RAPA3G probe qPCR Mix是将化学修饰的热启动RAPA3G DNA聚合酶、反应Buffer、dNTP等试剂预混在一起,是一种2×浓度的单组分预混试剂,用于单重的探针法定量PCR。该制品不含有ROX校正染料,适用于各种荧光标记探针,并且适用于各种定量PCR机型。此外,该制品在多重定量PCR (MultiPlex qPCR)检测表现出色,至少可进行4重的定量PCR检测。
制品中的RAPA3G DNA聚合酶为第三代DNA聚合酶,其具有最高的杂质耐受性,其对乙醇、胍盐、肝素、血清、植物多糖多酚具有极高的耐受性,因此可用于粗样品的直接定量PCR检测(Direct PCR)。该酶经化学法修饰,在50℃以下100%无活性,只有95度条件下加热5min后才能完全恢复酶的活力。因此该系统可以有效抑制非特异性PCR扩增,极大的提高了PCR扩增特异性。
主要特征
RAPA3G DNA聚合酶强劲的扩增性能,可用于4重以上的qPCR扩增。
杂质高耐受性,使用各种gDNA和cDNA,具有最佳的扩增成功率。
高灵敏度,宽范围的动态检测(>7个数量级)。
反应效率在95-110%之间,高准确度和重现性。
扩增程序40min内完成,具有10s扩增1kb的快速能力。
在不同的富含AT和GC目标物上产生更高的荧光检测。
应用
基因分型、RNA转录的cDNA、基因组DNA、病毒DNA等定量检测。
储存
请避光置于-20℃可保存3年。请避光置于-20℃以下可保存3年。该试剂经30次冻融后性能无下降,因此不使用时请置于-20℃避光保存。
反应实例 |
A![](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/b7786032-787a-45a8-b3a8-b103b216bfbb.jpg) |
B![](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/b2a755de-58d3-4401-b942-4282faba6e63.jpg) |
C![](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/fceccad6-21bd-4227-8d16-43bfb4fa2347.jpg) |
D![](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/10b86654-5e11-4ca9-97dc-8f1b80b84828.jpg) |
E![](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/b4bafdfd-43b0-4a88-bc07-173517268139.jpg) |
Fig.四重引物、探针检测。分别以nCoV S基因质粒(蓝线- FAM通道)、nCoV N基因质粒(绿线- VIC通道)、nCoV ORF1ab基因质粒(红线- Cy5通道)和 人GAPDH内参Hela cDNA(黄线- ROX通道)为模板,四对引物和四条探针在同一体系内进行检测, 模板均使用10e8-100copy/Test(7个数量级),A为四重检测扩增曲线和标准曲线,C-E为单独每一个通道的性能展示,结果可见该RAPA3G Probe qPCR Mix在7个数量级的动态检测中表现出卓越的扩增性能,各个通道之间区分良好。 |
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