AMPPD发光显色试剂盒操作步骤

AMPPD发光显色试剂盒操作步骤 自备材料： 1、转印了蛋白并已以抗体-酶复合物检测过的PVDF 膜 2、Tris 盐缓冲液(TBS) 3、透明的塑料保鲜膜 4、蒸馏水 操作步骤（仅供参考）： 1、临用前，取适量的A1 和A2，等量混合后获得Dioxetane Buffer。 2、按 2.5mgAMPPD 溶于25ml Dioxetane Buffer, 配制0.1mg/ml AMPPD 底物溶液即为AMPPD Dioxetane Buffer(发色发光显迹液)，用于膜的染色。 3、取适量Dioxetane Buffer 洗膜两次，每次15min。 4、对于 PVDF 膜进行的碱性磷酸酶反应, 膜置于新鲜配制的AMPPD Dioxetane Buffer作用5min。 5、将膜移入适量的AMPPD Dioxetane Buffer 中，浸泡5min(AP 反应)。 6、取出 PVDF 膜，滴干水分，将膜正面朝下放在一张透明的塑料保鲜膜上，向后折叠将膜包裹起来，成为不漏水的封闭体。 7、在暗房中，将膜正面朝下放在感光胶片上，曝光数秒至数小时。 8、如需要，在室温下以适量的TBS 洗膜15min。 9、将膜放入AMPPD Dioxetane Buffer，条带应在10~30min 内出现。 10、用蒸馏水洗膜，终止反应。晾干后拍照留永久的记录。 注意事项： 1、PVDF 膜置于胶片上后，不要改变位置。 2、曝光时间应根据实验情况，自行摸索。 3、配制好的AMPPD Dioxetane Buffer，应避光低温保存。 4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。 有效期： 12 个月有效。 南京森贝伽生物科技有限公司