光合细菌培养基

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  • 北京绿百草现货提供卫生检验微生物检验干粉培养基(细菌总数,大肠菌数,粪大肠菌群,大肠杆菌)
    北京绿百草现货提供卫生检验微生物检验干粉培养基(细菌总数,大肠菌数,粪大肠菌群,大肠杆菌) 关键词:培养基,北京绿百草,微生物检验 北京绿百草现货提供卫生检验微生物检验干粉培养基常用品种(细菌总数,大肠菌数,粪大肠菌群,大肠杆菌):伊红美蓝琼脂(EMB),麦康凯琼脂培养基,双料乳糖胆盐胨水,乳糖胆盐发酵培养基,乳糖胆盐发酵管,三糖铁琼脂,乳糖复发酵胨水,月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤(LST),平板计数琼脂,EE增菌肉汤培养基,中国蓝琼脂,品红亚硫酸钠琼脂等。 需要详细信息请联系北京绿百草:010-51659766. 登录网站获得更多产品信息:www.greenherbs.com.cn
  • 弧菌显色培养基平板 弧菌显色琼脂平板 弧菌显色琼脂培养基平板
    【产品名称】通用名称:弧菌显色培养基平板英文名称:Chromogenic VibrioAgar Plate【产品编号与包装规格】产品编号产品类型包装规格CP0570即用型固体平板20套(φ9cm) /盒【产品用途】用于弧菌特别是副溶血性弧菌的分离和初步鉴定。【检验原理】蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;蔗糖为可发酵的糖类;抑菌剂抑制大部分非弧菌细菌,氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;混合色素与副溶血性弧菌、霍乱弧菌和创伤弧菌所对应的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上产生品红色菌落(副溶血性弧菌)和绿-蓝绿色的菌落(霍乱弧菌和创伤弧菌)。【配方成分】成分含量(每升)成分含量(每升)蛋白胨18.8g琼脂13.0g酵母膏粉5.0g混合色素3.0g蔗糖20.0g抑菌剂1.5g蒸馏水1000mL氯化钠10.0g最终pH9.0±0.2【使用方法】拆开包装即可使用。【质量控制】下列质控菌株接种后于35~37℃培养24h,观察结果如下表:指标质控菌株及编号标准值特征性反应生长率副溶血性弧菌ATCC17802PR≥0.5品红色菌落霍乱弧菌VBO非01绿蓝色菌落特异性溶藻弧菌ATCC33787——无色,不扩散选择性大肠埃希氏菌ATCC25922G≤1——【储存条件与保质期】2~8℃,避光保存,有效期见产品标签。【注意事项】1、一次性平板培养基置于冰箱冷藏保存需与存放容器冷凝管保持一定距离以避免冻损坏。产品多次在低温与常温之间变更会引起琼脂的泌水,属于正常现象。使用前应平衡至室温且尽量在无菌干燥箱中预干燥。2、质检报告可以登录环凯培养基网站, 打开“质检报告”页面,输入产品批号下载。【废物处理】检测之后带菌物品置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。
  • 环凯霍乱弧菌检测培养基 霍乱弧菌显色培养基 CRM009
    【产品名称】通用名称:霍乱弧菌显色培养基英文名称:Chromogenic Vibrio Agar【产品编号与包装规格】产品编号产品类型包装规格CRM009干粉1000mL/瓶SR0450冻干粉10瓶/盒【产品用途】用霍乱弧菌的快速分离和鉴定。【检验原理】蛋白胨和酵母膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;蔗糖为可发酵的糖类;抑菌剂抑制大部分非霍乱弧菌细菌,氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂;色素与霍乱弧菌所具有的酶发生特异性反应,水解底物,释放出显色基团,在淡黄色平板上产生绿-蓝绿色的菌落。