RAPA3G植物组织直扩PCR试剂盒

RAPA3G DNA聚合酶为经电子重构架的第三代Taq DNA聚合酶，第三代DNA聚合酶具有高度的杂质耐受性、长片段扩增能力、高扩增成功率、高产量等特征，从而使得RAPA3G系列产品可用于粗制样品的直接扩增，无需核酸纯化步骤。杂质耐受性方面，该酶可耐受植物中的多糖多酚；全血、血清、血浆中的肝素、高浓度的血红蛋白、甘油三脂；乙醇；胍盐；SDS等强PCR抑制剂。在血液直扩PCR实验中，RAPA3G PCR Mix性能与KAPA3G DNA聚合酶展现出同等的表现，其性能表现优于二代聚合酶（血液扩增Hemo KlenTaq Mix）。在植物直扩PCR实验中，RAPA3G PCR Mix在配合DNA释放剂的条件下与KAPA3G Plant PCR试剂盒性能一致。

长片段扩增能力方面，使用该酶可轻松扩增8kb的基因组片段，20kb的λ DNA，8kb的cDNA。该酶具有6kb/min以上的扩增速度，可显著的缩短PCR的扩增时间，在常规测试条件下，10s的延伸时间可完成1kb的基因组DNA扩增。在PCR扩增成功率方面，与其它类型的PCR扩增试剂对比中，RAPA3G PCR Mix表现出卓越的PCR扩增成功率。此外，该酶包含一定比例的RAPA HiFi超保真DNA聚合酶，因此其具有一定的保真性能（经蓝白斑测试，其保真性能约为Taq DNA聚合酶的56倍）。另外，RAPA3G系列产品均采用HaiGene专有的热启动技术，确保50°C以下完全无活性，仅有95°C加热5min以后才能恢复其活性，因此可最大限度的提高扩增的特异性，减少非特异性产物的产生。该PCR Mix具有5'-3'的聚合酶活性、5'-3'的外切酶活性和3'-5'的外切酶活性，产物部分带有"A"尾巴，部分为平末端，因此产物均可用于TA克隆或平端克隆。

特征和用途

快速扩增：具有6kb/min的扩增能力，1kb片段可在25min内完成扩增.

高成功率扩增：RAPA3G PCR Mix具有最高的PCR扩增成功率。

液体样品直接扩增：全血、血清、培养细胞、尿液等样本直接进行PCR扩增，无需核酸纯化。

组织样本直接扩增：叶片、种子、果实、动物组织等样品，可以直接扩增，也可采用DNA释放剂简单处理后直接扩增，无需核酸纯化。

长片段扩增：质粒、λ DNA 等简单模板可以有效扩增>20 kb，基因组可以有效扩增>8 kb，cDNA可以有效扩增>8kb。

高保真扩增：保真度是 Taq DNA Polymerase 的56 倍。

高特异性：采用HaiGene专有热启动技术，50°C以下无活性，仅有95°C加热5min才能恢复酶活。

储存

长期储存置于-20°C以下，可保存2年，避免反复冻融；短期使用置于4°C（3个月）保存，一经融化后请放置于4°C，勿再冻存。

应用实例1：在以A3824-03或 A3828-03，用 LP1002引物组进行的LAMP测试。Bst4.0 SYBR Green试剂可在标准定量PCR仪或恒温荧光仪上进行反应。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应25min的检测结果，可以看到检测反应<20min(达平台期)。

应用实例2： 用 LP1002引物组进行的LAMP测试。OG变色法为终点变色策略，在反应结束后，倒置反应管，溶解管盖上染料后，阳性样本呈现出醒目的绿色，阴性表现出橙色，区分明显。且该方法不受样本类型限制，杂质耐受性很好。以体外转录RNA为模板，1-6分别为1、10、100、1000、10e4和10e6Copies，NTC为ddH2O为模板。下图为65℃反应20min后检测结果。

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应用实例3：采用荧光酶活测定法在30℃和60℃条件下测定HotStart Bst 4.2，结果显示与未加入Aptamer的对照比较来看。HotStart Bst 4.2在30℃条件下酶活几乎无活性，而60℃条件下1min内酶活完全释放，恢复100%活性