一、如何解冻血清才不会使产品质量受损？  将血清从冷冻箱取出后，先置于2-8℃冰箱使之溶解，然后在室温下使之全溶。但必须注意的是，溶解过程中必须规则地摇晃均匀。  二、保存血清的方法？  血清应保存在-5℃至-2O℃若存放于4℃时，请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶，建议将无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。  标准新生牛血清（无菌过滤）注意事项： （1）有少量蛋白质结块析出不影响使用。未融化或融化未经摇匀的血清禁止直接放入高温水浴内加温。减少血清重复冻融。若您一次无法用完一瓶，建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内，再放回冷冻。 （2）长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。由于血清结冰时体积会增加约10%,因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。 （3）一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现血清有悬浮物，则可将血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤血清。  标准新生牛血清（无菌过滤）使用注意事项（仅供参考）：  1.血清解冻采用逐步解冻法（-20℃→2-8℃→25℃或37℃），解冻过程中必须随时轻摇，使血清受热温度均匀。  2.血清凝絮物，血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出，这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物，实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。  3.热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活，请严格按照56℃30分钟（水浴）处理已解冻血清。  4.常温状态下短期融化并不会影响血清质量。  5.产品有效期，检定合格之日起有效期5年。  标准新生牛血清（无菌过滤）主要作用：  ●提供基本营养物质：氨基酸、维生素、无机物、脂类物质、核酸衍生物等，是细胞生长必须的物质。  ●提供激素和各种生长因子：胰岛素、肾上腺皮质激素（地塞米松）、类固醇激素（雌二醇、睾酮、孕酮）等。生长因子如成纤维细胞生长因子、表皮生长因子、血小板生长因子等。  ●提供结合蛋白：结合蛋白作用是携带重要地低分子量物质，如白蛋白携带维生素、脂肪、以及激素等，转铁蛋白携带铁。结合蛋白在细胞代谢过程中起重要作用。  ●提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。  ●对培养中的细胞起到某些保护作用：有一些细胞，如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。这种作用是偶然发现的，现在则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被广泛用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保护细胞免受机械损伤，特别是在悬浮培养搅拌时，粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子，他们在代谢解毒中起重要作用，如SeO3,硒等。

人elisa试剂盒在中国已经具备了一定的市场规模和基础，正从产业导入期步入成长期，在行业内的发展前景良好。中国生物科研市场规模增速显著高于全球的平均水平，目前，进口试剂以及仪器的垄断优势正在被民族产品打破和制约，国内试剂产业发展总体表现出的特点是市场大，市场潜力更大。　　人ELISA试剂盒初次始用之时是先将试剂集中到管底，实验开始后应留一孔，测验时先将此孔OD值调到零，此孔留着*后加底物溶液及2N H2SO4。实验时酶标板加上盖或覆膜，可有效防止样品蒸发，提高结果的稳定性。　　首先关于人ELISA试剂盒检验时无颜色，可能原因：　　1、试剂孵育的时间没有按说明书操作。　　解决方法：确定生物素抗体，连接的HRP试剂或链霉亲和素-HRP使用的时间是否适当　　2、不同试剂盒或不同批号的试剂混用。　　解决方法：重新检查试剂的标签，确准所有组份都属于正使用的试剂盒中的。不能混用不同试剂盒或不同批号的试剂　　3、漏加酶或显色剂。　　解决方法：检查操作流程，注意不要漏加　　4、HRP酶污染了叠氮钠。　　解决方法：使用新配制的试剂，禁含叠氮钠　　5、标准品有问题(若在标本孔中有信号)　　解决方法：按说明书检查标准品的制备使用新标准品　　6、某一容器未洗净，残留灭火酶物质。　　解决方法：尽可能用试剂盒内容器，另觅一定要洁净、可靠　　7、使用含血清的缓冲液配制/复溶抗体。　　解决方法：重新确认所选用的试剂　　8、试剂配制/使用有误。　　解决方法：将实验重做;严格按说明书操作，每次配制和使用前看清标签。　　9、缓冲液污染。　　解决方法：配制新新鲜的缓冲液

1．空间采用紫外线、熏蒸和臭氧灭菌(1) 紫外线灭菌 在接种室、超净台上或接种箱里用紫外灯灭菌。紫外线灭菌是利用辐射因子灭菌，细菌吸收紫外线后，蛋白质和核酸发生结构变化，引起细菌的染色体变异，造成死亡。紫外线的波长为200-300nm，其中以260nm．的杀菌能力最强，但是由于紫外线的穿透物质的能力很弱，所以只适于空气和物体表面的灭菌；而且要求距照射物以不超过1.2m为宜。(2) 熏蒸灭菌 用加热焚烧、氧化等方法，使化学药剂变为气体状态扩散到空气中，以杀死空气和物体表面的微生物。这种方法简便，只需要把消毒的空间关闭紧密即可。化学消毒剂的种类很多，它们使微生物的蛋白质变性，或竞争其酶系统，或降低其表面张力，增加菌体细胞浆膜的通透性，使细胞破裂或溶解。一般说来，温度越高，作用时间越长，杀菌效果越好。另外，由于消毒剂必须溶解于水才能发挥作用，所以要制成水溶状态，如升  与高锰酸钾。还有消毒剂的浓度一般是浓度越大，杀菌能力越强，但石炭酸和酒精例外。    常用熏蒸剂是甲醛，熏蒸时，房间关闭紧密，按5～8ml/m3用量，将甲醛置于广口容器中，加5g/m3高锰酸钾氧化挥发。熏蒸时，房间可预先喷湿以加强效果。冰醋酸也可进行加热熏蒸，但效果不如甲醛。(3)臭氧灭菌 臭氧极不稳定，分解时释放出自由基态氧，自由基态氧具有强氧化能力，可以穿透细胞壁，氧化分解细菌内部氧化葡萄糖所必须的葡萄糖氧化酶；也可以直接与细菌、病毒发生作用，破坏其细胞器和核糖核酸，分解DNA、RNA、蛋白质、脂质类和多糖等大分子聚合物，使细菌的物质代谢生长和繁殖过程遭到破坏；还可以渗透细胞膜组织，侵入细胞膜内作用于外膜脂蛋白和内部的脂多糖，促进细胞的溶解死亡，并且将死亡菌体内的遗传基因、寄生菌种、寄生病毒粒子、噬菌体、支原体及热原（细菌病毒代谢产物、内毒素）等溶解变性灭亡。2. 一些物体表面用药剂喷雾灭菌物体表面可用一些药剂涂擦、喷雾灭菌。如桌面、墙面、双手、植物材料表面等，可用70％的酒精反复涂擦灭菌，1％～2％的来苏儿溶液以及0.25％～1％的新洁尔灭也可以。

       每个实验都有自己的规则以及注意点，elisa实验也不例外，对于elisa实验如此条件严格的，那么如何才能保障elisa实验的正常进行呢，下面操作人员的技术要求，的确是如此，下面就是elisa实验时索要注意的问题。ELISA实验操作18条要点：　　1、要保证移液枪的准确性，误差不能超过2%。可用水和电子天平进行确定。但最hao有专业人员进行矫正。　　2、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后，要更换枪头。即使是吸取标准品时。　　3、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出，使各种试剂都恢复到室温，以使结果更稳定。　　4、实验时，要使底物避光保存。　　5、用枪吸取液体时速度不能太快，以免产生气泡而使吸取量不准确。　　6、吸取液体时，要用量程和需要量接近的枪去吸，减少误差。　　7、将液体加到酶标孔中时，避免枪头和孔内液体接触，可使枪头上的液滴和孔壁接触，液滴会自然流下去。　　8、液体全部加完后，可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒，混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。　　9、温浴时，要用不干胶或胶带纸封好酶标板，防止水分的蒸发。　　10、洗板时，每次洗液加入后，应静置1分钟，使清洗更加彻底。没有洗板机时，倒去液体后，要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。　　11、洗液不够时，可用蒸馏水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸缓冲液，加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。　　12、底物是光敏感的，要在临用前现配。　　13、检测前，要打开酶标仪，使之稳定10分钟以上。　　14、底物有一定的毒性，终止液对皮肤有腐蚀性，应尽量避免接触。　　15、待检样品要澄清，否则会影响结果。　　16、温浴时间应遵守试剂盒规定。　　17、应尽量做双孔实验，这样才能保证数据的准确性。　　18、对结果有疑问的样品要用其它方法进行确证。

据媒体报道，9月3日是开学日，深圳南山区南油小学有部分家长反映，孩子报到时到教室后出现身体不适甚至呕吐现象。有家长自行测试教室甲醛浓度结果发现超标，便不敢让孩子上学。有40余人的班级，开学当天仅有10余人到校。针对此现象，南山区教育局回应，学校开学前已请权威专业机构检测过两次，检测结果均为合格，学校环境指标不存在问题，学校具备开学条件。校舍安全关系师生生命健康，历来为社会和相关部门高度关注。早在2013年，教育部等十二部门联合下发《关于建立中小学校舍安全保障长效机制的意见》，从校舍规划布局、安全排查、施工建设、使用维护、信息公告、责任追究等各环节提出严格要求，以此加强对中小学校舍的管理。但是，近年来，随着人们环保意识的日益加强，校舍甲醛超标成为一个困扰校舍安全的新问题。深圳南油小学发生的事情并非个例。据媒体报道，陕西西安交大阳光海蓝城小学也是刚刚投入使用，就有多名孩子出现不良反应，9月3日至少有33名学生请假没去上课。也要看到，在公众越来越关注室内空气质量的语境下，中小学加强对校舍空气质量的重视，防止装修污染伤害师生身体健康，越来越成为家长和社会的共识，但是目前，涉事学校对此类事件的回应和作为显然尚未满足家长的心理预期。民众对校舍环保安全的焦虑多来自两个方面，即建筑材料的选用是否符合国家环保标准以及验收使用的环保测评是否具备权威性。这不仅让当事学校的家长心存疑虑，也让很多民众心头多了一丝疑惑。其实，甲醛超标疑云一再发生，与时下家长对外部环境高度敏感有关系，这不难理解，随着一些恶性环境事件的发生，不少家长陷入各种焦虑，甚至有些风声鹤唳，学校方面出具的检测报告甚至也无法让家长释怀，无法安心送孩子上学。家长的甲醛超标焦虑，背后反映出对学校的不信任，双方并没有建立一个良性的沟通机制。显然，学校方面要获得家长的信任，道阻且长。对此，有关方面理应有更积极的作为，以消除疑惑，给家长一个安心的答复。比如，学校和教育部门在校舍建设过程中，不妨建立健全信息公示制度，对于采用的建筑材料是否符合国家环保标准让家长一目了然。而在校舍投入使用前，做好时间规划，留出充足的时间让甲醛等污染气体得以挥发，并且选用权威、能得到家长认可的机构，对空气质量进行精准的公开检测。“把学校建成最安全、家长最放心的地方”是中小学校舍安全工程的根本要义。有关部门不妨进一步明晰校舍建设、投入使用的环保标准，从根本上避免校舍建设出现装修污染，解除家长的焦虑，也让师生身体健康安全真正得到保障。而学校在建设绿色环保校舍的同时，与家长群体也应建立绿色、和谐的沟通机制。恢复正常的教学秩序，有赖于校舍建设安全保障，也有赖于和家长的沟通与交流。

匹多莫德(PIDOTIMOD)，是免疫调节剂，适用于机体免疫功能低下的患者，并可用于预防急性感染，缩短病程，减少疾病的严重程度，可作为急性感染期的辅助用药。该品主要成分及其化学名称为：匹多莫德(PIDOTIMOD)400mg(3—L—焦谷氨酸四氢噻唑啉羧酸)。2018年3月匹多莫德制剂说明书修订：3岁以下儿童禁用。3月9日，国家食药监总局发布《关于修订匹多莫德制剂说明书的公告（2018年第30号）》。在说明书中，增加“3岁以下儿童禁用”的禁忌。▍只作为辅助治疗，6000万儿童禁用总局表示：为进一步保障公众用药安全，决定对匹多莫德制剂（包括匹多莫德片、匹多莫德散、匹多莫德分散片、匹多莫德口服溶液、匹多莫德口服液、匹多莫德胶囊、匹多莫德颗粒）说明书进行修订。在公布的“匹多莫德制剂说明书模板”中，总局将其适应症定位：用于慢性或反复发作的呼吸道感染和尿路感染的辅助治疗。其中，“辅助治疗”的字眼颇为醒目。并在“禁忌”中增加：3岁以下儿童禁用。同时，用法用量规定：3岁及以上儿童及青少年：每次0.4g，每日两次，不超过60天。（详见文末附件）结合全国第六次人口普查数据分析，0-3岁儿童数量为6000万左右。▍一年狂卖40亿，曾被强烈质疑2018年1月，北京和睦家医院冀连梅药师，撰文《一年狂卖40多亿的匹多莫德，请放过中国儿童》。她在文中估算，匹多莫德2016年的销量达到40亿元，同时质疑临床疗效和安全性均不明确，并指出其存在滥用现象。由于涉及儿童用药安全，这篇文章引起巨大关注，媒体报道不断。公开资料显示，匹多莫德的原研药“普利莫”在原产国（意大利）仅适用于3岁以上儿童及成人，这种药物被用作免疫刺激剂在呼吸道感染和泌尿道免疫力降低的人群中。▍消息重要，告诉你身边的家长但在国内，其说明书适用人群扩大至所有阶段的儿童。据新华社报道，意大利儿科传染病专业权威专家苏珊娜·埃斯波西托在接受采访时表示，“这种药物在意大利及欧洲都是3岁以上儿童使用，我们需要更多的研究来证明在6个月到3岁的儿童中是否可以使用。”为了千万儿童健康，此次国家食药总局出手了，小编为此举叫好。这个消息很重要，请告诉你身边的家长。

