小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒操作步骤 操作步骤： 1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉，再各取50μl 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为240pg/ml，160pg/ml ，80pg/ml L，40pg/ml ， 20pg/ml）。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4. 配液：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T 的20 倍）倍稀释后备用。 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟. 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450n波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。 ELISA 试剂盒组成： 试剂盒组成48 孔配置96 孔配置保存 说明书1 份1 份 封板膜2 片（48） 2 片（96） 密封袋1 个1 个 酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：360pg/ml 0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存 标准品稀释液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存 酶标试剂3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 样品稀释液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 终止液3ml×1 瓶6ml×1 瓶2-8℃保存 浓缩洗涤液（20ml×20 倍）×1 瓶（20ml×30 倍）×1 瓶2-8℃保存 检测范围： 5pg/ml - 300pg/ml 保存条件及有效期： 1.试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6 个月 试剂盒性能： 1.样品线性回归与预期浓度相关系数R 值为0.95 以上。 2.批内与批间应分别小于9%和11%

黑色素染色液(硫酸亚铁法)染色步骤及注意事项 操作步骤(仅供参考)： 1、固定：福尔马林是最好的固定液。 2、将实验切片及对照切片入蒸馏水清洗。 3、入硫酸亚铁溶液浸染1h。 4、蒸馏水洗5～6 次。 5、入酸性铁氰化钾溶液浸染30min。 6、蒸馏水洗3～4 次。 7、入核固红染色液，复染核2～5min。 8、蒸馏水冲洗2 次。 9、脱水、透明、合成树脂封固。 注意事项： 1、该染色方法是黑色素特有的，具有很好的鉴别诊断作用。 2、应当避免使用铬酸盐和氧化汞等固定液。 3、此方法不能使三价铁和脂褐素染色。 4、核固红复染时，应根据具体切片摸索染色时间。 5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期： 6 个月有效。

小鼠糖缺失性转铁蛋白(CDT)ELISA试剂盒实验方案 实验步骤： 1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉，再各取50μl 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为6000 pg/ml，4000 pg/ml ，2000pg/ml，1000pg/ml，500pg/ml）。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4. 配液：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T 的20 倍）倍稀释后备用。 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟. 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。 注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 试剂盒性能： 1.样品线性回归与预期浓度相关系数R 值为0.95 以上。 2.批内与批见应分别小于9%和11% 检测范围： 500 pg/mL -12000 pg/mL 保存条件及有效期： 1.试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6 个月

人脑钠素(BNP)ELISA试剂盒实验步骤 1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉，再各取50μl 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为6000 pg/ml，4000 pg/ml ，2000pg/ml，1000pg/ml，500pg/ml）。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4. 配液：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T 的20 倍）倍稀释后备用。 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟. 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。 注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

兔白细胞介素6(IL-6)试剂盒含量测定方法 注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 试剂盒性能： 1.样品线性回归与预期浓度相关系数R 值为0.95 以上。 2.批内与批间应分别小于9%和11% 检测范围： 5ng/L -100ng/L 保存条件及有效期： 1.试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6 个月

大鼠蛋白激酶G(PKG)ELISA试剂盒测活性实验方法 操作步骤： 1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同） 2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀， 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4.配液：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml 后备用 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7.温育：操作同3。 8.洗涤：操作同5。 9.显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟 10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

猪脑心肌炎病毒抗体(EMCV-Ab)试剂盒定性实验方法 操作步骤： 1.编号：将样品对应微孔按序编号，每板应设阴性对照2 孔、阳性对照2 孔、空白对照1孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同） 2.加样：分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀， 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4.配液：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml 后备用 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7.温育：操作同3。 8.洗涤：操作同5。 9.显色：每孔先加入显色剂A 50μl，再加入显色剂B 50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟 10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。 结果判定： 试验有效性：阳性对照孔平均值≥1.00; 阴性对照平均值≤0.10 临界值（CUT OFF）计算：临界值=阴性对照孔平均值+0.15 阴性判定：样品OD 值< 临界值（CUT OFF）者为猪脑心肌炎病毒抗体(EMCV-Ab)阴性 阳性判定：样品OD 值≥ 临界值（CUT OFF）者为猪脑心肌炎病毒抗体(EMCV-Ab)阳性 注意事项 1．操作严格按照说明书进行，本试剂不同批号组分不得混用。 2．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 3．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 4．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 5．底物请避光保存。 6．试验结果判定必须以酶标仪读数为准，使用双波长检测时，参考波长为630nm 7．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M 的硫酸，使用时必须注意安全。 保存条件及有效期 1．试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6 个月

