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厌氧微生物培养的基本原理与操作步骤!

                厌氧微生物培养的基本原理与操作步骤!一、基本原理厌氧微生物在自然界分布广泛,种类繁多,作用也日益引起重视。培养厌氧微生物的技术关键是要使该类微生物处于除去了氧或氧化还原势低的环境中。焦性没食子酸与碱性溶液作用后,形成碱性没食子酸盐,在此反应过程中能吸收氧气而造成厌氧环境;牛肉渣内既含有不饱和脂肪酸能吸收氧,又含有谷胱甘肽(glutathione)能形成负氧化还原电位差;厌氧罐是采用某种方法除去其中的氧,例如将镁与氧化锌制成产氢气袋,放入罐中加水反应产生氢,钯或铂是催化剂,在常温下催化氢与氧化合成水,则可除去密封的厌氧罐中的氧。二、器材巴氏芽孢梭菌(巴氏固氮梭状芽孢杆菌,Clostridium pas- teurianum),荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens);焦性没食子酸,棉花,10%NaOH,灭菌的石蜡凡士林(1∶1),牛肉,蛋白陈,葡萄糖, NaCl,肉膏蛋白胨琼脂培养基,小试管肉膏蛋白胨琼脂斜面,厌氧罐,催化剂袋,气体发生袋,指示剂袋,灭菌的带橡皮塞或螺旋帽的大试管,灭菌的玻璃板(直径比培养皿大3—4 cm),灭菌的滴管,烧瓶,刀等。三、操作步骤1、焦性没食子酸法(1)大管套小管法在大试管中放入少许棉花和焦性没食子酸,焦性没食子酸的用量按它在过量碱液中能每克吸收100ml空气中的氧来估计,本实验用量约0.5g。接种巴氏芽孢梭菌在小试管肉膏蛋白胨琼脂斜面上,迅速滴入10%的NaOH于大试管中,使焦性没食子酸润湿,并立即放入除掉棉塞已接种菌的小试管斜面(小试管口朝上),塞上橡皮塞或拧上螺旋帽,置30℃培养。(2)培养皿法取玻璃板一块或用培养皿盖,铺上一薄层灭菌脱脂棉,将1g焦性没食子酸放于其上。用肉膏蛋白陈琼脂培养基倒平板,待凝固稍干燥后,在平板上一半划线接种巴氏芽孢梭菌,下一半划线接种荧光假单胞菌,并在皿底用记号笔作好标记。滴加10%NaOH溶液约2ml于焦性没食子酸上,切勿使溶液溢出棉花,立即将已接种的平板覆盖于玻璃板上或培养皿盖上,必须将脱脂棉全部罩住,焦性没食子酸反应物切勿与培养基表面接触,以溶化的石蜡凡士林液(即vaspar)密封皿底与玻璃板或皿盖的接触处。置30℃温箱培养。  2、疱肉培养基法(1)取已除去筋膜、脂肪的牛肉500g,切成小方块,置1000ml蒸馏水中,以小火煮1小时,用纱布过滤,挤干肉汁,将肉汁保留备用。再将肉渣用绞肉机绞碎,或用刀切碎,最好使其成细粒。(2)将保留的肉汁加蒸馏水,使总体积为2000ml,加入20g蛋白陈,2g葡萄糖,5gNaCl和绞碎的肉渣。置烧瓶中摇均匀,加热使蛋白胨溶化。(3)取上层溶液调整pH为8.0,在烧瓶壁上用记号笔标明瓶内液体高度,1.05kg/cm2,121.3℃灭菌15分钟后补足蒸发的水量,重新调整pH为8.0,再煮沸10—20分钟,补足水量,再调整pH为7.4。(4)把烧瓶内容物摇匀,将溶液和肉渣分装于小试管中,肉渣约用,应用无菌手续加入已灭菌的石蜡凡士林,以隔绝氧气。(5)接种前可将上述已做好的庖肉培养基煮沸10分钟,以除去溶入的氧,如果盖有一层石蜡凡士林,需将石蜡凡士林先在火焰边微加热,使其溶化。在培养基手感不烫时按液体接种法接入巴氏芽孢梭菌,然后将接种的试管垂直,使石蜡凡士林凝固而密封培养基。再置30℃中培养。  3、厌氧罐培养法(1)用肉膏蛋白胨琼脂培养基倒平板,凝固干燥后,取两个平板,每个平板一半边划线接种巴氏芽孢梭菌,另一半边划线接种荧光假单胞菌,并标记好。取其中的一个已接种的平皿置于厌氧罐的培养皿支架上,而后放入厌氧培养罐内;另一个已接种的平皿置培养室30℃培养。(2)剪开催化剂袋,将催化剂倒入厌氧罐盖下面的多孔催化剂盒内,拧紧催化剂盒的盒盖。(3)剪开气体发生袋的切碎线处,并迅速将此气体发生袋置罐内金属架的夹上,再向袋中加入约10 ml水。同时,由另一人配合,剪开指示剂袋,将指示条暴露,立即放进罐内。(4)迅速盖好厌氧罐的盖,将固定梁旋紧,置 30℃培养。北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

参数原理

2021.10.14

SW 1353人软骨肉瘤细胞的应用!

                   SW 1353人软骨肉瘤细胞的应用!一、背景SW 1353人软骨肉瘤细胞最初从一位72岁女性白人的右肱骨原发性Ⅱ级软骨肉瘤中分离得到。最初的培养基是含有可的松和胰岛素的L-15培养基添加10%FBS和1%抗生素。1982年1月,ATCC收到1支传代至12代的冻存管SW 1353细胞。软骨肉瘤是常见的恶性骨肿瘤之一,发生于髓腔者为中心型,发生于骨膜者为骨膜型,另有少数可发生于软组织。肿瘤好发于四肢长骨与骨盆,也可见于椎骨、骶骨、锁骨、肩胛骨和足骨。SW1353软骨细胞系是一种人软骨肉瘤细胞株,常被用于软骨细胞功能及相关疾病的研究。二、细胞处理方法1、细胞在培养瓶中培养至状态良好后灌满培养基运输,获得细胞后用酒精棉球擦拭瓶口消毒,然后在超净台中操作。2、如细胞生长至70%-80%,将瓶中的培养基移入无菌瓶中留作培养使用,保留5-8mL培养基在37℃、5%的CO2的温箱中继续培养。细胞培养至90%-100%后,按要求消化传代。3、弃去培养基,用无菌PBS或者其他缓冲液清洗细胞2次,加入适量胰蛋白酶消化(EDTA胰酶),待细胞完全脱壁后加培养基吹打混匀,分瓶培养。三、应用用于人软骨肉瘤细胞SW1353及WISP3突变型C20/A4软骨细胞的Ⅱ型胶原动力学及定位研究:与许多组织细胞不同,软骨细胞在体外长期贴壁培养(单层培养)和传代过程中,细胞形态与功能可发生显著变化,细胞逐渐丧失合成Ⅱ型胶原和硫酸软骨素蛋白多糖的能力,转而分泌Ⅰ型和Ⅲ型胶原,该变化被称为“软骨细胞的去分化(Dedifferentiation)现象”。从软骨细胞脱离组织,在贴壁条件下培养开始,软骨细胞即逐渐地发生去分化。近10余年来,因海藻酸钠三维培养体系能很好模拟体内环境,有效维持软骨细胞的分化表型,广泛应用于软骨细胞组织工程和软骨细胞生物学研究。比较了单层培养及海藻酸钠三维培养的人软骨肉瘤细胞SW1353的形态学和表型差异,其目的是观察SW1353细胞在两种培养体系中的表型差异。单层培养的SW1353细胞8周后有去分化改变,而海藻酸钠三维培养体系8周后仍能很好维持软骨细胞的固有表型。与单层培养相比,三维培养中的SW1353细胞增殖缓慢,Ⅱ型胶原合成和分泌低下,因而细胞的这种“休眠”状态可能是三维培养状态下软骨细胞维持其固有表型。

应用实例

2021.10.14

金黄色葡萄球菌的检验标准知识解析!

                  金黄色葡萄球菌的检验标准知识解析!一、金黄色葡萄球菌定性检验1、7.5%氯化钠肉汤增菌培养:(1)若样品本身在均质后清澈,培养18h观察呈现一定程度的浑浊(与培养前相比),则接种平板;若18h后仍无变化,继续培养至24h后无论浑浊与否都接种至平板;(2)若样品本身在均质后浑浊,则直接培养至24h后再接种平板。2、血平板:36±1℃培养18h后观察,若有菌落生长或有菌落生长的迹象(无论是否溶血),则应酌情配制NA、BHI并分装至小试管中(NA 10mL/管、BHI 5mL/管)、灭菌后NA应斜放凝固成琼脂斜面备用。至血平板培养至24h取出,挑取菌落进行革兰氏染色镜检,同时挑取菌落接种至NA斜面、BHI肉汤管,36±1℃培养24h。3、接种原则:(1)革兰氏染色后还剩余10个或10个以上菌落,则NA、BHI分别接种5管;(2)若多于5个(不包括5个)不足10个,则BHI接种5管,剩余的接种NA;(3)5个及以下则全部接种BHI,不接种NA。4、BP平板:36±1℃培养24h后观察,有菌落生长则取出,无菌落生长则继续培养至48h后再观察。若血平板已挑取菌落进行证实试验,则不必再挑取BP平板上的菌落进行实验。 若血平板上无菌落生长,则应在24h~48h内逐步观察BP平板是否长菌或有无长菌迹象,有则需配置BHI及NA,挑取BP上的菌落进行纯化、增菌,36±1℃培养24h。 5、血浆凝固酶试验:(1)根据BHI管数,取冻干血浆粉,每瓶用移液枪加入0.5mL生理盐水,使其充分溶解,再换移液枪枪头取0.3mLBHI培养物加入其中(每管BHI用1个枪头),振荡摇匀后于36±1℃培养,计时,每30min观察一次,如呈现凝固(将试管倾斜或倒置时出现凝块)或半凝固(一般的液体呈现凝固)则判定为阳性。若一直不凝固,则一直观察,直至观察至6h(查看12次)还未凝固,则试验终止,判定为阴性结果;若中途出现完全凝固或半凝固,则试验终止,判定为阳性结果。(2)同时取金黄色葡萄球菌标准菌株(ATCC 6538以及CMCC(B)26003各一支)制成菌悬液后作为阳性对照、以灭菌生理盐水为阴性对照,分别接种至BHI中同步培养后进行血浆凝固酶试验。(3)若血浆凝固酶试验结果可疑,则挑取NA上的菌落接种BHI再次进行试验。二、金黄色葡萄球菌平板计数法1、取1mL样品稀释匀液接种3个BP平板(此处并未严格按照标准中0.3mL、0.3mL、0.4mL精确取样,由于如此操作会增加试验时间,无法在15min内完成试验)。2、涂布时不要触及平板边缘(会导致样液涂抹不均匀,大部分汇集于边缘)。3、可用同一根涂布棒从低稀释度到高稀释度进行涂布(不用换涂布棒)。4、涂布完成后应稍微放置一段时间使培养基吸收样品匀液。5、若水珠较多,可正置于培养箱中1~2h后再倒置培养。6、36±1℃培养24h后观察,有典型菌落生长则进行证实试验(革兰氏染色镜检、血浆凝固酶试验、划线血平板)。若无菌落生长则继续培养至48h后再观察,有典型菌落生长则进行证实试验,无典型菌落生长则试验终止。三、金黄色葡萄球菌MPN计数法1、样品稀释同菌落总数,取3个连续稀释度稀释液(或包括液体样品原液),每个稀释度接种3管7.5%氯化钠肉汤,每管接种1mL,36±1℃培养18h后观察,若出现浑浊则接种至BP平板,若无变化则继续培养至24h后再接种至BP平板。 2、划线接种至BP平板,36±1℃培养24h后观察,有典型菌落生长则进行证实试验(革兰氏染色镜检、血浆凝固酶试验、划线血平板)。若无菌落生长则继续培养至48h后再观察,有典型菌落生长则进行证实试验,无典型菌落生长则试验终止。 3、根据证实后的阳性管数差MPN表得出结果。四、标准检验补充 1、称取25g样品于可封口的均质袋中,再倒入BPW至250g,尽量排去均质袋中的空气后再封口、均质后直接置于36±1℃培养箱中培养过夜(标准要求为8~18h,一般培养过夜后第二天早晨继续下一步试验) 2、TTB、SC应酌情配制,现配现用,不宜久置。若BPW放入培养箱的当日时间允许,则可将TTB、SC灭菌、配制、分装后冷藏以备第二天实验;若当日时间不允许,则次日早晨灭菌、分装,下午即可转接培养。 3、TTB:灭菌条件为121℃15min,与一般试验耗材、培养基的灭菌条件一致,故在灭菌时可考虑同时灭为一锅。且须同时灭一些带塞(可带塑料盖子)的小试管、10mL移液枪枪头、1mL移液枪枪头,在灭菌完成后温度降至不烫手时,轻轻晃动三角烧瓶使底部白色沉淀物浮起而充分混匀,每100mLTTB中加入1支碘液(陆桥,P-72)、1支0.1%煌绿(陆桥,P-73),充分摇匀至整瓶TTB呈现绿色,此时用移液枪准确吸取10mLTTB至已灭菌的小试管中,盖上盖子。取1mLBPW增菌液至1管TTB中,于42℃培养18~24h(若时间允许、或18h后观察试管仍无浑浊,则培养至24h,否则培养至18h即可)。 4、SC:仅需加热煮沸灭菌(因SC易溶于水,煮沸即可,无需过度加热),冷却至不烫手时用移液枪吸取10mL分装至已灭菌的小试管中,盖上盖子。取1mLBPW增菌液至1管SC中,于36±1℃培养18~24h(若时间允许、或18h后观察试管仍无浑浊,则培养至24h,否则培养至18h即可)。 5、BS、XLD应酌情配制,在用前一天配制后备用(两者仅需加热灭菌、不添加任何添加剂,无需过度加热)。BS在不烫手时即可倒成平板,否则容易沉淀或凝固,且在倒平板前应充分摇匀以防止有效成分沉淀于底部(棕色或棕黄色颗粒物)。XLD过度加热会造成琼脂不易凝固、划线时容易划破,甚至不凝结成块、无法倒置。 6、XLD培养条件:36±1℃培养18~24h。18h后观察,若TTB、SC增菌液都有菌落生长,则可挑取任意生长良好的菌落进行生化鉴定试验;若只有其中一种增菌液有菌落生长、或两者都无菌落生长,则继续培养至24h再观察,此时无论菌落生长与否都不再继续培养,只要其中任一增菌液有典型或可疑金黄色葡萄球菌生长则挑取进行生化试验。 7、生化鉴定:(1)一般情况下,XLD上的任一增菌液长菌,则BS上对应增菌液也会长菌,此时若已挑取XLD上的菌落进行生化试验,则无需挑取BS上的菌落;或XLD上的两种增菌液长了形态特征完全相同的菌落,则挑取任一典型菌落进行生化鉴定即可,且无论BS上菌落生长如何,都不再挑取BS上的菌落进行生化试验。(2)若出现XLD未长菌的增菌液在BS上长菌,则还需挑取BS上的该菌落进行生化试验。(3)用生化鉴定试剂盒进行生化鉴定,依据产品说明书判断阴性或阳性,再根据标准中表2~表5的内容逐步进行判定(即生化鉴定试剂盒是将标准中的所有鉴定步骤同时完成,但判定时依然要按照标准逐步判定,只要其中任一阶段可判定为非沙门氏菌属,则不再往下判定,鉴定试验即终止)(4)若判定为金黄色葡萄球菌,则可选择进行或不进行血清凝集试验。首先应确定该菌落无自凝性,否则无法进行血清学试验。欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

参数原理

2021.10.13

腐蚀柠檬酸杆菌的培养方法与注意事项!

               腐蚀柠檬酸杆菌的培养方法与注意事项!腐蚀柠檬酸杆菌是Citrobacter属的微生物,原产地为美国。本菌双倍乳糖胆盐培养基中44.5℃培养不生长。在伊红美蓝琼脂培养基上的菌落西瓜红色,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润。主要用途为分类;研究,具体用途为分类学研究。一、菌种简介平台编号:bio-85065提供形式:冻干物拉丁属名:Citrobacter rodentium中文名称:腐蚀柠檬酸杆菌拉丁名称:Citrobacter rodentium其它保藏中心编号:=DSM 16636=ATCC 51116=CDC 1843-73=CIP 104675来源历史:←DSMZ←ATCC收藏时间:2016/6/15原始编号:CDC 1843-73 [DO 14784]原产国:美国资源归类编码:15131122103模式菌株:非模式菌株主要用途:分类;研究特征特性:双倍乳糖胆盐培养基中44.5℃培养不生长。在伊红美蓝琼脂培养基上的菌落西瓜红色,圆形,边缘整齐,表面光滑湿润。具体用途:分类学研究。生物危害程度:四类培养基编号:CM0847培养基名称:胰蛋白胨大豆琼脂(TSA)(CAIQ0701)培养基成分:胰蛋白胨 15.0g,大豆胨 5.0g,氯化钠 5.0g,琼脂 13.0 g,蒸馏水 1.0L,pH7.3±0.2。。培养温度:37℃需氧类型:好氧分离基物:仓鼠采集地:美国康涅狄格州保存方法:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享用途:分类学研究。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。二、储存条件冻干菌种和试管斜面请置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。三、培养条件1、培养基编号:CM08472、培养基成分:胰蛋白胨 15.0g,大豆胨 5.0g,氯化钠 5.0g,琼脂 13.0 g,蒸馏水 1.0L,pH7.3±0.2。3、需氧类型:好氧4、培养温度:37℃四、注意事项1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。2、试管斜面菌种请尽快转接,不建议长期存放。3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。4、使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系或更换新的菌种。五、冻干管打管说明书1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉檫试冻干管表面进行消毒,将管顶端于酒精灯外焰上均匀加热;立即滴 2-3 滴无菌水于加热部位,使管壁破裂;再用镊子或其他适宜工具敲下破裂处。2、菌株恢复培养:用无菌吸管吸取 0.5ml 左右液体培养基(固体培养基去掉琼脂即可)于冻干管中将冻干菌粉全部溶解。将溶解后的菌悬液转移至盛有 4~5mL 液体培养基的试管中混匀,可将残留在吸管中 1-2 滴菌悬液转接至固体培养基上。将液体试管和斜面试管于推荐条件下静置培养。以液体培养结果为准。3、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 2-8℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,延迟期较长,需要转接至 2-3 代恢复活力。4、复苏后的菌种在传 1-2 代后使用。5、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏(特殊除外)。6、冻干管打开后需一次用完,不能留存。7、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。8、打管操作应在烧杯或托盘上方进行,用完冻干管应灭菌处理后丢弃。

参数原理

2021.10.13

小鼠肾上腺皮质瘤细胞的应用!

