腐镰刀菌烯醇等的提取，20个样品同时纯化处理，专为难纯化的样品打造！04Watbule C12/C13进样小瓶清洗机用户新宠！色谱分析进样小瓶用量大，还在为洗瓶子发愁吗？Watbule C12/C13 HPLC进样小瓶清洗机作为很多前期使用的用户的新宠，也来优惠促销，让更多用户体验，在65折基础上再送一年延保，安心无忧，选我就对了！

01适用范围●适用于猪、鸡肌肉、肝脏和鱼、虾可食组织中氯霉素残留量的测定。（本实验样品采用猪肌肉）参考标准：《GB-31658.2-2021食品安全国家标准 动物性食品中氯霉素残留量的测定 液相色谱－串联质谱法》02提取步骤●称取试料5g（准确至±0.02g），加内标工作液50μL、乙腈5mL、4%氯化钠溶液5mL，涡旋振荡2min，4000r/min离心10min，取上清液，残渣重复提取一次，合并上清液。加正己烷5mL，涡旋振荡1min，2000r/min离心10min，弃去上层液，正己烷重复提取一次。加水饱和的乙酸乙酯溶液5mL，涡旋振荡1min，2000r/min离心10min，取上层液转移至另一离心管中，重复提取一次，合并提取液，氮气吹干，加水-乙腈（95:5）3mL使溶解，备用。03SPE净化步骤●SPE柱：月旭Welchrom® C18E，规格：500mg/3mL。活化：10mL甲醇、10mL水，弃去；上样：取备用液全部过柱，弃去；淋洗：6mL水，抽干；洗脱：3mL 50%甲醇溶液洗脱，收集洗脱液；复溶：在洗脱液中加入水饱和乙酸乙酯溶液8mL，涡旋振荡1min，2000r/min离心5min，取上清液，氮气吹至近干，用50%甲醇溶液定容至1mL，涡旋混匀，过0.22μm滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。04色谱条件●UPLC条件色谱柱：Ultimate® XB-C18，5μm，3.0×150mm。流动相：甲醇：水=75：25；柱温：30℃；流速：0.4mL/min；进样体积：2µL。质谱条件离子源：电喷雾离子源（ESI）；扫描方式：负离子扫描；检测方式：多反应监测（MRM）模式；离子喷雾电压：-4500V；离子源温度：500℃；气帘气（CUR）10psi；雾化气（GS1）55psi；辅助气（GS2）50psi。其他质谱参数见表105色谱图或者加标回收率结果06相关产品信息

在色谱分析过程中常常需要使用缓冲盐来调节流动相的pH值，缓冲盐的不当使用对色谱柱可能造成柱压升高、柱效下降以及使化合物的保留时间发生变化等影响。“柱压升高原因：缓冲盐使用不当导致缓冲盐析出，堵塞塞板和键合相颗粒之间的孔隙，阻碍流动相传质，引起柱压升高；“相同化合物的保留时间发生变化原因：如果没有冲洗干净就进行进样，色谱柱内含有的盐会使化合物的保留时间发生变化；“柱效下降原因：1）有些缓冲盐会渗入到键合相的深处，损害硅胶基体，导致色谱柱键合相流失，柱床变松，柱效下降；2）凝结在键合相表面，使C18碳链难以舒展，对物质的保留能力下降，导致柱效下降。因此用过缓冲盐后需要对色谱柱进行冲洗，水中缓冲盐浓度较大时应特别引起注意。那么如何正确使用缓冲盐呢？使用前的处理：在使用缓冲盐作流动相之前需要用不含缓冲盐的流动相冲洗色谱柱，直至基线平稳。原则上，用于冲洗的流动相与分析时所用的流动相含水的比例相同（或含水更多），不同的只是用于冲洗用的流动相中不含缓冲盐。缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂。用含缓冲盐的(特别是做流动相的水为饱和的缓冲盐溶液时)流动相进行分析时，如果分析前色谱柱中用于保存色谱柱的流动相中含水的比例相对较小，不先冲洗掉，接下来做样品的时候所用的流动相中如果有机溶剂含量大，而其比例中所含的水又不足以溶解该缓冲盐时，缓冲盐将会在色谱柱柱体上析出，沉积下来，这将可能导致上述对色谱柱的损害。使用后的处理：用与分析时含水比例相同的流动相（与分析用流动相唯一的区别是，用于冲洗的流动相不含缓冲盐）进行冲洗约30min，直至基线平稳。如果该色谱柱在接下来很长的一段时间内不使用，要长期保存，则需再加上一步，即用纯的有机溶剂冲洗一遍，直至基线平稳。使用缓冲液要注意几点01避免使用盐酸盐，盐酸盐对钢质有腐蚀作用。02缓冲液是良好的菌类培养液，缓冲液最好要现配现用。03实验后不可用有机溶剂直接过度，有机溶剂会处使盐类析出，造成液路或色谱柱堵塞。04使用缓冲液要及时掌握pH范围，做到胸中有数。05清洗液路和柱子时，有温控可加热到30摄氏度易于冲洗。06长时间用缓冲溶液要注意观察接头处有无析出，若有白色盐类析出，可考虑一定周期用10%硝酸冲洗一下液路（拆下柱子，走30mL，再用5倍水冲洗）可以避免液路的堵塞。07选择缓冲液要用可靠的试剂，避免不纯的盐类造成不必要的麻烦。如果流动相中有机溶剂的比例很高是不能用来冲洗缓冲盐的，是洗不出来的。通常C18柱先用5%~10%的甲醇冲洗，是可以把缓冲盐冲洗出来的，然后用纯的有机溶剂来保护柱子。最好的方法是使用与流动相相同浓度不含盐的流动相进行清洗。但就是速度慢一些。用水是为了快速替换，一般在15分钟以内最好，且用0.8的流速较好。如果用纯水冲，容易造成键合的碳链的流失，最好用5%~10%甲醇水溶液冲。可以用纯水代替流动相中的缓冲液，有机相不变。这样冲洗柱子比较稳妥。小结正确使用缓冲盐很有必要，既可以防止缓冲盐析出，也可以达到提高色谱柱使用寿命的目的。我们不妨用一句话来总结它的使用方法：用前要过滤，用后需冲洗。

01适用范围●适用于鱼、虾可食组织中安眠酮残留量的检测。（本实验样品采用鲢鱼）参考标准：《GB-31656.5-2021食品安全国家标准 水产品中安眠酮残留量的测定 液相色谱－串联质谱法》02提取步骤●取试样5g（准确至±0.05g），于50mL离心管中，加内标工作液50μL、水3mL，涡旋混合30s，加正己烷15mL，振荡提取3min，超声5min，4500r/min离心7min，取正己烷层至25mL容量瓶，残渣再加正己烷8mL，重复提取一次，合并正己烷液，并用正己烷稀释定容至刻度，混匀，备用。03SPE净化步骤●SPE柱：月旭Welchrom® Silica，规格：500mg/3mL。活化：5mL丙酮、5mL正己烷，弃去；上样：精密量取备用液10mL过柱，速度约为每秒1滴，弃去；淋洗：5mL正己烷，弃去流出液，抽干；洗脱：8mL50%乙醚-正己烷混合溶液洗脱，收集洗脱液；复溶：将洗脱液于40℃水浴中氮气吹干，残余物中加入50%甲醇溶液1mL，涡旋混匀，过0.22μm滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。04色谱条件●UPLC条件色谱柱：Ultimate® XB-C18，5μm，2.1×100mm。流动相：0.1%甲酸溶液：甲醇=10:90；柱温：25℃；流速：0.3mL/min；进样体积：2µL。质谱条件离子源：电喷雾离子源（ESI）；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测（MRM）模式；离子喷雾电压：5500V；离子源温度：500℃；气帘气（CUR）10psi；雾化气（GS1）55psi；辅助气（GS2）50psi。其他质谱参数见表106相关产品信息●