一、实验目的与原理质粒多为一些双链、环状的DNA分子，是独立于细菌染色体之外进行复制和遗传的辅助性遗传单位。质粒是进行分子生物学实验操作，进行遗传工程改良物种等工作时最主要的DNA载体。提取质粒的基本步骤分为三步：①细菌的培养和质粒的扩增②细菌菌体的裂解③质粒DNA的纯化本实验采取的菌体裂解方法为碱解法，质粒纯化方法为梯度离心法。二、材料与试剂1、材料：大肠杆菌2、仪器：超净工作台，培养箱，摇床，恒温水浴锅，台式离心机，取液器一套，低温冰箱，冷冻真空干燥机，电泳仪，水平电泳槽，紫外观测仪3、试剂：Solution I 25 mM Tris-Hcl(pH7.4)      10 mM EDTA(pH8.0)      50 mM葡萄糖      高压灭菌，4℃保存      Solution II 0.2 M NaOH, 1%SDS 现配现用      Solution III 5 N KAc pH4.8      高压灭菌，4℃保存      3 M NaAc PH5.2, 高压灭菌，4℃保存。异丙醇，溶菌酶（8 mg/ml），酚/氯仿，无水乙醇，70％乙醇，LB培养基，电泳试剂三、操作步骤1、细菌繁殖LB培养基，2 ml/20ml，37℃，200rpm，摇一摇，过夜2、离心10 min，5000 rpm, 4℃；弃上淸液3、沉淀（菌体细胞）预冷的TES缓冲液洗涤，离心10 min，5000 rpm, 4℃加入预冷的1 ml Solution I，冰浴，10 min4、重新悬浮，加入150 ul溶菌酶母液，室温放置5 min5、加入1.2 ml Solution II, 冰浴，5 min6、加入0.9 ml预冷乙酸钾，混匀，离心10 min，12000 rpm, 4℃7、加入1.5 ml异丙醇，-20℃冰箱内放置15 min8、离心10 min，12000 rpm, 4℃9、取沉淀，悬于400 ul TE缓冲液中10、加入40 ul，3 M NaAc11、酚/氯仿，抽提，乙醇沉淀12、离心10 min，12000 rpm, 4℃13、取沉淀，冷冻干燥，再悬浮于50 ul TE缓冲液中。14、电泳检测提取DNA的质量四、结果与分析超螺旋结构DNA

      肝素钠为抗凝血药，是一种黏多糖类物质，系由猪、牛、羊的肠黏膜中提取的硫酸氨基葡萄糖的钠盐，在人体内系由肥大细胞分泌而自然存在于血液中；肝素钠具有防止血小板集聚和破坏，抑制纤维蛋白原转变成纤维蛋白单体，抑制凝血活素的形成和对抗已形成的凝血活素，阻止凝血酶原转变成凝血酶和对抗凝血酶等作用。什么是肝素钠       肝素钠是一种含有硫酸基的酸性粘多糖类天然抗凝血物质；肝素钠在组织内和其它粘多糖一起与蛋白质结合成复合物，因此肝素制备过程包括肝素蛋白质复合物的提取，本品不溶于乙醇、丙酮等有机溶剂；肝素钠是一种外观为白色或灰棕色无定性粉末的中药标准品，但也被经常于一种注射液，作为一种天然多糖的标准品，常用于生化研究,防止凝血酶原转变成凝血酶；本品在水中易溶，其CAS号为：9041-08-1肝素钠的作用1、用于延缓和阻止血液凝固。2、生化研究，防止凝血酶原转变成凝血酶。3、与碳酸氢钠、乳酸钠并用，可促进肝素钠抗凝血作用。4、低分子肝素钠具有明显而持久的抗血栓作用，其抗血栓形成活性强于抗凝血活性。5、生化研究，用于防止凝血酶原转变成凝血酶，有抗血栓塞作用。      肝素钠在体内体外均能延缓或阻止血液凝固；其作用机理极为复杂，对凝血过程中许多环节均有影响；其作用为：a、抑制凝血致活酶的形成及作用，从而防碍凝血酶原变为凝血酶；b、在较高浓度时尚有抑制凝血酶及其他凝血因子的作用，阻碍纤维蛋白原变成纤维蛋白；c、能阻止血小板的凝集和破坏等。

      中药标准品由于应用范围广泛，一直被科研实验所使用到，中药标准品源于中药，其保存方法一直以来都是很多科研人员比较关注的问题，稍有不慎，就有可能改变原有的特性，让其质量也受到影响，那么应该如何保存中药标准品呢，有哪些事项需要注意?       中药标准品主要是用于监测药材的质量，中药质量分析!在实验过程中，我们需要格外的小心，在哪里购买，价格多少，怎么查询，怎么保存已经成为了科研人员比较头痛的事，关于中药标准品查询及价格详情，可以参考：上海哪家公司卖中药标准品，价格是多少钱，中药标准品查询方法及中药标准品目录介绍，本文将重点为您讲述： 中药标准品的保存方法及注意事项 中药标准品保存方法1、中药标准品属性小编之前曾讲过，中药标准品的数量非常多，在保存上，我们可以先从它的属性开始，比如苷类，酸类，酶类，多肽等这些不同有属性类别开始，进行一一保存，同时我们还可以按其用途，参数量等归类放在一起!2、保存条件对于这种高质量的中药标准品标准品来说，保存温度及条件都是十分重要；一般来说，应尽量设置空调设施，保证室内阴凉、干燥、避光、通风，温度在25±5℃，相对湿度在50～75%为宜；特殊品种要求严格按照规定的贮存条件妥善保存。3、指定专人专管因为中药标准品的类别特别多，所以我们在保存时，需要对这些中药标准品进行标样记录，还需给不同类别的中药标准品进行指定区域放置；并且做到每天进行下下午各1次的检查，如果发现有不合要求的，应该及时调整，遇到多雨季节，更应该增加检查的次数。4、保存温度a、常温保存：通常用于化学性质比较稳定的标准品，建议保存于干燥阴凉的地方。b、4度冷藏：用于常温下不是很稳定的物质，保存于冰箱冷藏室。c、20度冷冻：用于化学性质不稳定，常温下容易分解的物质。d、80度保存：一些具有生物活性的物质，需要保存于特定的-80度的冰箱。5、成品中药标准品对于已经配制成溶液的中药标准品，放在阴凉干燥的地方室温保存，因为低温的时候物质确实不容易分解，但低温使得化合物的溶解度降低，因而导致常温下就难溶解的化合物在低温下长时间放置时析出晶体，而且一旦析出晶体很难再溶解。6、正在使用中的中药标准品一般来说，我们建议已经使用中的中药标准品要一次性使用完，以免改变其性能，特别是对于那些不懂得如何保存的人员来说。7、剩余的中药标准品虽然说建议一次性使用完，但不代表说一定就能用完，那对于剩余的中药标准品需要怎么保存呢？建议是取1毫升配成100毫升储备液后，将剩下的装入1毫升自动进样瓶中，旋紧瓶盖，贴上标签；将用后的储备液装入事先洗净烘干的100毫升医用试剂瓶中，盖上20毫升顶空瓶垫(大小刚好)，用铝盖封好(专用压盖器)，贴好标签，将其一并放入标液展示柜冷藏。中药标准品保存注意事项1、上面我们提到过在保存中药标准品时需要专人专管，有些中药标准品会散发出不同程度的毒性，所以这些管理人员在在工作时应该配带安全工作服及手套，有时甚至于需带上防毒口罩(面具)。2、大部分苷类标准物质在药典规定的条件下较易溶解；特殊苷类的对照品，如黄芩苷、橙皮苷等按药典要求 加入有机溶剂后较难溶解完全，故配制该类标准溶液时应在微温水浴上加热2-3秒，轻轻晃动，反复2、3 次，当溶液变为透明澄清后，放至室温，再定容。3、从冰箱中取出标准溶液，使用前，需超声约半分钟或放到室温，摇匀后在使用。4、保存温度要遵循常温、阴凉处、凉暗处、冷处四个标准，在保存时，要注意对照相应标准品和对照品的说明书选取合适的温度条件，避免因保存温度不当而使得标准品失效，进而对药品检验造成影响。5、特别是对于刚刚接触中药标准品的新手来说，在保存时除了要遵循相关的说明书外，还应该多请教专业人员，不可盲目进行。

      普通维生素D在体内需要经过肝25-羟化酶和肾脏1α-羟化酶两步羟化，才能转化为具有高活性的维生素D。因此，普通维生素D其实是原料，只是作为一种营养素，用于维生素D缺乏及防治骨质疏松症的基本健康补充剂，而不是骨质疏松症的治疗药物。        骨质疏松症患者多为老年患者，随着年龄的增长，肾脏的1α-羟化能力下降，体内活性维生素D的产生减少，维生素D受体的敏感性也下降，患者虽常规补充足够的维生素D，但补充的维生素D不能发挥zui大的效应。        活性维生素D（骨化三醇）或其类似物（阿法骨化醇）无需经过肾脏转化，可以直接弥补体内活性维生素D的不足。因此，对于老年人，在补充普通维生素D以维持正常的维生素D营养状况的同时，可以给予适量的活性维生素D或其类似物。除此之外，在某些其他病理情况下，如肾脏损害、成纤维细胞生长因子23产生过多、甲状旁腺激素产生过少，糖皮质激素产生过多或使用糖皮质激素，体内活性维生素D的产生减少，有必要给予活性维生素D，这些疾病需要经过医生检查后才能确定是否存在。        需要注意的是，活性维生素D或其类似物并不是营养素，而是药物，不能代替阳光或普通维生素D的作用，只有坚持晒太阳或摄入普通维生素D才能维持体内正常的维生素D的营养水平（25OHD的水平），并且由于活性维生素D或其类似物还能促进细胞内的25OHD的降解。        因此，使用活性维生素D的人群也要也要像普通人群一样坚持晒太阳或补充普通维生素D，以维持正常的25OHD的水平，也就是说要维持正常的维生素D的营养状态，只有在维持正常营养状态的基础上使用药物，才能治好疾病。