                      小鼠肾上腺皮质瘤细胞的应用!一、背景小鼠肾上腺皮质瘤细胞是一株能分泌鼠类甾类激素、分泌型肾上腺皮质激素的细胞系。肾上腺皮质是构成肾上腺外层的内分泌腺组织。它能分泌由数种类固醇混合而成的肾上腺皮质激素,皮质内还含有为数更多的类固醇。肾上腺皮质由3层构成,最外层为球状带(zona glomerulosa),接着为占大部分的束状带(zona fasciculata),内层为网状带(zona seticularis)。其功能异常可以引起肾上腺皮质功能亢进、肾上腺皮质功能减退、肾上腺皮质增生等。肾上腺皮质的组织结构可以分为三层,自外向内分为球状带、束状带和网状带。球状带腺细胞排列成短环状或球状。这一层较薄,主要分泌盐皮质激素,人主要为醛固酮。束状带位于皮质中间,腺细胞排列成垂直于腺体表面呈束状。这层较厚,构成皮质的大部分。网状带位于皮质最内层,腺细胞排列不规则。肾上腺皮质癌(adrenocortical carcinoma)甚少见,一般为功能性,发现时一般比腺瘤大,重量常超过100g,呈浸润性生长,正常肾上腺组织破坏或被淹没,向外侵犯周围脂肪组织甚至该侧肾。小的腺癌可有包膜。切面棕黄色,常见出血、坏死及囊性变。镜下分化差者异型性高,瘤细胞大小不等,并可见怪形核及多核,核分裂像多见。二、应用用于类固醇生成因子-1及DAX-1与肾上腺皮质肿瘤研究:检测SF-1、DAX-1mRNA在肾上腺皮、髓质肿瘤以及正常肾上腺皮质中的表达,初步探讨SF-1、DAX-1在肾上腺肿瘤尤其是醛固酮分泌瘤中的作用。方法:1、用TRIZOL分别提取肾上腺醛固酮分泌瘤(APA,n=17),包括血管紧张素Ⅱ(AⅡ)无反应的醛固酮分泌瘤(AⅡ-U-APA,n=12)和血管紧张素Ⅱ有反应的醛固酮分泌瘤,(AⅡ-R-APA,n=5)、肾上腺醛固酮皮质癌(n=2)、肾上腺皮质醇分泌瘤(n=10)、肾上腺无功能瘤(n=10)、肾上腺嗜铬细胞瘤(PHEO,n=6)和正常肾上腺皮质(n=8)组织的总RNA;2、实时荧光定量PCR方法检测上述不同组织中SF-1、DAX-1、ACTH-R基因和内参照β-actin mRNA的表达;3、比较SF-1、DAX-1、ACTH-R mRNA在上述不同组织中的表达差异,并与肾上腺皮质肿瘤患者的临床资料行相关性分析。结果:1、SF-1 mRNA在肾上腺皮质肿瘤中的表达1)在APA中表达和正常肾上腺皮质相比无明显统计学差异,SF-1/β-actin mRNA比值分别为23.89±3.17(AⅡ-U-APA)、21.59±3.00(AⅡ-R-APA)和24.58±2.45(正常肾上腺皮质)(p>0.05);2、在皮质醇分泌瘤中表达(14.17±2.80)明显低于正常肾上腺皮质及APA,差异有明显统计学意义(p均<0.01);3、在肾上腺无功能瘤中表达(36.38±3.50),明显高于正常肾上腺皮质、APA和皮质醇分泌瘤(p均<0.01);4)2例肾上腺分泌醛固酮的肾上腺皮质癌中表达(分别为38.75和44.16)有明显高于其他各组的趋势。北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

应用实例

2021.10.13

格氏乳杆菌的生产工艺与应用范围!

                  格氏乳杆菌的生产工艺与应用范围!格氏乳杆菌是刺激免疫细胞分泌抗过敏相关细胞激素浓度的唾液乳杆菌。革兰氏染色阳性杆菌,不生成孢子,不具触酶、氧化酶及运动性,在好氧及厌氧环境均能生长,属于兼性异质发酸性菌株,葡糖代谢时不产生气体。一、定义中文名称:格氏乳杆菌刺激免疫细胞分泌抗过敏相关细胞激素浓度的唾液乳杆菌。革兰氏染色阳性杆菌,不生成孢子,不具触酶、氧化酶及运动性,在好氧及厌氧环境均能生长,属于兼性异质发酸性菌株,葡糖代谢时不产生气体。二、应用范围一种食品组合物,所述的食品为发酵乳、乳酪、乳制饮品、乳粉的任意一种;一种用于抗过敏的药物组合物,其包含刺激免疫细胞分泌抗过敏相关细胞激素浓度的唾液乳杆菌及药学上可接受的赋形剂或稀释剂;三、生产工艺为东宇专利菌株。我国台湾东宇生物科技股份有限公司聚焦于领先业界的SINT益生菌研发技术平台。四、来源健康新生儿之消化道中分离纯化,属人体原生菌种,为台湾东宇专利菌株,是一种少有的可以改善消化系统,预防消化不良反复发作的益生菌菌株,其功能为调整消化系统。Salivarius意指“腺体型”最初是由人类腺体中被发现,是人体消化道中的原生菌种,亦是美国食品药品监督管理局(FDA)表列安全菌种之一。五、分离基物于MRS培养液培养时,菌体呈短杆状,二端呈圆形,通常单独出现,成对短链状。特征特性: 呈球形或卵圆形,(0.5—1.2)μm×(0.5—1.5)μm,无芽孢,无荚膜,不运动,发酵产物以L-(+)-乳酸为主,不产气,最适生长温度30℃,可在10℃生长。六、质量要求1、性状冷冻干燥粉末2、唾液乳杆菌活菌数≥2.0×10的11次方 cfu/g七、益生菌的发现上个世纪初,前苏联科学家梅契尼柯夫和德国科学家保罗·埃尔利希发现胃肠道内的有利菌活性缺少,会损坏肠胃免疫体系,反抗有害菌才干下降,致使过敏性发作、久治不愈;并体系地论说了人体的白细胞和肝、脾内及细胞吞噬微生物的特性,正式提出噬菌细胞免疫学说。(Phagory-tentheorie),并因此二人一同取得了1908年度的诺贝尔医学与生理学奖。一个世纪以来科学家不断的对细菌学,益生菌,细胞学等微生物学方面进行研讨和实验,并不断取得新的打破。1982年,澳大利亚科学家巴里·马歇尔和罗宾·沃伦发现肠道疾病和过敏疾病是由于有利菌在肠道中削减,肠液中的消化酶活性缺少,毒素在肠道积累,肠粘膜遭到病毒及有害菌腐蚀构成。由此巴里·马歇尔和罗宾·沃伦取得了2005年度诺贝尔医学和生理医学奖的桂冠。在这两项诺贝尔奖效果的基础上,科学家经过重复的试验证明:过敏性疾病难以治好的根本原因在于胃肠道内消化酶和有利菌活性差。因此,只有添加肠道内相应的益生菌,激活人体胃肠道内消化酶和有利菌的活性,才是铲除过敏性疾病的的最好办法。八、产品功能1、能有效改变各类型过敏,包括:过敏性鼻炎、结膜炎、异位性皮肤炎、荨麻疹、食物、花粉等各种过敏症状。2、调整过敏体质,预防宝宝过敏。3、预防感冒,降低细菌及病毒(肠病毒、鼻病毒、呼吸道融合病毒)感染。4、长期补充能稳定肠道菌相,维持好菌多坏菌少之肠道生态,进而刺激粘膜强化免疫系统。5、健胃整肠,促进营养吸收提高造血功能。6、治疗急性腹泻、胀气、肠燥症。7、排出肠内毒素,延缓老化。

应用实例

2021.10.12

肺炎衣原体的鉴定检测方法及预防与控制!

              肺炎衣原体的鉴定检测方法及预防与控制!肺炎衣原体(C. pneumoniae)仅有TWAR 一个血清型。1965年从台湾小学生眼结膜标本中分离到一株新型衣原体,命名为TW-183;1983年从美国西雅图患急性呼吸道感染的大学生咽部标本中也分离出一株新型衣原体,命名为AR-39;后发现TW-183和AR-39株同为一种衣原体,1986年合并上述两株衣原体字母命名为TWAR血清型。 一、生物学分类1965年,我国台湾地区小学生进行沙眼的疫苗检测时,从沙眼患者的结膜中分离出一种新的衣原体,分离出的头两株分别命名为TW-183和AR-39,最初认为它是沙眼衣原体简称CT的一个株,并将此株统称为TWAR。进一步对衣原体的原体超微结构及DNA分析研究后,发现TWAR既不同于CT,又不同于鹦鹉热衣原体,简称Cpn。那时,肺炎衣原体中只有TWAR这一株被确定,于是,1989年,正式命名TWAR株为肺炎衣原体( Chlamydia pneumoniae,Cpn),归属于衣原体属内的第三个种。 根据遗传性和生物学特性,肺炎衣原体可分为 TWAR、 考拉和马 3 个生物变种。 代表株为 TW-183T( ATCC VR 2282T)。 TWAR 是由第一次分离到的 2 株 TW-183 和 AR-39的名字合并而成。TWAR 生物变种仅是从人分离到,同时也只有 1 个血清变种。 TWAR 对呼吸系统有致病性,最突出的是引起急性或慢性支气管炎和肺炎。此外, 还与急性或慢性呼吸道疾病如中耳炎、肺阻塞性疾病以及动脉粥样硬化、哮喘、 结节性红斑、反应性呼吸道疾病、Reiter 氏综合征、肉样瘤病等有关。参考株是 TW-183T。肺炎嗜性衣原体考拉生物变种其 MOMP 属于 1 型, 与 TWAR 蛋白同源性为 97.8%,与马生物变种 MOMP 同源性为94.5%,而与其他衣原体的 MOMP 同源性低于 70%。参考株为 LPCon。目前,肺炎嗜性衣原体马生物变种只有一个分离株 N16,是 1990 年 Wills 等从马呼吸系统分离到的。其MOMP 与肺炎嗜性衣原体其他株的差异性为 5.5%; 而与衣原体其他种的差异性则>30%。用 N16 分离株接种马可引起无症状感染,参考株为 N16。 二、生物学性状1、基本形态Cpn在Hela229中培养,其外形极像鹦鹉热衣原体(Cps),但碘染色阴性且不挤压细胞核。既往认为电镜观察Cpn,其明显特征为其外形为梨形,平均直径为380nm,其长轴为440nm,短轴为310nm。姬姆萨染色法可着色,革兰氏染色不着色。核区和细胞膜之间有较宽的原生质区。而Cps和沙眼衣原体(CT)均为圆形。CP菌株YK-41、10L-207及K6菌株也被证实为圆形。现认为,Cpn、CT和Cps的包涵体凸面有很多颗粒呈六角形排列,用激光束转换的方法研究Cpn的原体外形发现,其表面的六角形结构有相似的周期性,在Cpn原体的复制繁殖过程中,普遍存在线粒体与包涵体并不相关现象,具体机制有待阐明。 2、培养特性和生化特性肺炎衣原体不能体外培养,只能在细胞内寄生,鸡胚对其不敏感,因此一般不用鸡胚传代,而用细胞培养传代,肺炎衣原体敏感的细胞株为HEP-2或H-292,离心能促进肺炎衣原体对细胞的感染,但在第一代细胞内很少能形成包涵体。肺炎衣原体包涵体不含糖原,碘染色阴性,在Hela细胞中的形态与鹦鹉热衣原体十分相似,姬姆萨染色后呈深密度卵圆形,在HEP-2细胞中的包涵体,其密度和形态均多样化,有致密的、桂花样散在的、伸出胞外出瘤状的、圆形、胞内着色较少的包涵体。CPn的抵抗力较弱,对室温或冰冻敏感。 Cpn无运动力,能独立进行有限的代谢活动;染色体有DNA和RNA两种核酸,只能在细胞内复制、繁殖,发育周期分为原体(elementarybody,EB)和始体(initialbody),也称为网状体(reticulatebody,RB)两阶段。原体平均直径为0.38nm,在电镜下呈梨形,并有清晰的周浆间隙,原体中无质粒DNA。Giemsa染色呈紫色,Macchiavello染色呈红色。原体具有高度感染性,在宿主细胞外较为稳定,无繁殖能力。当进入宿主易感细胞后,细胞膜围于原体外形成空泡。原体在空泡中逐渐发育、增大成为始体。 始体呈圆形或椭圆形,体大,直径0.5~1nm,电子致密度较低,无胞壁,代谢活泼,以二分裂方式繁殖,在空泡内发育成许多子代原体。最后,成熟的子代原体从破坏的感染细胞中释出;再感染新的易感细胞,开始新的发育周期。每个发育周期约为48h、72h。始体是衣原体发育周期中的繁殖型,不具感染性。Macchiavello染色呈蓝色。3、毒性肺炎衣原体毒力较低,3代之内不能致死鸡胚,小鼠鼻内、脑内和静脉内接种,不引起小鼠死亡,猴结膜内接种,不发生滤泡性结膜炎。对药物的抗菌谱类似其他衣原体,耐磺胺类药物。 三、发病机制肺炎衣原体感染发病机制尚不明确。肺炎衣原体侵入人体后,主要引起单核-巨噬细胞反应,肺泡巨噬细胞作为病原体贮存和传播的载体,造成其在宿主体内的持续感染。在非人哺乳动物如小鼠及猴的动物实验研究中发现,感染早期多无症状,大部分在2个月出现肺部病变,主要表现为间质性肺炎,早期局部有多核细胞浸润,以后则为巨噬细胞和淋巴细胞浸润。可从肺部及脾脏中分离出肺炎衣原体。其感染易转为慢性,与许多慢性感染有关,如冠心病、动脉粥样硬化、慢性阻塞性肺病、支气管哮喘、结节病及反应性关节炎等。 1、黏附素肺炎衣原体黏附于上皮细胞是衣原体在细胞内生长、繁殖并导致病变的前提。衣原体通过创面侵入机体后,原体吸附于易感的柱状或杯状黏膜上皮细胞并在其中繁殖,其中,MOMP作为黏附因素之一发挥了重要作用,它可与宿主细胞受体一硫酸乙酰肝素结合,促进肺炎衣原体吸附于宿主细胞表面,引起肺炎衣原体感染。最新研究表明, GroEl蛋白也可能与肺炎衣原体入侵宿主细胞有关。 2、内毒素样物质衣原体能产生内毒素样物质,抑制宿主细胞代谢,直接溶解宿主细胞。这种物质还可引起宿主的炎症反应和超敏反应。在慢性心血管疾病方面,肺炎衣原体的热稳定成分脂多糖(lipolysaccharides,LPS)可以引起巨噬细胞泡沫化。有研究表明,用抗衣原体LPS的单克隆抗体可以同时抑制体内外的肺炎衣原体感染。 3、主要外膜蛋白除了在黏附过程发挥作用外,MOMP在肺炎衣原体致病过程中还起着直接或间接的作用。有证据显示肺炎衣原体MOMP可以促进巨噬细胞分泌MMP-9(92kD明胶酶),加强细胞外基质的蛋白水解酶活性,导致基质降解。还可促进单核细胞产生IL-1等细胞因子,从而介导炎症发生、瘢痕形成,直接损伤宿主细胞,造成相关病变。MOMP富含半胱氨酸,二硫键使这些半胱氨酸广泛交联形成网状结构,维持外膜结构的坚韧性,增强肺炎衣原体抗机械作用能力,稳定其渗透压。同时,这种结构为肺炎衣原体原体与网状体的转换提供了足够的可塑性。MOMP有类似于孔蛋白的功能,通过β-折叠形成跨膜通道,经二硫键调控开/关状态,由此控制ATP等营养物质的进出;此外,它还能阻止吞噬体与溶酶体融合.致肺炎衣原体抗吞噬,有利于其生存并破坏宿主细胞。在进化过程中,MOMP还可以发生基因突变,以此来逃避免疫反应而继续感染细胞。 4、热休克蛋白肺炎衣原体的热休克蛋白( heat shock protein,HsP)除了作为分子伴侣的蛋白折叠功能外,还在衣原体病的致病机制及免疫,炎症病理损伤中发挥重要作用。目前的研究显示HSP60是肺炎衣原体参与动脉粥样硬化形成的重要成分,是与冠状动脉疾病最相关的危险因子。HSP10与HSP60在遗传上密切相连,在蛋白结构和功能上也具有一定相关性。有研究发现哮喘患者体内的肺炎衣原体HSP10抗体明显高于健康对照组人群,说明肺炎衣原体HsSP10抗体与成人哮喘可能具有相关性,但具体机制有待进一步研究。HSP70与HSP60均属于免疫优势抗原,同时,HSP70可能参与衣原体对宿主细胞的黏附作用,并可能作为一种信号分子激活与炎症相关的信号通路,调节细胞因子的表达。 5、其他肺炎衣原体上还有多种成分参与衣原体的致病。最新研究热点之一是Ⅲ型分泌系统( type ll secrenon system,T3Ss)可能与之相关。CPAF是第一个发现的由衣原体基因编码合成并分泌到宿主细胞内的蛋白酶样活性因子,具很强免疫活性,在衣原体的致病过程中及衣原体与宿主的相互作用中发挥重要作用。另外,Pmp20、Pmp21、Cpn0980、Cpn0809及Omp2等可诱导宿主分泌细胞因子,引起多种炎症介质失控性释放,造成机体持续的炎症反应。 四、鉴定检测方法临床依据患者的症状和体征,很难鉴别细菌性、病毒性、肺炎支原体或肺炎衣原体的感染,以致在临床用药上存在困难,一般只能依赖实验室通过人体体液标本进行病因检测。碘染色法和姬姆萨染色法不适用于Cpn的检测。细胞免疫组织化学法对组织切片进行生物素-抗生物素-过氧化物酶系统着色(又称ABC法)。在冠状动脉硬化斑块上可检出Cpn-EB,透射电镜证明在AS泡沫细胞内有特征性的0.4µm大小的EB。该系统设备价格高昂,技术要求高,只限于科研应用。故不适合直接涂片。 目前常用的检测方法有如下几种: 1、分离培养分离培养是Cpn特异性实验室诊断方法,可用鼻咽或喉拭子、痰和胸腔积液标本分离Cpn,鼻咽部拭子是进行分离的理想标本,喉和痰液分离Cpn有何差别还不清楚。Cpn需要在组织中进行培养,无细胞培养基不适合Cpn繁殖,Cpn能在呼吸道来源的细胞系如:HEp-2和HL细胞系中稳定生长。拭子采用涤棉、金属线为好,拭子既应注意防污染,亦要防止细胞和Cpn受抑制,取得的标本通常置于加抗生素和小牛血清的蔗糖磷酸缓冲液(保存于4℃,不超过24h),标本置于室温会降低其活性,如果不能在24h内处理,标本应置于−70℃冰箱保存。接种后72h,要证实菌株,可用Cpn特异性或衣原体种特异性(即抗LPS)荧光结合单克隆抗体进行染色。Cpn包涵体不包含糖原,因此不被碘染色。  但是,肺炎衣原体的组织培养较其他衣原体困难,在作分离培养时,常采取以下措施以增强肺炎衣原体的感染性及促进其在细胞中的生长:①接种物离心(3000r/min)。②培养细胞用30µg/ml的二乙氨基乙基葡聚糖(DEAE-dextran)预处理。③加入细胞生长抑制剂,如环己酞亚胺1µg/ml以抑制宿主细胞生长。Kuo等在研究肺炎衣原体培养所需氨基酸时发现,赖氨酸和蛋氨酸的部分或完全缺失可不同程度地促进肺炎衣原体的生长,但该促进作用在加入环己酞亚胺后变得不明显。Theunissen等观察了SPG保存液的pH、离子强度、温度对肺炎衣原体感染HL细胞的影响,发现pH大于8或小于5,原体的存活率迅速减低;在含10%小牛血清的SPG中,外加NaCI浓度小于80mmol/L时原体的活性受到影响,而0.346~4mmol/L的Ca2+或0~2.5mmol/L的Mg2+对原体感染性的影响不明显;在0~20℃24h内,SPG中原体95%以上存活,温度超过20℃,原体的存活率随存放时间的延长下降迅速。 2、血清学检测最常用的血清学方法是补体结合反应。一般用加热处理过的衣原体悬浮液作为抗原(属特异抗原)来测定被检血清(属特异血清)。哺乳动物和禽类一般于感染后7d、10d出现补体结合抗体。通常采取急性和恢复期双份血清,如抗体滴度增高4倍以上,认为系阳性。关于血清学普查判定标准,国内暂定1∶16或以上为阳性,1∶8为可疑,1∶4以下为阴性。 (1)酶联免疫吸附试验(ELISA)ELISA已用于痰标本的Cpn抗原检测。优点为特异性强、操作简便、易于自动化,并且可用于大批量标本的检测,另外,快速试验过程仅需1h,临界值易判断,由于可检测血清中IgM和IgG,故能区分急性感染和既往感染,适合于临床实验室作为Cpn感染的常规检查;缺点为敏感性差,阳性预期值较低,不适合人群的筛查。 (2)微量免疫荧光抗体检测(MIF)MIF技术对肺炎衣原体的诊断是特异的且敏感性高,因此被国内外学者誉为Cpn感染诊断的“金标准”。MIF抗体包括3种:IgM、IgG和IgA。初次感染(原发感染)时,IgM于发病后3周出现,IgG于发病后6~8周出现,而IgA反应较弱或不出现;再次感染(重复感染)时,IgG常在1~2周内出现,且效价可以很高,但往往没有IgM出现或其效价很低。目前诊断标准为:①急性感染:双份血清抗体效价升高4倍以上或IgM=1∶16或IgG≥1∶512;②既往感染:IgM无论采用何种检测方法,急性期及恢复期的双份血清标本中,肺炎支原体特异性抗体滴度呈4倍或4倍以上增高或减低时,均可确诊为肺炎支原体感染,这是目前国际上公认的标准。 3、分子生物学检测用分子生物学方法检测血管组织中Cpn,结果取决于样本收集和操作、引物设计、核酸抽提、扩增物的检测以及假阳性、假阴性结果的预防与鉴别等环节。最常用的引物是omp1、16SrRNA、3SrRNA、Cpn特异性克隆PstI片断等,测定扩增产物多应用琼脂糖电泳、Southernblot、EIA、聚丙烯酰胺胶电泳等。目前分子诊断技术中已有聚合酶链反应(PCR)、套式聚合酶链反应(nPCR)、连接酶链反应(LCR)、转录介导扩增试(TMA)、基因探针杂交等方法。作为分子生物学方法,PCR法具有快速、简便、灵敏的特点,是Cpn诊断的发展方向。总之,分子生物学方法具有快速、简便、灵敏的优点,是Cpn感染诊断的重要手段。很多学者建议将各种分子生物学方法之间或与其他诊断方法联合应用,并且证明了联合应用能提高Cpn感染诊断的敏感性。如PCR与ELISA联合应用的方法诊断Cpn感染的敏感性高于免疫荧光法、传统PCR法以及ELISA法。此外,其中基因探针杂交和LCR单独使用灵敏度不足,宜与PCR联合应用。nPCR不仅特异性与灵敏度颇占优势,而且由于无须增添任何设备,能开展PCR检测的单位均可实施,是较为适合国情的方法。 五、环境与污染源人类肺炎衣原体感染呈世界性流行,不分地域、不受种族和年龄限制。人类肺炎衣原体感染一年四季均可能发生,不呈季节性特征,其流行可呈散发性或爆发性传播,尤其在空间相对封闭、人群聚集较多、空气不太流通的公共场所。 一般认为肺炎衣原体感染与鸟类及其他动物无关,人类是Cpn唯一储存宿主。其传播源是患病者或无症状携带者的呼吸道分泌物和飞沫。另外肺炎衣原体在硬塑料表面能存活30h,在纸巾上能存活12h,在手上存活时间仅10~15min。健康者也可能通过接触这些带有病原体的物体而被感染。 虽然在人肺部感染Cpn的潜伏期约为10d,65d内即可诱导产生特异性T细胞免疫和B细胞免疫,从患者血清中可检测到特异性抗体。这些感染性抗体可暂时地提供一定的机体免疫保护作用。但其免疫力不强,且维持时间短,多数情况下不能阻断再度感染而呈反复发作的状态。 健康人群可分离出Cpn,提示存在健康的带菌者或隐性感染者。然而正是这些无症状的“健康”或“亚健康”的携带者在传播Cpn上具有重要意义。 六、预防与控制肺炎衣原体感染的预防应注意呼吸道隔离,隔离传染源,切断传播途径,及时治疗患病个体。如流行期不要在人群密集的地方停留时间过长,经常洗手,讲究个人卫生,强化对环境公共卫生的管理和监督。增强体质,提高自身的免疫力,是预防呼吸道感染的有效途径。 1、要注意避免接触感染源。Cpn的传播方式主要是人一人通过飞沫传播,也可从环境中接触后通过手自体接种。因此,要有较好的生活环境,室内要注意清洁卫生,要经常开窗换气,保持室内空气新鲜。可经常到空气新鲜的户外活动,避免到空气污浊的公共场所,外出后注意清洗面部(口鼻处)和手,特别是要避免接触已患呼吸道感染的病人。如家长患呼吸道感染要尽量少与小儿接触,如必须接触一定要戴上口罩,并注意进行室内的消毒。 2、要注意加强身体抵抗力。一是通过被动免疫,即预防接种来提高抵抗力。6岁前的儿童,预防接种是防患传染病的最有效办法。二是要提高主动免疫能力,如注意营养,增强体质,进行日光浴,空气浴等。 3、要注意对引起疾病的诱因进行控制。如环境温度的影响,要根据天气变化适当穿衣,避免引起受寒,也不要捂得太多受热。饮食也需注意,如营养不良,身体抵抗力低下,就容易被病原体侵袭,还易引起并发症。所以应消除营养不良,防治佝偻病、贫血、缺锌等营养性疾病。当然营养过剩或饮食不当也是呼吸道感染的诱因。因此,食量要适当,食物要合理,注意蔬菜,水果等富含维生素和纤维素的摄入。 

