人I型胶原(Col-Ⅰ)ELISA试剂盒实验方法

注意事项： 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30 分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5 分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD 值大于标准品孔第一孔的OD 值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n 倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异，以英文说明书为准。 产品货号：SBJ-H0204 目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本人I 型胶原(Col-Ⅰ)的含量。 ELISA 实验原理：试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人I 型胶原(Col-Ⅰ)水平。用纯化的人I 型胶原(Col-Ⅰ)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入I 型胶原(Col-Ⅰ)，再与HRP 标记的I 型胶原(Col-Ⅰ)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的I 型胶原(Col-Ⅰ)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人I 型胶原(Col-Ⅰ)浓度。