      近日，日本漫画《樱桃小丸子》的作者樱桃子女士因乳腺癌不幸离世的消息让许多人心碎，这部充满童真的漫画作品，是许多人的美好回忆，曾给我们的童年带来数也数不清的乐趣，许多网友感慨再也等不到《樱桃小丸子》大结局的那一天了。虽然,基因测序技术成熟了,但樱桃子还是走了! 癌证也还在     乳腺癌真的有那么可怕吗？目前乳腺癌的研究到什么程度了？虽然小编很伤心，但作为一名尽职尽责的科研君，本职工作不能忘，今天小编就带大家了解一下乳腺癌研究的新进展。      乳腺癌的发生一般是由体细胞突变引起的，因此研究乳腺癌的体细胞突变对于明确癌症的成因、变异过程及治疗均有重要意义。而基因测序技术的成熟加速了癌症基因组学的研究，乳腺癌的体细胞基因突变图谱的构建也随之取得了突破性的进展。基因测序技术在癌症基因组学中的应用主要分为以下3个方面： 1.发现新的驱动基因：通过基因测序分析基因变异与乳腺癌风险的关联程度寻找癌症驱动基因，也可通过比对样本中的癌细胞基因组差异来寻找驱动基因。 2.识别特异性突变基因：乳腺癌的发生和发展是多基因、多阶段的过程，是体细胞突变的积累过程，不同的突变过程都会在基因组内留下痕迹，即突变签名。测序分析可全面揭示遗传与环境变化在癌症基因组内留下的签名，从而揭示癌症突发及进化机制。 3.推动精准医学发展：对癌细胞基因组进行基因测序，分析其耐药性或代谢差异从而开展有针对性的临床治疗工作。     然而由于人基因组本身的复杂性，及癌基因组的不稳定性导致其基因组内出现大量重复片段。利用二代测序技术能有效地检测出癌基因组内的单核苷酸变异（snv）和插入缺失突变（indel），但受制于二代测序的短读长，往往难以检测出癌基因组内大的结构变异，而这些结构变异往往与癌症的发生、发展密切相关。第三代单分子测序技术凭借其超长读长可以有效检测癌基因组内结构变异信息。下面本科研君就给大家分享一篇今年6月发表在genome research上的关于乳腺癌细胞基因组结构变异检测的研究文章[1]来详细解读长读长测序在乳腺癌基因组变异检测中的优势。     该研究以乳腺癌中较为典型的sk-br-3细胞系为研究对象，通过pacbio三代测序得到了70x左右的基因组数据。通过ngmlr及sniffles分析软件鉴定到了76776个超过10bp的基因变异，其中包含17313个结构变异，而二代测序只检测到了4174个结构变异。相对于二代测序，三代测序在结构变异检测上展现出了更高的灵敏度与准确度。 图1 长读长检测结构变异结果分析      研究人员进一步对检测到的结构变异进行分析发现部分致癌基因出现了大量多拷贝复制现象，如myc基因具有38个拷贝，bcas1基因有17.6个拷贝，sntb1基因具有69.2个拷贝等。其中sk-br-3中最重要的致癌基因erbb2平均具有33.6个拷贝，而且基因的一小部分片段大量扩增，占据了17号染色体的200万个碱基对区段，另外有部分片段与8号染色体发生基因融合，部分融合片段在8号染色体上被复制多达1000次。 图2  erbb2基因的拷贝复制       同时，研究人员还对sk-br-3细胞系进行了全长转录组测序，系统地分析了可变剪切事件和基因融合现象，最后检测到了53个基因融合事件，其中还存在部分之前二代测序未鉴定到的三基因融合事件。 表1 部分融合基因       综上所述，本研究通过三代测序对癌基因组和转录组进行变异分析，发现了近20000个二代测序未鉴定到的新的结构变异信息，揭示了癌基因组演化过程的复杂机制。未来，利用新的技术手段对癌基因组进行系统有效的结构变异图谱描绘将极大地推动癌症基因组学的发展，而长读长测序技术必定会在其中发挥重要作用。      作为目前国内大规模的三代测序服务提供商，安诺优达拥有丰富的物种及合作项目经验，搭建了业界先进的三代测序数据分析体系，具备快速的项目交付周期，专业的硕、博士高学历技术支持团队致力为您提供优质、高效的测序及分析服务。

　　维生素d对于维持骨骼健康是十分必要的。一旦缺乏，容易引来佝偻病及软骨病。此外，维生素d还能帮助预防感冒和抵抗抑郁症，是健康日常生活中不可或缺的帮手。小编和大家一起学习11个方法，晒晒阳光，吃吃鱼肝油，喝喝橙汁和营养强化奶……补足每日所需，生活更健康。充足的阳光　　阳光刺激身体，受紫外线的照射后，人体内的胆固醇能转化为维生素d。但由于紫外线易加大患皮肤癌的风险，所以专家建议，要做足防晒措施，且晒太阳时间以20到25分钟为最佳。当然地区不同，太阳光线也有所影响。在高纬度地区的人们，或是年纪大、皮肤较黑的人群就不太适合这个方法。　　富含脂肪的鱼类，包括鲑鱼，鳟鱼，鲭鱼，金枪鱼，鳗鱼，可以是维生素d的良好来源。一份3盎司红鲑鱼片就包含大约450个国际单位的维生素d。此外，你还可以获得有利心脏健康的黄金ω-3脂肪酸！　　鱼罐头　　新鲜的鱼不是唯一的方法来提高你的维生素d摄入量，你还可以从鱼罐头得到维生素d。金枪鱼和沙丁鱼罐头都含有维生素d，而且通常比新鲜的鱼来得便宜。另外，较长的保质期，食用起来更方便快捷。　　罐装淡金枪鱼的维生素d大约为37.5国际单位/盎司，而长鳍金枪鱼罐头约12.5国际单位/盎司，沙丁鱼罐头中每两条沙丁鱼就含有40国际单位多一点。　　蘑菇　　就像人类一样，蘑菇也有能力自身生成维生素d，这是因为紫外线能刺激维生素d的生产。然而，有些在黑暗中生长的蘑菇不包含维生素d，因此要根据具体蘑菇的种类挑选。营养强化牛奶　　几乎所有强化牛奶都含有维生素d，而冰淇淋和奶酪就没有。在一般情况下，一杯8盎司的牛奶含有至少100国际单位的维生素d，而6盎司酸奶含有80国际单位，但维生素d的含量还取决于品牌。像有些豆奶和牛奶维生素d的含量几乎是相同的，具体还要看标签。　　橙汁　　不喝牛奶也没关系，你可以饮用含有维生素d的橙汁。浓缩橙汁可帮助你获得维生素d。一杯8盎司浓缩果汁通常有大约100国际单位的维生素d。　　维生素d滴剂　　滴剂可以帮助每天获得适当的足够量的维生素d。每粒含维生素d3400单位，但长期过量服用，可能会出现中毒现象。医学研究所建议，九岁以及九岁以上的人维生素d的摄入量最多为4000个国际单位，包括从食物，阳光以及维生素d滴剂获得的所有。　　鸡蛋　　鸡蛋是一种方便的方式来获得维生素d，因为蛋几乎出现在早餐，午餐，晚餐和点心食谱中。蛋由于维生素d主要在蛋黄中，而鸡蛋除了蛋黄，还有蛋白。一个蛋黄能提供给你每天约40国际单位维生素d。但不要试图单凭鸡蛋就足够补充每天的维生素d。但由于一个鸡蛋约含200毫克的胆固醇，美国心脏协会建议每天不超过300毫克，这样才有益心脏健康。　　牛肝　　牛肝，虽然它可能不是是最有吸引力的的来源，熟牛肝3.5盎司包含约50个国际单位的维生素d和其他一些营养成分。但是你还可以从中得到维生素a，铁和蛋白质。但是，需要注意的是，牛肝胆固醇含量较高，要慎吃。　　鱼肝油　　鱼肝油是鲛类动物等无毒海鱼肝脏中提出的一种脂肪油，在0℃左右脱去部分固体脂肪后，用精炼食用植物油、浓度较高的鱼肝油或维生素a与维生素d3调节浓度，再加适量的稳定剂制成。每1g中含维生素a应为标示量的90.0%以上；维生素d应为标示量的85.0%。为黄色至橙红色的澄清液体；微有特异的鱼腥臭，但无败油臭。一汤匙鱼肝油约含1300国际单位的维生素d，比每天建议摄入量（600国际单位）的两倍还要多。11　　紫外线灯和灯泡　　如果有人严重缺乏维生素d，可能就要求助于紫外发光的灯具和灯泡。这种疗法适合维生素吸收能力明显不足的人群，以及那些在冬季无法补充维生素d的人群。但这种灯对皮肤损害大，需要配备防护眼镜，因此要在医生的指导监护下，才能进行紫外线灯光照射的治疗。　　富含脂肪的鱼类　富含脂肪的鱼类，包括鲑鱼，鳟鱼，鲭鱼，金枪鱼，鳗鱼，可以是维生素d的良好来源。一份3盎司红鲑鱼片就包含大约450个国际单位的维生素d。此外，你还可以获得有利心脏健康的黄金ω-3脂肪酸！　　

  苹果酸(Malic acid)又名羟基丁二酸，由于有一个不对称碳原子，故苹果酸有三种：L-苹果酸、D-苹果酸、DL-苹果酸。L-苹果酸是人体三羧酸循环中的产物，故人体只能代谢L-苹果酸。在苹果、葡萄、柠檬等水果中天然存在的都是L-苹果酸。如从果实中提取，含量低、成本高，无法工业化大量生产。由反丁烯二酸(富马酸)催化合成生产的只能是DL-苹果酸，由于人体不能代谢DL-苹果酸，所以欧美各国尽管允许DL-苹果酸作为食品添加剂，但人们总是存在不安全感觉。用微生物方法生产的苹果酸全部为L-苹果酸，因此，现在使用的苹果酸全部由微生物来生产，在食品、医药等方面使用的苹果酸，基本上以L-苹果酸取代了DL-苹果酸。  苹果酸的消费量比衣康酸稍多些，也是用途较为广泛的一种有机酸。苹果酸在食品工业上，如饮料、果酱、果冻、果酒中作 酸味剂；在日用化工上用于牙膏、化妆品中改善品质；在医药上与氨基酸复配制成注射液，作为手术后的营养液，也是肝功能异常患者的良好药物；此外，还用作化学工业的涂料及洗涤剂、除臭剂的成分。微生物发酵制备苹果酸:苹果酸发酵工艺有两种： 即一步发酵法与两步发酵法。不同发酵工艺所使用的微生物也不同。(1)一步发酵法 菌种有黄曲霉、米曲霉、寄生曲霉等，均以包括葡萄糖在内的多种糖为底物产生L-苹果酸。(2)两步发酵法 由华根霉或少根根霉将葡萄糖生物合成富马酸，再由膜醭毕赤酵母、普通变形菌、芽孢杆菌或掷孢酵母等将富马酸转化为L-苹果酸。一步发酵法较多地采用黄曲霉，它能利用葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、果糖及淀粉等多种糖质原料产生L-苹果酸。但培养基较复杂，发酵过程常有富马酸等其他有机酸产生，给分离提纯带来困难，难于得到高纯度的晶体，再加上产酸低，对糖转化率低 (30%～40%)，周期长(最少也需5天)，故至今在国内外均未实现工业化生产。两步发酵法的第一步，先用根霉将糖类发酵生成富马酸，即富马酸发酵，这里的糖较多的使用葡萄糖，葡萄糖可由淀粉经双酶水解而得。第二步是在前面所产的富马酸中接入酵母菌或细菌进行发酵，将富马酸转化为L-苹果酸，即转化发酵。采用这种方法，苹果酸对糖转化率最高可达60%以上，但是毕竟发酵周期太长，前后加起来要8～9天。虽然两步法与一步法一样，国内外学者正在不断地探索，取得了一些有价值的进展，但至今仍然未见工业化生产的报道。无论是一步法还是两步法发酵，如以淀粉为原料，在使用前都需进行水解处理，使之成为葡萄糖，而淀粉最好的水解方法是双酶水解法。目前，国内外L-苹果酸工业化生产的方法，都是固定化细胞转化法。该方法是首先大量培养富马酸酶活力高的菌体，收集菌体后用卡拉胶等适当的载体进行固定，然后装入柱式反应器，以富马酸钠盐为底物，流经反应器，由固定化细胞中的富马酸酶的催化作用，很容易将富马酸转化为L-苹果酸，且几乎无副产物，转化率高达95%以上。此法与上述两种方法相比，简单、 经济、高效，于是成了工业化生产的首先方法。