大鼠环磷酸鸟苷(cGMP)ELISA试剂盒测活性实验方法 操作步骤： 1.标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉，再各取50μl 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为300IU/L，200IU/L ，100IU/L，50IU/L，25IU/L）。 2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4.配液：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T 的20 倍）倍稀释后备用。 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7.温育：操作同3。 8.洗涤：操作同5。 9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟. 10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11.测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。 目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆，组织及相关液体样本中环磷酸鸟苷(cGMP)的活性。 ELISA实验原理：试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠环磷酸鸟苷(cGMP)水平。用纯化的大鼠环磷酸鸟苷(cGMP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入环磷酸鸟苷(cGMP)，再与HRP 标记的环磷酸鸟苷(cGMP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的环磷酸鸟苷(cGMP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠环磷酸鸟苷(cGMP)活性浓度。 注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

鸭生长抑素(SS)ELISA试剂盒实验方法 样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉，再各取50μl 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为120μg/L，80μg/L ，40μg/L，20μg/L，10μg/L）。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4. 配液：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T 的20 倍）倍稀释后备用。 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟. 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 产品货号：SBJ-H0204 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本人I 型胶原(Col-Ⅰ)的含量。 ELISA 实验原理：试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人I 型胶原(Col-Ⅰ)水平。用纯化的人I 型胶原(Col-Ⅰ)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入I 型胶原(Col-Ⅰ)，再与HRP 标记的I 型胶原(Col-Ⅰ)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的I 型胶原(Col-Ⅰ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人I 型胶原(Col-Ⅰ)浓度。

人铁调素(Hepcidin)ELISA试剂盒实验说明 试剂盒性能： 1.样品线性回归与预期浓度相关系数R 值为0.990 以上。 2.批内与批见应分别小于9%和11% 检测范围： 7.5μg/L -150μg/L 保存条件及有效期： 1.试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6 个月 操作步骤 1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉，再各取50μl 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为120μg/L，80μg/L ，40μg/L，20μg/L，10μg/L）。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4. 配液：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T 的20 倍）倍稀释后备用。 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟. 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