【配方成分】成分含量(每升)成分含量(每升)蛋白胨15.0g抑菌剂5.0g酵母膏粉5.0g琼脂13.0g蔗糖10.0g色素3.1g氯化钠5.0g蒸馏水1000mL最终pH 9.2±0.2【使用方法】称取本品56.1g,加入蒸馏水或去离子水1000mL,搅拌加热煮沸至完全溶解,待冷至50℃左右;如需加强抑制效果,可在无菌环境中,每100mL培养基添加1瓶霍乱弧菌显色培养基选择性添加剂(SR0450),混匀,倾注灭菌平皿,待凝固后,备用【质量控制】下列质控菌株接种后于35~37℃培养24h,观察结果如下表:指标质控菌株及编号标准值特征性反应生长率霍乱弧菌VBO非01PR≥0.5绿-蓝绿色菌落选择性大肠埃希氏菌ATCC25922G≤1——创伤弧菌ATCC27562【储存条件与保质期】2-8℃,贮存于避光、干燥处。贮存期2年。【注意事项】1、称量时注意粉尘,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。2、干粉培养基使用后立即旋紧瓶盖,避免吸潮结块。贮存于2-8℃,避光、干燥处。3、质检报告可以登录环凯培养基网站,打开“下载中心”页面,输入产品批号下载。【废物处理】检测之后带菌物品置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。【执行标准】Q/HKSJ 03

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  • 其他培养基 400-622-8982
    EX-CELL 293是一种无动物蛋白无血清培养基,适用于HEK 293细胞的长期悬浮培养。在悬浮培养的条件下,细胞可以传代20次以上而不会损失细胞活性。默克生命科学提供BHK21细胞无血清培养基,针对细胞生长特性,在合成细胞培养基的基础上,引入化学组分代替血清,使培养基在不添加血清的情况下,能在体外满足细胞较长时间生长繁殖的要求,有效克服因使用血清所引发的各种问题。EX-CELL 405无血清培养基适用于BTI-TN-5B1-4 (Tn5, High FiveTM) 的生长和活性。此外,405培养基可以使High Five细胞的重组蛋白表达量超过Sf9细胞报道过的水平。405培养基在使用前无需添加其他蛋白质。EX-CELL 420无血清培养基适用于Sf9和Sf21细胞的生长和活性。通常情况下细胞密度可以达到1×107 /mL,细胞活性大于95%。Sf9和Sf21细胞在传代20次以上也不会丧失细胞活性。蛋白表达量和病毒产量超过在含血清的培养基达到的水平。EX-CELL TiterHigh是一种无动物源、无蛋白的无血清培养基,特别适合Sf9和Sf21细胞的培养,可以支持细胞的快速生长(倍增时间20-24 h),细胞密度可达20×106 cells/mL (Sf9)。EX-CELL MDCK是一种无动物蛋白的无血清培养基,适用于MDCK细胞及其相关细胞的长期贴壁培养。无血清条件下培养的达到的细胞密度和倍增时间等同于在添加了血清的培养基中达到的水平。EX-CELL VPRO是一种无动物蛋白的无血清培养基,适用于人胚胎成视网膜细胞(PER. C6及其相关细胞)的长期悬浮培养。PER. C6细胞可以在转瓶或滚瓶中进行悬浮培养(滚瓶培养是最适合的培养方式)。细胞可以传代20次而不会丧失细胞活性。EX-CELL NSO是一种化学成分限定、无动物源成分的无血清培养基,适用于NSO相关细胞的长期悬浮培养基,在悬浮培养的条件下,细胞可以传代50次以上而不会损失细胞活性。EX-CELL Sp2/0是一种化学成分限定、无动物源成分的无血清培养基,适用于Sp2/0相关细胞的长期悬浮培养基,在悬浮培养的条件下,细胞可以传代25次以上而不会损失细胞活性。EX-CELL 610是一种低蛋白水平(11 mg/L)的无血清培养基,最初研发此培养基的目的是用来培养杂交瘤细胞,后来发现其也支持多种细胞的生长(包括人源和鼠源的淋巴细胞、上皮细胞、B细胞杂交瘤细胞)。该培养基适用于静止培养和大规模细胞发酵罐培养,在这两种培养方式中,细胞产物(例如单克隆抗体)的表达等同甚至超购同类细胞在添加了胎牛血清培养的水平。EX-CELL 610是一种低蛋白水平(11 mg/L)的无血清培养基,最初研发此培养基的目的是用来培养杂交瘤细胞和其他相关细胞,用于表达单克隆抗体和其他蛋白质。杂交瘤细胞、淋巴瘤细胞和骨髓瘤细胞可以在620培养基中进行长期的无血清条件的生长(超过15代)。此外,CHO细胞也被发现可以在620培养基中得到良好的生长和产物表达。更多信息,可联系默克当地销售。