“什么是脂肪酸脂肪酸（fatty acid），脂肪酸是由碳、氢、氧三种元素组成的一类化合物，是中性脂肪、磷脂和糖脂的主要成分。是指一端含有一个羧基的长的脂肪族碳氢链，是有机物，直链饱和脂肪酸的通式是C(n)H(2n-1)COOH，低级的脂肪酸是无色液体，有刺激性气味，高级的脂肪酸是蜡状固体，无可明显嗅到的气味。脂肪酸是最简单的一种脂，它是许多更复杂的脂的组成成分。脂肪酸在有充足氧供给的情况下，可氧化分解为CO2和H2O，释放大量能量，因此脂肪酸是机体主要能量来源之一。包括饱和（没有双键）脂肪酸和不饱和（携有双键）脂肪酸。一般多为直链，有的亦会出现支链。“前处理方法原理样品经氢氧化钠甲醇溶液皂化，生成脂肪酸盐，用三氟化硼催化，使甲醇与脂肪酸盐生成脂肪酸甲酯，用正庚烷萃取。“应用案例硬脂酸聚烃氧（40）酯中脂肪酸组成的测定色谱条件：色谱柱：月旭WEL-PEG20M（30m×0.32mm，0.25μm）。柱温：初始温度170℃维持2min，以10℃/min升至240℃维持30min；进样口：250℃；检测器：FID260℃；载气：氮气；进样量：1μL；分流比：40：1；柱流速：1mL/min;氢空比例：32：200。“谱图与数据供试品溶液“ 结论 使用此甲酯化方法可以萃取出样品中的脂肪酸甲酯，并且用月旭WEL-PEG20M（30m×0.32 mm，0.25μm）结果可满足《中国药典2020版》中相关要求。

01适用范围●适用于鸡肌肉、肝脏、肾脏和脂肪中二硝托胺及其代谢物残留量的检测。（本实验样品采用鸡肌肉）参考标准：《GB-31613.3-2021食品安全国家标准 鸡可食性组织中二硝托胺残留量的测定 方法二》02提取步骤●称取试料2g（准确至±0.02g），加磷酸盐缓冲液（pH 6.0）10mL（鸡肝脏、肾脏加磷酸盐缓冲液（pH 4.0），10000r/min均质1min，8000r/min离心5min，收集上清液，残渣加相应磷酸盐缓冲液10mL，重复处理，合并上清液。准确移取上清液8mL，用氢氧化钠溶液调pH至7.0，8000r/min离心5min，取上清液，备用。03SPE净化步骤●SPE柱：月旭Welchrom® BRP，规格：60mg/3mL。活化：3mL甲醇、3mL水，弃去；上样：取备用液过柱，弃去；淋洗：3mL水，抽干；洗脱：4mL 0.1%甲酸-乙腈洗脱，压干并收集于离心管中；复溶：将洗脱液过0.22μm滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。04色谱条件●UPLC条件色谱柱：Ultimate® UHPLC XB-C18，1.8μm，2.1×100mm。流动相：0.1%甲酸溶液：乙腈=10:90；柱温：30℃；流速：0.2mL/min；进样体积：2µL。质谱条件离子源：电喷雾离子源（ESI）；扫描方式：正负离子扫描（二硝托胺为负离子模式、3-ANOT为正离子模式）；检测方式：多反应监测（MRM）模式；离子喷雾电压：5500V（-4500 V）；离子源温度：500℃；气帘气（CUR）10psi；雾化气（GS1）55psi；辅助气（GS2）50psi。其他质谱参数：见表205色谱图或者加标回收率结果06相关产品信息

色谱分离中，影响选择性和分离的因素有很多，其中流动相中的有机溶剂类型以及不同的溶剂强度就是影响因素之一。对于反相色谱模式，常用的有机溶剂有甲醇、乙腈、四氢呋喃等，我们可以通过改变流动相中有机相种类或调整其比例，来改变选择性和分离度，以呈现出不同的分离效果。应用实例4-（氯甲基）苯甲酸&3-（氯甲基）苯甲酸的分离结构如图所示：两种物质为间位与对位异构体，在乙腈体系下无法实现完全分离。改变有机相种类后，可实现较好分离。色谱条件1色谱柱：Ultimate® XS-C18 4.6*250mm，5μm流动相：0.1%磷酸水和乙腈，梯度洗脱分析：两目标峰有分离趋势，但分离不完全，将梯度调整成等度条件。色谱条件2色谱柱：Ultimate® XS-C18 4.6*250mm，5μm流动相：0.1%磷酸水/乙腈=70/30分析：分离有改善，但还是无法分离完全，且依靠调整溶剂强度已无法改善其分离。色谱条件3在该色谱柱柱上进行方法优化，用甲醇替换乙腈，再次进行测试色谱柱：Ultimate® XS-C18 4.6*250mm，5μm流动相：0.1%磷酸水/甲醇=60/40结果：两目标物峰型良好，且可实现完全分离。

Polar RP是一款色谱柱采用超纯硅胶为基质，在反相固定相的碳链中嵌入极性基团的色谱柱，是一款亲水性的C18色谱柱，其特点如下：1因极性基团的嵌入，使烷基固定相在流动相中有机相比例极低时（甚至100%水相时），也能被水溶剂化润湿而不会发生相塌陷现象；2因在硅胶表面不远处嵌入极性基团，对硅醇基的屏蔽作用十分有效，不易造成峰形拖尾。同时，采用独特的工艺，使该款色谱柱在分析酸性和碱性物质时，都能得到较好的峰型；3因极性基团的嵌入，使色谱柱具有与常规色谱柱不一样的保留与选择性，特别是对极性弱保留物质的作用更加突出。应用案例2.985分钟处包含两个强极性的弱保留成分，在常规C18柱上，两个成分与溶剂倒峰合并，无法分离；采用Ultimate® Polar RP色谱柱，两个成分（3.241，3.487）与溶剂峰完全分开，且两个成分间的分离度也达到了基线分离。Polar RP色谱柱因极性基团的嵌入而带来了不一样的选择性，特别是对增加极性弱保留物质的保留方面的作用更加突出。因此，在做样过程中，如碰到类似的问题，可以优先考虑采用Polar RP色谱柱进行实验，也许会有意外的惊喜哦！