操作维护

2021.10.12

大鼠海马神经元细胞的收货处理与使用方法!

               大鼠海马神经元细胞的收货处理与使用方法!一、基本信息平台编号:bio-73732产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶 英文名称:Rat Hippocampal Neurons Cells产品名称:大鼠海马神经元细胞 组织来源:海马体组织 培养基信息:Neurobasal-A、B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等 我们推荐使用大鼠海马神经元细胞专用完全培养基(产品货号:CM-R107)作为体外培养大鼠海马神经元细胞的培养基。细胞用途:研究注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。二、细胞简介大鼠海马神经元细胞分离自海马体;海马体(Hippocampus),又名海马回、海马区、大脑海马,海马体主要负责记忆和学习。海马神经元细胞是海马区的主要细胞组成,主要功能是参与近期记忆、情绪及内脏功能调节、是老年性痴呆、癫痫等疾病的主要病灶之一。海马属于大脑的边缘系统,在学习、记忆、情绪反应及神经系统疾病的病理生理变化等方面有重要作用,而且海马组织是中枢神经系统内主要的神经干细胞聚集区,具有高度序化板层结构和神经元相对独立分布的特点,境界相对清晰,便于取材,因此,海马神经元体外培养模型被广大基础医学和临床医学研究者当做理想的实验模型。海马神经元细胞培养是研究神经细胞生物学特性和外源干扰因素作用(细胞因子)的有效细胞模型,其在神经生物学,发育生物学体外实验研究中已被广泛应用。 本公司生产的大鼠海马神经元细胞采用胰蛋白酶消化法、化学试剂抑制法结合神经元细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经MAP-2免疫荧光鉴定,纯度可达85%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。 三、细胞特性1)组织来源于实验动物的正常脑组织。2)细胞鉴定:NSE免疫荧光染色为阳性。3)经鉴定细胞纯度高于90%。4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。5)细胞生长方式:不规则细胞,贴壁培养。四、细胞的运输和保存视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。五、产品的使用1)本产品仅能用于科研2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核3)本产品未通过用于活体诊断的审核六、大鼠海马神经元细胞收货处理T25:收货→观察细胞状态→酒精消毒→37度平衡2h→取培养基备用→传代或者继续培养。血清:收货→酒精消毒→37度平衡2h→接种到完全培养基→ 观察细胞状态→继续培养。离心管:收货→酒精消毒→37度平衡2h →离心收集细胞→新培养基重悬→接种观察细胞状态→继续培养。干冰:收货→放液氮或-80冰箱→复苏→观察细胞状态→继续培养。七、注意事项1、可将培养瓶内多余的培养基转移至50ml无菌离心管中,备用;细胞*传代时,可以将该培养基按照一定比例和客户自备的培养基混合使用,让细胞逐渐适应培养条件。2、确认细胞状态良好后,应及时将部分细胞冻存,再进行后续的实验,避免后期实验失误可能发生细胞污染或死亡而导致的细胞丢失,影响后续实验。3、建议客户收到细胞后前3天,100X、200X、400X各拍3张细胞照片,记录细胞状态,便于后续和技术支持沟通交流。

参数原理

2021.10.12

鲜绿青霉在食品工业中的应用!

                      鲜绿青霉在食品工业中的应用!一、背景鲜绿青霉(Penicillium viridicatum)属于青霉属真菌,常在谷物、水果、蔬菜、坚果和肉类等食品成熟和贮藏过程中生长繁殖。鲜绿青霉在生长繁殖过程中易产生多种真菌毒素,如赭曲霉毒素A(ochratoxin A ,OTA)。OTA具有强烈的致癌性和致畸性,同时对肾脏和肝脏有严重损害,是食品主要污染源之一,对人类健康及动物养殖业有重大危害。因此鲜绿青霉的防治受到学者广泛关注。由于食品在加工、贮藏、消费的过程中易受到各种有害微生物的侵害而变质,食品防腐保鲜便成了食品工业中的重要问题。随着人们生活水平的提高,及环保意识的增强,传统的化学保鲜剂已被证实具有潜在的危害性。因此,开发高效、无毒、安全的生物保鲜剂势在必行。 二、治疗有研究提供了一种具有抗真菌作用,特别是对鲜绿青霉有拮抗作用的链霉菌,并对该菌株进行分类鉴定,确定其为阿南德氏链霉菌JXNU02;对阿南德氏链霉菌JXNU02发酵液的抑菌谱进行了研究,确定其对多种真菌及细菌均有抑制作用;对阿南德氏链霉菌JXNU02发酵液对鲜绿青霉菌丝生长的影响进行了研究,确定其发酵液抑制鲜绿青霉菌丝生长,且抑制率达到100%。这些数据将为今后食品生物保鲜剂的开发和应用奠定基础。该菌是从江西省南昌市郊区采集的土样经分离制备获得,其学名为阿南德氏链霉菌JXNU02。菌株已保存在国家知识产权局指定的保藏单位保藏,保藏单位是中国典型培养物保藏中心,保藏地址为中国武汉,武汉大学;保藏日期为2013 年11月18日,保藏编号为CCTCC NO:M 2013575。 阿南德氏链霉菌JXNU02菌株的形态特征: 基内菌丝发育良好,无横隔、不断裂;气生菌丝在ISP2 培养基(酵母提取物 4 g,麦芽提取物 10 g,葡萄糖 4 g,琼脂 20 g,蒸馏水1 L,pH 7.3 )上生长良好,多分枝,可形成孢子链,孢子丝呈螺旋形,孢子椭圆形、表面光滑 。阿南德氏链霉菌JXNU02菌株的生理生化特征: 阿南德氏链霉菌JXNU02能使淀粉水解、能产生硫化氢、能利用酪氨酸产生黑色素、能使明胶液化、能使硝酸盐还原,不能分解纤维素、不能使牛奶胨化;能够利用葡萄糖、蔗糖、D-果糖、L-阿拉伯糖、D-木糖、棉子糖、肌醇和D-甘露醇,但不能利用L-鼠李糖;细胞壁类型属于I 型,全细胞水解液中含有核糖,未检测出特征性糖。对鲜绿青霉有拮抗作用的阿南德氏链霉菌JXNU02发酵液抑菌谱的测定。采用琼脂糖扩散法对阿南德氏链霉菌JXNU02发酵液抑菌谱进行测定。采用的靶菌分别为鲜绿青霉、桔青霉、酵母菌、白假丝酵母、水稻稻瘟病菌、黑曲霉、毛霉、棉花枯萎病菌、尖孢镰孢菌、水稻纹枯病菌、米根霉、核盘菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。结果表明,阿南德氏链霉菌JXNU02发酵原液对上述13 种靶菌均有抑制作用。 三、应用鲜绿青霉可用于制备抗菌剂,如具有杀虫效果的秸秆腐解菌剂。秸秆还田作为一项培肥地力的增产措施在我国受到普遍重视,既能有效防止秸秆焚烧带来的环境污染,又能增肥增产,还能节水和降低耕作成本,对农业可持续发展 具有积极作用。秸秆还田有多种方式,其中各地大力推广、应用范围最广的就是将秸 秆粉碎后直接还田。秸秆直接还田是将收获作物籽粒后的秸秆经粉碎后直接翻入土壤,能有效提高土壤有机质含量,增加土壤微生物活性,提高土壤肥力,但同时也为病虫害的生长和发育提供了良好的生长环境,尤其是在秸秆直接还田后减少中耕次数的条件下,为病虫害提供了相对稳定的生长发育环境。此外农作物秸秆的主要成分结构致密,在自然状态下较难分解。因此,有针对性地强化破坏秸秆中的结构,才能实现秸秆的快速分解。目前大多数农作物秸秆还田腐 解菌剂存在微生物代谢类型和功能单一、针对性不强和复配比例不当等问题,无法达到快速高效的秸秆腐解效果,难以大规模推广应用。如何将农作物秸秆进行有效的处理,既强调秸秆腐解的效果,又达到防治虫害的目的,成为一个亟待解决的问题。提供了一种具有杀虫效果的秸秆腐解菌剂,该秸秆腐解菌剂可作为秸秆直接还田的菌剂。有研究提供了一种秸秆腐解菌剂,它的活性成分是由黑曲霉、拟康氏木霉、鲜绿青霉、解木聚糖梭菌、枯草芽胞杆菌、苏云金芽胞杆菌杀虫变种和苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种组成。上述秸秆腐解菌剂中,所述菌剂的活性成分中,所述黑曲霉、所述拟康氏木霉、所述鲜绿青霉、所述解木聚糖梭菌、所述枯草芽胞杆菌、所述苏云金芽胞杆菌杀虫变种和所述苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种的菌落形成单位(cfu)数目比可为(2-3):(2-3): (2-3):(3-4):(3-4):(2-3):(2-3如1:(1-1.5):(1-1.5):(1.5-2): (1.5-2):(1-1.5):(1-1.5),或1:1:1:2:2:1.5:1.5。上述秸秆腐解菌剂中,所述菌剂的活性成分可为所述黑曲霉、所述拟康氏木霉、所述鲜绿青霉、所述解木聚糖梭菌、所述枯草芽胞杆菌、所述苏云金芽胞杆菌杀虫变种和所述苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种经发酵培养后,或直接使用或浓缩使用或经载体吸附而制成的活菌制品。欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

应用实例

2021.10.11

人类星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞的处理与培养!

              人类星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞的处理与培养!一、细胞简介平台编号:bio-103897规格: 1*10 6拉丁属名:U251MG/TMZ细胞名称:人类星形胶质瘤耐替莫唑胺细胞细胞用途:仅供科研使用。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。二、细胞特性1)来源:U251胶质瘤耐药筛选2)形态:贴壁细胞3)含量:>1x1064)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装三、细胞的运输和保存可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式(1)干冰运输,收到后立即转入液氮冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。四、细胞接收后的处理方法1)收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。2)在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。3)观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。4)贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。5)悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1:2传代。五、细胞耐药分步诱导待细胞生长稳定后,开始倍增药物诱导剂量,依次为0.125μg/mL、0.25μg/mL、0.5μg/mL、1μg/mL、2μg/mL、4μg/mL、8μg/mL、16μg/mL,每个剂量保持培养20天左右。至第8个月末可诱导出对TMZ具有5-8倍耐药的细胞系,并命名为U251 MG/TMZ。六、细胞培养步骤1、培养基及培养冻存条件准备:1)准备DMEM培养基优质胎牛血清,10%;双抗,1%。(可在完全培养基中加入最大耐药浓度为16ug/ml的TMZ培养)2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。2、细胞处理:1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。注:第一次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。下面T25瓶为例;1、细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2、1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3、将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。七、注意事项1、收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。2、收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。3、由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。4、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。微生物菌种查询网自设细胞系板块,是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

参数原理

2021.10.11

施氏假单胞菌单层冻干管打管说明书!

