小鼠肾上腺皮质瘤细胞的应用！

                      小鼠肾上腺皮质瘤细胞的应用！

一、背景

小鼠肾上腺皮质瘤细胞是一株能分泌鼠类甾类激素、分泌型肾上腺皮质激素的细胞系。

肾上腺皮质是构成肾上腺外层的内分泌腺组织。它能分泌由数种类固醇混合而成的肾上腺皮质激素，皮质内还含有为数更多的类固醇。肾上腺皮质由3层构成，最外层为球状带（zona glomerulosa），接着为占大部分的束状带（zona fasciculata），内层为网状带（zona seticularis）。其功能异常可以引起肾上腺皮质功能亢进、肾上腺皮质功能减退、肾上腺皮质增生等。

肾上腺皮质的组织结构可以分为三层，自外向内分为球状带、束状带和网状带。球状带腺细胞排列成短环状或球状。这一层较薄，主要分泌盐皮质激素，人主要为醛固酮。束状带位于皮质中间，腺细胞排列成垂直于腺体表面呈束状。这层较厚，构成皮质的大部分。网状带位于皮质最内层，腺细胞排列不规则。

肾上腺皮质癌（adrenocortical carcinoma）甚少见，一般为功能性，发现时一般比腺瘤大，重量常超过100g，呈浸润性生长，正常肾上腺组织破坏或被淹没，向外侵犯周围脂肪组织甚至该侧肾。小的腺癌可有包膜。切面棕黄色，常见出血、坏死及囊性变。镜下分化差者异型性高，瘤细胞大小不等，并可见怪形核及多核，核分裂像多见。

二、应用

用于类固醇生成因子-1及DAX-1与肾上腺皮质肿瘤研究：

检测SF-1、DAX-1mRNA在肾上腺皮、髓质肿瘤以及正常肾上腺皮质中的表达,初步探讨SF-1、DAX-1在肾上腺肿瘤尤其是醛固酮分泌瘤中的作用。

方法：1、用TRIZOL分别提取肾上腺醛固酮分泌瘤（APA,n=17）,包括血管紧张素Ⅱ（AⅡ）无反应的醛固酮分泌瘤（AⅡ-U-APA,n=12）和血管紧张素Ⅱ有反应的醛固酮分泌瘤,（AⅡ-R-APA,n=5）、肾上腺醛固酮皮质癌（n=2）、肾上腺皮质醇分泌瘤（n=10）、肾上腺无功能瘤（n=10）、肾上腺嗜铬细胞瘤（PHEO,n=6）和正常肾上腺皮质（n=8）组织的总RNA；

2、实时荧光定量PCR方法检测上述不同组织中SF-1、DAX-1、ACTH-R基因和内参照β-actin mRNA的表达；

3、比较SF-1、DAX-1、ACTH-R mRNA在上述不同组织中的表达差异,并与肾上腺皮质肿瘤患者的临床资料行相关性分析。

结果：1、SF-1 mRNA在肾上腺皮质肿瘤中的表达1)在APA中表达和正常肾上腺皮质相比无明显统计学差异,SF-1/β-actin mRNA比值分别为23.89±3.17（AⅡ-U-APA）、21.59±3.00（AⅡ-R-APA）和24.58±2.45（正常肾上腺皮质）（p＞0.05）；

2、在皮质醇分泌瘤中表达（14.17±2.80）明显低于正常肾上腺皮质及APA,差异有明显统计学意义（p均＜0.01）；

3、在肾上腺无功能瘤中表达（36.38±3.50）,明显高于正常肾上腺皮质、APA和皮质醇分泌瘤（p均＜0.01）;4)2例肾上腺分泌醛固酮的肾上腺皮质癌中表达（分别为38.75和44.16）有明显高于其他各组的趋势。

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