   01、概述伏马菌素 (Fumonisin FB) 是一种霉菌毒素，是由串珠镰刀菌（Fusarium moniliforme Sheld）产生的水溶性代谢产物，是一类由不同的多氢醇和丙三羧酸组成的结构类似的双酯化合物。伏马菌素主要污染粮食及其制品，并对某些家畜产生急性毒性及潜在的致癌性，有报道指出，伏马菌素主要损害肝肾功能，能引起马脑白质软化症和猪肺水肿等，并与我国和南非部分地区高发的食道癌有关，现已引起世界范围的广泛注意。已成为继黄曲霉毒素之后的又一研究热点。月旭科技新推出伏马毒素（B1/B2/B3）免疫亲和柱，适合于和HPLC或LC-MS结合使用，定量检测FB1、FB2和FB3。适用于粮谷、饲料等样本中的伏马毒素净化处理，提高了样品的纯度，纯化后的提取液可用于不同的分析方法测定。 02、原理‍‍净化的基础是抗原抗体反应，伏马毒素单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上，样品中的伏马毒素经过提取、过滤、稀释，然后将样品提取液缓慢通过伏马毒素免疫亲和柱，在免疫亲和柱内，伏马毒素与抗体结合，洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。最后采用甲醇-乙酸洗脱伏马毒素，然后进行相关分析。‍‍‍‍03、净‍‍化步骤1）准确称取20g（精确至0.01g）粉碎的样品；2）先加入50mL样品提取液混合，摇床振荡提取30min，于4000r/min，离心5min，取出上清液于试剂瓶中；3）将底部沉淀部分再加入50mL样品提取液混合，以摇床振荡提取30min，于4000r/min，离心5min，取出上清液，与前面的上清液合并混匀；4）准确移取10mL上清液，加入40mL 1.5%吐温20-PBS稀释，用玻璃微纤维滤纸过滤，至滤液澄清，备用。5）准确移取15mL混匀滤液（相当于0.6g样品）过亲和柱。6）3mL柱管上方堵头直接连接20mL针筒固定后使用（柱管内偶见有小气泡属正常现象，不影响亲和柱的使用）；7）准确移取上述混匀滤液，注入注射器中，调节针筒压力使其以2秒/滴的速度缓慢通过免疫亲和柱；8）先用10mL PBS冲洗柱子，再用3mL水冲洗柱子，弃去流出液，流速1秒/滴，直至2~3mL空气通过柱体，保证柱子内没有残余液体；9）准确加入3.0mL洗脱液洗脱，流速自然重力，直至2~3mL空气通过柱体，保证柱子内没有残余液体。收集全部洗脱液，进行相关测定。（注意：整个纯化过程尽量不要让柱子干燥！）04、色谱条件流动相配置流动相A ：移取0.2mL 甲酸，加水至200mL混匀，经0.22μm滤膜抽滤，即得；流动相B：分别移取200mL色谱级乙腈和甲醇，混匀，经0.22μm滤膜抽滤，即得。质谱条件离子源：ESI；检测方式：MRM；干燥气：氮气，450℃；流速：1000L/Hr；碰撞气：氩气；离子喷雾电压：1.0kV。05、谱图展示06、结果展示【 产品信息 】

#Part 1新老用户 买一送一新客享全线月旭科技品牌产品买1送1老客享年度新品买1送1///// #Part 2自由搭配 买六送一液相分析柱、气相柱、杂质捕集小柱买6款再送1款分析柱可多规格搭配或与气相柱搭配，赠送产品为六款产品中市场jia格Z低的一款。（此项活动仅面向终端客户）/////    #Part 3一众好礼 买满即赠前处理产品、蛋白纯化产品买满zhi定金额即可获赠对应礼品或产品！实付金额每满5000元，zhi定标准品任选两支，免费送！#Part 4试剂买送 火热回归买4箱WelPure® 乙腈高纯试剂送2箱WelPure® 甲醇高纯试剂/////    #Part 5耗材 一口价狂欢cu销期间凡购样品瓶，每单赠送1个样品瓶架，xian量100个（送完即止） QLA溶出耗材全线产品 6折起 一口价cu销同款滤芯购买2000个以上则再送100个同款滤芯；QLA产品订单单笔金额买满20000赠如下沉降篮任选其一：CAPWHT-VK：三叉型沉降篮，适用1-3号胶囊与栓剂；CAPWHT-4S：螺旋型沉降篮，21.3*9.8mm尺寸，5圈缠绕结构；CAPWHT-XLS：螺旋型沉降篮，29.2*11.8mm尺寸，5.5圈缠绕结构；CAPWST-19：弹簧型沉降篮，19.3*7mm尺寸，Z大适用2号胶囊；CAPWST-31：弹簧型沉降篮，31*11mm尺寸，Z大适用000号胶囊；CAPWHT-PC：异型沉降篮，适用于薄片药物；CAPWHT-S99：O型沉降篮，Z大适用0号胶囊。另：QLA产品订单单笔金额买满50000赠药典收录款式沉降篮（CUSBSK-JP） *本活动Z终解释权归月旭科技（上海）股份有限公司所有。

手性色谱柱一般用于手性异构体的分离，除了手性异构体外，在其他同分异构体或结构极为相似的组分的分离上，也有一定的效果。应用实例对氰基氯苄&间氰基氯苄的分离结构如图所示：两种物质为间位与对位异构体，在反相体系上尝试多种不同选择性的色谱柱均无分离趋势，无法分离。最后采用手性色谱柱实现分离。色谱条件色谱柱：Ultimate® Cellu-D 4.6*250mm，5μm。流动相：正己烷/异丙醇=98/2。

在色谱柱使用过程中，会出现柱压高，峰形差等现象，其主要原因是色谱柱填料污染导致的，其中填料板结是填料污染中特殊的一种，下面将对色谱柱填料板结进行原因剖析及解决方案。填料板结的表现色谱柱填料板结，色谱柱打开后会发现，填料颜色不变，但填料成片状、块状、结晶等结块现象。填料板结的原因分析及解决方案1、盐析解决方案：1）不管是新色谱柱或已经使用过的色谱柱，使用含盐的流动相都先使用与流动相组成比例相同但不含盐的溶液进行冲洗置换（避免使用纯水），时间建议30个柱体积以上。2）流动相置换，在方法开发过程中，多数情况会涉及不同缓冲盐体系和不同有机相体系的各种尝试，那么在调整、更换流动相组成的过程中，请务必充分考虑到不同种类缓冲盐的溶解情况。若不确定所使用的缓冲盐和有机相之间的互溶情况，可按照不同比例将二者混合，静置30min，观察底部是否有沉淀或絮状物产生。3）梯度条件，当涉及缓冲盐-有机相梯度条件时，请确认缓冲盐在梯度条件中有机相最高点是否能够充分溶解。当然，不确定的时候也可以和上述方法一样，将缓冲盐和有机相按照梯度最高比例混合后静置，观察是否有沉淀产生。2、流动相配制时间过久，流动相长菌，或乙腈等有机相时间过久产生絮状沉淀。解决方案：流动相按需配制，纯水相流动相一次配制使用不超过12小时。其他含有机相流动相一次使用不超过24小时，也可根据实际情况调整流动相的保质期。3、其他：如胶状，絮状等样品通过过滤无法去除，也会积压在筛板和柱头端，引起柱压升高。解决方案：胶状，絮状样品通过工艺，前处理去除干净后再进液相色谱系统。