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  • 为助力中国生物制药企业快速发展,走向世界,默克立足于“在中国,为中国”的公司策略,在这中国建立研发中心。研发中心于2018年从北京迁至上海,并于2019年进行了进一步的扩张。目前实验室占地面积约600平方米,计划投资共计超过5000万元。拥有完整的细胞构建、培养基开发、工艺开发及分析测试等平台。多样化的培养基库,高通量的筛选和分析,通过大数据获得的关键组分,以及我们对培养基30多年的研发历史,能确保我们以最快的速度和最高的质量完成定制化培养基开发工作。我们灵活的合作模式,本地化的快速样品制备和大规模的商业化生产能力,能够充分满足客户对法规、速度和规模的需求。immediate ADVANTAGE服务针对GMP前的小规模样品定制,培养基、补料、补充剂和缓冲液是我们所能提供支持的示例之一。这项快捷服务为您提供竞争优势,可以更快完成开发工作并将产品分子更快推向市场。同时,我们配备了相当于我们大型GMP设施的生产技术,确保我们小批量产品的可靠使用和质量。更多信息,e.g., IA项目的主要特点,站点间的可比性等,可参见本页面核心参数 – 样本下载中的资料手册。
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  • 快速、安全、可重现的培养基灭菌琼脂培养基的制备是当今实验室的常规任务。 典型的工作流程是将组分溶解在烧瓶中,然后在高压灭菌器中灭菌。 然而,该过程有很多缺点。首先,大量工作步骤使培养基准备非常耗时。 其次,灭菌温度通常仅在一个参考容器中进行控制,热暴露可能因样品而异。 更糟的是,无法在灭菌过程中搅拌瓶内的琼脂培养基 - 而这恰恰是其保持均匀的关键。 后,将培养基冷却至可分配温度需要很长时间,造成培养基长期暴露于高温下,琼脂培养基效力可能受损。INTEGRA 设计了专门的培养基灭菌器,消除了这些缺点。 MEDIACLAVE 采用更短的流程,一个步骤即可完成培养基的配制和灭菌。 琼脂培养基的温度在整个过程中被精确地监测和控制。 恒定搅拌保证了整个批次的均匀温度,有效的板式换热器有助于快速冷却。 所有这些功能都可防止培养基过热,从而保持其效力。 安全性MEDIACLAVE 配备了多个独立的压力和温度监控系统,为用户和工作环境确保很高的安全标准。 容器的盖子配有自动超压安全阀和爆破盘,以防其他电子监控系统出现故障。1)添加口2)超压安全阀3)分装口4)温度探头Pt1000迅速加热、急速冷却强大的加热元件可快速处理培养基,以大限度地减少热应激,并确保培养基的高效力。 压力和温度控制的脱气过程可确保容器中的蒸汽饱和。有效的板式换热器可进行快速冷却。 冷却水系统和灭菌室的分离使培养基不会被冷却水污染。1)标准模式:加热,灭菌并冷却至分装温度。2)巧克力琼脂模式:首次灭菌阶段完成后,加入血液,并再次加热培养基。可靠的灭菌MEDIACLAVE media sterilizers feature strong magnetic stirrer and a Pt-1000 temperature probe大而强进的磁力搅拌器可调节速度和换向转动,确保了宽粘度范围的培养基均匀制备。 Pt-1000 温度探头和控制处理参数的微处理器可对培养基进行可重复的灭菌。分装MEDIAJET Petri dish filler is a perfect complement to MC10/30MEDIACLAVE 可以快速方便地连接到MEDIAJET 自动培养皿分装器的分装管上。 或者,可以使用DOSE IT 蠕动泵分装特殊体积或形状的容器,如四边形培养皿,瓶子或烧瓶。诸如瓶子的大型容器可以通过灭菌器自带的压力分装模式进行分装。进程文件记录和认证MEDIAJET process documentationMEDIACLAVE 的灭菌过程可被监控,并存储在PC上。 