                   施氏假单胞菌单层冻干管打管说明书!施氏假单胞菌是革兰氏阴性、无芽孢的短杆状。菌落淡黄色,边缘不规则,表面有褶皱、湿润、半透明,好氧,化能异养。可以以100ppm对硝基苯酚为唯一碳源生长,24h内降解率90%。最适生长温度为28℃。可以以100ppm对硝基苯酚为唯一碳源生长,24h内降解率90%。最适生长温度为28℃。一、菌种简介平台编号:bio-53097拉丁属名:Pseudomonas stutzeri中文名称:施氏假单胞菌属名:Pseudomonas种名加词:stutzeri其它编号:ATCC17588=JCM5965 =DSM5190 =ACM782 =NCIB11358来源历史:←南京农业大学农业环境微生物菌种保藏中心收藏时间:2008-10-16原产国:中国资源归类编码:15131134101模式菌株:非模式菌株主要用途:研究;教学特征特性:革兰氏阴性、无芽孢的短杆状。菌落淡黄色,边缘不规则,表面有褶皱、湿润、半透明,好氧,化能异养。可以以100ppm对硝基苯酚为唯一碳源生长,24h内降解率90%。最适生长温度为28℃。具体用途:可以以100ppm对硝基苯酚为唯一碳源生长,24h内降解率90%。最适生长温度为28℃。培养基编号:2培养温度:37培养时间:18-24 小时用途:模式菌株、分类研究,减少嘧啶碱类。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。二、培养基*营养琼脂培养基(NA)*胰蛋白胨大豆肉汤培养基(TSA)*LB 培养基三、保藏条件冻干菌种应在 2-8°C 保存,斜面菌种 15-20℃,15-20 天转一次。 四、注意事项1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解,接种在 2 个斜面上,因冻干粉处于休眠状态,请勿接种多支斜面或平板,以避免因接种量不足而导致复苏不成功;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系。五、单层冻干管打管说明书1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。2、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的,开启后必须一次使用完,不能留菌粉下次使用;另外,安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功;3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间还未长起来,请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间,直至菌种培养完成;有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说菌种稳定后才能用于您的后续实验。4、暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏(特殊除外)。5、冻干管打开后需一次用完,不能留存。6、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。

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2021.10.11

用于酱油制曲和黄豆酱生产的米曲霉!

               用于酱油制曲和黄豆酱生产的米曲霉!米曲霉(Aspergillus oryzae)属于黄曲霉群,是曲霉属中的一个常见种。分生孢子头放射状,一直径150-300μm,也有少数为疏松柱状。分生孢子梗2mm左右。分生孢子梗长约2mm,近顶囊处直径达12-25μm,壁较薄,粗糙。顶囊近球形或烧瓶形,通常40-50μm。小梗一般为单层,12-15μm,偶尔有双层,也有单、双层小梗同时存在于一个顶囊上。分生孢子幼时洋梨形或卵圆形,老后大多变为球形或近球形,一般4.5μm,粗糙或近于光滑。米曲霉菌落生长快,10d直径达5-6cm,质地疏松。初呈白色、黄色,后转黄褐色至淡绿褐色,背面无色,分布甚广,主要在粮食、发酵食品、腐败有机物和土壤等处。是我国传统酿造食品酱和酱油的生产菌种。也可生产淀粉酶、蛋白酶、果胶酶。一、菌种简介平台编号:bio-52627规格:冻干物拉丁属名:Aspergillus oryzae (Ahlburg) Cohn中文学名:米曲霉 拉丁学名:Aspergillus oryzae 界:真菌界 亚门:半知菌亚门 纲:丝孢纲 目:丝孢目 科:从梗孢科培养基编号:50培养温度:28-30℃培养时间:5-7 天用途:酱油制曲和黄豆酱生产。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。二、培养基综合马铃薯培养基(PDA)20%马铃薯汁 1L 葡萄糖 20g MgSO4.7H2O 1.5g KH2PO4 3gVitanib B1 (硫胺素) Trace 微量约 8mg Agar (琼脂) 20g pH 自然20%马铃薯汁配制方法:马铃薯洗净去皮,取 200 克切成小块 , 加水 1000 毫升煮沸 20 分钟后滤去马铃薯块,将滤液补足 1000ml。 三、保藏条件斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20°C 保存。 四、注意事项1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解,接种在 2 支斜面上,因冻干粉处于休眠状态,请勿接种多支斜面或平板,以避免因接种量不足而导致复苏不成功;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系。五、单层冻干管打管说明书1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。2、注意事项:菌种活化前,请将安瓿管保存在 4-10℃的环境下,某些菌种经过冷冻干燥并抽真空保存的,,开启后必须一次使用完,不能留菌粉下次使用;另外,安瓿管里大部分是用牛奶作为保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功;3、冻干菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,有时延滞期较长,如在说明书建议的培养时间还未长起来,请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间,直至菌种培养完成;有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说,菌种稳定后才能用于您的后续实验。暂不启开的安瓿管应于 4℃中保藏(特殊除外)。冻干管打开后需一次用完,不能留存。打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。

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2021.10.09

生物材料创新合作平台正式成立!

                     生物材料创新合作平台正式成立!百欧博伟生物:即日,生物材料创新推进会暨生物材料创新合作平台成立大会在京举行,国家药品监督管理局局长焦红出席大会并讲话,国家卫生健康委员会副主任曾益新、工业和信息化部总工程师韩夏致辞。近年来,我国生物医药产业快速发展,成为创新最活跃、影响最深远的战略性新兴产业之一。在国家药监局、国家卫健委、工信部、科技部的共同支持下,国家药监局医疗器械技术审评中心、中国信息通信研究院、中国生物技术发展中心、国家纳米科学中心等21家技术单位、科研院所、医疗机构、学术团体联合成立生物材料创新合作平台,致力于建立生物材料与相关医疗器械深度融合的创新体系,推动生物材料领域科技成果成功转化应用。焦红对生物材料创新合作平台的成立表示祝贺。她表示,近年来,国家药监局认真贯彻落实党中央、国务院部署和要求,坚持新发展理念,不断深化医疗器械审评审批制度改革,强化医疗器械全生命周期管理,激发行业创新活力,助推产业高质量发展。当下,生物材料技术发展日新月异,越来越多新技术、新材料在医疗器械中广泛应用,然而,挑战依然存在,我国生物材料科技创新和产业发展衔接不紧密,研发、生产环节还存在短板,支撑生物材料领域高质量发展的政策体系、标准体系有待进一步完善。对于推进生物材料创新合作平台的发展,焦红提出四点建议,希望成员单位充分集合并协调各方资源,积极推进科研合作、产业合作,共同面对生物材料科技进步给医疗器械行业发展和产业监管带来的新挑战、新机遇,打造覆盖全产业链条的生物材料相关医疗器械创新发展新模式;积极响应国家政策方针和决策部署,与国家重大科研项目紧密结合,通过平台工作为国家相关部委及机构在相关领域的重点工作提供助力;发挥专业优势,聚焦生物材料领域关键技术和“卡脖子”问题,持续推进重大技术突破和成果转化应用,助力我国抢占生物材料领域国际制高点;统筹安排相关工作,制定总目标和阶段性目标,明确时间表和路线图,确定项目责任人,扎实推进工作,确保能早出成果、出好成果。会议以开拓、创新、聚力、共赢为关键词,来自生物材料创新合作平台各支持部门、成员单位、顾问委员会以及科研机构、高等院校、医疗机构、行业组织和企业方面的300余位代表参加了会议。会上,多位行业资深专家进行了专业内容分享。中国工程院院士张兴栋介绍了我国生物材料领域和相关医疗器械产业的发展状况和遇到的挑战,对其进一步发展提出建议。中国工程院院士王迎军作新型生物材料的创新发展与成果转化专题报告,分享了智能抗菌植入材料等领域技术创新助力破解临床难题的案例,提出她对医疗器械创新发展突破瓶颈的认识和看法。中国医疗器械行业协会副秘书长杨晓芳作生物材料相关医疗器械产业发展现状专题分析,国家药监局医疗器械技术审评中心审评三部副部长赵鹏介绍了生物材料相关医疗器械的监管科学实践。

应用实例

2021.10.09

人鼻咽癌细胞的培养步骤与处理方法!

                人鼻咽癌细胞的培养步骤与处理方法!一、细胞简介平台编号:bio-105817规格:1*10 6拉丁属名:5-8F(人鼻咽癌细胞)细胞名称:人鼻咽癌细胞细胞用途:仅供科研使用。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。二、细胞特性1)来源:鼻咽癌2)含量:>1x106 个/mL3)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性4)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装三、细胞的运输和保存可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。四、细胞接收后的处理方法1)收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。2)在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。3)观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。4)贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。5)悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1:2传代。            五、细胞培养步骤1、培养基及培养冻存条件准备:1)准备RPMI-1640培养基;优质胎牛血清,10%;双抗,1%。2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。2、细胞处理:1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2、加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。3、按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4、客户收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议客户冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。下面T25瓶为例;1、细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2、1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。3、将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。六、注意事项1、收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。2、收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。3、由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。4、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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2021.10.09

黄色微球菌的特点与培养及保藏方法!

                  黄色微球菌的特点与培养及保藏方法!黄色微球菌是Micrococcus属的微生物,原产地为中国。MCCC 1B00528与模式菌株Micrococcus flavus LW4(DQ491453)相似性为99.382%;革兰氏染色阴性,接触酶阳性,氧化酶阳性。不分解淀粉,3%NaCl胨水不生长,6%NaCl胨水不生长,麦芽糖、半乳糖不产酸,蔗糖、果糖、葡萄糖产酸。主要用途为分类;研究,具体用途为近海细菌。一、菌种简介提供形式:冻干物拉丁属名:Micrococcus flavus中文译名:黄色微球菌拉丁学名:Micrococcus flavus原始编号:LW4菌株来源:←中国科学院微生物研究所保藏人:王保军直接来源国家:中国保藏时间:12/1/2005其他保藏编号:=JCM 14000生物危害:四类模式菌株:模式菌株菌株用途:模式菌株培养温度:30℃培养基:0002    分离源:生物反应器用途:模式菌株存储条件:液氮超低温冻结法;-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法 注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用二、菌株特点1、该菌为需氧芽孢杆菌,细菌繁殖体G兰氏染色阴性呈紫色,细菌芽胞孔雀绿着色。其细菌繁殖体对培养基要求低,在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨琼脂上生长良好,表面粗糙呈米黄色。2、适生长繁殖湿度为56-65℃,培养24h即可形成菌落,37℃下24h看不到菌落。3、本生物指示剂载体为高级滤纸片,染菌量为5×105-5×106cfu/片或1×106cfu/片,封装在小纸袋内,热死亡时间为121℃,3.9 min阳性,19 min阴性;D10值1.3-1.9 min,符合美国药典第十一版规定标准。4、该菌无毒,热抗稳定,在冰箱内4℃下保存一年抗力无明显下降,在常温(20℃左右)可保存1个月。三、培养条件1、营养肉汁琼脂:牛肉膏3.0g,蛋白胨10.0g,NaCl 5.0g,琼脂15.0g,蒸馏水1.0L,pH7.0。[注]培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。pH7.0。121℃,15min。2、需氧类型:好氧3、培养温度:55℃四、注意事项1、菌种常规培养时间:细菌1-2天,酵母3天,霉菌5-7天,大型真菌7-10天。2、试管斜面种请尽快转接,不建议长期存放。3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,BNCC不负责任。4、使用者应保证菌种的安全储存和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。五、保藏方法1、传代培养保藏法又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4-6℃冰箱内保存。2、液体石蜡覆盖保藏法是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。3、载体保藏法是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。4、寄主保藏法用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、立克次氏体、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。5、冷冻保藏法可分低温冰箱(-20-30℃,-50-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。6、冷冻干燥保藏法先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。有些方法如滤纸保藏法、液氮保藏法和冷冻干燥保藏法等均需使用保护剂来制备细胞悬液,以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害。保护性溶质可通过氢和离子键对水和细胞所产生的亲和力来稳定细胞成分的构型。保护剂有牛乳、血清、糖类、甘油、二甲亚砜等。

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2021.10.08

永生化人脑微血管内皮细胞的处理方法培养步骤!

         永生化人脑微血管内皮细胞的处理方法培养步骤!一、基本信息平台编号:bio-51720规格:1*10 6拉丁属名:HCMEC/D3(永生化人脑微血管内皮细胞)细胞名称:永生化人脑微血管内皮细胞细胞用途:仅供科研使用。 注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。二、细胞介绍人脑微血管内皮细胞是人微血管内皮细胞通过含端粒酶逆转录SV40T慢病毒转染得到。三、细胞特性1)来源:人脑微血管2)形态:细胞呈梭状,细长型3)含量:>1x106 个/mL4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装四、细胞的运输和保存可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。(3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。   五、注意事项1、收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。2、收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。3、由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。4、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。六、细胞接收后的处理方法1)收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。2)在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。3)观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。4)贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。5)悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基)。6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1:2传代。七、细胞培养步骤1、培养基及培养冻存条件准备:1)准备内皮细胞专用基础培养基;优质胎牛血清,5%;添加对应因子1%;双抗,1%。2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。3)冻存细胞:冻存细胞时,用FBS重悬细胞,然后加入一定量的DMSO,轻轻混合均匀后移入到冻存管中,DMSO终浓度为10%。2、细胞处理:1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,离心管加入4mL培养基混合均匀。在800-1000RPM条件下离心4-5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入T25培养瓶中培养,补加培养基至6ml。2)细胞传代:如果细胞密度达80%,即可进行传代培养。3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2、加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加入3-4ml此细胞的培养基终止消化。3、轻轻吹打后吸出,移入15ml离心管中,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养液后吹匀。4、收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。下面T25瓶为类;1、细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1-2ml胰酶(含EDTA),细胞变圆脱落后,加入2-3ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。2、4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和等体积的冻存液,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10E6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。3、将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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2021.10.08

无乳链球菌的培养特性与生化反应!

                  无乳链球菌的培养特性与生化反应!无乳链球菌(Streptococcus agalactiae,GBS)是一种革兰氏阳性链球菌,因最先从患乳腺炎的牛中分离而得名。随后在各国孕产妇和新生儿中分离到,可引起新生儿早发和晚发型感染,无乳链球菌也被发现于各种畜牧及水产鱼类的流行病中,因此受到广泛关注。该菌能导致动物体产生败血症和脑膜炎,且具有较高的致死率。一、菌种简介规格:冻干物拉丁属名:Streptococcus agalactia中文名:无乳链球菌 外文名:Streptococcus agalactiae 形态:单个、成双、链状排列、长短不一 引起疾病:牛乳腺炎、罗非鱼链球菌病、败血症、脑膜炎等 缩写:GBS其它编号:ATCC 12386 培养基编号:103 培养温度:37 培养时间:48 小时用途:研究培养基信息 培养基编号:103 名称:1/5脑心浸出液培养基 Brain Heart Infusion (BHI) 备注:Bacto Brain Heart Infusion 7.4g ;蒸馏水  1L;琼脂 15g;pH 自然 注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用二、培养基TSA+5%脱纤维羊血(血琼脂平板)三、形态与染色革兰阳性球菌,单个、成双、链状排列、长短不一。四、培养特性在血琼脂平板上35 ℃培养18~ 24h,形成灰白色、表面光滑、有乳光、圆形、β溶血的菌落。部分菌株无β溶血环。五、生化反应触酶试验阴性,分解海藻糖,不分解山梨醇,马尿酸钠、CAMP 和VP 试验均为阳性,七叶苷和6.5 %NaCl试验均为阴性。六、保藏条件斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。 七、注意事项1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,参照“开管说明”,用无菌吸管吸取0.3ml-0.5ml 培养液(即以上建议的培养基配方,不加琼脂)或者无菌水,滴入冻干管中,轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液,接种在培养基上(建议不超过 2 支平板); 经过冷冻干燥保藏,菌种处于休眠状态,复苏培养时可能会延迟生长,这时需较长的培养时间;若您收到的是已复苏的培养物(非冻干菌),则可以直接用于您的实验,或根据需要转接培养;如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;2)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;3)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;4)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;5)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系。6)如若有菌种复苏不活或者污染等情况,请在收到菌钟后 2 个月内联系,逾期不予受理;7)打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。8)西林瓶开封:用 75%酒精棉擦拭西林瓶外部,在安全柜内使用尖嘴钳去除塑料盖及铝盖,注意不要同时打开胶塞。缓慢开启胶塞,用 75%酒精棉消毒瓶口部分,使用无菌吸管注入0.5ml 适宜的液体培养基复溶冻干粉末。9)安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。

参数原理

2021.10.08

我国生物安全进入依法治理的新阶段!