亲水作用色谱法（hydrophilic interaction chromatogmaphy，HILIC）可以视为是使用含水-有机流动相的正相色谱法，因此它有时被称为“含水正相色谱法”。亲水作用色谱柱比反相色谱柱的极性更强，以极性很强的水作为B溶剂。增加水的比例会减小样品的保留（与反相色谱法相反）。极性较强和电离的溶质在亲水作用色谱中的保留较强。在大多数的HILIC分离中，流动相中水的比例为3%-40%之间。当水的比例大于40%时，保留一般很弱。固定相常规应用于HILIC色谱的固定相有：纯硅胶柱、氨基柱、酰胺基柱、两性离子柱等。纯硅胶柱有固定相不易流失的优点，在使用CAD、ELSD和LC-MS检测器时，最受欢迎；氨基柱，在HILIC色谱中的应用，特别适合碳水化合物（糖类）分离；两性离子柱，不再需要使用离子对试剂，具有极强的亲水性，能够有效地保留RP-LC中保留弱或不保留的强极性离子型化合物以及碱性药物分子。同样是Silica，NH2，与用于正相色谱中的色谱柱不同，专为HILIC色谱设计的色谱柱，可以用于水-有机物的流动相中，换句话说，HILIC色谱对固定相的耐水性要求更高，否则会因固定相的水解，出现基线噪音大、色谱柱寿命短等问题。所以用于正相色谱中的色谱柱，不一定能用于HILIC色谱。而适用于HILIC色谱的色谱柱，可以用于正相色谱中。HILIC的优点极性溶质在亲水作用色谱里优先被保留，这意味着很多在反相色谱里保留很弱的物质可以轻松地使用亲水作用色谱进行分离。亲水作用色谱有以下几个潜在的优点：●   碱性溶质的峰形良好；●   有助于提高质谱的灵敏度；●   可以直接进样溶解在有机溶剂里的样品；●   因为流动相的黏度较低，可以承受较高的流速。HILIC的常见问题与反相色谱法相比，亲水作用色谱中最常见的问题应该是不理想的峰形（前沿或者拖尾）。这正反映了亲水作用色谱作为一种新的分离方法还没有得到如RPC一样广泛应用的事实。亲水作用色谱可能还在使用A类硅胶作为填料。我们还需要继续改良HILIC色谱柱以及想办法对峰形进行改善。当遇到峰形问题时，第一个尝试的方法应该是增加流动相中缓冲液的浓度。有些样品要求缓冲液浓度高达100mmol/L才能得到比较好的峰形。一般情况下样品应该用流动相溶解，但有时为了改善峰形，可以把溶解样品用的有机溶剂的比例增加。如果峰形还是没有得到改善，那么就可以考虑更换柱子或者调整流动相的pH。流动相中应该一直含有一定量的水，水的比例至少应达到3%-5%。在运行质谱检测的时候，有些键合相柱会发生柱流失的问题。通常的解决办法是改用硅胶柱或者别的键合相的色谱柱。有文献指出，使用亲水作用色谱时，某些样品组分会与硅胶柱产生不可逆的结合，这时可以考虑改用键合相的HILIC柱。

水相流动相的使用，是采用反相色谱法进行离子化合物分析检测的关键步骤：包括pH值对分析物保留的影响、缓冲盐的类型与浓度、缓冲盐在有机溶剂中的溶解度及其对检测的影响等。缓冲盐种类、离子强度和pH值等选择不当，会导致对极性化合物和可电离化合物进行反相分离时，存在不良或不可重现的保留和拖尾现象。分析物部分离子化，分析物与固定相自由硅醇基和其他活性位点之间较强的作用力等问题，可通过选择合适的缓冲范围、正确的缓冲盐种类及其浓度（离子强度）来改善。灵敏的LC-MS分析，更加注重酸、碱、缓冲盐种类和其他添加剂的选择：缓冲液不能抑制分析物的电离。反相模式中，离子化合物的保留主要由流动相pH值来决定。离子官能团的解离性能同样影响化合物的保留。非离子化合物的保留几乎不受流动相pH值的影响。对于含酸性基团的化合物（羧酸盐居多），pH值低于化合物pKa可增强保留，对于含碱性基团的化合物（胺类居多），pH值高于化合物pKa可增强保留。在pH值离pka较远的位置，较小的pH值变化对非质子-质子种类的比例影响很小。因此，中等pH值变化不会对保留产生明显影响。pKa附近pH值的微小变化，会对两种物质的比例产生明显的影响。因此，改变接近pKa的pH值，会明显影响化合物的保留。当pH值作为增加化合物保留的手段时，考虑方向应该是尽量降低分析物的离子化。缓冲液是弱酸与其共轭碱，或弱碱与其共轭酸的溶液。缓冲液降低氢离子、水合氢离子和氢氧根离子的影响，从而较少包括稀释在内的pH值波动。反相模式下，经典的硅胶基质填料的pH值耐受范围是2-8。缓冲液的选择通常由所需的pH值决定。缓冲液的pKa必须接近所需的pH值，因其在pKa处最容易控制pH值。经验法则是选择一个pKa值

新品上市Welchrom® T-2毒素免疫亲和柱是月旭科技推出的前处理专用柱系列之一，T-2毒素免疫亲和柱适合于和HPLC、LC-MS及T-2酶免分析试剂盒结合使用，定量检测T-2毒素。适用于谷物、食品等样本中的T-2毒素净化处理，提高了样品的纯度，纯化后的提取液可用不同的分析方法测定。月旭科技根据《GB 5009.118-2016 食品安全国家标准 食品中T-2毒素的测定》开发出了Welchrom® T-2毒素免疫亲和柱，并利用高效液相色谱法做了全面的验证，在标准条件下，均能满足检测要求。 01 原理 T-2毒素免疫亲和柱测定的基础是抗原抗体反应，抗T-2毒素的单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上，样品中的T-2毒素经过提取、过滤、稀释，然后将样品提取液缓慢通过T-2毒素免疫亲和柱，在免疫亲和柱内，T-2毒素与抗体结合，洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。最后采用甲醇洗脱T-2毒素，然后进行相关分析。 02 净化程序 亲和柱活化→上样→淋洗→洗脱活化：3mL柱管上方堵头直接连接20mL针筒固定后使用，弃去保存液；上样：准确移取上述混匀滤液，注入针筒中，调节针筒压力使其以2秒/滴的速度缓慢通过免疫亲和柱，弃去；淋洗：用20mL水冲洗柱子，流速1秒/滴，弃去流出液，直至2~3mL空气通过柱体，保证柱子内没有残余液体；洗脱：用3mL甲醇洗脱并收集洗脱液于15mL 离心管中。50℃水浴氮气吹干洗脱液。用75%乙腈水溶液定容至1mL，过0.22μm有机滤膜，上机检。 03 色谱条件色谱条件：色谱柱：月旭Boltimate® C18，2.1×100mm，2.7μm。流动相：流动相A：10mmol/L 乙酸铵溶液 流动相B：甲醇；流速：0.2mL/min；柱温：30℃；进样量：2μL；运行梯度：质谱条件：离子源：ESI；检测方式：MRM；干燥气：氮气，450℃，流速：1000L/Hr；碰撞气：氩气；离子喷雾电压：1.0kV。04 色谱图及实际样品测定结果05 结论 Welchrom® T-2毒素免疫亲和柱在《GB 5009.118-2016 食品安全国家标准 食品中T-2毒素的测定》标准下测试，样品加标回收率达到95.7%，满足实验要求。06 产品信息 

01适用范围●适用于牛奶中赛拉嗪残留量的定性、定量检测。（本实验样品采用牛奶）参考标准：《GB-31659.1-2021食品安全国家标准 牛奶中赛拉嗪残留量的测定 液相色谱－串联质谱法》02提取步骤●称取试料2g（准确至±0.02g），加乙腈8mL，涡旋混合20s，振荡提取5min，5℃下8000r/min离心5min，取上清液于10mL离心管，40℃水浴氮气流下浓缩至小于2mL，加0.5%氨水溶液4mL，涡旋混合，备用。03SPE净化步骤●SPE柱：月旭Welchrom® BRP，规格：60mg/3mL。活化：3mL甲醇、3mL水、3mL 0.5%氨水溶液弃去；上样：取备用液全部过柱，弃去；淋洗：3mL水，抽干；洗脱：3mL 2%甲酸甲醇溶液洗脱，压干并收集于离心管中；复溶：将洗脱液于40℃水浴中氮气吹干，残余物中加入20%乙腈溶液0.5mL，涡旋后超声溶解5min，过0.22μm滤膜，供液相色谱-串联质谱仪测定。04色谱条件●UPLC条件色谱柱：Ultimate® UHPLC XB-C18，1.8μm，2.1×50mm。流动相：A: 0.1%甲酸溶液；B: 0.1%甲酸乙腈溶液；柱温：30℃；流速：0.3mL/min；进样体积：2µL；梯度洗脱程序：见表1质谱条件离子源：电喷雾离子源（ESI）；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测（MRM）模式；离子喷雾电压：5500V；离子源温度：500℃；气帘气（CUR）10psi；雾化气（GS1）55psi；辅助气（GS2）50psi。其他质谱参数：见表205色谱图或者加标回收率结果●06相关产品信息●