   人体的各种生理反应都是由蛋白参与和调节的，而这些蛋白的表达和活性同时也受多水平，多方面的调节。这种调节既有转录水平的，也有翻译水平。既有转录后的修饰，也可以是蛋白翻译后的修饰调节。对这些蛋白的调节也有多种的形式，包括磷酸化——去磷酸化，乙酰化——去乙酰化，羧基化，甲基化，糖基化等等。这种多水平，多方面的调节构成了人体内庞大而复杂的调节体系，精确地调节了人体内的各种生理、生化反应。   蛋白的乙酰化和去乙酰化是蛋白活性调节的一种重要的形式，通过乙酰化或去乙酰化，改变了染色质结构或是转录因子的活性，可以调节基因转录的活性。而乙酰化的辅酶A在许多反应中都扮演着重要的角色。对这些乙酰化蛋白展开研究已经成为许多蛋白活性调节研究中的重点。目前乙酰化研究已经成为基因表达、蛋白组学、酶动力学研究中的一个重要方面。    组蛋白是染色质中核小体的主要结构元件。核小体主要由四种组蛋白（H2A,H2B,H3和H4）构成。这四种组蛋白和缠绕在组蛋白的DNA共同组成了染色质。在研究中发现基因的表达并不仅仅由DNA决定，组蛋白的修饰（乙酰化、磷酸化和甲基化）所引起的结构变化同样能影响基因的开关，并且这种变化同样也调控着基因的转录，影响着基因的表达。组蛋白的乙酰化和去乙酰化能打开或关闭某些基因，增强或抑制某些基因的表达。例如H2B蛋白能在Lysines5,12,15和20乙酰化，H3蛋白能在Lysines9,14,18和23乙酰化。Lysines9的乙酰化在组蛋白的堆积和染色质的装配中起了关键的作用。而这种作用最终影响了基因的表达。在多种疾病中，都存在组蛋白编码错误的迹象。因此，有人将组蛋白编码称之为“第二套遗传密码”。组蛋白的乙酰化修饰对于研究基因的表达调控至关重要。目前尚缺乏能准确识别乙酰化和非乙酰化蛋白的抗体，为此CST公司推出了可用于蛋白功能检测的乙酰化组蛋白系列抗体,圆满的解决这个问题。    因为乙酰化与蛋白的活性相关，因此通过乙酰化的系列抗体特异性地识别靶蛋白的乙酰化形式，可以反映出靶蛋白质的活性水平，达到研究蛋白功能和调节的目的。而其他的抗体仅能反映出该蛋白质的表达量或表达水平，不能反映出蛋白的活性状态。乙酰化系列抗体：Catalog#Product DescriptionSourceApplications2576Acetyl-Histone H2A (Lys5) AntibodyRabbitW IP IHC IC2575Acetyl-Histone H2B (Lys12) AntibodyRabbitW IHC IC2571Acetyl-Histone H2B (Lys20) AntibodyRabbitW IP IHC IC2574Acetyl-Histone H2B (Lys5) AntibodyRabbitW IP IHC IC9675Acetyl-Histone H3 (Lys18) AntibodyRabbitW IHC IC9674Acetyl-Histone H3 (Lys23) AntibodyRabbitW IHC IC9671Acetyl-Histone H3 (Lys9) AntibodyRabbitW IP IHC IC2591Acetyl-Histone H4 (Lys12) AntibodyRabbitW IP IHC IC2594Acetyl-Histone H4 (Lys8) AntibodyRabbitW IP IHC IC　有时组蛋白同时乙酰化和磷酸化修饰，进行转录的调控和活性的调节，因此CST也推出了能同时检测乙酰化和磷酸化的组蛋白的抗体。该系列抗体只识别同时乙酰化和磷酸化的靶蛋白，对于只乙酰化或磷酸化的靶蛋白没有识别的能力，利用该系列抗体可以帮助我们理解乙酰化和磷酸化的相互作用。Catalog# Product DescriptionSource Applications9711Acetyl-and Phospho-Histone H3(Lys9/Ser10) AntibodyRabbitW IHC IC1010Acetyl-and Phospho-Histone H3(Lys9/Ser10)Blocking PeptideRabbitW IHC IC　在组蛋白去乙酰化的过程中，组蛋白去乙酰酶起着关键的作用。研究组蛋白去乙酰酶对于理解组蛋白乙酰化和去乙酰化如何调节基因转录有着重要的作用。为此CST推出了组蛋白去乙酰酶系列抗体。Catalog#Product DescriptionSourceApplications2062Histone Deacetylase1(HADC1) AntibodyRabbitW IP IHC IC2632Histone Deacetylase3(HADC3) AntibodyRabbitW IHC IC2072Histone Deacetylase4(HADC4) AntibodyRabbitW2082Histone Deacetylase5(HADC5) AntibodyRabbitW IP IHC IC2162Histone Deacetylase6(HADC6) AntibodyRabbitW IHC IC2882Histone Deacetylase7(HADC7) AntibodyRabbitW IP IC　乙酰化在人体的其他生理反应和调节中同样也起着重要的作用。利用识别乙酰化Lysine的抗体能让我们更清楚地理解人体的各种反应和调节的机制。目前识别Lysine乙酰化的抗体有：Catalog#Product DescriptionSourceApplications9681Acetyl-Lysine Monoclonal AntibodyMouseW E IHC9441Acetyl-Lysine Polyclonal AntibodyRabbitW IP E IHC2072Histone Deacetylase4(HADC4) AntibodyRabbitW2082Histone Deacetylase5(HADC5) AntibodyRabbitW IP IHC IC2162Histone Deacetylase6(HADC6) AntibodyRabbitW IHC IC2882Histone Deacetylase7(HADC7) AntibodyRabbitW IP IC这些抗体专一性的识别乙酰化的Lysine，对于蛋白的乙酰化调节研究起着重要的作用。注：W=Western Blot；IP=Immunoprecipitation；E=ELISA；IHC=Immunohistochemistry；IC=Immunocytochemistry

柱式法 Minute TM 胞质胞核分离试剂盒操作方法：A． 悬浮细胞样品（包括植物，细菌，酵母和真菌制备的原生质体）1.500Xg，3 分钟低速离心收集细胞，用预冷的 PBS 清洗一次2. 将细胞转移到 1.5 ml 离心管中，3000 rpm 离心 1-5 分钟，弃去上清。3. 按表格 1 加入适量的胞浆提取缓冲液（请注意样品及裂解液的比例，以达到最佳效果）, 涡旋大力震荡 15 秒, 冰上孵育 5 分钟, 混匀. 接转胞质胞核分离步骤。表格 1，不同细胞体积应加入相应体积缓冲液细胞体积（ul） 胞浆提取缓冲液（ul） 胞核提取缓冲液（ul） 5 50 25 10 100 50 20 200 100 50 500 250﹡ NIH3T3 和 293T 细胞 10ul 体积相当于 1*106 个细胞B. 贴壁细胞1. 贴壁细胞生长至融合度 90-100%，将预冷的 PBS 直接加入细胞培养板，培养皿或培养瓶中清洗细胞两次，吸去上清。2. 按表格 2 将适量的胞浆提取缓冲液均匀的加入整个器皿表面，冰上静置 5 分钟。用吸头吹打几次后转移到预冷的 1.5 ml 离心管中。涡旋大力震荡 15 秒。接转胞质胞核分离步骤。（请注意样品及裂解液的比例，如浓度较低请减少裂解液使用量）表格 2，不同贴壁细胞量应加入相应体积缓冲液器皿   胞浆提取缓冲液（ul） 胞核提取缓冲液（ul） 24孔板 80 25 6孔板 300 150 25 cm2培养瓶 500 250C．组织样品1. 称重适量组织样品，放入预冷的 1.5 ml 离心管中。2. 用预冷的 PBS 清洗组织样品一次。3000rpm 离心 1 分钟，弃去上清，尽可能的使沉淀干燥。3. 按表格 3 加入适量胞浆提取缓冲液，用微型管杵或微粉碎机匀浆，去除没有完全匀浆的组织碎片。接转胞质胞核分离步骤。表格 3，不同组织样品量应加入相应体积缓冲液组织样品（mg） 胞浆提取缓冲液（ul） 胞核提取缓冲液（ul） 5 50 25 10-15 100 50 15-20 200 100 20-30 500 250 胞质胞核分离步骤1. 4oC，最高速 (14000-16000 rpm) 离心 5 分钟2. 将上清液（上清为胞浆组份）转移到一个新的预冷的 1.5 ml 离心管中。将沉淀（可选优化：用 0.5 ml 预冷 PBS 重悬，10000 rpm，离心 3-5 分钟清洗沉淀可以减少胞浆蛋白污染）中加入适量的胞核提取缓冲液，涡旋大力震荡 15 秒，冰上孵育 1 分钟。然后重复震荡 15 秒，冰上孵育 1 分钟四次。（如核蛋白提取浓度低，可适当延长每次孵育及震荡时间）3. 迅速将核提取物转入到预冷的离心管套管中，14000-16000 rpm，离心 30 秒。弃掉离心管柱。将核蛋白储存于-80℃。一般产量 1.5-2.5 mg/ml。