                 我国生物安全进入依法治理的新阶段!微生物菌种查询网:我国生物安全法律规制迎来重要里程碑,4月15日,生物安全法正式实施。作为我国生物安全领域的一部基础性、综合性、系统性、统领性法律,它的颁布和实施,标志着我国生物安全进入依法治理的新阶段。“生物安全法是国家安全领域的又一部重要法律。该法聚焦生物安全领域主要风险,完善风险防控体制机制,全面规范生物安全相关活动,对保障人民生命健康、维护国家安全、提升国家生物安全治理能力、完善生物安全法律体系具有重要功效和价值。”在全国人大常委会本月初举行的生物安全法实施座谈会上,全国人大宪法和法律委员会副主任委员丛斌表示。首次在国家层面以综合性立法形式界定生物安全生物安全涉及国家经济社会发展方方面面。中国疾控中心生物安全首席科学家武桂珍解释,生物安全属于非传统安全,包括新发突发传染病、新型生物技术误用和谬用、实验室生物安全、国家重要遗传资源和基因数据流失、生物武器与生物恐怖主义威胁等。在武汉大学环境法研究所所长秦天宝教授看来,生物安全法的一大重要亮点,是首次在国家层面以综合性立法的形式对生物安全进行了法律界定。生物安全法拓展了生物安全的法律内涵,实现了对生物安全风险的整体性、针对性防控。该法还以专章的形式规定了生物安全风险防控体制,分别对国家生物安全工作的领导机构、各级生物安全工作协调机制以及国家生物安全风险防控相关制度进行了明确。此外,生物安全法全面总结生物安全风险防控的经验做法,针对存在的短板弱项,特别是新冠肺炎疫情防控中暴露出来的问题,确立了十一项基本制度,构建起生物安全风险防控的“四梁八柱”。坚持问题导向防范重点领域风险基因编辑、合成生物学、人工智能等现代技术不断融合发展,生物技术误用、谬用导致出现灾难性后果已成为可能。“国家应加强对生物技术研究、开发与应用活动的安全管理,强化过程管理,按照风险等级实行分类管理;同时开展伦理审查、跟踪评估,严防滥用与谬用。”武桂珍呼吁。生物安全法的一大亮点是坚持问题导向,防范重点领域风险。通过系统梳理各领域生物安全风险,建立健全风险防控专项制度,分设专章对防控新发突发传染病和动植物疫情、生物技术研发与应用安全、病原微生物实验室生物安全、人类遗传资源与生物资源安全、防范生物恐怖与生物武器威胁等作出针对性规定。与此同时,生物安全法既强调防范生物安全风险,也注重促进我国生物技术产业健康发展,通过加强生物安全能力建设、科学研究以及基础设施建设等,为生物技术产业发展创造了健康发展的法治环境,实现生物安全风险防控与产业健康发展的有效协调。用好用足法律手段 确保见实效“生物安全涉及范围广、部门多。”丛斌建议,相关部门要主动作为,列明责任清单,加强监管,严格执法,用好用足法律手段,确保各项规定落到实处,见到实效。生物安全法规定,国家加强对我国人类遗传资源和生物资源采集、保藏、利用、对外提供等活动的管理和监督。座谈会上,科技部副部长相里斌表示,将加快推动《人类遗传资源管理实施细则》的制定和配套文件出台,完善人类遗传资源监督管理机制,加强地方支撑能力建设和信息管理平台建设,探索分级分类管理,由集中审批模式向加强监管和“放管服”等方向转变。为应对生物技术研究开发活动的安全风险,科技部和司法部起草了《生物技术研究开发安全管理条例(草案)》,目前已报送国务院待常务会审议。审议通过后,科技部将按职责组织编制其配套实施细则,制定生物技术研究开发活动风险分类标准及名录,依法加强对生物技术研究开发活动的安全管理。此外,围绕生物安全法部署的科技创新主要任务,科技部将开展重大新发突发传染病和动植物疫情防控、新型两用生物技术等科研攻关,系统提升我国生物安全科技支撑能力。“生物安全无国界。”武桂珍同时提到,需加强生物安全领域的国际合作,支持参与生物安全事件国际救援,共同提升全球生物安全治理水平。

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2021.09.30

STBL3超级感受态细胞的应用!

                       STBL3超级感受态细胞的应用!一、背景STBL3超级感受态细胞是为专为克隆慢病毒表达载体系统里顺向重复序列而设计的。该菌株可以降低慢病毒和其它反转录病毒长片段末端重复区意外重组的频率。这种特性是TOP10菌株没有的。与此同时,Stbl3™比SURE®细胞更稳定,能提高慢病毒载体的克隆效率。Stbl3超级感受态细胞是操作慢病毒系统推荐使用的菌株,对慢病毒载体等较大的质粒转化的效果好,能有效减低错误重组的可能性。二、操作方法1、Stbl3感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5分钟后待菌块融化,加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置25分钟。2、42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。3、向离心管中加入0.9 mL室温S.O.C.或LB培养基(S.O.C.营养丰富,可提高转化效率)。4、37℃,225 rpm复苏60分钟或30℃,225 rpm复苏90分钟。(当质粒中含有不稳定片段时,30℃培养可降低错误重组的概率,若转化control pUC19计算转化效率,则需37℃,225 rpm复苏60分钟)5、5000rpm离心一分钟收菌,留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的S.O.C.或LB培养基上。6、将平板倒置放于37℃或30℃培养箱过夜培养。三、应用用于E.coli高效感受态细胞转化体系的建立及诱导型瞬时表达载体的构建研究:比较了不同方法制备的大肠杆菌感受态细胞的转化效率,并优化了质粒DNA转化感受态细胞的转化体系。结果表明,应用高效法制备的感受态细胞其转化效率极显著高于普通大肠杆菌感受态细胞,转化效率提高了966.1%。-80℃超低温长期保存时,以7%DMSO为冻存保护剂保存的感受态细胞其转化效率最高,达到1、1×107,较15%甘油冻存保护剂保存的转化效率提高了69%。温浴5 min,冰浴10 min时,其转化效率最高,达到4.95×107。并且转化时间缩短至普通大肠杆菌感受态细胞的12.5%,仅为15 min。2、试验以拟南芥为试材,设计特异引物克隆得到了拟南芥诱导型启动子rd29A的基因序列,通过在GenBank上进行核苷酸序列的比对,分析了该启动子的各个响应元件。结果表示,序列的第370-375碱基之间有5 bp的TATA盒(TATAA),在第737-744碱基间有8 bp的戴帽信号序列(TCAGTCTC),在第302-305和353-356碱基间有CAAT盒和富GC区域(ATGGGCCAATAG)。干旱响应顺式作用元件(DRE)(TACCGACAAT)这段序列位于第556-565碱基之间,而报道中的ABA响应元件(ABRE)(ACGTG)则位于第719-724碱基之间。3、试验构建了诱导型植物瞬时表达载体PBI221-rd29A。通过分析启动子的酶切位点,试验利用HindIII和XbaI对启动子基因片段进行双酶切处理,同时载体PBI221也用相同的限制性内切酶进行酶切处理,将处理产物在T4 DNA连接酶的作用下16℃进行过夜连接,其产物转化大肠杆菌感受态细胞,经过培养得到含有载体质粒的克隆子。提取所构建载体的质粒进行酶切检测,顺利释放800bp左右目的条带,证明载体构建成功。微生物菌种查询网自设细胞系板块,是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

应用实例

2021.09.30

红假单胞菌属各种的描述之沼泽红假单胞菌!

             红假单胞菌属各种的描述之沼泽红假单胞菌!沼泽红假单胞菌[Rhodopseudomonas palustris(Molisch)van Niel 1944.89]  Pa.lus’tris.拉丁语阴性形容词palustris沼泽。  部分描述根据:Whittenbury和McLee,1967;Liaaen-Jensen,1963;Tauschol和Drews,1968;Qadri和Hoare,1968。  年幼单个的细胞(运动的子细胞)呈杆状到卵形,偶见稍弯,0.6-0.9*1.2-2.0微米,以极生或亚极生鞭毛运动。芽生繁殖;母细胞产生一个细管;管长为原来细胞长度的1.5-2.0倍,并位于有鞭毛相反的一端。管的一端膨大(芽的形成),子细胞变成像原来细胞那样大和不透明,从而产生了一个哑铃状的菌体。然后发生不对称的分裂,形成一个卵形子的细胞,和带有芽管的卵形母细胞。丛生和簇生是这个菌的老培养物的特征,在丛和簇中的每个菌以鞭毛端互相连在一起。在某些复杂的有机培养基中,单个细胞可长达10微米,形状不规则,也可形成分枝。  光合膜的系统,平行的片层在细胞质膜的下面并相连着;在管中没有片层结构。  厌氧液体培养基物最初呈淡红色,后来变成红至褐红色;老培养物暗棕红色。好氧培养物无色到粉红色。  光能异养菌:兼性好氧,可以在光下营厌氧生活,或在黑暗下营好氧生长。大多数菌株能长在洋菜平板或斜面上,虽然最初分离时,许多菌株表现为对氧敏感。能在有简单的有机底物和碳酸氢钠及以对-氨基苯甲酸盐为生长素的无机盐培养基上生长。有的菌株还需要加入生物素。酵母膏有显著地刺激生长的作用。pH范围:5.5-8.5;脂肪酸在pH7.0以下会抑制生长。最适的生长范围:30-37℃。作为碳源或光合作用的电子供体的底物:乙醇、脂肪酸、C4二羧酸、氨基酸、苯甲酸盐、环己烷羧酸。甲酸盐,分子氢和硫代硫酸盐只能在有少量酵母膏时才能利用。不利用:单糖类和糖醇类、硫化物。  氮源;铵盐。  色素:菌叶绿素a和正常的螺菌黄质系的类胡萝卜素。  贮藏物质:多糖类、聚-β-羧基丁酸盐。  有氢化酶、接触酶、甲酸脱氢酶。  DNA碱基含量:64.8-66.3克分子2%G+C(浮力密度法)。  生境:广泛分布在暴露于阳光下的泥和水中。最常见的非硫紫细菌。欢迎访问微生物菌种查询网,本站隶属于北京百欧博伟生物技术有限公司,单位现提供微生物菌种及其细胞等相关产品查询、咨询、订购、售后服务!与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

参数原理

2021.09.30

亚香棒虫草的形态特征与鉴定及栽培技术!

              亚香棒虫草的形态特征与鉴定及栽培技术!亚香棒虫草又名古尼虫草、霍克斯虫草,寄生于寄生在鳞翅目昆虫幼虫的子囊菌,由虫体和头部长出的子座组成。子座从寄主头部生出,柄白色,顶部一般灰色至灰黑色,长卵圆形至柱状,单生,二叉分枝或成簇着生,一般8-22mm ×5-8mm,成熟时与柄的界限分明,无不孕顶端。一、菌种简介平台编号:bio-32653拉丁学名:Cordyceps hawkesii Gray中文名称:亚香棒虫草别名:霍克斯虫草 拉丁属名:Cordyceps 种名加词:hawkesii Gray 收藏时间*:2005-8-15 来源历史:中国林科院亚热带林业研究所原产国:中国 资源归类编码:15152117101 模式菌株:非模式菌株 主要用途:研究;教学 特征特性:子座单生,由寄主前端发出,长6-8cm,粗2mm,柄多弯曲,黑色,有纵皱或棱纹,上部光滑,下部有细毛。头部短圆柱形,顶端圆,长12mm,粗3.5mm,茶褐色。子囊壳埋生于子囊座内,椭圆形至卵形,600-700μm×230-260μm,孔口黑色 、粒点状 。子囊400-500μm×5μm,孢子断成8-9μm×0.5-1μm的小段。生物危害程度:四类 致病对象:无 采集地区:山东金乡 培养基信息:培养基编号:14 培养基名称:PDA 培养温度:25 资源保护类型:培养物 保藏方法:定期移植法 共享方式:公益性共享 提供形式:斜面培养物 实物状态:有实物注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。二、形态特征子座单生,由寄主前端发出,长6-8cm,粗2mm,柄多弯曲,黑色,有纵皱或棱纹,上部光滑,下部有细毛。头部短圆柱形,顶端圆,长12mm,粗3.5mm,茶褐色。子囊壳埋生于子囊座内,椭圆形至卵形,600-700μm×230-260μm,孔口黑色 、粒点状。子囊400-500μm×5μm,孢子断成8-9μm×0.5-1μm的小段。三、分布范围主要分布于贵州、湖南,也有少量分布于云南、安徽、湖北、广东、广西、四川等地。四、鉴定方法性状鉴别 该品为虫体及其头部长出的子座组成。虫体似蚕,长3-4cm,直径4-5mm,头部红黄色或紫黑色,体表类白色,有20-30个环节,近头部有足3对,尾部1对,中部4对,气门点状,黑色,刮去外层灰白色菌膜,可见褐色或栗褐色虫体角皮;质脆,易折断,断面略平坦,黄白色。子座单生,间或2-3个,长4-8cm,头部短圆柱形,顶端圆钝,长1-1.2cm,直径3-6mm,茶褐色,柄多弯曲,直径2-4mm,灰白色或灰黑色,具纵纹;质脆,易折断,断面疏松或空瘪。气香,味微咸(菌核)或淡(子座)。显微鉴别子座横切面:子囊壳埋生于子座内,烧瓶形或鞋底形,长325-585μm,直径65-156μm;子囊长304-398μm,直径3-5μm,子囊孢子线形,长182-325μm,直径1.5-2μm,横隔不明显;壁部菌丝排列紧密;菌髓菌丝排列疏松。五、化学成分亚香棒虫草含甘露醇(mannitol),麦角甾醇(ergosterol),糖,氨基酸,生物碱及有机酸。氨基酸主要包括:天冬氨酸(aspartic acid),苏氨酸(threonine),丝氨酸(serine),谷氨酸(glutamic acid),脯氨酸(proline),甘氨酸(glycine),缬氨酸(valine),蛋氨酸(methionine),丙氨酸(alanine),异亮氨酸(isoleucine),亮氨酸(leucine),酪氨酸(tyrosine),苯丙氨酸(phenylalanine),赖氨酸(lysine),组氨酸(histidine)及精氨酸(arginine)。还含有维生素C, 烟酸(nicotinic acid),烟酰胺(nicotinic acid amide),锌,铜,锰,铁,钴和铬。六、栽培技术菌种:菌种多是来自自然界的古尼虫草,按常规进行分离培养而取得。据研究,虫草菌有性型发生过程中,需要一定的湿度以满足体内复杂的生理变化所要求的水分,且温度与湿度之间存在相关性,在一定的湿度下,温度变化缓慢或较为恒定,则不利于抽出子实体。有性型的发生必须要经过低温和变温处理侵染途径:古尼虫草是虫草菌孢子接触幼虫侵染致死,才能长出子实体。据观察发现,寄主4-5龄幼虫子感染率最高。老熟幼虫很少感染,3龄以下的幼虫不被感染。如何把握时机,对一般人来讲也是很难掌握的。在浸染问题上,人工培育昆虫的条件较好,则虫体过于强壮,抗菌力强,难以感染。条件差,则虫菌侵入后引起死亡,出现这两种情况都会失败。

参数原理

2021.09.29

小鼠正常肝细胞的处理方法与应用!

                   小鼠正常肝细胞的处理方法与应用!一、背景小鼠正常肝细胞是从对人TGFα进行转基因的小鼠(CD1株,MT42系)的肝细胞中建立的贴壁上皮样细胞。通过电子显微镜,这些细胞表现出典型的肝细胞特征,例如过氧化物酶体和胆小管样结构。AML12细胞保留表达血清(白蛋白,α1抗胰蛋白酶和转铁蛋白)和间隙连接(连接蛋白26和32)蛋白的高水平mRNA的能力,并且仅包含乳酸脱氢酶的同工酶5。细胞表达高水平的人TGFα和较低水平的小鼠TGFα。肝特异性蛋白的表达随培养时间的延长而降低,但会通过在无血清培养基中生长细胞而重新激活。肝脏是由肝细胞组成,肝细胞极小,肉眼看不到,必须通过显微镜才能看到。每个肝细胞表面可分为窦状隙面、肝细胞面和胆小管面三种。肝细胞里面含有许许多多复杂的细微结构:如肝细胞核、肝细胞质、线粒体、内质网、溶酶体、高尔基氏体、微粒体及饮液泡等组成。二、细胞处理方法1、弃去培养液,加少量消化液润洗一次。2、弃去液体,再加入适量的消化液,25cm2细胞瓶可加入1-1.5ml消化液,75 cm2细胞瓶可加入3ml消化液。3、置室温或37℃放置至细胞变圆或细胞分散为单个细胞,不要摇动以免细胞成团。4、加入新鲜培养液,吹打混匀并加置新瓶中。三、应用用于纳米化诱癌剂诱发小鼠肝癌的机制研究:建立了小鼠肝癌模型,并对其致癌机制进行了初步研究。目的:制备稳定、高效的纳米化诱癌剂-nanoDEN,通过长期、低频经口给予纳米化诱癌剂建立良好、快捷、稳定的小鼠肝癌模型,研究其致癌机制。方法:1、采用高压均质法制备纳米化诱癌剂-nanoDEN,利用激光粒径仪测定其粒径、zeta电位及稳定性,采用扫描电镜观察其微观形态,通过透析袋法测定纳米化诱癌剂的体外释放,完成纳米化诱癌剂的制备与表征。2、在体的动物水平方面,经口给予16.5 mg/kg纳米化诱癌剂等诱发小鼠肝癌,通过记录小鼠体重变化、观察肝脏大体观(是否出现肿瘤结节)、检测肝功能生化指标(包括ALT、AST等)和镜下对肝脏组织染色(H&E及Masson)进行评分,比较纳米化诱癌剂与DEN致癌效果。3、分子水平方面,利用免疫组织染色法检测β-catenin(肿瘤发生过程中关键因子)、COX-2(炎症相关因子)、PCNA(与肿瘤发展密切相关的蛋白)的表达量变化情况及TUNEL染色法检测细胞凋亡的变化,分析纳米化诱癌剂的致癌作用。4、离体的细胞水平方面,采用MTT法检测纳米化诱癌剂及DEN对肝癌细胞株HepG-2、正常肝细胞株L02的毒性作用,比较纳米化诱癌剂与DEN的致癌能力。通过nanoRhod B处理HepG-2及L02细胞,模拟肝癌细胞及正常肝细胞对纳米化诱癌剂的胞吞作用过程。5、通过小鼠尾静脉注入nanoRhod B实验,模拟纳米化诱癌剂的体内分布情况。微生物菌种查询网自设细胞系板块,是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

应用实例

2021.09.29

链格孢的生物学特性与使用注意事项!