根据FDA(21 CFR Part 11)/ EU(GMP Annex 11)的电子签名会自动添加到电子版进程文件中。 所有日志文件也可以使用MEDIACLAVE USB 端口存储。如果配备了可选择的点阵打印机,则可以获得不易褪色的高质量打印输出。应用标准琼脂培养基MEDIACLAVE 用于多种类型培养基的制备和灭菌典型的例子有:MEDIACLAVE 用于培养基制备LB(Luria Bertani)培养基 - 主要用于大肠杆菌的培养胰蛋白酶大豆琼脂 - 用于培养各种微生物的通用培养基血琼脂 - 适用于复杂营养型微生物巧克力琼脂 - 用于复杂营养型呼吸道细菌如流感嗜血杆菌麦康凯(MacConkey)琼脂 - 革兰氏阴性细菌沙氏(Sabouraud)琼脂 - 用于真菌蛋白胨溶液 - 用于样品制备炭琼脂使用MEDIACLAVE 制备炭琼脂培养基炭琼脂培养基用于培养和分离百日咳博代氏杆菌和流感嗜血杆菌等,使用带桨的磁力搅拌棒,可制备高粘度的炭琼脂,而无需预膨胀。 准备时间减少了30%以上。使用MEDIACLAVE 配合带桨搅拌棒的优点:MEDIACLAVE 30 用于炭琼脂制备提高混合性能小化泡沫形成缩短准备时间果蝇食物制备用于制备果蝇(fly)食物的优化系统MEDIACLAVE 能够代替果蝇(fly)食物制备中所使用的简单烹饪锅或搅拌壶。 MEDIACLAVE 集成的冷却系统,省去了等待果蝇食物降至分装温度所需要的数小时时间。在少于90分钟的时间内,混合物即可准备就绪,并被保持在所需的分装温度。技术规格容量MC 10:1-10 升;MC 30:3-30 升规格尺寸(HxWxD)MC 10:480 x 550 x 640mm;MC 30:1040 x 550 x 640mm重量MC 10:57kg;MC 30:85kg
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  • 细菌在培养基上生长特性

    1.固体培养基标本或液体培养物划线接种到固体培养基表面后,单个细菌经分裂繁殖可形成一个肉眼可见的细菌集团,称为菌落(colony)。(1)菌落的形态特征:大小、形状(露滴状、圆形、菜花样、不规则等)、突起或扁平、凹陷、边缘(光滑、波形、锯齿状、卷发状等)、颜色(红色、灰白色、黑色、绿色、无色、黄色等)、表面(光滑、粗糙等)、透明度(不透明、半透明、透明等)和粘度等。据细菌菌落表面特征不同,可将菌落分为3型: ①光滑型菌落(S型菌落):菌落表面光滑、湿润、边缘整齐,新分离的细菌大多呈光滑型菌落。②粗糙型菌落(R型菌落):菌落表面粗糙、干燥、呈皱纹或颗粒状,边缘大多不整齐。R型菌落多为S型细菌变异失去菌体表面多糖或蛋白质形成。R型细菌抗原不完整,毒力和抗吞噬能力都比S型细菌弱。但也有少数细菌新分离的毒力株就是R型,如炭疽孢杆菌、结核分枝菌等。③粘液型菌落(M型菌落):菌落粘稠、有光泽、似水珠样。多见于厚荚膜或丰富粘液层的细菌、结核杆菌等。(2)菌落溶血特征:菌落溶血有下列3种情况。①α溶血:又称草绿色溶血,菌落周围培养基出现1~2mm的草绿色环,为高铁血红蛋白所致;②β溶血:又称完全溶血,菌落周围形成一个完全清晰透明的溶血环,是细菌产生的溶血素使红细胞完全溶解所致;③γ溶血:即不溶血,菌落周围的培养基没有变化,红细胞没有溶解或缺损。(3)色素:有些细菌产生水溶性色素,使菌落和周围的培养基出现绿色、金黄色、白色、橙色、柠檬色等颜色,产生的色素有水溶性或脂溶性。(4)气味:某些细菌在培养基中生长繁殖后可产生特殊气味,如铜绿假单胞菌(生姜气味)、变形杆菌(巧克力烧焦的臭味)、厌氧梭菌(腐败的恶臭味)、白色假丝酵母菌(酵母味)和放线菌(泥土味)等。

  • 细菌柠檬酸利用试验用的培养基

    枸橼酸盐培养基( 1 )成分 氯化钠 5g 枸橼酸钠(无水) 2g 硫酸镁 0.2g 1.0 %溴麝香草酚蓝指示液 10ml 磷酸氢二钾 1g 琼脂 14g 磷酸二氢铵 1g 水 l000ml ( 2 )制法 除指示液和琼脂外,取上述成分,混合,微温使溶解,调pH 值使灭菌后为6.9 士0.1 ,加入琼脂,加热溶胀,然后加入指示液,混匀,分装于小试管中,121 ℃ 灭菌15 分钟,制成斜面.(3 )用途 用于鉴别细菌能否利用枸橼酸盐作为碳源和氮源而生长繁殖。 方法和结果观察:取可疑菌落或斜面培养物,接种于枸橼酸盐培养基的斜面上,一般培养48 ~ 72 小时,凡能在培养基斜面生长出菌落,培养基即由绿色变成蓝色者为阳性反应;无菌落生长,培养基仍绿色者为阴性反应,阴性反应者应继续培养观察至7 天。