普鲁士蓝染色液(伊红法)实验步骤 操作步骤(仅供参考)： (一)石蜡切片染色： 1、组织固定于 10%中性福尔马林，常规脱水包埋。 2、切片厚度 4μm，常规脱蜡至水。 3、蒸馏水水洗 1min。 4、切片入 Perls stain(见注意事项4)，浸染15～30min。 5、蒸馏水充分冲洗 5～10min。 6、入伊红染色液，淡染细胞核 15～30s。 7、自来水冲洗 1～5s。 8、常规脱水透明，中性树胶封固 （二）冰冻切片染色： 1、无需脱蜡，直接迅速用蒸馏水冲洗 2～3min。 2、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。 （三）细胞染色： 1、4%多聚甲醛固定10～20min。 2、自来水冲洗2 次，每次2min。 3、蒸馏水冲洗 2 次，每次2min。 4、染色、脱蜡、透明、封固步骤同石蜡切片的染色步骤。 产品简介： 含铁血黄素(Hemosiderin)是一种血红蛋白源性色素，为金黄色或棕黄色颗粒，因其含铁，且为金黄色，故称为含铁血黄素。当红细胞被巨噬细胞吞噬后，在溶酶体酶的作用下，血红蛋白被分解为不含铁的橙色血质和含铁的含铁血黄素。Perls 普鲁士蓝反应(Prussianbluereaction)又称为含铁血黄素染色，即经过亚铁氰化钾和稀酸处理后可以产生蓝色，常见于吞噬细胞或间质内，主要显示三价铁盐。普鲁士蓝是非常经典的组织化学反应，是显示组织内三价铁的一种敏感、传统优良的方法，其染色原理在于亚铁氰化钾溶液使三价铁离子从蛋白质中被稀盐酸分离出来，三价铁与亚铁氰化钾反应，生成一种不溶解的蓝色化合物即三价铁的亚铁氰化物普鲁士蓝，所以该反应被称为普鲁士蓝反应。三价铁的亚铁氰化物是一种很稳定的化合物，在反应后可用红色染色剂进行复染，如核固红、伊红、中性红等。 普鲁士蓝染色用于显示局部组织内的各种出血性病变，常见于吞噬细胞内。在判断含铁血黄素沉积时，用Perls 反应可以得到证实,该染色法可以很好地区分含铁血黄素与其他色素。该染色液稳定性好、可以长期保存、不易产生沉淀、应用范围广，可以进行复染。该染色液的复染液采用伊红染，复染时间较核固红染色液要短。 产品组成： 试剂(A): Perls stain A1:Perls stainA 25ml 50ml RT A2:Perls stainB 25ml 50ml RT 临用前，取A1、A2 等量混合即为Perls stain，不宜提前配制。 试剂(B): 伊红红染色液 50ml 100ml RT 避光 使用说明书 1 份 注意事项： 1、切片脱蜡应尽量干净。 2、组织固定常采用10%中性福尔马林，经普通福尔马林长期固定后，组织会有损伤。避 免使用酸性固定剂，铬酸盐处理也会妨碍铁的保存。 3、整个操作过程中容器要干净，避免用金属铁制品，洗切片和容器时以蒸馏水为宜，因普通水内含铁质。 4、Perls stain 染色时，应根据样本情况调整着色时间。 5、所有切片都应使用同一个阳性对照切片，选择适合的对照非常重要。尸检肺组织是一个很好的对照，包含相当数量的铁阳性巨噬细胞(心衰细胞)。 6、系列乙醇应经常更换新液。 7、冰冻切片和细胞的染色，最好根据具体情况摸索实验条件。 8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

小鼠T淋巴细胞亚群(CD3,CD4,CD8)ELISA试剂盒使用方法 注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

羊雄甾烯酮(ADT)ELISA试剂盒操作说明 操作步骤 1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉，再各取50μl 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为1200 ng/L，800ng/L ，400 ng/L，200ng/L，100 ng/L）。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4. 配液：将20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水20 倍稀释后备用。 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15 分钟. 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

人性激素结合球蛋白(SHBG)ELISA试剂盒说明书 试剂盒原理：试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人性激素结合球蛋白(SHBG)水平。用纯化的人性激素结合球蛋白(SHBG)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入性激素结合球蛋白(SHBG)，再与HRP 标记的性激素结合球蛋白(SHBG)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的性激素结合球蛋白(SHBG)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人性激素结合球蛋白(SHBG)浓度。

人CD14 酶联免疫分析试剂盒操作步骤： 1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉，再各取50μl 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为15ng/ml，10ng/ml ，5ng/ml，2.5ng/ml，1.25ng/ml）。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4. 配液：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T 的20 倍）倍稀释后备用。 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15 分钟. 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

操作步骤(仅供参考)： (一)冰冻切片染色 1、冰冻切片至蒸馏水。 2、切片入ACP 孵育液，置于37℃温箱，浸染15～60min。 3、入37℃蒸馏水中洗2 次，每次1min，以去除未被吸附的铅。 4、在上述过程中配制ALP 硫化工作液，即取试剂(B)用蒸馏水稀释50 倍, 即为ALP 硫化工作液，即配即用。切片入硫化工作液，孵育1～2min。 5、流水冲洗3～5min，蒸馏水洗。 6、(可选)核固红复染细胞核，蒸馏水洗。 7、栺油明胶封片。 (二)石蜡切片染色 1、石蜡切片脱蜡至蒸馏水。 2、切片入ACP 孵育液，置于37℃温箱，浸染4～12h，可以延长至24h。 3、入37℃蒸馏水中洗2 次，每次1min，以去除未被吸附的铅。 4、在上述过程中配制ALP 硫化工作液，即取试剂(B)用蒸馏水稀释50 倍, 即为ALP 硫化工作液，即配即用。切片入硫化工作液，孵育1～2min。 5、流水冲洗3～5min，蒸馏水洗。 6、(可选)核固红复染细胞核，蒸馏水洗。 7、石蜡切片脱水，常规透明，中性树胶封片。