                   链格孢的生物学特性与使用注意事项!链格孢属是一种在自然界广泛分布的暗色真菌,是土壤、植物、食品、工业材料上常见的腐生菌,也是实验室常见污染菌。链格孢属隶属于真菌界、子囊菌门、子囊菌亚门、座囊菌纲、格孢腔目、孢腔菌科。属内有50多个种,最常见的为互格链格孢。链格孢(Alternaria Nees) 是经济上重要的真菌属之一。大多数种类兼性寄生于植物上,引起多种经济植物病害,造成田间和产后损失。有几个链格孢小孢子种可侵染人和动物,引起皮癣、甲癣、颚骨髓炎等疾病。链格孢产生的某些真菌毒素是重要的致癌因素。另一方面,链格孢也是有应用潜力的生物资源,如一些链格孢次生代谢物具有杀虫、杀菌和杀原生生物活性。长柄链格孢中某些菌株分生孢子壁中含有激发子组份,可被用来制成防治烟草赤星病的生防制剂等。一、菌种简介平台编号:bio-52592规格:冻干物拉丁属名:Alternaria alternata (Fries) Keissler菌种名称:链格孢其它编号:AS3.4255培养基编号:17培养温度:25-28℃培养时间:5-7 天用途:除光学仪器外的防霉试验菌种。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。二、培养基综合马铃薯培养基(PDA)20%马铃薯汁 1L 葡萄糖 20g MgSO4.7H2O 1.5g KH2PO4 3gVitanib B1 (硫胺素) Trace 微量约 8mg Agar (琼脂) 20g pH 自然20%马铃薯汁配制方法:马铃薯洗净去皮,取 200 克切成小块 , 加水 1000 毫升煮沸 20 分钟后滤去马铃薯块,将滤液补足 1000ml。三、生物学特性对梨黑斑病病原菌链格孢菌(Alternaria alternata)生物学特性的研究结果表明,不同菌株在PSA 平板上培养,平均日生长速率、产孢量、菌落颜色以及菌落厚度有显著不同。病原菌生长适宜温度为20~30℃,最适温度为28℃,孢子萌发的最适温度为28℃;病原菌适宜生长相对湿度为50%~100%,最适生长相对湿度为98%~100%,孢子萌发必须具备相对湿度98%以上的高湿条件,在水滴中萌发率最高;病原菌菌丝适宜生长的pH值为4~12,最适生长pH 值为7~8,孢子萌发最适pH 值为7~8,病原菌培养一段时间后培养基的pH 值会发生改变。该病原菌对多种单糖、双糖和多糖等碳源及有机氮、无机氮均可利用,最适碳源为蔗糖,最适氮源为蛋白胨,硫酸胺和氯化胺会抑制病原菌菌丝生长。四、保藏条件斜面菌种和冻干菌种应在 2-8°C 保存。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。 五、注意事项1)冻干首次活化,干粉要全部用完,不能预留,参照“开管说明”,用无菌吸管吸取0.3-0.5ml 培养液(即以上建议的培养基配方,不加琼脂)或者无菌水,滴入冻干管中,轻轻振荡至其溶解。吸取全部菌悬液,接种在培养基上(建议不超过 2 支平板或斜面);2)经过冷冻干燥保藏,菌种处于休眠状态,复苏培养时可能会延迟生长,这时需较长的培养时间; 若您收到的是已复苏的培养物(非冻干菌),则可以直接用于您的实验,或根据需要转接培养如有不明白之处,请务必先咨询我单位技术人员,避免不必要的损失;3)微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方,室温放置时间过长会导致菌种衰退;4)菌种操作应在无菌条件下进行;转种完毕,应经灭菌再做丢弃处理;5)应根据菌种状况及时转接,冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年;6)菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系。7)如若有菌种复苏不活或者污染等情况,请在收到菌钟后 2 个月内联系,逾期不予受理;8)打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。9)安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂,用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端并将冻干管开口处在火焰上过一遍,并保持在火焰旁操作。

参数原理

2021.09.29

培养基母液的配制方法有哪些?

                  培养基母液的配制方法有哪些?一、实验目的1、了解无菌操作2、掌握培养基母液的配制方法二、实验原理配制培养及时,为了使用方便和用量准确,通常采用母液法进行配制,即将所选培养基配方中各试剂的用量,扩大若干倍后再准确称量,分别先配制成一系列的母液置于冰箱中保存,使用时按比例吸取母液进行稀释配制即可。三、实验器材和药品1、器材:电子天平、烧杯、容量瓶、细口瓶、药勺、玻璃棒、电炉。2、药品:NH4NO3、KNO3、CaCl2·2H2O、 MgSO4·7H2O、KH2PO4、KI、H3BO3、MnSO4·4H2O、 ZnSO4·7H2O、Na2MoO4·2H2O、 CuSO4·5H2O、CoCl2·6H2O、FeSO4·7H2O、 Na2-EDTA·2H2O、肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇(维生素B6)、盐酸硫胺素 (维生素B1)、甘氨酸。四、实验步骤1、大量元素母液的配制各成分按照表1培养基浓度含量扩大10倍用天平称取,用蒸馏水分别溶解,按顺序逐步混合。后用蒸馏水定容到 1000ml的容量瓶中,即为10倍的大量元素母液。到入细口瓶,贴好标签保存于冰箱中。配制培养基时,每配1L培养基取此液100ml。表1 MS培养基大量元素母液制备注意:(1) 配制大量元素母液时,某些无机成分如Ca2+、SO42-、Mg 2+和H2PO4一等在一起可能发生化学反应,产生沉淀物。为避免此现象发生,母液配制时要用纯度高的重蒸馏水溶解,药品采用等级较高的分析纯,各种化学药品必须先以少量重蒸馏水使其充分溶解后才能混合,混合时应注意先后顺序。特别应将Ca2+、SO42一、Mg 2十和H2PO4一等离子错开混合,速度宜慢,边搅拌边混合。(2)CaCl2·2H2O要在最后单独加入,在溶解CaCl2·2H2O 时,蒸馏水需加热沸腾,除去水中的CO2,以防沉淀。另外,CaCl2·2H2O放入沸水中易沸腾,操作时要防止其溢出。2、微量元素母液的配制MS培养基的微量元素无机盐由7种化合物(除Fe )组成。微量元素用量较少,特别是 CuSO4·5H2O、 CoCl2·6H2O ,因此在配制中分微量Ⅰ、Ⅱ配制。按照表2,表3配方,用电光天平称量,其它同大量元素。配制培养基时,每配制1L培养基,取微量Ⅰ10ml,微量Ⅱ0.1ml。表2 MS培养基微量Ⅰ的配制表3 MS培养基微量Ⅱ的配制注意:使用电子分析天平时注意不要把药品撒到称盘上,用完以后,用吸耳球将天平内的脏物清理干净。3、铁盐母液的配制铁盐不是都需要单独配成母液,如柠檬酸铁,只需和大量元素一起配成母液即可。目前常用的铁盐是硫酸亚铁和乙二胺四乙酸二钠的螯合物,必须单独配成母液。这种螯合物使用起来方便,又比较稳定,不易发生沉淀。配制方法同上,直接用蒸馏水加热搅拌溶解,定容至1L。配制培养基时,配制1L取此液10ml。表4 MS铁盐母液的配制注意:在配制铁盐时,如果加热搅拌时间过短,会造成FeS04和Na2-EDTA 鳌合不彻底,此时若将其冷藏,FeSO4会结晶析出。为避免此现象发生,配制铁盐母液时,FeSO4和Na2-EDTA 应分别加热溶解后混合,并置于加热搅拌器上不断搅拌至溶液呈金黄色(约加热20 - 30 min),调pH值至5 .5,室温放置冷却后,再冷藏。4、有机母液的配制MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、盐酸硫胺素和盐酸吡哆素。培养基中的有机成分原则上应分别单独配制。配制直接用蒸馏水溶解,定容至1L,注意称量时用电子分析天平。配制培养基时,每配1L培养基取此液5ml。注意:由于维生素母液营养丰富,因此贮藏时极易染菌。被菌类污染的维生素母液,有效浓度降低,并且易给后期培养造成伤害,不宜再用。避免此现象发生的方法是:配制母液时用无菌重蒸馏水溶解维生素,并贮存在棕色无菌瓶中,或缩短贮藏时间。表5 MS培养基有机物质母液的制备5、激素母液配制植物组织培养中使用的激素种类及含量需要根据不同的研究目的而定。一般激素母液的配制的终浓度以0.5mg/ml为好,需要注意的是:(1)配制生长素类,例如IAA、NAA、2.4-D、6BA,应先用少量95%乙醇或无水乙醇充分溶解,或者用 1mol/L的NaOH溶解,然后用蒸馏水定容到一定的浓度。(2)细胞分裂素,例如KT,应先用少量95%乙醇或无水乙醇加3~4滴1mol/L的盐酸溶解,再用蒸馏水定容。(3)配制生物素,用稀氨水溶解,然后定容。注意:所有的母液都应保存在0~4℃冰箱中,若母液出现沉淀或霉团则不能继续使用。北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

参数原理

2021.09.28

酸土脂环酸芽孢杆菌的培养条件与实验内容!

              酸土脂环酸芽孢杆菌的培养条件与实验内容!酸土脂环酸芽胞杆菌是Alicyclobacillus属的微生物,原产地为德国。G+,细胞呈直杆状,0.53um×2.33~3.67um,芽胞卵圆形,孢囊膨大。主要用途为分类;研究;分析检测,具体用途为分类学研究,质量控制。一、菌种简介拉丁属名:Alicyclobacillus acidoterrestris中文名称:酸土脂环酸芽孢杆菌属名:Alicyclobacillus种名加词:acidoterrestris其它中心编号:=ACCC 10223=DSM 3922 =ATCC 49025来源历史:←中国农业微生物菌种保藏中心←DSMZ收藏时间:2009.6.2原始编号:GD3B资源归类编码:15131312101模式菌株:模式菌株主要用途:分类;研究;分析检测具体用途:分类学研究,质量控制。特征特性:G+,细胞呈直杆状,0.53umX2.33~3.67um,芽孢卵圆形,孢囊膨大。 生物危害程度:四类致病对象:无分离基物:花园土壤培养基:A溶液:CaCl2 ?2H2O 0.25g,MgSO4?7H2O 0.5g,(NH4)2SO4 0.2g,KH2PO4 3.0g,酵母膏 2.0g,葡萄糖 5.0g,蒸馏水 0.5(固体培养基)/1.0(液体培养基)L,pH4.0。B溶液:ZnSO4.7H2O 0.1g,MnCl2.4H2O 0.03g,H3BO3 0.3g,CoCl2.6H2O 0.2g,CuCl2.2H2O 0.01g,NiCl2.6H2O 0.02g,Na2MoO4.2H2O 0.03g,蒸馏水 1.0L。C溶液:琼脂15.0g,蒸馏水 0.5L。[注] 以上溶液单独灭菌,A与1ml B溶液混合制成液体培养基,A,1ml B溶液,C混合制成固体培养基。培养温度:45-50℃资源保藏类型:培养物保存方法:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法实物状态:有实物共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享用途:分类;研究;分析检测;分类学研究,质量控制。注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。二、储存条件冻干菌种和试管斜面请置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。三、培养条件1、培养基编号:CM04372、培养基成分:A 溶液:CaCl2 2H2O 0.25g,MgSO4 7H2O 0.5g,(NH4)2SO4 0.2g,KH2PO43.0g,酵母膏 2.0g,葡萄糖 5.0g,蒸馏水 0.5(固体培养基)/1.0(液体培养基)L,pH4.0。B溶液:ZnSO4 7H2O 0.1g,MnCl2 4H2O 0.03g,H3BO3 0.3g,CoCl2 6H2O 0.2g,CuCl2 2H2O0.01g,NiCl2 6H2O 0.02g,Na2MoO4 2H2O 0.03g,蒸馏水1.0L。C 溶液:琼脂 15.0g,蒸馏水 0.5L。[注] 以上溶液单独灭菌,A 与 1ml B 溶液混合制成液体培养基,A,1ml B 溶液,C 混合制成固体培养基。3、需氧类型:好氧4、培养温度:45-50℃四、实验内容1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌五、保存方法1、传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙。2、液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。3、悬液保存法:① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。4、载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。六、注意事项1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。2、试管斜面菌种请尽快转接,不建议长期存放。3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。4、使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降,应及时和微生物菌种查询网联系菌种。

参数原理

2021.09.28

WI-38细胞的培养步骤与应用!

                    WI-38细胞的培养步骤与应用!一、背景WI-38细胞是从女性高加索人的正常胚肺组织中获得的一株人2倍体细胞系。它的培增时间为2Rh,有限寿命为Sd代。它是成纤维细胞,能产生胶原。WI-38细胞是首株用于人类疫苗制备的人二倍体细胞系,培养液中添加TNF-α可以促进WI-38细胞生长。二、培养步骤1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。2、加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。3、轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。4、按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。三、应用用于D-半乳糖诱导WI-38细胞衰老模型的建立及机制研究:以D-半乳糖诱导WI-38(PDL30-40)细胞衰老,以建立D-半乳糖诱导细胞衰老模型,并在此基础上探讨诱导衰老的分子机制并寻找潜在的抗衰老靶点。采用MTT法测定不同浓度D-半乳糖(0,1.25,2.5,5,10,20g/L)对WI-38细胞活力的影响;SA-β-Gal染色检测不同浓度D-半乳糖(0,1.25,2.5,5,10 g/L)连续处理WI-38细胞14d后衰老状况;Western Blot法检测细胞周期抑制蛋白P21和P16和衰老标志蛋白β-gal的表达;DCFH-DA法测定不同浓度D-半乳糖对WI-38细胞总ROS水平的影响;Western Blot检测抗氧化酶、自噬标记蛋白和自噬相关通路蛋白表达。在D-半乳糖诱导细胞衰老模型上,采用不同浓度Mito Q进行干预,DCFH-DA法进一步测定细胞总ROS,SA-β-Gal染色检测衰老状况,Western Blot进一步检测衰老相关蛋白、抗氧化蛋白以及自噬标记蛋白表达,MDC法检测自噬。结果:1、D-半乳糖诱导WI-38细胞衰老模型的建立(1)D-半乳糖对WI-38细胞活力具有一定的抑制作用,并且随着浓度的增高而下降。(2)D-半乳糖可诱导WI-38细胞衰老;不同浓度D-半乳糖作用14d后,SA-β-Gal染色细胞阳性率随着浓度的增加而增高,在5g/L浓度时达到最高。(3)不同浓度D-半乳糖处理14d,P21、P16和β-gal表达随着D-半乳糖浓度的增加而逐渐增高,P16和β-gal表达在5g/L浓度达到最高。微生物菌种查询网自设细胞系板块,是细胞株提供中心,专业提供代次低、周期短、活性好的细胞株。与国内外多家研制单位,生物医药,第三方检测机构,科研院所有着良好稳定的长期合作关系!欢迎广大客户来询!

应用实例

2021.09.28

成都假单胞菌的形态特征与主要价值!

               成都假单胞菌的形态特征与主要价值!成都假单胞菌是Pseudomonas属的微生物,原产地为中国。菌种简介平台编号:bio-84743提供形式:冻干物拉丁属名:Pseudomonas chengduensis中文名称:成都假单胞菌属:Pseudomonas 拉丁名称:Pseudomonas chengduensis其它保藏中心编号:=DSM 26382 =CGMCC 2318来源历史:←DSMZ收藏时间:2017/3/28原始编号:MBR原产国:中国资源归类编码:15131134101模式菌株:模式菌株主要用途:分类;研究特征特性:菌体短杆状,单个或成对排列,革兰氏阴性。16S rRNA基因序列号:EU307111,gyrB基因序列号:JX042516,rpoB基因序列号:JX042515, rpoD基因序列号:JX042517。生物危害程度:四类培养基编号:CM0002培养基名称:营养肉汁琼脂培养基成分:蛋白胨 5.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,琼脂 15.0g,蒸馏水 1.0L,pH7.0。[注] 培养芽孢杆菌时加入5mg MnSO4·H2O,则有利于产生芽孢。培养温度:28℃需氧类型:好氧分离基物:固体废弃物处置处的垃圾渗滤液采集地:四川成都保存方法:-80℃冰箱冻结法;真空冷冻干燥法共享方式:公益性共享;资源纯交易性共享;合作研究共享;资源交换性共享用途:分类;研究注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用参考文献:(1)Tao, Y., Zhou, Y., He, X., Hu, X., Li, D. (2014). Pseudomonas chengduensis sp. nov., isolated from landfill leachate. Int J Syst Evol Microbiol. 64 ( Pt 1 ): 95-100. (2)Su, W., Zhang, L., Li, D., Zhan, G., Qian, J., Tao, Y. (2012). Dissimilatory nitrate reduction by Pseudomonas alcaliphila with an eletrode as the sole electron donor. Biotechnol. Bioeng. 109 ( 11 ): 2904-2910.形态特征G‾,菌体杆状,单个或八字排列,单鞭毛运动,无芽胞。菌落圆形,表面光滑、湿润,不透明。能利用葡萄糖、木糖,不能发酵乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖。接触酶阳性,精氨酸水解酶、ONPG、硫化氢、赖氨酸、鸟氨酸为阳性。还原硝酸盐产气,不水解尿素,可生长于6.5% 氯化钠中。 主要价值主要用途为研究,具体用途为用于环境污水处理研究。 北京百欧博伟生物技术有限公司的微生物菌种查询网提供微生物菌种保藏、测序、购买等服务,是中国微生物菌种保藏中心的服务平台,并且是集微生物菌种、菌种,ATCC菌种、细胞、培养基为一体的大型微生物查询类网站,自设设备及技术的微生物菌种保藏中心!欢迎广大客户来询!

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2021.09.27

生物安全法律规制的里程碑!