米非司酮是妇产科常用的药物流产用药，有‘堕胎圣药’之称，所以国家管理的很严，没有专科医生的处方，一般人是搞不到的。不过，除了堕胎它还有很多其他的神奇用途，诸如抗癌、缩瘤、抗抑郁……还能治疗艾滋病……与前段时间炒的很火的‘神药’——阿司匹林、二甲双胍有过之而不及。受到匹林、双胍的‘刺激’之后，‘小米’再也无法寂静地沉默下去了！今天，笔者就带您走进‘小米’——米非司酮的内心世界！1.早期妊娠药物流产药物流产国内多用于停经≤49 天、B超提示妊娠胎囊7周的药物流产，口服米非司酮其完全流产率少于90%，不过可通过增加药量提高成功率。2.终止中晚期妊娠国外对妊娠13-27周要求终止妊娠而无禁忌证的妇女予以口服米非司酮 200 mg，36-48小时后口服或阴道给予米索前列醇600-1000 μg，引产成功率可达90% 以上。1）妊娠12-16 周由于孕激素对子宫的抑制，宫缩难以发动，同时胎盘及胎儿骨骼已经形成，胎儿娩出时宫颈要有充分的扩张， 而此时宫颈又不成熟，直接行钳刮术终止妊娠的操作难度较大及并发症（术中大出血及子宫穿孔）较多。药物流产能较好地替代钳刮术，引产时间短。用法：米非司酮口服50 mg，bid×2 d（总量200 mg），第3天晨口服或于阴道后穹隆置米索前列醇400-600 μg，每隔3-4 h 可重复1次，阴道置药较口服给药效果更好，流产成功率高，不良反应更小（PS:这些用法相信大家都知道，在此仅作热身复习）。2）对于16-27周中期妊娠传统上采用利凡诺引产。目前国内开始应用米非司酮或米非司酮联合利凡诺用于中期妊娠引产。国内多中心临床研究结果表明采用利凡诺羊膜腔注射同时给米非司酮 200 mg顿服，或先给米非司酮 100 mg/d×2 d，d 3行利凡诺羊膜腔注射，与单纯利凡诺羊膜腔注射比较，流产时间缩短、胎盘粘连减少。说明米非司酮作为利凡诺中期妊娠引产的术前用药能明显提高引产的有效性，减少引产并发症的发生。3.稽留流产稽留流产因胎盘组织机化与子宫壁紧密粘连，不易剥离，而且退行性变的胎盘组织释放凝血活酶进入母血循环，易引起播散性血管内凝血，导致大出血。因此稽留流产是临床上处理最棘手的流产类型。以往稽留流产，多采用补佳乐戊酸雌二醇片口服或肌注以提高子宫对缩宫素的敏感性，然后根据子宫大小进行处理，4.死胎引产对于死胎引产，过去往往采用水囊引产、利凡诺羊膜腔内注射引产或先用雌激素再静脉滴注催产素引产。经羊膜腔注入利凡诺引产，成功率较高，但其缺点为引产时腹痛时间长，重度腹痛发生率高达60 %，胎盘胎膜残留率高，产后出血量亦增多；水囊引产有引起逆行性感染的可能；米非司酮是作用的靶器官是蜕膜，特别是毛细血管的内皮细胞，通过取代体内孕激素与其受体的结合抑制孕酮活性，导致出血和体内HCG水平急剧下降，继而卵巢黄体溶解，体内孕激素和雌二醇水平随之下降。蜕膜变性引起内源性前列腺素释放，进一步促进宫缩和软化宫颈，有利于孕产物的排出。米索前列醇对各期子宫均有收缩作用，且随剂量增加而增强，阴道给药且无肝脏首过效应，作用时间长，胃肠道反应小与传统死胎引产方法相比，米非司酮和米索前列醇具有用药方便、作用可靠、减少操作、避免各种手术并发症发生的优点。而且由于其能充分软化、扩张宫颈，近乎生理分娩状态，从而减少软产道裂伤的可能性，同时胎盘娩出往往完整，产后出血发生率较低。5.异位妊娠在异位妊娠患者的药物保守治疗方案中，甲氨蝶呤（MTX）单次肌内注射是最常用的方法。近年来， 米非司酮与MTX联合治疗异位妊娠的方法也逐渐应用。大多数异位妊娠为输卵管妊娠，米非司酮在终止妊娠的同时对输卵管有保护作用，可减少输卵管组织的破坏，保持输卵管的完整性，促使坏死胚胎组织经输卵管排出，再次妊娠率较高。2种药物配合应用，作用迅速可靠，较单独应用MTX的有效率明显提高，血β-hCG恢复正常的天数明显缩短。因2 种药物不破坏输卵管管壁组织及其本身的修复功能，为需保留生育功能的患者带来希望， 特别对有生育要求者，此方法为首选治疗方案。目前常用的联合用药方案有：①MTX 50 mg/m2肌注，肌注当日口服米非司酮 50 mg/次 bid×3天。② 米非司酮 150 mg，qd x 3 d，d 4 单次MTX 50 mg/m2，分两侧臀部肌注。③ 米非司酮 50 mg/次 bid，MTX 20 mg/d，im，qd x 5 d。6.协助取环米非司酮能使宫颈成熟、软化、直径增加。阴道后穹隆放置米索前列醇，可直接作用于靶器官，进一步促使宫颈软化，增加宫颈口的直径和降低机械扩张的抵抗性，起到协同效应。加之在B超监控下操作，能将取环勾直接勾住IUD下缘。这样，完全摆脱以往凭感觉操作，避免了意外发生，并可减少受术者痛苦，明显提高取环成功率。推荐方法：对于取宫内节育器失败者需经B超证实IUD在宫腔内，并进行常规妇科检查、体检，严格掌握药物适应证。未绝经妇女在月经第5d开始服米非司酮25mg，2次/d，共服3d。绝经妇女不受时间限制，服米非司酮25mg，2次/d，共服5d，服完米非司酮第2d上午，阴道后穹隆放置米索前列醇1枚，2～2.5h后在B超监控下取器。下次有取不出的环可以试试哦！7.终止带环妊娠米非司酮与米索前列醇配伍起到协同作用，使子宫蜕膜、绒毛细胞退化、凋亡、出血、剥蜕，激活子宫肌引起节律性收缩，并能软化、扩张宫颈，排出妊娠物，同时也将IUD排出。用于终止10～16周妊娠，不论带器与否，均不影响其引、流产效果。从IUD排出情况看，约有75%的患者能在妊娠物排出前或排出时自行排出，但仍有25%的患者未能将IUD排出，必须给予清宫及时取出。由于服药后宫颈已软化、扩张松弛，此时不论是清宫还是取器，均比较容易。方法：米非司酮和前列腺素的使用方法及用量均同抗早孕。若服米索前列醇5～6h无规律宫缩者加服米索前列醇600μg或阴道上药（米索前列醇）200μg。8.子宫肌瘤雌激素是子宫肌瘤生长的主要促进因素，孕激素在子宫肌瘤的发生及成长中也起着重要作用， 孕激素及孕激素受体调节着子宫肌瘤细胞的分裂活动， 促进子宫肌瘤的增殖。米非司酮 具有很强的与PR相结合的能力， 能拮抗体内孕激素刺激肌瘤组织中表皮生长因子（EGF）基因的表达，还使肌瘤中孕激素受体明显减少；同时雌激素受体也随之减少，血清中雌、孕激素维持在卵泡期较低水平，从而使肌瘤组织中雌、孕激素效应明显降低，导致肌瘤体积缩小。由于米非司酮 长期使用可缩小肌瘤及使子宫动脉血流量减少，减轻盆腔充血及水肿，米非司酮也可以作为子宫肌瘤剔除术的术前用药。对于一些年轻未育需做肌瘤剔除术的患者，服用后可使肌瘤与宫壁肌层组织间界限明显，疏松易剥离，从而减少了手术损伤， 提高术后患者的生育功能及降低其妊娠、分娩的并发症。当然，在用药前十分有必要进行诊断性刮宫和宫颈细胞学检查，排除子宫内膜及宫颈的恶性病变。9.子宫内膜异位症子宫内膜异位症主要病理变化为异位种植的子宫内膜随卵巢激素的变化而发生周期性出血，为育龄妇女常见病之一，属雌激素依赖性疾病。近年来治疗方法主要是依靠药物抑制卵巢功能及诱导内膜萎缩，达那唑及GnRH-a等虽然有效，但由于存在明显的不良反应，其临床应用受到一定限制。米非司酮除了能拮抗孕激素作用外，也在子宫内膜上表现出抗增殖作用：它能抑制雌激素依赖的子宫内膜增殖、有丝分裂活性及分泌活动，减少子宫内膜的厚度。米非司酮 在子宫内膜异位症的治疗作用已得到公认。国内临床应用多主张小剂量米非司酮长期使用，10-25 mg/d，3-6个月为1个疗程。米非司酮除了缓解异位症患者症状外，还可明显缩小异位病灶体积，术前给药有利于手术、减少术中出血及异位病灶的切除。另外，术后加用米非司酮可明显改善患者症状和体征，消除残余小病灶，减少手术后的复发率， 从而减少再次手术的机会。10.葡萄胎滋养细胞具有高度增殖能力， 是葡萄胎突出特点之一。米非司酮作为孕激素受体拮抗剂， 在抑制孕酮作用同时， 直接作用于子宫， 诱导子宫蜕膜和滋养细胞发生凋亡， 使蜕膜发生退形性变， 促使胚胎组织坏死、脱落。有研究表明，不同剂量的米非司酮对滋养细胞中增殖细胞核抗原的增殖表现出剂量依赖性生长抑制作用。11.妇科恶性肿瘤米非司酮具有抗肿瘤作用， 其机制与拮抗孕激素、诱导细胞凋亡、逆转肿瘤耐药性、影响血管生成等作用有关。有研究表明， 每天口服米非司酮20 mg，可增加卵巢癌患者对紫三醇和顺铂联合化疗的敏感性； 每天口服200 mg 米非司酮， 对孕激素受体阳性的子宫内膜癌和子宫肉瘤有稳定病情的作用， 病情稳定率在25 % 左右。另一项研究显示，米非司酮对子宫平滑肌肉瘤术后复发有效。12.精神病看到这个用途，不要笑哦。‘小米’真的对精神异常相关疾病有很不错的作用，与常规抗抑郁药相比还有其有过之而不及的作用。因机体下丘脑-垂体-肾上腺轴失衡导致的外周血循环中糖皮质激素水平的异常升高（高皮质醇血症）往往与人类的情感性精神障碍有密切的关联性。近期，有诸多研究表明糖皮质激素受体拮抗剂能起到有效治疗诸多不同类型情绪障碍的作用，其中以米非司酮较为常见。米非司酮通过抗糖皮质激素治疗精神障碍性疾病的显著疗效主要表现在精神病性抑郁症、双相抑郁和认知障碍、阿尔茨海默病。已有研究证实，米非司酮在改善糖尿病大鼠早期认知障碍减退方面有显著作用。有学者研究发现，抑郁人群中大多伴有糖皮质激素稳态的失衡，而有效的抗抑郁治疗可以起到改善外周血循环中高皮质醇血症的作用，米非司酮是目前正在测试的一种潜在的抗抑郁新药。早在2006年，就有米非司酮对于抑郁症特别是中度至重度精神病性症状的患者的疗效被报道。米非司酮在降低患者精神病性中的作用有精神病性抑郁的大量临床研究也如雨后春笋般涌现。有更为深入的研究表明米非司酮可以通过抑制HPA轴对糖皮质激素受体的过度兴奋作用改善抑郁症患者的应激障碍。此外，米非司酮在很大程度上可以避免或减少其他常规抗抑郁药物用药期间引起的体重增加和代谢异常等不良反应。13.避孕米非司酮可以通过影响下丘-垂体-性腺轴的功能从而干扰卵泡的形成，胚胎的植入及发育等。在月经周期的不同时段，米非司酮对女性生殖内分泌的影响也不相同： 卵泡期使用，可抑制卵巢雌激素分泌、抑制黄体生成激素（LH）峰，从而抑制排卵；黄体早期给药，可引起子宫内膜上皮细胞凋亡，改变子宫内膜的接受活性， 阻止胚胎植入。在黄体中、晚期使用可使子宫内膜退行性变和脱落。可用于紧急避孕、黄体期避孕和常规避孕。推荐10 mg 米非司酮用于无保护性交后120 h 内紧急避孕， 且对推迟月经影响最小。14.胎盘植入植入性胎盘的病因多有原发性蜕膜发育不全或创伤性内膜缺陷，使底脱膜部分性或完全性缺失所致。米非司酮作用于胎盘滋养细胞的同时，更直接作用于子宫螺旋动脉上雌、孕激素受体，影响子宫螺旋动脉的血供，使植入性胎盘血供不足，从而抑制滋养细胞增殖，且诱导和促进其凋亡，使残存的胎盘坏死。缩宫素是帮助子宫收缩的常用药，与米非司酮合用有利于胎盘尽早排出。15.库欣综合征库欣综合征是由于各种原因导致外周血循环中糖皮质激素增多发生的一种内分泌代谢障碍性综合征。血清糖皮质激素异常高常继发于原发或继发肾上腺肿瘤对肾上腺内分泌功能的刺激作用。对大多数库欣综合征患者，首选手术治疗。然而，有大部分患者在术后不能完全治愈。对于复发患者的二线治疗方案，常采用二次手术、放疗或者药物治疗。采用肾上腺糖皮质激素拮抗剂治疗安全、有效。2012年美国FDA批准米非司酮作为首选的糖皮质激素抑制剂治疗继发于库欣综合征的高皮质醇血症。16.非器质性的子宫出血（亦即过去提到的‘功血’）更年期非器质性子宫出血是由于卵巢功能衰退，对促性腺激素的反应下降所引起的无排卵性功血。雌、孕激素的分泌相对减少，无排卵。米非司酮为一种孕酮受体阻断剂，不仅有拮抗孕激素的作用，对下丘脑、垂体、卵巢、子宫均有作用。米非司酮对卵巢功能的影响，主要是抑制卵泡的发育和延迟排卵，除直接作用于卵巢外，还通过抑制促卵泡生成激素、促黄体生成激素分泌而阻止卵泡发育，加速了卵巢残存卵泡的萎缩而使接受治疗的患者直接进入绝经期。推荐方法：经B超检查，诊断性刮宫排除恶性疾病后开始口服米非司酮，1次/d，10 mg/次，连用6个月。用药前检查肝肾功能，并排除血液系统疾患，用药后3个月复查肝肾功能及B超检查。17.脑膜瘤脑膜瘤是最常见的神经非恶性肿瘤之一，具有易复发的特点。国内外各大基础和临床研究表明超过70%的脑膜瘤患者血清或组织中有孕激素受体的表达，且表达程度与复发情况之间存在正相关。在2015年美国西南肿瘤协组（SWOG）就口服孕激素受体拮抗剂——米非司酮进行了为期两年的双盲、多中心临床Ⅲ随机对照试验，研究结果表明在复发性脑膜瘤患者中每日口服200mg米非司酮组2年后病情好转情况显著优于安慰剂组，且安全有保障。18.艾滋病已有诸多动物试验和人体药理临床试验表明，米非司酮作为糖皮质激素受体的抑制剂在离体组织和机体内均可以起到的抗HIV病毒活性的作用，且在一定的血药浓度范围内（75mg-300mg）安全有效，可以在很大程度上抑制HIV病毒的复制，降低病毒载量，延缓HIV病毒携带人群的病程进展，在一定程度上改善病人的预后。

    脂质 体(LR)试剂是阳离子脂质体DOTMA和DOPE的混合物(1：1)。它适用于把 DNA 转染入悬浮或贴壁培养细胞中，是目前条件下最方面的转染方法之一。转染率高，优于磷酸钙法，比它高5-100倍，能把DNA和RNA转染到各种细胞。    用LR进行转染时，首先需要优化转染条件，应找出该批LR对转染某一特定细胞适合的用量、作用时间等，对每批LR都要做。先要固定一个DNA的量和DNA/LR混合物与细胞相互作用的时间，DNA可从1-5ug和孵育时间6h，开始，按这两个参数绘出相应LR需用量的曲线，再选用LR和DNA两者的剂量，确定出转染时间。因LR对细胞有一定的毒性，转染时间以不超过24h为宜。    细胞种类：COS-7、BHK、NIH-3T3、Hela和Jurkat等任何一种细胞均可作为受体细胞。实验步骤1. 操作步骤(方法一)：   1) 取6孔培养板，向每孔中加入2ml含(1-2) x 10 5 个细胞的培养基，37℃、18% CO 2 培养基40%-60%汇合时。   2) 转染液制备：在聚苯乙烯管中制备以下两液(为转染1个空细胞所用的量)。      A液：用不含血清培养基稀释DNA使浓度为1-10ug，终量100ul。      B液：用不含血清培养基稀释LR，使终浓度为2-50ug，终量100ul。轻轻混合A液、B液，室温中置10-15min，稍后会出现微浊现象，但并不妨碍转染。   3) 转染准备：用2ml不含血清培养基漂洗2次，再加入1ml不含血清培养基。   4) 转染：把A/B复合物缓缓加入培养基中，摇匀，置37℃温箱中6-24h，吸除无血清转染液，换入正常培养基继续培养。   5) 其余处理：如观察、筛选、检测等与其他转染法相同。   6) 注意：转染时切勿加血清，血清对转染效率有很大影响。2. 快速脂质体转染法操作步骤(方法二)：   1) 将细胞以5 x 105个/孔接种于6孔板中培养24h，使其达到50%-60%板底面积。   2) 在试管中配制DNA-脂质体复合物。      a. 在1ml无血清DMEM中稀释PSV1-neo质粒DNA或供体DNA。      b. 旋转1s，再加入脂质体悬液，旋转。      c. 室温下放置5-10min，使DNA结合在脂质体上。   3) 弃去细胞中的旧液，用1ml无血清DMEM洗细胞1次后弃去，向每孔中直接加入1mlDNA-脂质体复合物，37℃培养3-5天。   4) 再于每孔中加入含20%胎牛血清的DMEM，继续培养14-24h。   5) 吸出DMEM-DNA-脂质体混合物加入新鲜含10%胎牛血清的DMEM，2ml/孔，再培养24-48h。   6) 用细胞刮或消化法收集细胞，以备分析鉴定。3. 稳定的脂质体转染法：   1) 接种细胞同前述，细胞长至50%板底面积可用于转染。   2) DNA-脂质体复合物制备转染细胞同前。   3) 在每孔中加入1ml含20%胎牛血清的DMEM，37℃培养48h。   4) 吸出DMEM，用G418选择性培养基稀释细胞，使 细胞生长 一定时间，筛选转染克隆，方法参照细胞克隆筛选法进行。4. Invitrogen公司的Lipofectamine2000在24孔板转染单层贴壁细胞。(别的方法可以参考生产商提供的protocol)   1) 转染前1天将0.5～2×105细胞接种于24孔培养板，并加入500ul不含 抗生素 的完全培养基，以保证转染时细胞汇合达90～95％。   2) 准备复合物      a. 将0.8ug DNA稀释于50ul无血清无抗生素的培养液中轻轻浑匀。      b. 将2ul Lipofectamine2000稀释于50ul无血清无抗生素的培养液中，轻轻浑匀，室温孵育5分。注意：必须在25分内进行。      c. 5分后将它们混合，并轻轻浑匀，室温孵育20分。   3) 吸去培养板的培养基，用PBS或无血清培养基清洗细胞2次。   4) 将复合物(总体积100ul)加入培养孔，前后摇动培养板使其分布均匀。   5) 将细胞放入 培养箱 孵育4～6h后，可以更换含血清培养液去除复合物(也可不用)。   6) 24～48h后可以观察转入 基因表达 情况。   7) 稳定转染：换含血清培养基24h后将细胞以1：10(或更高比例)传代，1天后更换筛选培养基筛选。