大鼠总胆固醇(TC)ELISA试剂盒操作实验步骤 大鼠总胆固醇(TC)ELISA试剂盒试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定大鼠血清，血浆及相关液体样本中总胆固醇（TC）的含量。 ELISA 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠总胆固醇（TC）水平。用纯化的大鼠总胆固醇（TC）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入总胆固醇（TC），再与HRP 标记的总胆固醇（TC）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的总胆固醇（TC）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中大鼠总胆固醇（TC）浓度。

操作步骤： 1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10 孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl 分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 弃掉，再各取50μl 分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl 分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl 弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为480μmol/L ，320μmol/L ，160μmol/L，80μmol/L，40μmol/L）。 2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5 倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 4. 配液：将30（48T 的20 倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T 的20 倍）倍稀释后备用。 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30 秒后弃去，如此重复5 次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15 分钟. 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm 波长依序测量各孔的吸光度（OD 值）。测定应在加终止液后15 分钟以内进行。

葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)操作说明 产品组成： 试剂(A): G-6-Pase 孵育液 50ml 4℃ 避光 试剂(B): ALP 硫化溶液 2×1ml RT 避光 试剂(C): 中性福尔马林 50ml 4℃ 避光 试剂(D): G-6-Pase 对照液 10ml 4℃ 避光 使用说明书 1 份 产品简介： 葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6 –phosphatase，G-6-Pase)是一种多存在于哺乳类动物肝、肾、肠等组织的膜结合酶，G-6-Pase 和微体紧密结合，定位于内质网，是内质网的主要标志酶，能把葡萄糖-6-磷酸水解成葡萄糖和磷酸。G-6-Pase 对维持血糖浓度的相对恒定有至关重要的作用，是糖代谢的关键酶。当血糖降低时，G-6-Pase 促进肝糖原转变为血糖。当缺乏G-6-Pase 时，会引起糖原分解障碍，使糖原积累在肝、肾、心脏等部位，导致肝糖原储积病。G-6-Pase 最适pH 为6.5，在pH6.0～8.0 亦可，pH8.0 最稳定，pH5.0易变性。组织化学反应多用pH6.5～6.7。 葡萄糖-6-磷酸酶染色液(铅法)采用重金属捕捉剂和磷酸结合显示酶的活性。该酶对固定很敏感，组织经80%乙酸溶液固定后用石蜡包埋，G-6-Pase 完全被抑制。需用新鲜组织低温恒冷切片，经甲醛短时固定酶即失活，但可短时低温丙酮固定，但一般不固定。 操作步骤(仅供参考)： 1、冰冻切片入蒸馏水清洗。 2、入G-6-Pase 孵育液，37℃孵育15～20min。 3、自来水冲洗后，蒸馏水冲洗。 4、在上述过程中配制ALP 硫化工作液，即取试剂(B)用蒸馏水稀释50 倍, 即为ALP 硫化工作液，即配即用。切片入硫化工作液，孵育1min。 5、自来水水洗3～5min。 6、(可选)入中性福尔马林，固定2min。 7、入蒸馏水水洗2 次。 8、甘油明胶封片

Fontana黑色素染色液操作说明 产品组成： 试剂(A): Fontana 氨银溶液 100ml 4℃ 避光 试剂(B): 海波溶液 100ml RT 试剂(C): 中性红染色液 100ml RT 避光 操作步骤(仅供参考)： 1、固定: 10%中性福尔马林是最好的固定液，应当避免使用铬酸盐和氧化汞等固定液。 2、切片: 所有类型的切片都可以处理，数值切片可能需要做一些调整。 3、将实验切片及对照切片入蒸馏水中。 4、入Fontana 氨银溶液，避光浸染12～24h 或56℃温箱孵育30～40min。 4、蒸馏水多次洗净(5～6 次)。 5、入海波溶液处理切片1～5min。 6、自来水处理3～5min。 7、(可选)入中性红染色液，轻轻复染5min。 8、蒸馏水冲洗。 9、95%乙醇、无水乙醇脱水。 10、二甲苯透明、中性树胶封固。 产品简介：黑色素属于非血源性内生色素，是一组由黑色素母细胞产生的颜色从浅棕色到黑色的色素。这种色素通常出现在皮肤表皮、眼睛、大脑的黑质和毛囊中。黑色素有一个显著的物理性质，即完全不溶解于大多数有机溶剂——几乎可以肯定是由于黑素体中已形成的黑色素可与蛋白质紧密结合。黑色素另一个物理性质是能够被强氧化剂漂白，尽管这个过程是缓慢的。在病理情况下，这种色素也可出现在良性痣细胞瘤中和恶性黑色素瘤中。在常规HE 染色中不呈黑色而是呈棕黄色或棕黑色。许多方法可用于识别黑色素和黑色素生成细胞，如还原方法，如Masson-Fontana 银技术和Schmorl 三价铁-铁氰化钾还原实验；酶方法(如多巴反应)；荧光方法；免疫组织化学。 Masson-Fontana黑色素染色利用黑色素具有将银氨溶液还原为金属银特性即嗜银反应原理来显示黑色素，染色后黑色素呈黑色，该法属于常用的黑色素特殊染色法，效果较其他染色理想。