                    生物安全法律规制的里程碑!微生物菌种查询网:生物安全法正式实施,为我国防范生物安全风险和提高生物安全治理能力提供了坚实的法律支撑,标志着我国生物安全法律体系建设进入了新的发展阶段,是生物安全法律规制的重要里程碑。  生物安全法具有重要时代意义  为进一步维护国家安全提供了法律依据。2020年2月,习近平总书记提出“把生物安全纳入国家安全体系,系统规划国家生物安全风险防控和治理体系建设”。生物安全法是在生物安全治理领域对总体国家安全观进行的具体贯彻。该法明确提出“维护国家安全,防范和应对生物安全风险”的立法目的,并从立法原则、管理体制、基本法律制度、法律责任等方面为我国生物安全风险防控提供了明确的法律依据,同时为进一步推动生物安全纳入国家安全体系,实现国家安全的整体性保障提供了法治路径。  为完善我国生物安全法律体系奠定了基础。生物安全法作为我国生物安全治理领域的基础性法律,对生物安全风险防控体制、重大新发突发传染病、动植物疫情、生物多样性、生物技术研发等多个领域的生物安全风险防控问题进行系统性、针对性的规制,填补了多项立法空白。同时,它明确了我国生物安全法律规制的统一理念和目标,其原则性和授权性规定为今后国家和地方生物安全立法工作预留了空间,为健全以生物安全法为核心、以其他相关法律规范为重要内容的生物安全法律体系奠定了坚实基础。  为促进我国生物技术产业健康发展提供了法律保障。生物安全法既强调防范生物安全风险,也注重促进我国生物技术产业健康发展。生物安全法通过加强生物安全能力建设、科学研究以及基础设施建设等,为生物技术产业发展创造了健康发展的法治环境,实现生物安全风险防控与产业健康发展的有效协调。  生物安全法的主要亮点  界定了生物安全的法律规制范围。生物安全法首次在国家层面以综合性立法的形式对生物安全进行了法律界定,拓展了生物安全的法律内涵,在防控重大新发突发传染病、动植物疫情、生物技术研发与应用、病原微生物实验室、人类遗传资源与生物资源、生物恐怖与生物武器等做出明确规定,实现了对生物安全风险的整体性、针对性防控。  建立健全了生物安全风险防控的领导体制。生物安全法以专章的形式规定了生物安全风险防控体制,分别对国家生物安全工作的领导机构、各级生物安全工作协调机制以及国家生物安全风险防控相关制度进行了明确,为实现国家领导下各利益相关主体参与生物安全风险防控的协同合作提供了制度支撑。  明确了生物安全风险防控基本原则和制度。生物安全法要求“维护生物安全应当贯彻总体国家安全观,统筹发展和安全”,并且明确了以人为本、风险预防、分类管理、协同配合等基本原则。生物安全法明确了生物安全风险监测预警制度、风险调查评估制度、信息共享制度、生物安全审查制度、应急制度等基本法律制度,为实现生物安全风险的“全链条”防控提供了可靠的制度依据。  我国生物安全法律体系的展望  以实现生物安全的整体性规制为理念。随着生物技术的不断更新和进步,生物安全风险也更具复杂性,生物安全风险防控也需要具有整体性、系统性的法律体系支撑。生物安全法的一项重要亮点在于体现了我国对生物安全的整体性规制理念。在此理念指引下,未来生物安全的整体性法律规制要结合现实需求对法律体系进行动态性完善和更新,进而实现新时期背景下生物安全法律体系对总体国家安全观的有效贯彻和推进。  法律体系结构将更具紧密性与协调性。生物安全法实施以后,我国生物安全法律体系要形成以生物安全法为中心,相关生物安全风险防控立法为重要组成部分的法律体系结构。在该体系结构下,我国生物安全风险法律规制的理念与目标进一步统一,将促进该体系内部相关法律规范的整合与衔接。同时,生物安全法律规制具有范围广泛、法律关系复杂等特征,生物安全法律体系的发展也应注重该体系在外部与其他法律规范、体系的协调配合,从而实现生物安全法律体系在解决生物安全风险问题时的整体性价值。  法律体系中主体关系更为多元。生物安全法一方面明确了国家在进行生物安全风险防控时的主导性地位,反映出生物安全与国家安全的密切联系;另一方面,该法也分别明确了专家委员会、基层群众性自治组织、社会组织、科研机构、新闻媒体等社会主体在生物安全风险防控工作的积极作用,体现出生物安全风险防控的主体多样性。由于生物安全风险防控涉及科学技术问题,未来生物安全法的实施应当注重协调各主体参与生物安全风险防控的权责关系,既需要专业机构、专家学者为其决策的制定和实施提供专业性意见,也需要全民共同参与以增强政府风险决策的正当性和可接受性,以发挥各主体生物安全风险防控的优势。

应用实例

2021.09.27

科氏芽孢杆菌单层冻干管打管说明书!

                科氏芽孢杆菌单层冻干管打管说明书!科氏芽孢杆菌(Bacillus cohnii),真菌界。保藏温度为 -70℃ 。一、菌种简介平台编号:bio-05400规格:冻干粉拉丁属名:Bacillus cohnii中文译名:科氏芽孢杆菌界:细菌界 分布区域:河北石家庄等拉丁学名:Bacillus cohnii原始编号:DSM 6307菌株来源:←DSMZ保藏人:周宇光直接来源国家:德国保藏时间:6/11/2004其他保藏编号:=ATCC 51227 =CCM 4369 =NBRC 15565生物危害:四类模式菌株:模式菌株菌株用途:模式菌株培养温度:30℃培养基:0002    分离源:土壤提供形式:冻干物用途:模式菌株注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用。二、储存条件冻干菌种和试管斜面请置于 6-10℃冷藏。三、培养条件营养肉汁琼脂蛋白胨 10.0g 牛肉浸取物 3.0g NaCl 5.0g 琼脂 15.0g蒸馏水 1.0L PH 7.0四、注意事项1、菌种常规培养时间:细菌 1-2 天,酵母 3 天,霉菌 5-7 天,大型真菌 7-10 天。2、菌种恢复培养前,建议将收到的菌种安瓿保存在 6-10°C 的环境下,某些菌种经过冷冻干燥保存后处于休眠状态,延迟期较长,如在说明建议的培养时间还未长起来,请继续在相应的环境下多培养 24 小时或者更长时间,直至菌种培养完成,有的菌种需要连续两次继代培养才能正常生长,一般来说菌种培养稳定后才能用于您的后续实验。3、初次使用时请严格按照本说明书推荐条件和操作步骤进行复活培养,如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失,我单位不负责任。4、恢复培养厌氧菌时,在操作过程中应严格控制厌氧条件:制作培养基时,应使用厌氧螺口试管,并利用高纯氮气去除试管和培养基中的氧气,使用者应保证菌种的安全存储和操作,带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。5、与菌种相关的其它信息请参阅微生物菌种查询网网站(www.biobw.org)。五、冻干管打管说明书1、安瓿瓶开封:用浸过 75%酒精的脱脂棉擦净安瓿管,用火焰加热其顶端,滴少量(2-3滴)无菌水至加热顶端使之破裂(应避免过多水蒸气影响菌种的复苏),用锉刀或者镊子敲下已破裂的安瓿管顶端。2、用无菌吸管吸取 0.3ml(建议勿超过 0.5ml)适宜的液体培养基(不添加琼脂),滴入管内,轻轻振荡,待安瓿管内的菌体溶解呈悬浮状,在用无菌吸管吸取全部菌悬液接在 1-2 支建议的培养基试管中(不超过 2 支,中国微生物菌种查询网提供的培养基配方中有琼脂,请务必做成试管斜面,配方中没有琼脂,试管中液体培养基不超过 5ml),并在建议的条件下静止培养。3、冻干管打开后需一次用完,不能留存。另外,安瓿管内大部分是用牛奶做保护剂,里面菌体为少数,复苏时要全部菌悬液接在新鲜培养基上,否则可能造成复苏不成功。4、打管操作需由专业微生物技术人员在相应的防护设备中进行,生物危害程度为三类的菌种应在生物安全柜中操作,打管时冻干管应远离面部,保护眼睛。5、打管操作应在烧杯或托盘上方进行,用完冻干管应灭菌处理后丢弃。6、菌种复苏时,请务必记录好菌种的编号和制备批号,否则不予售后。

参数原理

2021.09.27

中华人民共和国生物安全法!