所谓药典方法，顾名思义，药典专论所收载的方法。在参考药典方法进行色谱分析与方法开发过程中，因实验室条件不同导致完全按照药典方法无法进行可靠的分析。我们应了解到：药典方法考虑到各个实验室的差异，有一定的可调范围。下面我们具体来探讨一下这个问题吧!01中国药典2020规定0512高效液相色谱法规定如下：品种正文项下规定的色谱条件（参数）除填充剂种类、流动相组分、检测器类型不得改变外，其余如色谱柱内径与长度、填充剂粒径、流动相流速、流动相组分比例、柱温、进样量、检测器灵敏度等，均可适当改变，以达到系统适用性试验的要求。调整流动相组分比例时：当小比例组分的百分比例X小于33%时，允许改变范围为0.7X〜1.3X；当X大于33%时，允许改变范围为X—10%〜X+10%。由上文可知，中国药典专论方法除填充剂种类、流动相组分（比例调整在规定范围内）、检测器类型不得改变外，其他条件改变了，还是认为是药典方法。但中国药典没有规定方法确认之说，所以，即使是中国药典方法，也是应该按分析方法验证的相关规定进行全套的方法验证。02美国药典规定USP43CHROMATOGRAPHY规定如下：为符合系统适用性的要求而调整的操作条件是允许的，除非专论项下另有规定。下述为所列的最大的可调范围，应该按分析方法验证的相关规定进行全套的方法验证。多条件的调整，将对系统性能产生累积影响，实施前需仔细考虑。01流动相缓冲液的pH（HPLC）：±0.2单位以内或规定范围以内调节，适用梯度及等度。02流动相缓冲液盐浓度（HPLC）：±10%（pH允许情况下），适用梯度及等度。03流动相中组分比例（HPLC）：组分比例≤50%的组分可以相对调节±30%，但是任意一组分比例的调节不应超过±10%（相对于总的流动相），含三组分的流动相的调节可以分组分进行，含双组分的流动相的调节可在最小的组分进行。双组分调节实例：例如流动相50：50，其中一组分50%的30%是15%，但是它超过了占总体比例±10%的规定，所以这个流动相比例的调节范围应以±10%为限，可以在不超过40：60~60：40的范围之间调节。再例如流动相比例为2:98，其中小组分2%的30%是0.6%，这个值不超过占总体比例±10%的规定，此流动相的比例可以在不超过1.4：98.6~2.6：97.4的范围之间调节。三组分调节实例：流动相60：35：5，它的次组分35%的30%是10.5%，但是它超过了占总体比例±10%的规定，所以这个流动相比例中的次组分的调节范围应以±10%为限。对于最小组分5%的30%是1.5%。可以在不超过50：45：5~70：25：5或58.5：35：6.5~61.5：35：3.5的范围之间调节。04紫外检测器的波长（HPLC）：专论中规定的检测波长不允许改变，检测器供应商的程序或另一个验证程序来说明，波长检测误差，最多不得超过±3nm。05固定相：色谱柱长度（GC）：可以在±70%范围内调节。色谱柱长度（HPLC）：见粒径项下。色谱柱内径（HPLC）：如果线速度保持恒定，可以调整。见HPLC流速。色谱柱内径（GC）：最大可调整至±50%。膜厚（毛细管柱GC）：最大可在−50%至100%调整。06粒径(HPLC)：等度洗脱：粒径和柱长均可以修改，但柱长（L）与粒径（dp）的比值（L/dp）恒定或在规定柱长与粒径的比值的-25%~+50%范围内。或者（对于将粒度调节应用于表面多孔颗粒时），其它柱长（L）和粒度（dp）的柱子可以使用，但理论塔板数（N）应在规定柱的-25%~+50%范围内。如果调节导致更高的理论塔板数时应注意，这样将产生更小的峰体积，应通过缩小额外柱外峰拓宽的因素调整，例如仪器的管路、检测池的体积、采样速率和进样体积。当专论中未规定粒度时，该比值应采用规定柱的最大粒度计算。粒径(GC)：如果色谱图的符合系统适用性要求以及粒径范围比相同，粒度大小可以从大变小或从小变大，粒径范围比的定义是最大粒度直径除以最小粒度直径。07流速（GC）：流速可以最大在±50%调整。流速(HPLC)：当粒度改变时，流速也许需要调整，因为为达到相同的性能，小粒度的柱子需要更高的线速度（测量通过较少塔板高度），流速、柱内径、粒度通过下面公式换算。F2=F1×[（dc22×dp1）/（dc12×dp2）]对于等度洗脱，如果粒度从≥3μm变化到＜3μm时，将增加线速度（通过调整流速），使柱效不下跌20%以上，相同地，如果粒度从＜3μm变化到≥3μm时，应减少线速度（流速）来避免柱效降低20%以上。梯度洗脱时，流速、柱内径、粒度将不允许调整。另外，流速可以在±50%调整（只适用于等度洗脱）。

1有机酸的性质有机酸是指一些有酸性的有机化合物。最常见的有机酸是羧酸，其酸性源于羧基（-COOH）。磺酸（-SO3H）、亚磺酸（RSOOH）、硫羧酸（RCOSH）等也属于有机酸。有机酸多溶于水或乙醇，难溶于其他有机溶剂。2拖尾原因部分有机酸在C18柱上的保留和分离能力非常的弱，因此需要使用离子作用力对化合物进行分离，但是液相质谱的流动相体系中因无法加入不挥发性盐，且挥发性离子对试剂（如三氟乙酸等）也会降低质谱响应，无法达到定量限要求，所以两性离子柱HILIC-Amphion II就成为了很好的选择。图1、L-谷氨酸拖尾峰但是在测试中发现目标物会出现严重的拖尾现象，调解pH后依然非常严重，通过取下色谱柱改用两通后发现目标物4（L-谷氨酸）与其他目标物比多了些保留时间，且拖尾依然严重，推断液相体系可能污染（之前测试项目流动相体系中含有三氟乙酸，可能发生残留），导致了严重的拖尾。步骤1取下色谱柱，换上两通；步骤2取下所有流动相瓶，更换为0.1%甲酸水溶液，以0.3mL/min流速冲洗2h；步骤3将0.1%甲酸水溶液更换为0.1%氨水溶液，以0.3mL/min流速冲洗2h；步骤4将0.1%氨水溶液更换为水溶液，以0.3mL/min流速冲洗2h；步骤5将水溶液更换为甲醇溶液，以0.3mL/min清洗2h。注：清洗期间，液相不连接质谱；如果液相体系中还存在其他污染源且按上述清洗效果依然不满意的情况，可在甲醇清洗后用异丙醇进行冲洗，再用甲醇更换体系中的异丙醇溶液。讨论：多数情况下，当我们发现峰拖尾时，考虑的更多的是液相方法或者色谱柱的问题，很少会去排除液相系统中的污染问题，希望这个案例能给大家在遇到峰拖尾又排查不出原因时，提供一个思路。

