色谱法中常用定性方法分享（二）

上一期《色谱法中常用定量方法分享》中小编给大家简单介绍了色谱柱法中定量的方法，本期就简单给大家介绍一下色谱法中的定性分析。

众所周知，色谱定性分析就是要确定各色谱峰所代表的化合物。由于各种物质在一定的色谱条件下均有确定的保留值，因此保留值可作为一种定性指标。各种色谱定性方法都是基于保留值的。但是不同物质在同一色谱条件下，可能具有相似或相同的保留值，即保留值并非专属的。因此仅根据保留值对一个完全未知的样品定性是困难的。如果在了解样品的来源、性质、分析目的的基础上，对样品组成作初步的判断，再结合下列的方法则可确定色谱峰所代表的化合物。

色谱法中定性方法多种多样，今天就由小编给大家简单分享一下色谱法中常用的几种定性方法。

利用标准样品对未知化合物定性是较常用的高效液相色谱定性方法。由于每一种化合物在特定的色谱条件下（流动相组成、色谱柱和柱温等相同），其保留值具有特征性，因此，可以利用保留值进行定性。如果在相同的色谱条件下，被测化合物与标准样品的保留值一致，可以初步认为被测化合物与标准样品相同。若流动相组成经多次改变后，被测化合物的保留值仍与标准样品的保留值一致，就能进一步证实被测化合物与标准样品为同一化合物。

紫外检测器是高效液相色谱中使用最广泛的一种检测器。全波长扫描紫外检测器可以根据被检测化合物的紫外光谱图提供一些有价值的定性信息。传统的方法是在色谱图上某组分的色谱峰出现极大值，即浓度最大时，通过停泵等手段，使组分在检测池中滞留，然后对检测池中的组分进行全波长扫描，得到该组分的紫外可见光谱图，再取可能的标准样品按同样方法处理。对比两者光谱图即能鉴别出该组分与标准样品是否相同。某些有特殊紫外光谱图的化合物也可以通过对照标准谱图来识别。

同一种检测器对不同种类的化合物的响应值是不同的，而不同的检测器对同一种化合物的响应也是不同的。所以当某一被测化合物同被两种或两种以上检测器检测时，两检测器或几个检测器对被测化合物检测灵敏度比值与被测化合物的性质是密切相关的，可以用来对被测化合物进行定性。这是双检测器定性的基本原理。

双检测器体系的联接有串联联接和并联联接方式。当两种检测器中的一种是非破坏型的，可以采用简单的串联联接方式，方法是将非破坏型检测器串接在破坏型检测器之前。若两种检测器都是破坏型的，需采用并联方式联接，方法是在色谱柱的出口端连接一个三通，分别联接到两个检测器上。在高效液相色谱中最常用于定性分析的双检测体系是紫外检测器（UVD）和荧光检测器（FLD）。

如果使用半制备或者制备模式,收集HPLC流出液中的部分液体样品，这样就能收集到一定量的纯净分析物，用来做脱机的结构确定分析实验。因为可用的样品量较大，因此在线分析的时间范围限制就不存在了,脱机的结构分析常常能为一个收集到的色谱峰提供确凿的结构信息。脱机分析包括传统的FTR、NMR和质谱等分析方法；只要有足够多的样品,我们还可以用湿化学试验、X射线晶体学或者其他分析技术对样品进脱机分析。