酸土脂环酸芽孢杆菌的培养条件与实验内容！

              酸土脂环酸芽孢杆菌的培养条件与实验内容！

酸土脂环酸芽胞杆菌是Alicyclobacillus属的微生物，原产地为德国。G+，细胞呈直杆状，0.53um×2.33~3.67um，芽胞卵圆形，孢囊膨大。主要用途为分类；研究；分析检测，具体用途为分类学研究，质量控制。

一、菌种简介

拉丁属名：Alicyclobacillus acidoterrestris

中文名称：酸土脂环酸芽孢杆菌

属名：Alicyclobacillus

种名加词：acidoterrestris

其它中心编号：=ACCC 10223=DSM 3922 =ATCC 49025

来源历史：←中国农业微生物菌种保藏中心←DSMZ

收藏时间：2009.6.2

原始编号：GD3B

资源归类编码：15131312101

模式菌株：模式菌株

主要用途：分类；研究；分析检测

具体用途：分类学研究，质量控制。

特征特性：G+，细胞呈直杆状，0.53umX2.33~3.67um，芽孢卵圆形，孢囊膨大。 

生物危害程度：四类

致病对象：无

分离基物：花园土壤

培养基：A溶液：CaCl2 ?2H2O 0.25g，MgSO4?7H2O 0.5g，(NH4)2SO4 0.2g，KH2PO4 3.0g，酵母膏 2.0g，葡萄糖 5.0g，蒸馏水 0.5（固体培养基）/1.0(液体培养基)L，pH4.0。B溶液：ZnSO4.7H2O 0.1g，MnCl2.4H2O 0.03g，H3BO3 0.3g，CoCl2.6H2O 0.2g，CuCl2.2H2O 0.01g，NiCl2.6H2O 0.02g，Na2MoO4.2H2O 0.03g，蒸馏水 1.0L。C溶液：琼脂15.0g，蒸馏水 0.5L。[注] 以上溶液单独灭菌，A与1ml B溶液混合制成液体培养基，A，1ml B溶液，C混合制成固体培养基。

培养温度：45-50℃

资源保藏类型：培养物

保存方法：-80℃冰箱冻结法；真空冷冻干燥法

实物状态：有实物

共享方式：公益性共享；资源纯交易性共享；合作研究共享；资源交换性共享

用途：分类；研究；分析检测；分类学研究，质量控制。

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的，不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用。

二、储存条件

冻干菌种和试管斜面请置于 2-8℃冷藏。西林瓶菌种请置于-20℃冷冻。

三、培养条件

1、培养基编号：CM0437

2、培养基成分：A 溶液：CaCl2 2H2O 0.25g，MgSO4 7H2O 0.5g，(NH4)2SO4 0.2g，KH2PO43.0g，酵母膏 2.0g，葡萄糖 5.0g，蒸馏水 0.5（固体培养基）/1.0(液体培养基)L，pH4.0。B溶液：ZnSO4 7H2O 0.1g，MnCl2 4H2O 0.03g，H3BO3 0.3g，CoCl2 6H2O 0.2g，CuCl2 2H2O0.01g，NiCl2 6H2O 0.02g，Na2MoO4 2H2O 0.03g，蒸馏水1.0L。C 溶液：琼脂 15.0g，蒸馏水 0.5L。[注] 以上溶液单独灭菌，A 与 1ml B 溶液混合制成液体培养基，A，1ml B 溶液，C 混合制成固体培养基。

3、需氧类型：好氧

4、培养温度：45-50℃

四、实验内容

1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查 

2、干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 

3、高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 

4、过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

五、保存方法

1、传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙。

2、液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

3、悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

4、载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

六、注意事项

1、菌种常规培养时间：细菌 1-2 天，酵母 3 天，霉菌 5-7 天，大型真菌 7-10 天。

2、试管斜面菌种请尽快转接，不建议长期存放。

3、初次使用时请按照本说明书推荐条件进行复活培养，如使用其它类型培养基或培养条件造成菌种不活等损失，我单位不负责任。

4、使用者应保证菌种的安全存储和操作，带菌废弃物应高压灭菌处理后丢弃。

5、菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系菌种。