SW 1353人软骨肉瘤细胞的应用！

                   SW 1353人软骨肉瘤细胞的应用！

一、背景

SW 1353人软骨肉瘤细胞最初从一位72岁女性白人的右肱骨原发性Ⅱ级软骨肉瘤中分离得到。最初的培养基是含有可的松和胰岛素的L-15培养基添加10%FBS和1%抗生素。1982年1月，ATCC收到１支传代至12代的冻存管SW 1353细胞。

软骨肉瘤是常见的恶性骨肿瘤之一，发生于髓腔者为中心型，发生于骨膜者为骨膜型，另有少数可发生于软组织。肿瘤好发于四肢长骨与骨盆，也可见于椎骨、骶骨、锁骨、肩胛骨和足骨。SW1353软骨细胞系是一种人软骨肉瘤细胞株，常被用于软骨细胞功能及相关疾病的研究。

二、细胞处理方法

1、细胞在培养瓶中培养至状态良好后灌满培养基运输，获得细胞后用酒精棉球擦拭瓶口消毒，然后在超净台中操作。

2、如细胞生长至70%-80%，将瓶中的培养基移入无菌瓶中留作培养使用，保留5-8mL培养基在37℃、5%的CO2的温箱中继续培养。细胞培养至90%-100%后，按要求消化传代。

3、弃去培养基，用无菌PBS或者其他缓冲液清洗细胞2次，加入适量胰蛋白酶消化（EDTA胰酶），待细胞完全脱壁后加培养基吹打混匀，分瓶培养。

三、应用

用于人软骨肉瘤细胞SW1353及WISP3突变型C20/A4软骨细胞的Ⅱ型胶原动力学及定位研究：

与许多组织细胞不同，软骨细胞在体外长期贴壁培养（单层培养）和传代过程中，细胞形态与功能可发生显著变化，细胞逐渐丧失合成Ⅱ型胶原和硫酸软骨素蛋白多糖的能力，转而分泌Ⅰ型和Ⅲ型胶原，该变化被称为“软骨细胞的去分化（Dedifferentiation）现象”。从软骨细胞脱离组织，在贴壁条件下培养开始，软骨细胞即逐渐地发生去分化。近10余年来，因海藻酸钠三维培养体系能很好模拟体内环境，有效维持软骨细胞的分化表型，广泛应用于软骨细胞组织工程和软骨细胞生物学研究。

比较了单层培养及海藻酸钠三维培养的人软骨肉瘤细胞SW1353的形态学和表型差异，其目的是观察SW1353细胞在两种培养体系中的表型差异。单层培养的SW1353细胞8周后有去分化改变，而海藻酸钠三维培养体系8周后仍能很好维持软骨细胞的固有表型。与单层培养相比，三维培养中的SW1353细胞增殖缓慢，Ⅱ型胶原合成和分泌低下，因而细胞的这种“休眠”状态可能是三维培养状态下软骨细胞维持其固有表型。