人雄烯二酮(ASD)ELISA试剂盒注意事项 注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。

南京森贝伽生物科技有限公司AB-PAS染色液操作注意事项 1、切片脱蜡应尽量干净，否则影响染色效果。 2、过碘酸氧化时间不宜过久，氧化时的温度以18～22℃最佳。 3、阿利新蓝染色液、过碘酸溶液、Schiff Reagent 均应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多阳光和空气。使用前最好提前30min 取出恢复至室温，避光暗处使用。 4、酸性分化液应经常更换新液，分化时间应该依据切片厚薄、组织类别和酸性分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够。 5、切片在过碘酸溶液和Schiff Reagent 中作用时间非常重要，该依据切片厚薄、组织类别等决定。 6、用苏木素染色液复染细胞核时应淡染，以免影响阳性物质AB 的观察。目的是防止胞浆或黏蛋白着色而掩盖阿利新蓝的颜色。 7、阿利新蓝-PAS 联合技术的染色顺序可影响最终结果。PAS 技术在阿尔辛蓝染色之前时，中性黏蛋白和糖原可染成紫色。与此相反，阿利新蓝染色在PAS 技术之前时，则可将这些物质染成预期的紫红色。 8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus 在1946 年最先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该技术不仅能显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质。 阿利新蓝(又称阿尔辛蓝、爱先蓝等)和PAS 技术联合使用可鉴别同一组织切片中的中性黏蛋白和酸性黏蛋白。这种技术也常用作广泛检测黏蛋白的手段，切片先经标准阿利新蓝(pH=2.5)染色再使用PAS 技术。阿利新蓝可将唾液黏蛋白、硫黏蛋白和蛋白多糖染成蓝色。PAS 技术可将中性黏蛋白染成深红或红紫色，同时将既含中性黏蛋白又含酸性黏蛋白的组织和细胞染成深浅不同的紫色，这是由于阿利新蓝与Schiff 试剂结合并发栻反应。上述染色常可出现在含有中性黏蛋白和唾液黏蛋白的小肠杯状细胞中。阿利新蓝的染色原理在于是类铜钛花青染料，这种阳离子染料与酸性基团结合，也即阿利新蓝与组织内含有的阴离子基团如羧基和硫酸根形成不溶性复合物。分子中带正电荷的盐键与酸性黏多糖物质中带负电荷的酸性基团结合形成不溶性的复合物而呈蓝色，再与PAS 进行复合染色，就能显示三种不同黏液物质成分。 AB-PAS 染色液核心成分为阿利新蓝染色液和Schiff Reagent，多用于黏液物质染色，糖原、中性黏蛋白、各种糖蛋白呈紫红色，其余呈蓝色。

猪乳酸脱氢酶(LDH)ELISA试剂盒英文说明 Specimen requirements 1. serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitationappeared, Centrifugal again. 2. plasma-use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix 10-20mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. removesupernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. 3. Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared,Centrifugal again. The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluidReference to it. 4. cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue asterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m.remove supernatant,detect the composition of cells, Dilut cell suspensionwith PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration reached 1 million / ml, repeatedfreeze-thaw cycles, damage cells and release of intracellular components,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,If precipitation appeared, Centrifugal again. 5. Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidly frozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃ after melting,add PBS（PH7.4）, Homogenized by hand or Grinders,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant. 6. extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles. 7. Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.

