蔗糖合成酶(SS)活性检测试剂盒微量法

蔗糖合成酶（SS）活性检测试剂盒说明书

微量法

规格：100T/48S

产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

试剂二：临用前加 1 mL 水，配制成 10 mg/mL 蔗糖溶液，再将其用蒸馏水稀释为 500μg/mL 备用。

产品说明：

蔗糖是源（叶片等）光合产物向“库”器官运输的主要形态。SS（EC 2.4.1.13）催化植物体内游离果糖和葡萄糖合成蔗糖。

SS 催化游离果糖与葡萄糖供体 UDPG 反应生成蔗糖，蔗糖与间苯二酚反应可呈现颜色变化，在 480nm 下有特征吸收峰，酶活力大小与颜色的深浅成正比。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、离心机、移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

二、测定步骤

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 480nm，蒸馏水调零。

2、 样本测定（在 1.5mL EP 管中依次加入下列试剂）：

混匀，80℃水浴保温 20min，冷却后，吸取 200μL 于微量玻璃比色皿或者 96 孔板中，在 480nm 下测定各管吸光值（标准管和空白管只做 1-2 管，每个测定管需要设定一个对照管）。计算 ΔA 测=A 测定管-A 对照管，ΔA 标=A 标准管-A 空白管。

三、SS 活力单位的计算

注意事项：

尽量在30min内完成测定

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！