                         中华人民共和国生物安全法!第一章 总则第一条 为了维护国家安全,防范和应对生物安全风险,保障人民生命健康,保护生物资源和生态环境,促进生物技术健康发展,推动构建人类命运共同体,实现人与自然和谐共生,制定本法。第二条 本法所称生物安全,是指国家有效防范和应对危险生物因子及相关因素威胁,生物技术能够稳定健康发展,人民生命健康和生态系统相对处于没有危险和不受威胁的状态,生物领域具备维护国家安全和持续发展的能力。从事下列活动,适用本法:(一)防控重大新发突发传染病、动植物疫情;(二)生物技术研究、开发与应用;(三)病原微生物实验室生物安全管理;(四)人类遗传资源与生物资源安全管理;(五)防范外来物种入侵与保护生物多样性;(六)应对微生物耐药;(七)防范生物恐怖袭击与防御生物武器威胁;(八)其他与生物安全相关的活动。第三条 生物安全是国家安全的重要组成部分。维护生物安全应当贯彻总体国家安全观,统筹发展和安全,坚持以人为本、风险预防、分类管理、协同配合的原则。第四条 坚持中国共产党对国家生物安全工作的领导,建立健全国家生物安全领导体制,加强国家生物安全风险防控和治理体系建设,提高国家生物安全治理能力。第五条 国家鼓励生物科技创新,加强生物安全基础设施和生物科技人才队伍建设,支持生物产业发展,以创新驱动提升生物科技水平,增强生物安全保障能力。第六条 国家加强生物安全领域的国际合作,履行中华人民共和国缔结或者参加的国际条约规定的义务,支持参与生物科技交流合作与生物安全事件国际救援,积极参与生物安全国际规则的研究与制定,推动完善全球生物安全治理。第七条 各级人民政府及其有关部门应当加强生物安全法律法规和生物安全知识宣传普及工作,引导基层群众性自治组织、社会组织开展生物安全法律法规和生物安全知识宣传,促进全社会生物安全意识的提升。相关科研院校、医疗机构以及其他企业事业单位应当将生物安全法律法规和生物安全知识纳入教育培训内容,加强学生、从业人员生物安全意识和伦理意识的培养。新闻媒体应当开展生物安全法律法规和生物安全知识公益宣传,对生物安全违法行为进行舆论监督,增强公众维护生物安全的社会责任意识。第八条 任何单位和个人不得危害生物安全。任何单位和个人有权举报危害生物安全的行为;接到举报的部门应当及时依法处理。第九条 对在生物安全工作中做出突出贡献的单位和个人,县级以上人民政府及其有关部门按照国家规定予以表彰和奖励。第二章 生物安全风险防控体制第十条 中央国家安全领导机构负责国家生物安全工作的决策和议事协调,研究制定、指导实施国家生物安全战略和有关重大方针政策,统筹协调国家生物安全的重大事项和重要工作,建立国家生物安全工作协调机制。省、自治区、直辖市建立生物安全工作协调机制,组织协调、督促推进本行政区域内生物安全相关工作。第十一条 国家生物安全工作协调机制由国务院卫生健康、农业农村、科学技术、外交等主管部门和有关军事机关组成,分析研判国家生物安全形势,组织协调、督促推进国家生物安全相关工作。国家生物安全工作协调机制设立办公室,负责协调机制的日常工作。国家生物安全工作协调机制成员单位和国务院其他有关部门根据职责分工,负责生物安全相关工作。第十二条 国家生物安全工作协调机制设立专家委员会,为国家生物安全战略研究、政策制定及实施提供决策咨询。国务院有关部门组织建立相关领域、行业的生物安全技术咨询专家委员会,为生物安全工作提供咨询、评估、论证等技术支撑。第十三条 地方各级人民政府对本行政区域内生物安全工作负责。县级以上地方人民政府有关部门根据职责分工,负责生物安全相关工作。基层群众性自治组织应当协助地方人民政府以及有关部门做好生物安全风险防控、应急处置和宣传教育等工作。有关单位和个人应当配合做好生物安全风险防控和应急处置等工作。第十四条 国家建立生物安全风险监测预警制度。国家生物安全工作协调机制组织建立国家生物安全风险监测预警体系,提高生物安全风险识别和分析能力。第十五条 国家建立生物安全风险调查评估制度。国家生物安全工作协调机制应当根据风险监测的数据、资料等信息,定期组织开展生物安全风险调查评估。有下列情形之一的,有关部门应当及时开展生物安全风险调查评估,依法采取必要的风险防控措施:(一)通过风险监测或者接到举报发现可能存在生物安全风险;(二)为确定监督管理的重点领域、重点项目,制定、调整生物安全相关名录或者清单;(三)发生重大新发突发传染病、动植物疫情等危害生物安全的事件;(四)需要调查评估的其他情形。第十六条 国家建立生物安全信息共享制度。国家生物安全工作协调机制组织建立统一的国家生物安全信息平台,有关部门应当将生物安全数据、资料等信息汇交国家生物安全信息平台,实现信息共享。第十七条 国家建立生物安全信息发布制度。国家生物安全总体情况、重大生物安全风险警示信息、重大生物安全事件及其调查处理信息等重大生物安全信息,由国家生物安全工作协调机制成员单位根据职责分工发布;其他生物安全信息由国务院有关部门和县级以上地方人民政府及其有关部门根据职责权限发布。任何单位和个人不得编造、散布虚假的生物安全信息。第十八条 国家建立生物安全名录和清单制度。国务院及其有关部门根据生物安全工作需要,对涉及生物安全的材料、设备、技术、活动、重要生物资源数据、传染病、动植物疫病、外来入侵物种等制定、公布名录或者清单,并动态调整。第十九条 国家建立生物安全标准制度。国务院标准化主管部门和国务院其他有关部门根据职责分工,制定和完善生物安全领域相关标准。国家生物安全工作协调机制组织有关部门加强不同领域生物安全标准的协调和衔接,建立和完善生物安全标准体系。第二十条 国家建立生物安全审查制度。对影响或者可能影响国家安全的生物领域重大事项和活动,由国务院有关部门进行生物安全审查,有效防范和化解生物安全风险。第二十一条 国家建立统一领导、协同联动、有序高效的生物安全应急制度。国务院有关部门应当组织制定相关领域、行业生物安全事件应急预案,根据应急预案和统一部署开展应急演练、应急处置、应急救援和事后恢复等工作。县级以上地方人民政府及其有关部门应当制定并组织、指导和督促相关企业事业单位制定生物安全事件应急预案,加强应急准备、人员培训和应急演练,开展生物安全事件应急处置、应急救援和事后恢复等工作。中国人民解放军、中国人民武装警察部队按照中央军事委员会的命令,依法参加生物安全事件应急处置和应急救援工作。第二十二条 国家建立生物安全事件调查溯源制度。发生重大新发突发传染病、动植物疫情和不明原因的生物安全事件,国家生物安全工作协调机制应当组织开展调查溯源,确定事件性质,全面评估事件影响,提出意见建议。第二十三条 国家建立首次进境或者暂停后恢复进境的动植物、动植物产品、高风险生物因子国家准入制度。进出境的人员、运输工具、集装箱、货物、物品、包装物和国际航行船舶压舱水排放等应当符合我国生物安全管理要求。海关对发现的进出境和过境生物安全风险,应当依法处置。经评估为生物安全高风险的人员、运输工具、货物、物品等,应当从指定的国境口岸进境,并采取严格的风险防控措施。第二十四条 国家建立境外重大生物安全事件应对制度。境外发生重大生物安全事件的,海关依法采取生物安全紧急防控措施,加强证件核验,提高查验比例,暂停相关人员、运输工具、货物、物品等进境。必要时经国务院同意,可以采取暂时关闭有关口岸、封锁有关国境等措施。第二十五条 县级以上人民政府有关部门应当依法开展生物安全监督检查工作,被检查单位和个人应当配合,如实说明情况,提供资料,不得拒绝、阻挠。涉及专业技术要求较高、执法业务难度较大的监督检查工作,应当有生物安全专业技术人员参加。第二十六条 县级以上人民政府有关部门实施生物安全监督检查,可以依法采取下列措施:(一)进入被检查单位、地点或者涉嫌实施生物安全违法行为的场所进行现场监测、勘查、检查或者核查;(二)向有关单位和个人了解情况;(三)查阅、复制有关文件、资料、档案、记录、凭证等;(四)查封涉嫌实施生物安全违法行为的场所、设施;(五)扣押涉嫌实施生物安全违法行为的工具、设备以及相关物品;(六)法律法规规定的其他措施。有关单位和个人的生物安全违法信息应当依法纳入全国信用信息共享平台。第三章 防控重大新发突发传染病、动植物疫情第二十七条 国务院卫生健康、农业农村、林业草原、海关、生态环境主管部门应当建立新发突发传染病、动植物疫情、进出境检疫、生物技术环境安全监测网络,组织监测站点布局、建设,完善监测信息报告系统,开展主动监测和病原检测,并纳入国家生物安全风险监测预警体系。第二十八条 疾病预防控制机构、动物疫病预防控制机构、植物病虫害预防控制机构(以下统称专业机构)应当对传染病、动植物疫病和列入监测范围的不明原因疾病开展主动监测,收集、分析、报告监测信息,预测新发突发传染病、动植物疫病的发生、流行趋势。国务院有关部门、县级以上地方人民政府及其有关部门应当根据预测和职责权限及时发布预警,并采取相应的防控措施。第二十九条 任何单位和个人发现传染病、动植物疫病的,应当及时向医疗机构、有关专业机构或者部门报告。医疗机构、专业机构及其工作人员发现传染病、动植物疫病或者不明原因的聚集性疾病的,应当及时报告,并采取保护性措施。依法应当报告的,任何单位和个人不得瞒报、谎报、缓报、漏报,不得授意他人瞒报、谎报、缓报,不得阻碍他人报告。第三十条 国家建立重大新发突发传染病、动植物疫情联防联控机制。发生重大新发突发传染病、动植物疫情,应当依照有关法律法规和应急预案的规定及时采取控制措施;国务院卫生健康、农业农村、林业草原主管部门应当立即组织疫情会商研判,将会商研判结论向中央国家安全领导机构和国务院报告,并通报国家生物安全工作协调机制其他成员单位和国务院其他有关部门。发生重大新发突发传染病、动植物疫情,地方各级人民政府统一履行本行政区域内疫情防控职责,加强组织领导,开展群防群控、医疗救治,动员和鼓励社会力量依法有序参与疫情防控工作。第三十一条 国家加强国境、口岸传染病和动植物疫情联合防控能力建设,建立传染病、动植物疫情防控国际合作网络,尽早发现、控制重大新发突发传染病、动植物疫情。第三十二条 国家保护野生动物,加强动物防疫,防止动物源性传染病传播。第三十三条 国家加强对抗生素药物等抗微生物药物使用和残留的管理,支持应对微生物耐药的基础研究和科技攻关。县级以上人民政府卫生健康主管部门应当加强对医疗机构合理用药的指导和监督,采取措施防止抗微生物药物的不合理使用。县级以上人民政府农业农村、林业草原主管部门应当加强对农业生产中合理用药的指导和监督,采取措施防止抗微生物药物的不合理使用,降低在农业生产环境中的残留。国务院卫生健康、农业农村、林业草原、生态环境等主管部门和药品监督管理部门应当根据职责分工,评估抗微生物药物残留对人体健康、环境的危害,建立抗微生物药物污染物指标评价体系。第四章 生物技术研究、开发与应用安全第三十四条 国家加强对生物技术研究、开发与应用活动的安全管理,禁止从事危及公众健康、损害生物资源、破坏生态系统和生物多样性等危害生物安全的生物技术研究、开发与应用活动。从事生物技术研究、开发与应用活动,应当符合伦理原则。第三十五条 从事生物技术研究、开发与应用活动的单位应当对本单位生物技术研究、开发与应用的安全负责,采取生物安全风险防控措施,制定生物安全培训、跟踪检查、定期报告等工作制度,强化过程管理。第三十六条 国家对生物技术研究、开发活动实行分类管理。根据对公众健康、工业农业、生态环境等造成危害的风险程度,将生物技术研究、开发活动分为高风险、中风险、低风险三类。生物技术研究、开发活动风险分类标准及名录由国务院科学技术、卫生健康、农业农村等主管部门根据职责分工,会同国务院其他有关部门制定、调整并公布。第三十七条 从事生物技术研究、开发活动,应当遵守国家生物技术研究开发安全管理规范。从事生物技术研究、开发活动,应当进行风险类别判断,密切关注风险变化,及时采取应对措施。第三十八条 从事高风险、中风险生物技术研究、开发活动,应当由在我国境内依法成立的法人组织进行,并依法取得批准或者进行备案。从事高风险、中风险生物技术研究、开发活动,应当进行风险评估,制定风险防控计划和生物安全事件应急预案,降低研究、开发活动实施的风险。第三十九条 国家对涉及生物安全的重要设备和特殊生物因子实行追溯管理。购买或者引进列入管控清单的重要设备和特殊生物因子,应当进行登记,确保可追溯,并报国务院有关部门备案。个人不得购买或者持有列入管控清单的重要设备和特殊生物因子。第四十条 从事生物医学新技术临床研究,应当通过伦理审查,并在具备相应条件的医疗机构内进行;进行人体临床研究操作的,应当由符合相应条件的卫生专业技术人员执行。第四十一条 国务院有关部门依法对生物技术应用活动进行跟踪评估,发现存在生物安全风险的,应当及时采取有效补救和管控措施。第五章 病原微生物实验室生物安全第四十二条 国家加强对病原微生物实验室生物安全的管理,制定统一的实验室生物安全标准。病原微生物实验室应当符合生物安全国家标准和要求。从事病原微生物实验活动,应当严格遵守有关国家标准和实验室技术规范、操作规程,采取安全防范措施。第四十三条 国家根据病原微生物的传染性、感染后对人和动物的个体或者群体的危害程度,对病原微生物实行分类管理。从事高致病性或者疑似高致病性病原微生物样本采集、保藏、运输活动,应当具备相应条件,符合生物安全管理规范。具体办法由国务院卫生健康、农业农村主管部门制定。第四十四条 设立病原微生物实验室,应当依法取得批准或者进行备案。个人不得设立病原微生物实验室或者从事病原微生物实验活动。第四十五条 国家根据对病原微生物的生物安全防护水平,对病原微生物实验室实行分等级管理。从事病原微生物实验活动应当在相应等级的实验室进行。低等级病原微生物实验室不得从事国家病原微生物目录规定应当在高等级病原微生物实验室进行的病原微生物实验活动。第四十六条 高等级病原微生物实验室从事高致病性或者疑似高致病性病原微生物实验活动,应当经省级以上人民政府卫生健康或者农业农村主管部门批准,并将实验活动情况向批准部门报告。对我国尚未发现或者已经宣布消灭的病原微生物,未经批准不得从事相关实验活动。第四十七条 病原微生物实验室应当采取措施,加强对实验动物的管理,防止实验动物逃逸,对使用后的实验动物按照国家规定进行无害化处理,实现实验动物可追溯。禁止将使用后的实验动物流入市场。病原微生物实验室应当加强对实验活动废弃物的管理,依法对废水、废气以及其他废弃物进行处置,采取措施防止污染。第四十八条 病原微生物实验室的设立单位负责实验室的生物安全管理,制定科学、严格的管理制度,定期对有关生物安全规定的落实情况进行检查,对实验室设施、设备、材料等进行检查、维护和更新,确保其符合国家标准。病原微生物实验室设立单位的法定代表人和实验室负责人对实验室的生物安全负责。第四十九条 病原微生物实验室的设立单位应当建立和完善安全保卫制度,采取安全保卫措施,保障实验室及其病原微生物的安全。国家加强对高等级病原微生物实验室的安全保卫。高等级病原微生物实验室应当接受公安机关等部门有关实验室安全保卫工作的监督指导,严防高致病性病原微生物泄漏、丢失和被盗、被抢。国家建立高等级病原微生物实验室人员进入审核制度。进入高等级病原微生物实验室的人员应当经实验室负责人批准。对可能影响实验室生物安全的,不予批准;对批准进入的,应当采取安全保障措施。第五十条 病原微生物实验室的设立单位应当制定生物安全事件应急预案,定期组织开展人员培训和应急演练。发生高致病性病原微生物泄漏、丢失和被盗、被抢或者其他生物安全风险的,应当按照应急预案的规定及时采取控制措施,并按照国家规定报告。第五十一条 病原微生物实验室所在地省级人民政府及其卫生健康主管部门应当加强实验室所在地感染性疾病医疗资源配置,提高感染性疾病医疗救治能力。第五十二条 企业对涉及病原微生物操作的生产车间的生物安全管理,依照有关病原微生物实验室的规定和其他生物安全管理规范进行。涉及生物毒素、植物有害生物及其他生物因子操作的生物安全实验室的建设和管理,参照有关病原微生物实验室的规定执行。第六章 人类遗传资源与生物资源安全第五十三条 国家加强对我国人类遗传资源和生物资源采集、保藏、利用、对外提供等活动的管理和监督,保障人类遗传资源和生物资源安全。国家对我国人类遗传资源和生物资源享有主权。第五十四条 国家开展人类遗传资源和生物资源调查。国务院科学技术主管部门组织开展我国人类遗传资源调查,制定重要遗传家系和特定地区人类遗传资源申报登记办法。国务院科学技术、自然资源、生态环境、卫生健康、农业农村、林业草原、中医药主管部门根据职责分工,组织开展生物资源调查,制定重要生物资源申报登记办法。第五十五条 采集、保藏、利用、对外提供我国人类遗传资源,应当符合伦理原则,不得危害公众健康、国家安全和社会公共利益。第五十六条 从事下列活动,应当经国务院科学技术主管部门批准:(一)采集我国重要遗传家系、特定地区人类遗传资源或者采集国务院科学技术主管部门规定的种类、数量的人类遗传资源;(二)保藏我国人类遗传资源;(三)利用我国人类遗传资源开展国际科学研究合作;(四)将我国人类遗传资源材料运送、邮寄、携带出境。前款规定不包括以临床诊疗、采供血服务、查处违法犯罪、兴奋剂检测和殡葬等为目的采集、保藏人类遗传资源及开展的相关活动。为了取得相关药品和医疗器械在我国上市许可,在临床试验机构利用我国人类遗传资源开展国际合作临床试验、不涉及人类遗传资源出境的,不需要批准;但是,在开展临床试验前应当将拟使用的人类遗传资源种类、数量及用途向国务院科学技术主管部门备案。境外组织、个人及其设立或者实际控制的机构不得在我国境内采集、保藏我国人类遗传资源,不得向境外提供我国人类遗传资源。第五十七条 将我国人类遗传资源信息向境外组织、个人及其设立或者实际控制的机构提供或者开放使用的,应当向国务院科学技术主管部门事先报告并提交信息备份。第五十八条 采集、保藏、利用、运输出境我国珍贵、濒危、特有物种及其可用于再生或者繁殖传代的个体、器官、组织、细胞、基因等遗传资源,应当遵守有关法律法规。境外组织、个人及其设立或者实际控制的机构获取和利用我国生物资源,应当依法取得批准。第五十九条 利用我国生物资源开展国际科学研究合作,应当依法取得批准。利用我国人类遗传资源和生物资源开展国际科学研究合作,应当保证中方单位及其研究人员全过程、实质性地参与研究,依法分享相关权益。第六十条 国家加强对外来物种入侵的防范和应对,保护生物多样性。国务院农业农村主管部门会同国务院其他有关部门制定外来入侵物种名录和管理办法。国务院有关部门根据职责分工,加强对外来入侵物种的调查、监测、预警、控制、评估、清除以及生态修复等工作。任何单位和个人未经批准,不得擅自引进、释放或者丢弃外来物种。第七章 防范生物恐怖与生物武器威胁第六十一条 国家采取一切必要措施防范生物恐怖与生物武器威胁。禁止开发、制造或者以其他方式获取、储存、持有和使用生物武器。禁止以任何方式唆使、资助、协助他人开发、制造或者以其他方式获取生物武器。第六十二条 国务院有关部门制定、修改、公布可被用于生物恐怖活动、制造生物武器的生物体、生物毒素、设备或者技术清单,加强监管,防止其被用于制造生物武器或者恐怖目的。第六十三条 国务院有关部门和有关军事机关根据职责分工,加强对可被用于生物恐怖活动、制造生物武器的生物体、生物毒素、设备或者技术进出境、进出口、获取、制造、转移和投放等活动的监测、调查,采取必要的防范和处置措施。第六十四条 国务院有关部门、省级人民政府及其有关部门负责组织遭受生物恐怖袭击、生物武器攻击后的人员救治与安置、环境消毒、生态修复、安全监测和社会秩序恢复等工作。国务院有关部门、省级人民政府及其有关部门应当有效引导社会舆论科学、准确报道生物恐怖袭击和生物武器攻击事件,及时发布疏散、转移和紧急避难等信息,对应急处置与恢复过程中遭受污染的区域和人员进行长期环境监测和健康监测。第六十五条 国家组织开展对我国境内战争遗留生物武器及其危害结果、潜在影响的调查。国家组织建设存放和处理战争遗留生物武器设施,保障对战争遗留生物武器的安全处置。第八章 生物安全能力建设第六十六条 国家制定生物安全事业发展规划,加强生物安全能力建设,提高应对生物安全事件的能力和水平。县级以上人民政府应当支持生物安全事业发展,按照事权划分,将支持下列生物安全事业发展的相关支出列入政府预算:(一)监测网络的构建和运行;(二)应急处置和防控物资的储备;(三)关键基础设施的建设和运行;(四)关键技术和产品的研究、开发;(五)人类遗传资源和生物资源的调查、保藏;(六)法律法规规定的其他重要生物安全事业。第六十七条 国家采取措施支持生物安全科技研究,加强生物安全风险防御与管控技术研究,整合优势力量和资源,建立多学科、多部门协同创新的联合攻关机制,推动生物安全核心关键技术和重大防御产品的成果产出与转化应用,提高生物安全的科技保障能力。第六十八条 国家统筹布局全国生物安全基础设施建设。国务院有关部门根据职责分工,加快建设生物信息、人类遗传资源保藏、菌(毒)种保藏、动植物遗传资源保藏、高等级病原微生物实验室等方面的生物安全国家战略资源平台,建立共享利用机制,为生物安全科技创新提供战略保障和支撑。第六十九条 国务院有关部门根据职责分工,加强生物基础科学研究人才和生物领域专业技术人才培养,推动生物基础科学学科建设和科学研究。国家生物安全基础设施重要岗位的从业人员应当具备符合要求的资格,相关信息应当向国务院有关部门备案,并接受岗位培训。第七十条 国家加强重大新发突发传染病、动植物疫情等生物安全风险防控的物资储备。国家加强生物安全应急药品、装备等物资的研究、开发和技术储备。国务院有关部门根据职责分工,落实生物安全应急药品、装备等物资研究、开发和技术储备的相关措施。国务院有关部门和县级以上地方人民政府及其有关部门应当保障生物安全事件应急处置所需的医疗救护设备、救治药品、医疗器械等物资的生产、供应和调配;交通运输主管部门应当及时组织协调运输经营单位优先运送。第七十一条 国家对从事高致病性病原微生物实验活动、生物安全事件现场处置等高风险生物安全工作的人员,提供有效的防护措施和医疗保障。第九章 法律责任第七十二条 违反本法规定,履行生物安全管理职责的工作人员在生物安全工作中滥用职权、玩忽职守、徇私舞弊或者有其他违法行为的,依法给予处分。第七十三条 违反本法规定,医疗机构、专业机构或者其工作人员瞒报、谎报、缓报、漏报,授意他人瞒报、谎报、缓报,或者阻碍他人报告传染病、动植物疫病或者不明原因的聚集性疾病的,由县级以上人民政府有关部门责令改正,给予警告;对法定代表人、主要负责人、直接负责的主管人员和其他直接责任人员,依法给予处分,并可以依法暂停一定期限的执业活动直至吊销相关执业证书。违反本法规定,编造、散布虚假的生物安全信息,构成违反治安管理行为的,由公安机关依法给予治安管理处罚。第七十四条 违反本法规定,从事国家禁止的生物技术研究、开发与应用活动的,由县级以上人民政府卫生健康、科学技术、农业农村主管部门根据职责分工,责令停止违法行为,没收违法所得、技术资料和用于违法行为的工具、设备、原材料等物品,处一百万元以上一千万元以下的罚款,违法所得在一百万元以上的,处违法所得十倍以上二十倍以下的罚款,并可以依法禁止一定期限内从事相应的生物技术研究、开发与应用活动,吊销相关许可证件;对法定代表人、主要负责人、直接负责的主管人员和其他直接责任人员,依法给予处分,处十万元以上二十万元以下的罚款,十年直至终身禁止从事相应的生物技术研究、开发与应用活动,依法吊销相关执业证书。第七十五条 违反本法规定,从事生物技术研究、开发活动未遵守国家生物技术研究开发安全管理规范的,由县级以上人民政府有关部门根据职责分工,责令改正,给予警告,可以并处二万元以上二十万元以下的罚款;拒不改正或者造成严重后果的,责令停止研究、开发活动,并处二十万元以上二百万元以下的罚款。第七十六条 违反本法规定,从事病原微生物实验活动未在相应等级的实验室进行,或者高等级病原微生物实验室未经批准从事高致病性、疑似高致病性病原微生物实验活动的,由县级以上地方人民政府卫生健康、农业农村主管部门根据职责分工,责令停止违法行为,监督其将用于实验活动的病原微生物销毁或者送交保藏机构,给予警告;造成传染病传播、流行或者其他严重后果的,对法定代表人、主要负责人、直接负责的主管人员和其他直接责任人员依法给予撤职、开除处分。第七十七条 违反本法规定,将使用后的实验动物流入市场的,由县级以上人民政府科学技术主管部门责令改正,没收违法所得,并处二十万元以上一百万元以下的罚款,违法所得在二十万元以上的,并处违法所得五倍以上十倍以下的罚款;情节严重的,由发证部门吊销相关许可证件。第七十八条 违反本法规定,有下列行为之一的,由县级以上人民政府有关部门根据职责分工,责令改正,没收违法所得,给予警告,可以并处十万元以上一百万元以下的罚款:(一)购买或者引进列入管控清单的重要设备、特殊生物因子未进行登记,或者未报国务院有关部门备案;(二)个人购买或者持有列入管控清单的重要设备或者特殊生物因子;(三)个人设立病原微生物实验室或者从事病原微生物实验活动;(四)未经实验室负责人批准进入高等级病原微生物实验室。第七十九条 违反本法规定,未经批准,采集、保藏我国人类遗传资源或者利用我国人类遗传资源开展国际科学研究合作的,由国务院科学技术主管部门责令停止违法行为,没收违法所得和违法采集、保藏的人类遗传资源,并处五十万元以上五百万元以下的罚款,违法所得在一百万元以上的,并处违法所得五倍以上十倍以下的罚款;情节严重的,对法定代表人、主要负责人、直接负责的主管人员和其他直接责任人员,依法给予处分,五年内禁止从事相应活动。第八十条 违反本法规定,境外组织、个人及其设立或者实际控制的机构在我国境内采集、保藏我国人类遗传资源,或者向境外提供我国人类遗传资源的,由国务院科学技术主管部门责令停止违法行为,没收违法所得和违法采集、保藏的人类遗传资源,并处一百万元以上一千万元以下的罚款;违法所得在一百万元以上的,并处违法所得十倍以上二十倍以下的罚款。第八十一条 违反本法规定,未经批准,擅自引进外来物种的,由县级以上人民政府有关部门根据职责分工,没收引进的外来物种,并处五万元以上二十五万元以下的罚款。违反本法规定,未经批准,擅自释放或者丢弃外来物种的,由县级以上人民政府有关部门根据职责分工,责令限期捕回、找回释放或者丢弃的外来物种,处一万元以上五万元以下的罚款。第八十二条 违反本法规定,构成犯罪的,依法追究刑事责任;造成人身、财产或者其他损害的,依法承担民事责任。第八十三条 违反本法规定的生物安全违法行为,本法未规定法律责任,其他有关法律、行政法规有规定的,依照其规定。第八十四条 境外组织或者个人通过运输、邮寄、携带危险生物因子入境或者以其他方式危害我国生物安全的,依法追究法律责任,并可以采取其他必要措施。第十章 附则第八十五条 本法下列术语的含义:(一)生物因子,是指动物、植物、微生物、生物毒素及其他生物活性物质。(二)重大新发突发传染病,是指我国境内首次出现或者已经宣布消灭再次发生,或者突然发生,造成或者可能造成公众健康和生命安全严重损害,引起社会恐慌,影响社会稳定的传染病。(三)重大新发突发动物疫情,是指我国境内首次发生或者已经宣布消灭的动物疫病再次发生,或者发病率、死亡率较高的潜伏动物疫病突然发生并迅速传播,给养殖业生产安全造成严重威胁、危害,以及可能对公众健康和生命安全造成危害的情形。(四)重大新发突发植物疫情,是指我国境内首次发生或者已经宣布消灭的严重危害植物的真菌、细菌、病毒、昆虫、线虫、杂草、害鼠、软体动物等再次引发病虫害,或者本地有害生物突然大范围发生并迅速传播,对农作物、林木等植物造成严重危害的情形。(五)生物技术研究、开发与应用,是指通过科学和工程原理认识、改造、合成、利用生物而从事的科学研究、技术开发与应用等活动。(六)病原微生物,是指可以侵犯人、动物引起感染甚至传染病的微生物,包括病毒、细菌、真菌、立克次体、寄生虫等。(七)植物有害生物,是指能够对农作物、林木等植物造成危害的真菌、细菌、病毒、昆虫、线虫、杂草、害鼠、软体动物等生物。(八)人类遗传资源,包括人类遗传资源材料和人类遗传资源信息。人类遗传资源材料是指含有人体基因组、基因等遗传物质的器官、组织、细胞等遗传材料。人类遗传资源信息是指利用人类遗传资源材料产生的数据等信息资料。(九)微生物耐药,是指微生物对抗微生物药物产生抗性,导致抗微生物药物不能有效控制微生物的感染。(十)生物武器,是指类型和数量不属于预防、保护或者其他和平用途所正当需要的、任何来源或者任何方法产生的微生物剂、其他生物剂以及生物毒素;也包括为将上述生物剂、生物毒素使用于敌对目的或者武装冲突而设计的武器、设备或者运载工具。(十一)生物恐怖,是指故意使用致病性微生物、生物毒素等实施袭击,损害人类或者动植物健康,引起社会恐慌,企图达到特定政治目的的行为。第八十六条 生物安全信息属于国家秘密的,应当依照《中华人民共和国保守国家秘密法》和国家其他有关保密规定实施保密管理。第八十七条 中国人民解放军、中国人民武装警察部队的生物安全活动,由中央军事委员会依照本法规定的原则另行规定。第八十八条 本法自2021年4月15日起施行。中国微生物菌种查询网

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