Porcine(LDH)ELISA Kit Porcine Lactate Dehydrogenase (LDH) ELISA Kit FOR RESEARCH USE ONLY Purpose This kit allows for the determination of LDH concentrations in Porcineserum, blood plasma, and other biological fluids. Principle of the assay The kit assay Porcine LDH level in the sample，use Purified Porcine LDHantibody to coat microtiter plate wells, make solid-phase antibody, then addLDH to wells, Combined LDH antibody which With HRP labeled, becomeantibody - antigen - enzyme-antibody complex, after washing Completely, AddTMB substrate solution,TMB substrate becomes blue color At HRPenzyme-catalyzed, reaction is terminated by the addition of a sulphuric acidsolution and the color change is measured spectrophotometrically at awavelength of 450 nm. The concentration of LDH in the samples is thendetermined by comparing the O.D. of the samples to the standard curve.

AMPPD发光显色试剂盒操作步骤 自备材料： 1、转印了蛋白并已以抗体-酶复合物检测过的PVDF 膜 2、Tris 盐缓冲液(TBS) 3、透明的塑料保鲜膜 4、蒸馏水 操作步骤（仅供参考）： 1、临用前，取适量的A1 和A2，等量混合后获得Dioxetane Buffer。 2、按 2.5mgAMPPD 溶于25ml Dioxetane Buffer, 配制0.1mg/ml AMPPD 底物溶液即为AMPPD Dioxetane Buffer(发色发光显迹液)，用于膜的染色。 3、取适量Dioxetane Buffer 洗膜两次，每次15min。 4、对于 PVDF 膜进行的碱性磷酸酶反应, 膜置于新鲜配制的AMPPD Dioxetane Buffer作用5min。 5、将膜移入适量的AMPPD Dioxetane Buffer 中，浸泡5min(AP 反应)。 6、取出 PVDF 膜，滴干水分，将膜正面朝下放在一张透明的塑料保鲜膜上，向后折叠将膜包裹起来，成为不漏水的封闭体。 7、在暗房中，将膜正面朝下放在感光胶片上，曝光数秒至数小时。 8、如需要，在室温下以适量的TBS 洗膜15min。 9、将膜放入AMPPD Dioxetane Buffer，条带应在10~30min 内出现。 10、用蒸馏水洗膜，终止反应。晾干后拍照留永久的记录。 注意事项： 1、PVDF 膜置于胶片上后，不要改变位置。 2、曝光时间应根据实验情况，自行摸索。 3、配制好的AMPPD Dioxetane Buffer，应避光低温保存。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期： 12 个月有效。 南京森贝伽生物科技有限公司

样本处理及要求： 1. 血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2. 血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3. 尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4. 细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。 5. 组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3 的样品，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

人血管紧张素转化酶(ACE)试剂盒组成及血清，血浆样本处理 ELISA 试剂盒组成： 试剂盒组成48 孔配置96 孔配置保存 说明书1 份1 份 封板膜2 片（48） 2 片（96） 密封袋1 个1 个 酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：270U/L 0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存 标准品稀释液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存 酶标试剂3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 样品稀释液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 终止液3ml×1 瓶6ml×1 瓶2-8℃保存 浓缩洗涤液（20ml×20 倍）×1 瓶（20ml×30 倍）×1 瓶2-8℃保存

人铁蛋白（FE）ELISA试剂盒组成部分 试剂盒组成48 孔配置96 孔配置保存 说明书1 份1 份 封板膜2 片（48） 2 片（96） 密封袋1 个1 个 酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存 标准品：225nmol/L 0.5ml×1 瓶0.5ml×1 瓶2-8℃保存 标准品稀释液1.5ml×1 瓶1.5ml×1 瓶2-8℃保存 酶标试剂3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 样品稀释液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂A 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 显色剂B 液3 ml×1 瓶6 ml×1 瓶2-8℃保存 终止液3ml×1 瓶6ml×1 瓶2-8℃保存 浓缩洗涤液（20ml×20 倍）×1 瓶（20ml×30 倍）×1 瓶2-8℃保存