1适用范围●本标准规定了啤酒、葡萄酒、黄酒、白酒等酒类以及酱油中氨基甲酸乙酯含量的气相色谱-质谱法 测定。本标准适用于啤酒、葡萄酒、黄酒、白酒等酒类以及酱油中氨基甲酸乙酯含量的测定。参考标准：《GB 5009·223-2014 食品中氨基甲酸乙酯的测定》2试样制备●样品摇匀，称取2g（精确至0.001g）酱油样品，加100.0μL 1.0μg/mL氨基甲酸乙酯工作液、氯化钠0.3g，超声溶解、混匀。3SPE净化步骤净化●SPE柱：Welchrom® Celite AZO，规格：2g/12mL；     上样：试样液全部上样，静置10min；淋洗：10mL正己烷，弃去；洗脱：15mL 5%乙酸乙酯-乙醚溶液，压干，接收。洗脱液经装有2g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水后，收集于15mL刻度试管中，室温下用氮气缓缓吹至约0.5mL，用甲醇定容至1.0mL制成测定液，供GC/MS分析。4注意事项●加标水平：在2.0g试样中加入100μL 1μg/mL氨基甲酸乙酯工作液，加标水平0.05mg/kg，机读数为0.1μg/mL。5色谱条件●●  气相色谱条件色谱柱：WM-InoWAX，30m×0.25mm×0.25μm 。进样口温度：250℃；升温程序：50℃，保持1min，以8℃/min升温至180℃，再以240℃/min后运行5min；载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；进样方式：不分流进样；恒流模式：1.0mL/min；进样量：1μL。●  质谱条件电离方式：电子轰击电离源（EI）；电离能量：70eV；传输线温度：250℃；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；监测方式：氨基甲酸乙酯选择监测离子：44、62、74、89，定量离子62；溶剂延迟：8min。6色谱图及加标回收率结果●7相关产品信息●

相信很多小伙伴都遇到过这类情况，色谱柱使用一段时间后相邻色谱峰分离度变差，峰形也变宽，或者在做方法开发时，目标物分离度不好。导致这类情况的原因有哪些？遇到问题后该如何排查？今天就和小伙伴们讨论交流一下。在液相色谱中，分离度Rs是色谱分离之中最重要的部分，不管色谱最终的目的是定量定性分析还是样品制备，都是在一定的分离度基础上来实现的。分离度计算公式如下：其中，Rs表示分离度，tR2表示相邻峰中后一个峰的保留时间，tR1表示相邻峰中前一个峰的保留时间，W1和W2是两个峰在基线处的峰宽W。色谱峰的保留时间相差越大，或者峰形越窄，就能得到更好的分离结果（分离度增加）。对于色谱分离来说，基线分离有助于获得准确的定量分析结果。两个大小接近的色谱峰，基线分离对应Rs>1.5。“造成分离度下降的主要原因有哪些？从分离度的计算公式可以看出，造成分离度下降最直观的原因有：峰形变宽、拖尾或前延，保留时间发生变化。所以，导致分离度降低的主要原因有：1. 色谱柱使用时间太长，柱效下降了；2. 色谱柱或者保护柱或者系统有污染；3. 样品被污染变质，导致峰形变宽、拖尾或前延，或出现杂峰干扰；4. 仪器柱外死体积过大（管路太长，管路内径太大，检测器流通池体积过大等），导致柱效降低，峰形变宽；5. 柱温的影响。“分离度降低了，该如何解决？如果是在日常实验中，碰到分离度降低的情况，首先要排查色谱柱（包括保护柱）是否有污染或者失效，对其进行清洗或更换；其次是要排查样品污染的问题，重新配制样品进行分析；最后排查系统污染和流动相污染的问题，清洗仪器管路，更换在线过滤器并更换流动相。排除上述几种可能性，基本就能解决分离度降低的问题。如果在方法开发过程中遇到分离度低的情形时，影响因素就有很多了，比如色谱柱类型、填料粒径、有机相的种类和比例、缓冲盐的类型和浓度、柱温、色谱柱的长度等。具体的影响以后会再和大家一一讨论。

1适用范围●本标准规定了啤酒、葡萄酒、黄酒、白酒等酒类以及酱油中氨基甲酸乙酯含量的气相色谱-质谱法 测定。本标准适用于啤酒、葡萄酒、黄酒、白酒等酒类以及酱油中氨基甲酸乙酯含量的测定。参考标准：《GB 5009·223-2014 食品中氨基甲酸乙酯的测定》。2试样制备●样品摇匀，称取2g（精确至0.001g）红酒样品，加100.0μL 1.0μg/mL氨基甲酸乙酯工作液、氯化钠0.3g，超声溶解、混匀。3SPE净化步骤净化●SPE柱：Welchrom® Celite AZO，规格：2g/12mL；     上样：试样液全部上样，静置10min；淋洗：10mL正己烷，弃去；洗脱：15mL 5%乙酸乙酯-乙醚溶液，压干，接收。洗脱液经装有2g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水后，收集于15mL刻度试管中，室温下用氮气缓缓吹至约0.5mL，用甲醇定容至1.0mL制成测定液，供 GC/MS分析。4注意事项●加标水平：在2.0g试样中加入100μL 1μg/mL氨基甲酸乙酯工作液，加标水平0.05mg/kg，机读数为0.1μg/mL。5色谱条件●●  气相色谱条件色谱柱：WM-InoWAX，30m×0.25mm×0.25μm 。进样口温度：250℃；升温程序：50℃，保持1min，以8℃/min升温至180℃，再以240℃/min后运行5min；载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；进样方式：不分流进样；恒流模式：1.0mL/min；进样量：1μL。●  质谱条件电离方式：电子轰击电离源（EI）；电离能量：70eV；传输线温度：250℃；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；监测方式：氨基甲酸乙酯选择监测离子：44、62、74、89，定量离子62；溶剂延迟：8min。6色谱图及加标回收率结果●7相关产品信息●

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01适用范围●本标准规定了啤酒、葡萄酒、黄酒、白酒等酒类以及酱油中氨基甲酸乙酯含量的气相色谱-质谱法 测定。本标准适用于啤酒、葡萄酒、黄酒、白酒等酒类以及酱油中氨基甲酸乙酯含量的测定。参考标准：《GB 5009·223-2014 食品中氨基甲酸乙酯的测定》02试样制备●样品摇匀，称取2g（精确至0.001g）白酒样品，加100.0μL 1.0μg/mL氨基甲酸乙酯工作液、氯化钠0.3g，超声溶解、混匀。03SPE净化步骤●SPE柱：Welchrom® Celite AZO， 规格：2g/12mL ；         上样：试样液全部上样，静置10min；淋洗：10mL正己烷，弃去；洗脱：15mL 5%乙酸乙酯-乙醚溶液，压干，接收。洗脱液经装有2g无水硫酸钠的玻璃漏斗脱水后，收集于15mL刻度试管中，室温下用氮气缓缓吹至约，0.5mL，用甲醇定容至1.0mL制成测定液，供GC/Ms分析。04色谱条件●气相色谱条件色谱柱： WM-InoWAX，30m×0.25mm×0.25μm。进样口温度：250℃；升温程序：50℃，保持1min，以8℃/min升温至180℃，再以240℃/min后运行5min；载气：高纯氦气（纯度>99.999%）；进样方式：不分流进样；恒流模式：1.0mL/min；进样量：1μL。质谱条件电离方式：电子轰击电离源（EI）；电离能量：70eV；传输线温度：250℃；离子源温度：230℃；四极杆温度：150℃；监测方式：氨基甲酸乙酯选择监测离子：44、62、74、89，定量离子62；溶剂延迟：8min。05色谱图或者加标回收率结果●06相关产品信息●