  • 【原创大赛】细菌生化鉴定试验你了解几何?——三糖铁培养基的灵活应用

    细菌生化鉴定试验你了解几何?——三糖铁培养基的灵活应用摘要:糖类是细菌合成菌体成分必需的原料,各类细菌对各种糖类的分解能力也有差异,葡萄糖、乳糖、蔗糖是三糖铁培养基的三种糖,通过细菌对这三种糖的利用和分解产物做生化鉴定已经很有历史了。笔者通过对三糖铁培养基的应用,总结了三糖铁培养基在细菌鉴定中的灵活应用。总结:三糖铁培养基在肠道菌的鉴定中起到很重要的作用,只要灵活准确应用,将会在细菌的生化鉴定试验的第一步中起到关键性的作用。

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  • 高压灭菌器做九管法时如何避免气泡残留在培养基
    大肠菌群细菌多存在于温血动物粪便、人类经常活动的场所以及有粪便污染的地方,人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然界存在的主要原因。大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一。而检测食品中大肠菌群的方法中,国内采用的进出口食品大肠菌群检测方法主要有国家标准,国家标准的三步九管法,即乳糖发酵试验、分离培养、证实试验。 由于大肠菌群指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌,即:需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。因此大肠菌群的检测一般都是按照它的定义进行。1.乳糖发酵试验:样品稀释后,选择三个稀释度,每个稀释度接种三管乳糖胆盐发酵管。36±1℃培养48±2h,观察是否产气。2.分离培养:将产气发酵管培养物转种于伊红美蓝琼脂平板上,36±1℃培养18-24h,观察菌落形态。3.证实试验:挑取平板上的可疑菌落,进行革兰氏染色观察。同时接种乳糖发酵管36±1℃培养24±2h,观察产气情况。 在乳糖发酵试验工作中,经常可以看到在发酵倒管内极微少的气泡(有时比小米粒还小),有时可以遇到在初发酵时产酸或沿管壁有缓缓上浮的小气泡。实验表明大肠菌群的产气量,多者可以使发酵倒管全部充满气体,少者可以产生比小米粒还小的气泡。 在试验过程中,会用到高压灭菌器来进行灭菌,九管法灭菌时,大肠菌在高温下会产生气泡,如果用的是ALP高压力灭菌锅,可以通过进入工程师菜单,调整在升温过程中的排气时间,可以有效的排走残留在培养基中的气泡。初始界面灭菌中灭菌结束 培养基中有气泡 目前市面上,高压灭菌器品种繁多,有进口的有国产的高压灭菌器,高压灭菌器产品质量参差不齐。在业内质量口碑最好的当属东南科仪总代理的日本ALP高压灭菌器,日本ALP高压灭菌器具备《进口压力容器生产许可证》、《进出口锅炉压力容器安全性能检验证书》以及高压灭菌器上的压力表和减压阀,送当地计量部门计量后取得计量证书。 ALP高压灭菌器开关轻松简便,电子锁仅在通电时才可开启,避免因断电或关机时意外泄漏未灭菌物质。高压灭菌器可清晰显示所处的状态,如温度、压力、程序及操作过程中的其它相关信息。高压灭菌器脉冲空气净化反复进行,直至压力高于对应温度而产生过饱和蒸汽压保证灭菌效果。ALP高压灭菌器可根据被灭菌物质的情况调整蒸汽排放情况,ALP高压灭菌器具备快速冷却功能可使灭菌后快速降温到80℃以下的安全温度。ALP高压灭菌器通过真空泵及经0.2um的滤膜过滤后的热空气快速干燥样品,使其快速可用。高压灭菌器标配物温探头安装孔,选配物温探头,方便进行内部灭菌效果的验证。ALP高压灭菌器三重脉冲,预真空设备配置强大的真空泵强行排空腔内留存的空气,使饱和蒸汽良好的渗透入灭菌物品中,从而确保充分有效的灭菌效果。 更多详细参数可关注ALP高压灭菌器中国总代理:东南科仪!