      维生素c是人类营养中最重要维生素之一，缺乏时会产生坏血病。水果、蔬菜是供给人类维生素c的主要来源。通过对维生素c含量的测定，可以了解果品质量的高低，并掌握这一测定方法。利用染料2,6-二氯酚靛酚作氧化剂，可将还原态的维生素c氧化成脱氢维生素c，而染料本身被还原成无色的衍生物。2,6-二氯酚淀粉在酸性条件下呈红色。实验方法原理:      利用染料2,6-二氯酚靛酚作氧化剂，可将还原态的维生素c氧化成脱氢维生素c，而染料本身被还原成无色的衍生物。2,6-二氯酚淀粉在酸性条件下呈红色。在滴定终点之前，滴下的2，6-二氯酚淀粉立即被还原成无色。当溶液从无色转变成为红色时，即为滴定终点。实验步骤:一、试剂1. 实验材料：水果或蔬菜。2. 仪器：（1）微量滴定管；500毫升×1；（2）量瓶：50毫升×2；（3）三角瓶；500毫升×2；（4）研钵；（5）量筒； （6）刻度吸管；10毫升×2；3. 试剂：（1）1%草酸：秤取5.0克草酸溶于少量蒸馏水中，定容至500毫升。（2）2%草酸：秤取10.0克草酸溶于少量蒸馏水中，定容至500毫升。（3）0.001n 2，6-二氯酚靛酚钠溶液：称取干燥的2，6-二氯酚靛酚钠60毫克，放入200毫升量瓶中，加热蒸馏水中100-150毫升，滴加0.01n naoh4-5滴，强烈摇动10分钟冷却后加水至刻度。摇匀后用紧密滤纸滤于棕色瓶中，贮于冰箱中备用，有效期一周。使用前需标定.实验过程1. 样品的处理和提取：称取4.0克新鲜样品，至研钵中，加5毫升2%草酸，研成匀浆。通过漏斗将样品提取液转移到50毫升量瓶中。残渣再用2%草酸提取2-3次，提取液及残渣一并转入量瓶。2%草酸总量为35毫升，最后以水定容。溶液定容时若泡沫较多，可加几滴乙醇消除泡沫后再定容。摇匀，过滤，滤液备用。2. 样品的测定：吸取滤液10毫升，放入50毫升三角瓶中，立即用2,6-二氯酚靛酚钠溶液滴定至出现明显的红色，并在15秒内不消失为止。记录所用滴定液体积。3. 空白测定：在另一50毫升三角瓶内，放入35毫升2%草酸，并用1%草酸定溶，摇匀，取此液10毫升放入另一50毫升三角瓶内，用2,6-二氯酚靛酚钠滴定至终点，记录染料用量。 x：100克样品所含维生素c毫克数（毫克/100克）w：称取样品重（克）v1：滴定样品所用染料毫升数v2：滴定空白所用染料毫升数v：样品提取液稀释之总体积（即50毫升）k：1毫升染料液所能氧化维生素c之毫克数，可由标定算出      注意事项:      mso-bidi-language:ar-sa">二氯酚靛酚钠溶液的标定：准确称取维生素c20毫克，用1%草酸溶解定容至200毫升。吸取此液10毫升，以1%草酸再次稀释定容至200毫升。吸取此液10毫升，放入50毫升三角瓶中（同时吸取10毫升1%草酸于另一个50毫升三角瓶中，做空白对照立即用所要标定的2，6-二氯酚靛酚钠滴定至粉红色出现15秒不消失，记录所用毫升数，按下式计算k值（即1毫升染料所能氧化抗坏血酸的毫克数）。 (式中：g为称取维生素c的毫克数。v为滴定10毫升标准维生素c时所用去染料的毫升数，与滴定空白所用毫升数之差值)2. 操作要尽可能快，并防止与铁铜器具接触，以减少维生素c的氧化。3. 草酸及样品的提取液避免日光直射。4. 当样液本身带色时，测定前于提取液中加2-3毫升二氯乙烷。在滴定过程中当二氯乙烷由无色变粉红色时，即达终点。

第一步：首先看 Ori 的位置，了解质粒的类型（原核/真核/穿梭质粒）。所谓穿梭质粒是指一类人工构建的具有两种不同复制起点和选择标记，因而可以在两种不同类群宿主中存活和复制的质粒载体。此概念不仅用于不同的微生物菌群之间，也可以推广到真核生物表达载体的构建，如用于枯草的pBE2、酵母的pPIC9K、哺乳动物表达载体pMT2 和用于植物细胞的Ti 质粒。这些穿梭质粒不仅可以在大肠杆菌中复制扩增，也可以在相应的枯草、酵母、动物或植物细胞中扩增和表达。这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备。第二步：再看筛选标记，如抗性，决定使用什么筛选标记。Ampr 水解β－内酰胺环，解除氨苄的毒性。tetr 可以阻止四环素进入细胞。camr 生成氯霉素羟乙酰基衍生物，使之失去毒性。neor（kanr）氨基糖苷磷酸转移酶 使 G418（长那霉素衍生物）失活hygr 使潮霉素β失活。第三步：看多克隆位点（MCS）。它具有多个限制酶的单一切点。便于外源基因的插入。如果在这些位点外有外源基因的插入，会导致某种标志基因的失活，而便于筛选。决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。第四步：再看外源 DNA 插入片段大小。质粒一般只能容纳小于 10Kb 的外源 DNA 片段。一般来说，外源 DNA 片段越长，越难插入，越不稳定，转化效率越低。第五步：是否含有表达系统元件，即启动子－核糖体结合位点－克隆位点－转录终止信号。这是用来区别克隆载体与表达载体。克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。选用那种载体，还是要以实验目的为准绳。启动子－核糖体结合位点－克隆位点－转录终止信号启动子－促进 DNA 转录的 DNA 顺序，这个 DNA 区域常在基因或操纵子编码顺序的上游，是 DNA 分子上可以与 RNApol 特异性结合并使之开始转录的部位，但启动子本身不被转录。增强子/沉默子－为真核基因组（包括真核病毒基因组）中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。其作用与增强子所在的位置或方向无关。即在所调控基因上游或下游均可发挥作用。/沉默子－负增强子，负调控序列。核糖体结合位点/起始密码/SD 序列（Rbs/AGU/SDs）：mRNA 有核糖体的两个结合位点，对于原核而言是 AUG（起始密码）和 SD 序列。转录终止顺序（终止子）/翻译终止密码子：结构基因的*后一个外显子中有一个 AATAAA 的保守序列，此位点 down－stream 有一段 GT 或 T 富丰区，这 2 部分共同构成 poly（A）加尾信号。结构基因的*后一个外显子中有一个 AATAAA 的保守序列，此位点 down－stream 有一段 GT 或 T 富丰区，这 2 部分共同构成 poly（A）加尾信号。

中文名称:马来酰肼英文名称:Maleic acid hydrazideCAS:123-33-1纯度：98%;99% 包装信息：1g;5g;25g;100g;250g;500g;1kg分子式: C4H4N2O2分子量: 112.09EINECS号:204-619-9储存条件:0-6°C  化学性质:纯品为白色结晶固体。m.p.296～298℃，相对密度1.60 (25℃)，闪点300℃，不易挥发。25℃时溶解度为：二甲基甲酰胺2.4%、丙酮97%，m.p.>292℃，相对密度1.60。其三乙醇胺盐在水中溶解度为70%、钾盐10%、钠盐20%。 毒性：大鼠急性经口LD501400mg/kg，其钠盐为6950mg/kg，二乙醇盐为2340mg/kg。无刺激作用。用含5%原药的饲料喂养大鼠2年未出现中毒症状，未见致畸、致癌、致突变性。对鱼低毒，鲈鱼LC5075mg/L。对蜜蜂无毒。  主要用途:1、植物生长调节剂。通过叶面或根部吸入，由木质部和韧皮部传导，抑制细胞分裂而抑制植物生长。0.1%～0.05%药液可防除禾草和草坪、果园及水边杂草；0.025%药液抑制洋葱和马铃薯贮存期发芽；0.1%～0.05%药液抑制及延缓烟草侧芽生长和保持柑橘苗免受霜害。2、用作植物生长抑制剂3、用作农药、医药中间体4、顺丁烯二酰肼为选择性除草剂和暂时性植物生长抑制剂。药剂可通过叶面角质层进入植株，降低光合作用、渗透压和蒸发作用，能强烈地抑制芽的生长。用于防止土豆、洋葱、大蒜和萝卜贮藏期发芽，并有抑制作物生和延长开花的作用，也可用于非耕地除草。该品的互变异构为3，6-二羟基哒嗪（3，6-Dihydroxypyridazine）。是磺胺类药物磺胺甲氧嗪的中间体。5、生化研究6、马来酰肼为选择性除草剂和暂时性植物生长抑制剂。 生产方法：1、顺丁烯二酸酐与水合肼反应而得。在反应锅中投入水及40%水合肼，搅拌冷却下滴加30%盐酸，温度控制在20℃以下，至pH值为6.2-6.4，投入顺丁烯二酸酐，缓缓升温至106-110℃，回流2h，降温至5℃，甩滤，滤饼用冰水洗至pH4.8-5.1，干燥，得顺丁烯二酰肼，收率97%。2、由丁烯二酸酐（或丁二烯二酸）与硫酸肼于35～56℃下反应制得。

食品酶制剂是从生物（包括动物、植物、微生物）中提取的具有生物催化能力的物质，辅以其他成分，用于加速食品加工过程和提高食品产品质量的制品。它作为食品添加剂被添加到食物中后，只在加工过程中起作用，即帮助一种物质完成一种转变，而一旦它完成了使命，就功成身退，在终产品中消失或失去活力。不会在食品中产生危害残留。     食品酶制剂以其催化特性专一、催化速度快、天然环保等特性，在食品生产和人们生活中正扮演着越来越重要的角色，在淀粉、酿造、果汁、饮料、调味品、油脂加工的领域都有广泛的应用。淀粉酶淀粉酶属于水解酶类，是催化淀粉、糖元和糊精中糖苷键的一类酶的统称，其中以α-淀粉酶最为常见。淀粉酶水解淀粉，生成糊精和糖，在烘焙食品、啤酒、果冻、果汁和糖浆的生产过程中有着广泛的应用。纤维素酶纤维素酶是降解纤维素生成寡糖和单糖的一组酶的总称，作用于纤维素以及从纤维素衍生出来的产物，在分解纤维素时起生物催化作用。因为纤维素酶可以水解细胞壁中的纤维素，故通常用于果蔬处理、咖啡豆干燥、饲料加工等。果胶酶果胶酶是分解果胶质酶类的总称，可以将果胶分解成半乳糖醛酸等小分子。主要包括多聚半乳糖醛酸酶、原果胶酶、果胶酯酶及裂解酶。多用于果蔬加工、咖啡豆发酵、巧克力生产等过程中。脂肪酶脂肪酶是指分解或合成高级脂肪酸与丙三醇形成甘油三酸酯酯键的酶。在食品焙烤，油脂改性和添加剂生产等食品领域具有广泛应用，例如改良乳制品的风味，延长烘焙制品的保质期等。蛋白酶蛋白酶是催化蛋白质和多肽水解的一类酶的总称，广泛存在于动物内脏、植物茎叶、果实和微生物中。种类很多，重要的有胃蛋白酶、胰蛋白酶、组织蛋白酶、木瓜蛋白酶和枯草杆菌蛋白酶等。在干酪生产、肉类嫩化和植物蛋白改性中都大量的使用蛋白酶。