上一期《色谱法中常用定量方法分享》中小编给大家简单介绍了色谱柱法中定量的方法，本期就简单给大家介绍一下色谱法中的定性分析。众所周知，色谱定性分析就是要确定各色谱峰所代表的化合物。由于各种物质在一定的色谱条件下均有确定的保留值，因此保留值可作为一种定性指标。各种色谱定性方法都是基于保留值的。但是不同物质在同一色谱条件下，可能具有相似或相同的保留值，即保留值并非专属的。因此仅根据保留值对一个完全未知的样品定性是困难的。如果在了解样品的来源、性质、分析目的的基础上，对样品组成作初步的判断，再结合下列的方法则可确定色谱峰所代表的化合物。色谱法中定性方法多种多样，今天就由小编给大家简单分享一下色谱法中常用的几种定性方法。01标准样品定性利用标准样品对未知化合物定性是较常用的高效液相色谱定性方法。由于每一种化合物在特定的色谱条件下（流动相组成、色谱柱和柱温等相同），其保留值具有特征性，因此，可以利用保留值进行定性。如果在相同的色谱条件下，被测化合物与标准样品的保留值一致，可以初步认为被测化合物与标准样品相同。若流动相组成经多次改变后，被测化合物的保留值仍与标准样品的保留值一致，就能进一步证实被测化合物与标准样品为同一化合物。02紫外检测器全波长扫描功能定性紫外检测器是高效液相色谱中使用最广泛的一种检测器。全波长扫描紫外检测器可以根据被检测化合物的紫外光谱图提供一些有价值的定性信息。传统的方法是在色谱图上某组分的色谱峰出现极大值，即浓度最大时，通过停泵等手段，使组分在检测池中滞留，然后对检测池中的组分进行全波长扫描，得到该组分的紫外可见光谱图，再取可能的标准样品按同样方法处理。对比两者光谱图即能鉴别出该组分与标准样品是否相同。某些有特殊紫外光谱图的化合物也可以通过对照标准谱图来识别。03检测器的选择性定性同一种检测器对不同种类的化合物的响应值是不同的，而不同的检测器对同一种化合物的响应也是不同的。所以当某一被测化合物同被两种或两种以上检测器检测时，两检测器或几个检测器对被测化合物检测灵敏度比值与被测化合物的性质是密切相关的，可以用来对被测化合物进行定性。这是双检测器定性的基本原理。双检测器体系的联接有串联联接和并联联接方式。当两种检测器中的一种是非破坏型的，可以采用简单的串联联接方式，方法是将非破坏型检测器串接在破坏型检测器之前。若两种检测器都是破坏型的，需采用并联方式联接，方法是在色谱柱的出口端连接一个三通，分别联接到两个检测器上。在高效液相色谱中最常用于定性分析的双检测体系是紫外检测器（UVD）和荧光检测器（FLD）。04脱机分析定性如果使用半制备或者制备模式,收集HPLC流出液中的部分液体样品，这样就能收集到一定量的纯净分析物，用来做脱机的结构确定分析实验。因为可用的样品量较大，因此在线分析的时间范围限制就不存在了,脱机的结构分析常常能为一个收集到的色谱峰提供确凿的结构信息。脱机分析包括传统的FTR、NMR和质谱等分析方法；只要有足够多的样品,我们还可以用湿化学试验、X射线晶体学或者其他分析技术对样品进脱机分析。

什么是前沿峰前沿峰又称前伸峰、伸舌头峰。前沿平缓，后沿陡峭的不对称色谱峰称前沿峰。判断范围：当色谱峰的对称因子在0.95~1.05为正常峰；小于0.95为前沿峰；大于1.05为拖尾峰。一般情况下，0.9~1.2的色谱峰均可被接受。造成前沿峰的原因气相色谱中前沿峰产生的原因有以下几个方面：1、柱超载：减少进样量或者更换载样量更大的色谱柱。2、两个化合物共洗脱：可以提高灵敏度和减少进样量，使温度降低10~20度，以使峰分开。3、样品冷凝：检查进样口和柱温，如有必要可升温。4、样品分解：采用失活化进样器衬管或调低进样器温度。一般情况下，单纯的前沿峰都可以通过减少进样量或者更换载样量更大的色谱柱来解决。应用案例：丙二醇中乙二醇的测定色谱条件1色谱柱：月旭WM-624 （30m×0.32mm，0.25μm)（货号：03908-32001）。柱温：初始温度120℃维持4min，以8℃/min升至140℃维持10min，以8℃/min升至220℃维持10min；；进样口：230℃；；检测器：FID 250℃；载气：氮气；进样量：1μL；分流比：10-1；柱流速：1mL/min；氢空比例：32：200。色谱图：乙二醇结论：峰形前沿，样品浓度过高，色谱柱过载，更换载样量更大的色谱柱。色谱条件2：色谱柱：月旭WM-624 （30m×0.53mm，3.0μm)（货号：03908-52006）。柱温：初始温度120℃维持4min，以8℃/min升至140℃维持10min，以8℃/min升至220℃维持10min；进样口：230℃；检测器：FID 250℃；载气：氮气；进样量：1μL；分流比：10-1；柱流速：4mL/min；氢空比例：32：200。色谱图：乙二醇结论：通过更换色谱柱有效改善了乙二醇的峰形，结果可满足《中国药典2020版》中相关要求。相关产品信息：拖尾峰：进样口和色谱柱发生污染，需对气相进样口进行清洗和维护，比如更换或清洗衬管；通过对色谱柱老化出去污染物，或者从柱进口端截去1-2圈，再重新安装。平顶峰：可以通过减小进样量、升高载气流速和柱温来进行解决。当信号放大器输入饱和、色谱柱过载时会形成平顶峰。

01适用范围●适用于鱼、虾、蟹、鳖及海参等水产品可食组织中土霉素、四环素、金霉素和多西环素残留量的测定。（本实验样品采用鳜鱼）参考标准：《GB-31656.11-2021食品安全国家标准 水产品中土霉素、四环素、金霉素和多西环素残留量的测定 方法二》02提取步骤●取试样2g（准确至±0.02g），加Na2EDTA-Mcllvaine缓冲液6.0mL、醋酸铅溶液2.0mL，涡旋1min，超声10min后，在4℃下以8000r/min离心5min，移取上清液，残渣分别用Na2EDTA-Mcllvaine缓冲液6.0mL，重复提取两次，合并3次提取液。03SPE净化步骤●向上述提取液中加入正己烷10mL，涡旋1min后，8000r/min的速率离心5min，去除上层液，下层溶液待进一步净化（对于鳗鲡、蟹和海参样品，需按照上述方法净化两次）。SPE柱：月旭Welchrom® BRP，规格：60mg/3mL。活化：5mL甲醇、5mL水，弃去；上样：取10.0mL提取液上样，控制流速约1mL/min，弃去；淋洗：5mL水，5mL 甲醇溶液，抽干；洗脱：5mL甲醇-乙酸乙酯洗脱，压干并收集于离心管中；复溶：将收集液体于40℃水浴氮气吹至近干，用甲酸溶液（0.1%）-乙腈1.0mL溶解残余物，涡旋混匀，过0.22μm滤膜，为防止药物变性，需及时供液相色谱-质谱仪测定。04色谱条件●UPLC条件色谱柱：Ultimate® UHPLC XB-C18, 5μm, 2.1×150mm。流动相：A: 0.1%甲酸水溶液；B: 乙腈；柱温：35℃；流速：0.2mL/min；进样体积：2µL；梯度洗脱程序：见表1质谱条件离子源：电喷雾离子源（ESI）；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测（MRM）模式；离子喷雾电压：5500V；离子源温度：500℃；气帘气（CUR）10psi；雾化气（GS1）55psi；辅助气（GS2）50psi。其他质谱参数：见表205色谱图或者加标回收率结果●06相关产品信息●