  • 默克无菌检测培养基的特点
    相信经过前两期小编的详细介绍:无菌成品检测培养基的生产工艺,验证情况等,大家已经对无菌检测培养基有了初步了解了。那么,小编会给大家总结下成品培养基的特点。照例,在新解说开始之前,我们先进行一个小测验。这么多天过去了,不知道大家还记得多少呢?问:无菌检测培养基的严格的生产流程包含哪些?选择高质量的干粉培养基做为原料,使用一次性无菌耗材转移至灌装线对瓶子进行纯化水清洗,并干燥使用一次性过滤器降低生物负载并截留颗粒使用一次性管路进行罐装灭菌程序灭菌目视检查澄清度问:无菌检测培养基的验证包括哪些验证?答:物理特性的验证微生物特性的验证包装性能的验证不记得的小伙伴们,戳生产工艺复习哦!现在正式进入无菌检测培养基的特点篇无框式螺旋帽优化消毒程序这种无框式设计在擦拭消毒的时候,有效规避死角,都可以消毒到可以避免消毒剂在表面的残留,从而引发假阴性大直径隔垫易于操作人员安全高效刺入大直径的隔垫,方便插入,有效避免了粒子脱落。尤其是冲洗液的隔垫,常规设计的需要多次插入,使用这个大直径隔垫就方便多了二维码追溯系统产品瓶子上的二维码,记录了产品货号,批号,有效期等信息,通过扫码枪扫描就可以读取,使用更方便。满足很多公司对日益严格的数据完整性需求。颜色-外包装盒及螺旋盖易于分辨 不同的产品颜色不同,这样使用的时候就不容易出错。绿色是TSB红色是FTM黑色是冲洗液从无菌检测培养基的工艺到验证,再到这篇文章,我们向大家简单介绍了产品的部分情况与优点,希望能够给大家带来一些有用的知识,提高工作效率。相见不嫌晚为了更好得供应中国用户,默克无菌检测培养基得产品线已经在南通的生命科学亚太区生产中心生产了! 在保证质量的同时,大大缩短了供货周期。以下是具体的产品货号,如果您有相关需求,可以扫描下方二维码简单登记,我们将尽快与您联系。感谢您对默克微生物检测的支持!
  • 细胞培养基的质量标准和检测方法
    细胞培养基是人工模拟细胞在体内生长的营养环境,是提供细胞营养和促进细胞生长增殖的物质基础。培养液或培养基的含义几乎相同,英文都是medium。当它是粉剂时,倾向性地称为培养基,而将粉剂配成液体后,多称为培养液。培养液中常常补加血清、抗生素等成分。培养基主要包括天然细胞培养基、合成细胞培养基和无血清细胞培养基等。细胞培养基的质量标准和检测方法澄清度水是细胞培养基的溶剂。细胞培养基中的营养成分只有完全溶解于水才能被细胞吸收摄取,细胞才能生长增殖,因此细胞培养基是否溶解以及培养液是否透明澄清直接影响培养基使用。该项目是通过对水溶解后的细胞培养基的澄清度检查,判断细胞培养基的澄清度。 按中华人民共和国药典2005年版二部附录Ⅸ B进行。pH 值哺乳类动物细胞生长需要合适的酸碱度,pH过高或者过低都会导致细胞死亡。pH值的测定也可以检查细胞培养基的批间差。清大天一标准规定取规定量供试品,用注射用水(水温20℃-30℃)溶解至1L,加入规定量碳酸氢钠到上述溶液中,用与细胞培养基溶液pH值相近的两点标准缓冲液校准后的酸度计进行测定。按中华人民共和国药典2005年版二部附录Ⅵ H进行;加入规定量的碳酸氢钠到上述溶液中,按中华人民共和国药典2005年版二部附录Ⅵ H进行干燥减量的质量分数细胞培养基具有吸湿性,在空气中放置水分会很快升高,干燥减量的质量分数表示产品中含湿量。