无血清培养基是在合成培养基的基础上发展起来的，与传统的培养基相比，既能满足细胞在体外长时间培养的要求，又能避免动物血清所带来的不利因素。无血清培养基的发展历程分为无血清培养基（Serum-Free Medium，SFM）、无动物源培养基（Animal Component Free Medium，ACFM）、无蛋白培养基（Protein-Free Medium，PFM）及化学成分限定培养基（Chemically Defined Medium，CDM）等四类。在使用无血清培养基时，有些细胞需要逐渐适应，即先将原来的培养基与无血清培养基混合培养，渐渐地再转为完全的无血清培养基培养。有些贴壁生长的细胞，复苏时也可用少量的血清先培养，因为血清可助细胞贴壁，然后再换成无血清培养基。组成成分无血清培养基由营养较完全的基础培养基和补充因子组成。基础培养基在不同细胞培养时，根据细胞需求对成分已知的基础培养基组分进行适当调整即可使细胞更好地生长并提高目的产物的表达量。大多数人工合成的培养基如DMEM、DMEM/F12、1640。补充因子补充因子是代替血清的各种因子的总称。多数无血清培养液必须补加3-8种因子。胰岛素、亚硒suan钠和转铁蛋白是必须补充因子，其他多数为辅助作用的因子。按其功能不同，补充因子可分为五类：激素和生长因子。很多细胞用无血清培养时需要加入激素，如胰岛素、生长激素、胰高糖素等。胰岛素是重要的细胞存活因子，与细胞上的胰岛素受体结合后可促进RNA、蛋白质和脂肪酸的合成，抑制细胞凋亡。此外，雌二醇、孕酮、氢化可的松等也是无血清培养基中常添加的补充因子。结合蛋白。常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。转铁蛋白与细胞上的转铁蛋白受体结合是细胞获取铁元素的主要来源。白蛋白与脂类、激素、维生素、金属离子和生长因子结合后可调节上述物质在无血清培养基中活性的作用，此外，由于牛血清白蛋白一般添加量比较大，可增加培养基的粘度，保护细胞免受机械损伤。贴壁因子。许多细胞必须贴壁才能生长，这种情况下无血清培养基中一定要添加促贴壁和扩展因子，一般为细胞外基质，如纤粘连蛋白、胶原蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子，对许多细胞的繁殖和分化，起着重要作用。纤粘连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化，这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞、CHO细胞等。酶抑制剂。培养贴壁生长的细胞，需要用胰酶消化传代，在无血清培养基中必不可少须含酶抑制剂，以终止酶的消化作用，达到保护细胞的目的。最常用的是大豆胰酶抑制剂。其他补充因子。一些细胞培养使用的无血清培养基还需要补充微量元素、维生素、脂类等低分子量物质。优点1）避免血清不同批次间的质量差异，提高细胞培养实验结果的一致性。2）避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染。3）避免血清组分对实验研究的影响。4）有利于体外培养细胞的分化。5）可提高目的蛋白的表达量并使产品易于分离纯化。6）组分稳定，可大量生产。7）不含有丝分裂原抑制剂，可以促进细胞增殖。缺点1）细胞易受某些机械和化学因素的影响，培养基应用不如传统的合成培养基方便。2）成本高。3）针对性很强，一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养。4）不同细胞对培养及营养成分的需求不同。5）虽然不添加动物血清，但为了细胞的生长，培养基中依然包含大量动植物来源蛋白，添加物质的化学成分也不够明确。生产生物制品目前，生产生物活性蛋白、疫苗、单克隆抗体和基因治疗药物的表达载体等生物制品时一般都采用可高密度生长的动物工程细胞。无血清培养技术的运用，给动物工程细胞提供了更优的条件，进而表达更多的目的产物，并有利于后续目的产物的分离和纯化。基础研究领域虽然基础培养基加少量血清所配制的完全培养基可以满足大部分细胞培养的要求，但对有些实验却不适合。如，在利用DC肿瘤疫苗治疗时，所需要的树突状细胞和用于抗原致敏的肿瘤细胞，往往在胎牛血清（Fetal Calf Serum，FCS）中进行培养，这使得很难分辨哪些免疫应答是由血清引起而非真正的先天免疫系统的作用，需要使用成分明确的无血清培养基排除动物血清的干扰。

有没有人在追《延禧攻略》？该古装剧一改往日女主纯良无辜小白兔的人设，一路打怪升级，战斗力爆表。成了这段时间大家热议的头号大剧！在剧中，高贵妃就是嚣张跋扈的代名词，明明只是一个贵妃，却演出了皇太后的气势，屡屡将毒手伸向皇子......比如，泥萌最爱的“五阿哥”~战斗女主终于按捺不住，在某次高贵妃在与皇上观看打铁花表演时，借着“万紫千红”的戏用铁水烫伤了高贵妃的后背，更惨的是铁水被有心之人混进了金汁，使得高贵妃的病情日渐恶化，最后自杀领盒饭走人......看到这里，很多人要问：金汁为何物？为什么这么厉害？金汁名字看似很高大上，实质却是最原始污秽，它是最肮脏的粪便和尿液熬成的金色浓稠汤汁。那么，问题来了，粪便有这么大的杀伤力吗？铁的熔点有1535℃，虽然粪便中含有大量细菌，但高温不是能灭菌吗？按照铁水的高温，往铁水里加入粪水，那些细菌命再硬也早就被杀死了，还有什么能力害人？  对，实际上，金汁的作用很纯粹，就是想恶心你，心理上膈应你。高贵妃真正死因是烫伤创面细菌感染，和有没有混入金汁关系不大。人一但被烧伤，皮肤屏障功能受损，创面渗出的体液及坏死组织会成为细菌的良好培养基，很容易造成感染，在那个没有抗生素的时代，这都是分分钟要命的。也有网友感叹了，高贵妃要是活在现代，就不会被感染了，一定能活到全剧终。那么，一定是这样吗？ 像高贵妃被超高温度的铁水大面积烫伤，往往导致全层皮肤的深度烧伤（医学上称为Ⅲ度烧伤），非常严重，救治难度很高。就算高贵妃活在现代，医院各种有创检查和治疗(如气管切开、留置导尿、动静脉置管等)、血液制品的输入、和抗菌素长时间全身应用都是会可引发或导致感染，如果不幸的再感染“超级细菌”，再加上像高贵妃这样“不配合”的病人，高贵妃还是有可能会全身感染而亡！ 那么被烫伤的高贵妃最可能感染的病菌有哪些呢？ 1．铜绿假单胞菌大面积烧伤创面感染最常见的细菌是铜绿假单胞菌，本菌属于非发酵革兰氏阴性杆菌。菌体细长且长短不一，菌体的一端有单鞭毛，在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。 本菌为专性需氧菌，生长温度范围25~42℃，最适生长温度为25~30℃，该菌有4℃不生长而在42℃可以生长的特点。在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素，如绿脓素（pyocynin）与带荧光的水溶性荧光素（pyoverdin）等，在血平板上会有透明溶血环。铜绿假单胞菌能产生多种致病物质，主要是内毒素、外毒素、蛋白分解酶和杀白组胞素等。其致病特点是引起继发感染，多发生在机体抵抗力降低时，如大面积烧伤，长期使用免疫抑制剂等。临床上常见的有皮肤和皮下组织感染，中耳炎、脑膜炎、呼吸道感染、尿道感染、败血症等。铜绿假单胞菌具有多重耐药的特性，能天然抵抗多种抗生素，对抗生素耐药有多种耐药机制，如产生的多种β内酰胺酶、产氨基糖苷类钝化酶、细菌细胞外膜蛋白改变使抗菌药进入菌体的量减少、细菌细胞膜上存在多种外排泵以及细菌旋转酶或拓扑异构酶发生改变等，在治疗铜绿假单胞菌的感染过程中，一方面充分考虑其耐药机制，选用耐药率低的药物，避免诱导铜绿假单胞菌产生β内酰胺酶而对抗菌药物广泛耐药。另一方面，由于长期的各种抗生素治疗，分离菌株可能发生耐药性的改变，因此，初次分离的敏感菌株在治疗3~4 d 后应重新培养做药敏试验。 2．金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌为革兰染色阳性球菌，直径约1μm，排列成葡萄串状，无芽胞，无鞭毛，不能运动。大多数无荚膜。平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径0.5~1.0mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。常引起皮肤组织化脓性感染，金黄色葡萄球菌产生的多种外毒素也可引起败血症及脓毒血症，是医院感染的主要病原菌。随着抗生素的广泛滥用，耐药的金黄色葡萄球菌开始出现并逐年增多，现已遍及全球，其中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA），也称超级细菌。除甲氧西林外，MRSA对其他所有与甲氧西林结构相似的β-内酰胺类抗生素以及氨基糖苷类、四环素类、氟喹诺酮类等药物均有不同程度耐药，使得抗感染的难度大大增加。 3．大肠埃希菌  大肠埃希菌为革兰氏阴性短杆菌，大小0.5×1～3微米。周生鞭毛，能运动，无芽孢。目前，大肠埃希菌已成为医院感染的重要机会致病菌之一，当机体抵抗力下降时可引起人体各部位内源性感染。比如大面积烧伤的人，大肠杆菌侵入血流，会引起败血症。近年来,随着抗生素应用的日益增多，特别是许多广谱抗生素及新型抗生素的广泛应用，细菌的耐药性日益严重，多重耐药的肠杆科细菌对全球健康的威胁与日俱增。产超广谱β内酰胺酶（ESBL）和碳青霉烯酶是菌株耐药的常见原因。 4．鲍曼不动杆菌 鲍曼不动杆菌为革兰阴性球杆菌，单个或成双排列，有时呈丝状或链状。无芽胞，无鞭毛，革兰染色不易脱色。在血琼脂平板上35C 培养18~24 h ，形成直径2~3 mm 、圆形、灰白色、光滑、边缘整齐的菌落，部分菌落呈黠液状。在麦康凯琼脂等平板上35℃培养18~24 h ，形成粉红色菌落， 48 h后菌落呈深红色，部分菌株呈黠液型菌落。鲍曼不动杆菌是条件致病菌，广泛存在于自然界。该菌对湿热紫外线及化学消毒剂有较强抵抗力，常规消毒只能抑制其生长而不能杀灭，因此，在医院，患者机体抵抗力下降加上各种侵入性操作和长期使用广谱抗生素治疗，一些不动杆菌伺机而动，趁机占领“阵地”且产生了耐药性，逐步成为医院感染的重要病原菌，主要引起呼吸道感染，也可引发败血症、泌尿系感染、继发性脑膜炎等，对危重患者威胁很大。特别是耐碳青霉烯类的鲍曼不动杆菌，发展迅猛，甚至出现“全耐药”的鲍曼不动杆菌，已引起临床和微生物学者的严重关注。 抗生素的出现如奇迹一样帮人类解决了无数的问题，使人类在与众多疾病的战斗中能够占主导地位。但近几年，抗生素的错误及过度使用，病毒和病菌的抗药性越来越强，对人类构成的威胁也越来越大。因此，即便是活在现代，高贵妃依然难逃厄运。

参考质量标准: 七水硫酸镁（工业级）指标外观： 无色小颗粒结晶体主含量：≥99.5% PH(5W/V%Sol)： 5-8 铁含量(Fe)： ≤0.0015%氯含量（cL）： ≤0.02% 重金属（Pb）: ≤0.001% 砷含量（As）: ≤0.0002% 水不溶物： ≤0.01% 灼烧失重： 48-52%  七水硫酸镁（医药级）指标外观： 无色小颗粒结晶体 主含量： ≥99.5% PH(5W/V%Sol)： 5-8 铁含量(Fe)： ≤0.0015%氯含量（cL）： ≤0.01% 重金属（Pb）: ≤0.001% 砷含量（As）: ≤0.0002% 水不溶物： ≤0.01% 灼烧失重： 48-52%  七水硫酸镁（食品级）指标外观： 无色小颗粒结晶体 主含量： ≥99.5% PH(5W/V%Sol)： 5-8 铁含量(Fe)： ≤0.0015% 氯含量（cL）： ≤0.01% 重金属（Pb）: ≤0.001% 砷含量（As）: ≤0.0002% 水不溶物： ≤0.01% 灼烧失重： 48-52%  七水硫酸镁（饲料级）指标外观： 无色小颗粒结晶体 主含量： ≥99.5% PH(5W/V%Sol)： 5-8 铁含量(Fe)： ≤0.0015% 氯含量（cL）： ≤0.015% 重金属（Pb）: ≤0.001% 砷含量（As）: ≤0.0002% 水不溶物： ≤0.01% 灼烧失重： 48-52%