之前我们也向大家详细介绍了关于月旭科技37种脂肪酸专用柱的测试方法，通过优化方法可以在50分钟内完美分离37种脂肪酸甲酯，大大缩短分析时间，提高工作效率。详见：《食品中37种脂肪酸分离的小秘密，你知道吗?》。近期有小伙伴想了解下这个柱子相关信息和使用注意事项，下面就由小编简单和大家介绍一下。01色谱柱相关介绍名称规格：WM-CN100，100m*0.25mm*0.2μm。最高使用温度：240/250℃；货号：07965-25011。02适用范围适用于食品中37种脂肪酸含量的测定。参考标准：《GB 5009.168-2016食品安全国家标准 食品中脂肪酸的测定》。03优化后色谱条件色谱柱：月旭Welchrom® WM-CN100（100m*0.25mm，0.2μm）。柱温箱：0-6min：140℃，然后以4℃/min升温至240℃，并在240℃维持20min；进样器：260℃；检测器：260℃；柱前压：36.5psi；分流比：30:1；进样量：1μL。04色谱图05使用注意事项① 当柱箱温度高于室温时，载气中少量氧会损坏色谱柱内的固定相，尽量选用高纯钢瓶载气，载气必须采用脱氧管进一步脱氧（建议所用载气中氧气含量不要超过1ppm） ；② 安装完色谱柱后，不要升温（进样口、检测器、柱箱都不要升温），要先通至少1h的载气，将柱内的空气置换干净后再升温；③ 进样溶液应使用适宜的滤头过滤，避免堵塞柱子；④ 该色谱柱为强极性柱子，不能进水，避免有水进入色谱柱；⑤ 请在不做分析时将柱温降到100℃以下，可延长色谱柱使用寿命；⑥ 待仪器降温后方可关闭仪器，防止样品残留在色谱柱中冷凝造成堵塞；⑦ 若柱子长时间不使用时，从仪器中取出色谱柱后，使用堵头将色谱柱两端堵上，防止空气进入氧化污染柱子；⑧ 老化方法：老化时保持通气，初次老化时，先50℃保持30min，然后以2℃/min程序升温，温度升到210℃老化至少1-2h，并观察基线至平稳即可（有条件就多老化一会，注意观察基线，至少1-2h）。以上月旭科技37种脂肪酸专用柱的相关介绍。此外，月旭科技多年专注于气相色谱柱的研发和生产，具有高惰性、低流失、高柱效和长寿命等优点。并已推出22种有机氯、白酒成分分析、TVOC分析等热门毛细管气相柱，凭借优异的产品性能和完善的售后服务体系，公司的气相色谱柱已经广泛应用于各大高校、科研院所、制药、石油化工、酿造、环境保护等各行各业。

最近大家都在忙什么？想必很多小伙伴都在忙着“羊了个羊”通关，小编试了几次，游戏虽然好玩，但也不能熬夜玩，网上很多通宵熬夜通关的小伙伴，长此下去，会影响睡眠，不如放下手机，跟着小编来了解一下安神助眠的酸枣仁检测吧，休息一下大脑。“安神的药材有哪些呢？中药中有很多具有镇静安神功效的药物，总体上分为几类：1、重镇安神的药物，主要有朱砂、琥珀、磁石、龙骨等；2、养心安神的中药，主要有茯神、茯苓、元肉、酸枣仁、远志等；3、解郁安神的药物，比如合欢皮、合欢花、玫瑰花、柴胡等药物。在具体使用这些镇静安神的药物时需要根据身体的情况，适当的配伍养血、清热、疏肝、补肾、补血等药物进行调理。如果是心血不足引起的失眠可以配伍当归、川芎、熟地、阿胶等药物，效果会更好。我们比较熟悉的就是酸枣仁了，可以直接买中药饮片捣碎泡水或煮水，也可以购买复方的药品，购买之前，请遵医嘱哦。那么问题来了，你买的药材安全吗？酸枣仁，为鼠李科植物酸枣的干燥成熟种子。具有养心补肝，宁心安神，敛汗，生津之功效。常用于虚烦不眠，惊悸多梦，体虚多汗，津伤口渴。如何选到合格品质好的酸枣仁呢？需要关注以下检测项目。01 农残检测关注我们方法来源：药典四部  2341通则  农药残留量测定法。配置标准溶液，样品提取，使用Welchrom®Carb/NH2，规格：500mg/500mg/6mL；样品净化完后，用GC-MS检测，色谱图结果如下：02 黄曲霉毒素检测关注我们方法来源：药典一部色谱柱: 月旭Ultimate® ODS-3（4.6×300mm，5μm）。流动相：甲醇：乙腈：水=300：220：480；柱温: 30℃；检测波长：激发波长360nm，发射波长450nm；衍生方法：光化学衍生；流速：0.8mL/min；进样量: 25μL。由于黄曲霉毒素G1和B1具有荧光淬灭效应，所以本方法使用了光化学衍生。Welview是月旭科技自主研发的新一代高效能光化学衍生器，具有独特的超长寿命双灯管设计，友好的人机交互模式，LCD显示屏，蜂鸣报警，错误信息提示应有尽有，更长更细的衍生管提高衍生效果的同时，保证峰形更优。WelView光化学衍生器可将黄曲霉毒素G1、B1检测效果分别提高8.88与6.84倍，大大提高了检测的灵敏度。03 含量检测关注我们方法来源：药典一部色谱柱: 月旭Ultimate® ODS-3（4.6x250mm，5μm）。流动相:检测波长: 335nm；柱温: 25℃；流速: 1.0mL/min；进样量: 10μL。“长期睡眠不足的危害？经常睡眠不足对人体会产生很多危害，其中主要表现为以下几个方面：第一，神经衰弱。睡眠不足，患者会表现为白天昏昏欲睡，注意力不能集中，记忆力减退，对工作的效率降低，长期以往会造成神经衰弱。此外，还会影响人体的判断能力，语言连贯能力还有很多患者可能会合并焦虑症、抑郁症。第二，睡眠不足影响人体内分泌和许多生物代谢的过程。导致糖和脂肪代谢紊乱，大脑皮质功能紊乱以及自主神经功能失调，引发糖尿病、高血压等疾病。第三，睡眠不足的患者，抵抗力会下降，容易感冒，甚至容易产生恶性疾病。第四，皮肤衰老加速。睡眠不足的患者，身体会释放出更多的皮质醇。过量的皮质醇，会使皮肤中的胶原蛋白加速分解，影响皮肤的弹性和光泽。好了，小编写到这里，小伙伴就看到这里吧，放下手机，快快休息一下，保护视力，同时也让大脑休息一下。