细胞培养基是有菌制剂,其丰富的营养成分有利于微生物生长,控制细胞培养基中的水分可以防止微生物的繁殖,保持细胞培养基的养分。按中华人民共和国药典2005 年版二部附录Ⅷ L 干燥失重测定法进行。渗透压溶剂通过半透膜由低浓度向高浓度溶液扩散的现象称为渗透,阻止渗透所需施加的压力,称为渗透压。细胞必须生活在等渗环境中,动物细胞借助K+、Na+维持渗透平衡。大多数细胞对渗透压有一定的耐受性。但是培养液渗透压过高容易使细胞脱水wei缩,培养液渗透压过低容易使细胞膨胀破裂,因此要控制培养基的渗透压范围。按中华人民共和国药典2005 年版二部附录Ⅸ G 渗透压摩尔浓度测定法进行。细菌内毒素细菌内毒素是许多病原性细菌所产生的毒素。它的特殊性在于不是细菌或细菌的代谢产物,而是细菌死亡或解体后才释放出来的一种具有生物活性的物质。培养基细菌内毒素过高,对生物制品疫苗(如狂犬、乙肝疫苗)、基因工程药品等注射用的药品都需要检查细菌内毒素。 因此本项目的检验符合生物制品质量控制要求。常规细胞培养基的细菌内毒素标准定为<10 EU/ml。称取本品规定量(见表4-12)的1/100,加入细菌内毒素检查用水10 mL溶解,吸取该溶液0.1 mL加细菌内毒素检查用水3.9 mL,混匀即得试样。按中华人民共和国药典2005 年版二部附录Ⅺ E 细菌内毒素检查法中的凝胶法进行。微生物限度细胞培养基不是无菌产品,其中的微生物在一定条件下会吸收细胞培养基中的营养物质滋生繁殖,导致细胞培养基变质失效。控制细胞培养基中细菌和霉菌,是延长细胞培养基有效期的方法之一。清大天一在参考《中华人民共和国药典》2005版二部附录第100页的口服给药制剂的微生物限度标准,并严于该标准,规定细胞培养基产品的细菌数每1g不得超过200个,霉菌数每1g不得超过50个。称取样品1 g,加入无菌纯化水10 mL溶解,混匀即得试样。按中华人民共和国药典2005年版二部附录Ⅺ J 微生物限度检查法进行,检查项目为细菌数、霉菌数。检查法采用平皿法。细胞生长试验这是一个性能特性表述的要求。细胞培养基的功能就是培养哺乳类动物细胞,因此经过细胞培养效果的检验是产品质量优劣的直观表述,这也是很多生物制药用户要求的一项指标。目前国内尚无细胞培养和计数的法定方法,可参考《体外培养的原理与技术》中细胞计数fa论述的内容给出。按产品说明书配制培养液进行细胞培养,前四天用含10%小牛血清的培养液培养,观察细胞形态并计数,检查细胞培养基是否有促生长的能力。后三天用不含小牛血清的培养液维持培养,观察细胞形态并计数,检查细胞培养基中是否有不利细胞生长的毒素。本试验用细胞为VERO细胞。细胞培养液的储存,细胞培养液的储存条件一般为2-8℃、密闭、避光保存,但要注意如下几点:1) 过滤后的完全培养液,即添加了血清、谷氨酰胺、抗生素等的培养液要尽快使用,一般在2-3周内使用完。培养液中的L-谷氨酰胺是不稳定的,不同温度L-谷氨酰胺的降解。2) 灭菌后的未加L-谷氨酰胺等添加剂的培养基溶液,一般可在4℃保存6~9个月,也可冷冻保存,用时解冻3) 高压除菌后的培养基应置4℃保存,不能因为其可耐受高温而忽略储存温度。4) 添加某些生长因子、激素等添加物,可能会改变培养液的储存条件,比如温度、时间等方面的要求
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