最近朋友圈都被《我不是药神》刷屏了，故事从吕受益是一名白血病患者希望程勇能帮他弄到印度生产的抗癌药“格列宁”仿制药开始……“格列宁”究竟是什么药呢？价格差距怎么会这么大？   了解，影片中的“格列宁”与诺华制药生产的甲磺酸伊马替尼仅一字之差。其通用名叫“甲磺酸伊马替尼片”，是一种非常好的靶向药，问世于上世纪90年代，正式投入临床使用是在2000年初，它的出现可以让慢性粒细胞白血病患者的十年生存率，从以前的不到50%，增加到现在的90%左右，并且绝大多数患者可以正常工作和生活。可以说，甲磺酸伊马替尼片是上个世纪开发的最成功的肿瘤药物，也由此开启了靶向药物时代。中文名称：甲磺酸伊马替尼英文名称：Imatinib MesylateCAS号：220127-57-1分子式：C29H31N7O·CH4O3S分子量：589.71外观：淡黄色或类白固体适用症状:用于治疗慢性粒细胞白血病(CML)急变期、加速期或α-干扰素治疗失败后的慢性期患者；不能手术切除或发生转移的恶性胃肠道间质肿瘤（GIST）患者。  甲磺酸伊马替尼在体内外均可在细胞水平上抑制Bcr-Abl酪氨酸激酶，能选择性抑制Bcr-Abl阳性细胞系细胞、Ph染色体阳性的慢性粒细胞白血病和急性淋巴细胞白血病病人的新鲜细胞的增殖和诱导其凋亡。此外，甲磺酸伊马替尼还可抑制血小板衍化生长因子（PDGF）受体、干细胞因子(SCF)，c-Kit受体的酪氨酸激酶，从而抑制由PDGF和干细胞因子介导的细胞行为。临床前和临床数据提示，有些病人可通过不同的机制产生耐药性。   开始剂量 ：对慢性粒细胞白血病急变期和加速期患者，甲磺酸伊马替尼的推荐剂量为600 mg/日 ；对干扰素治疗失败的慢性期患者，以及不能手术切除或发生转移的恶性胃肠道间质肿瘤（GIST）患者，推荐剂量为400 mg/日，均为每日1次口服，宜在进餐时服药，并饮一大杯水，只要有效，就应持续服用。   如果血象许可，没有严重药物不良反应，在下列情况下剂量可考虑从400 mg/日增加到600 mg/日，或从600 mg/日增加到800 mg/日（400 mg，分2次服用）：疾病进展、治疗至少3个月后未能获得满意的血液学反应，已取得的血液学反应重新消失。  下列情况中必须调整剂量 ：如治疗过程中出现严重非血液学不良反应（如严重水潴留），宜停药，直到不良反应消失，随后再根据该不良反应的严重程度调整剂量。严重肝脏毒副作用时剂量的调整 ：如胆红质升高超过正常范围上限3倍或转氨酶升高超过正常范围上限5倍，宜停药，直到上述指标分别降到正常范围上限的1.5或2.5倍以下。中性粒细胞减少或血小板减少时剂量的调整 ：加速期或急变期 ：如果出现严重中性粒细胞和血小板减少（中性粒细胞  甲磺酸伊马替尼用于治疗慢性骨髓性白血病和胃肠基质肿瘤，治疗效果的确得到了广泛认可。相关研究也显示，89%的病人在服用这种药后能够存活5年以上。这么神奇的药物,怎么会不火呢!  但是据报道，一些病人服用该药后，出现了心力衰竭的不良反应。所以，只要是药，总是有或多或少的副作用，不能当做食物终身使用，药物在抑制病情的同时，也会使心脏受损，免疫力下降或其他危害，对于白血病来说用越好的药越容易使人的体质降低，抵抗力下降。

中文名：L-赖氨酸盐酸盐中文别名：(S)-2,6-二氨基己酸盐酸盐；L-氢氯赖氨酸英文名：L-Lysine HCL供应商：上海乔羽规格：5g/25g/100g/1kgCAS： 657-27-2化学分子式：C6H14N2O2·HCL含量：99%质量标准：食品级适用范围：限于科研实验，不作临床。化学性质：无色结晶状物质，无臭，味苦甜；易溶于水，微溶于乙醇和乙醚；10%水溶液pH值为5.6，mp为263-264℃；比旋光度[α]20D+14.6°(0.5-2.0 mg/ml，0.5 mol/L HCl)。主要用途：1、用于生化研究，医药上用于促进儿童生长发育、增进食欲和胃酸分泌。2、用作医药原料及食品、饲料添加剂3、赖氨酸是饲料营养强化剂，具有增强畜禽食欲，提高抗病能力，促进外伤愈合，提高肉类质量的功能，能增强胃液分泌，是合成脑神经、生殖细胞、蛋白质和血红蛋白必需的物质。一般在饲料中的添加量为0.1-0.2%。4、赖氨酸是人体必需的氨基酸，能增强造血机能，增强胃液分泌，提高蛋白质的利用率，增加抗病能力，保持代谢平衡，有利于促进儿童体格和智力的发育。我国规定可用于加工面条的面粉、饼干和面包，使用量为1～2g/kg；在饮液中为0.3～0.8g/kg。5、赖氨酸是最重要的氨基酸之一，氨基酸工业目前已成为具有相当规模和重要性的一个行业。赖氨酸主要用于食品、医药、饲料中。

中文名称：L-亮氨酸英文名称：L-Leucine供应商：上海乔羽CAS号：61-90-5分子式：C6H13NO2分子量：131.17EINECS号：200-522-0储存方式：2-8°C化学性质： 白色有光泽六面体晶体或白色结晶性粉末。生产方法:方法一、以血粉为原料血粉[HCl(分解)]→[110℃, 24h]水解液[除酸]→[减压蒸馏]除酸液[活性炭（吸附脱色）]→流出液[浓缩]→[减压蒸馏]浓缩液[沉淀]→[邻二甲苯-4-磺酸]沉淀[氨水(游离)]→[过滤]亮氨酸粗品[活性炭(脱色)]→[70℃, 1h]滤液[浓缩结晶]→[减压蒸馏]L-亮氨酸粗品[水(洗涤干燥)→L-亮氨酸成品水解、除酸 在1t水解罐中加入6mol/L的HCl溶液500L, 并投入100kg动物血粉， 加热保温110-120℃回流水解24h后， 70-80℃减压浓缩至糊状。 再加入50L浓缩至糊状， 如此反复三次， 冷却至室温， 过滤收集滤液得水解液。吸附、脱色 将水解液用水稀释1倍后， 以0.5L/min的流速流进颗粒活性炭(30cm×180cm)， 直至流出液出现苯丙氨酸为止， 用去离子水以同样流速洗至洗出液的pH为4.0为止， 并将流出液和洗涤液合并， 得流出液。浓缩、沉淀和游离 将流出液减压浓缩成原体积的1/3后，搅拌下加入1/10体积（V/V）的邻二甲苯-4-磺酸， 产生亮氨酸磺酸盐沉淀， 过滤取沉淀， 用2倍体积的去离子水洗涤2次，抽滤压干得亮氨酸磺酸盐。 再先用2倍体积的去离子水搅匀， 再加入6mol/L的氨水中和至pH为6-8，于70-80℃保温搅拌1h, 使亮氨酸从其磺酸盐中游离出来。 冷却结晶， 过滤取结晶， 再用2倍体积去离子水洗涤2次， 抽滤压干得亮氨酸粗品。精制 将亮氨酸粗品以40倍体积的去离子水加热溶解， 加0.5%活性炭(5g/L)保温70℃，搅拌脱色1h, 过滤取滤液， 将其浓缩至原体积的1/4后， 冷却结晶， 过滤取结晶， 并用少量水洗涤，抽干70-80℃烘干， 得L-亮氨酸精品。方法二、以玉米麸质为原料玉米麸质[脱水干燥]→玉米麸质粉[乙醇抽提]→玉米朊[水解]→水解液[中和、脱色]→脱色液[除酪氨酸]→滤液[106-110℃, 20h; 浓缩]→浓缩液[酸溶]→沉淀[氨解]→亮氨酸粗品[重结晶]→L-亮氨酸玉米麸质粉制备 玉米麸质含有大量水分， 固形物约占20%-30%， 需经脱水、干燥方可制得玉米麸质粉。 玉米朊制备 取玉米麸质粉， 用90%-95%的乙醇溶液抽提， 抽提液蒸发浓缩回收乙醇， 用水沉淀即得玉米朊。水解 取玉米10kg, 工业盐酸27L， 水9L， 装入水解罐中， 保温106-110℃ 20h, 至水解液呈红棕色。中和、脱色 搅拌水解液使之冷却， 缓慢加入7mol/L的NaOH溶液， 中和至pH3后， 再加入约2kg活性炭， 搅拌保温70-80℃, 30min进行脱色， 过滤取滤液得脱色液。 使脱色液为浅黄色透明溶液。 去酪氨酸 将脱色液冷却并不停搅拌， 加入少量酪氨酸晶体， 静置24h, 使酪氨酸结晶。 抽滤取结晶， 洗涤得酪氨酸粗品， 精制后得成品， 保留母液。 浓缩、结晶 将上述母液用稀HCl调pH至2.5， 然后减压浓缩， 待有大量氯化钠结晶析出时， 抽滤， 滤液再浓缩， 直至体积为10-15L为止， 抽滤， 合并滤饼(氯化钠和亮氨酸混合结晶)。 滤液用碱液调至pH3.3, 不断搅拌， 并加少量谷氨酸作品种， 待谷氨酸析出结晶， 抽滤得谷氨酸粗品， 精制后得成品。酸溶沉淀 将上步的合并滤饼(氯化钠和亮氨酸混合结晶)， 加入3mol/L的盐酸溶液7.5L， 加热搅拌， 70-80℃保温0.5h, 抽滤除去氯化钠结晶， 滤液为亮氨酸盐酸盐溶液， 体积大约为13L， 然后按其体积的10%往滤液中加入邻二甲苯-4-磺酸， 使完全形成亮氨酸磺酸盐析出， 过滤取滤饼， 滤液按同样方式操作， 使滤液加入邻二甲苯-4-磺酸后再无沉淀析出为止。 合并滤饼， 用少量蒸馏水搅匀， 抽滤， 如此洗涤2次， 得亮氨酸磺酸盐结晶。 亮氨酸游离 将亮氨酸磺酸盐结晶加入7mol/L的氨水中和， 使溶液中和至pH6-8, 保温70-80℃搅拌1h, 静置冷却结晶，抽滤取结晶并用少许蒸馏水洗涤2次， 得亮氨酸粗品。重结晶 按重量比1/40加蒸馏水， 将亮氨酸粗品加热使其溶解， 再加入1%活性炭脱色。 使脱色液的色度和澄明度经检查合格后， 进行减压浓缩， 直至体积为原体积的1/4为止， 搅拌、冷却、结晶， 抽滤得亮氨酸结晶。 母液再脱色再浓缩结晶， 合并结晶， 干燥后得亮氨酸成品。 方法三、以马面鱼屯鱼片下脚料为原料马面鱼屯鱼片下脚料[工业盐酸(水解)]→水解液[中和脱色， 7mol/L NaOH]→[活性炭；pH3]透明液[稀HCl(浓缩结晶)]→[pH2.5]滤饼[HCl， 沉淀剂(酸溶沉淀)]→沉淀物[7mol/L氨水(氨解)]→[pH6-8]粗品[蒸馏水(重结晶)]→L-亮氨酸成品。水解 取马面鱼片下脚料2kg， 加工业盐酸5.4L, 水1.8L， 盐酸浓度约为6mol/L, 加热保温106-110℃, 水解20h至水解液呈红棕色。中和、脱色 将水解液搅拌冷却， 加入7mol/L的NaOH溶液中和， 使pH至3。 再加入水解液约2%的活性炭， 保温70-80℃搅拌脱色半小时， 过滤取滤液， 即得黄色透明液。 浓缩、脱色 将上述黄色透明液用稀HCl调pH至2.5， 减压浓缩， 待有大量食盐结晶析出时， 过滤， 滤液再浓缩至总体积约为2-3L为止， 过滤， 合并滤饼(NaCl和亮氨酸混合结晶)。 酸溶、沉淀 将上述合并滤饼， 加入3mol/L的HCl液1.5L， 加热搅拌， 70-80℃保温半小时， 过滤弃去NaCl结晶， 滤液为亮氨酸盐酸盐溶

CAS:50-21-5乳酸，生化试剂说明书,由上海远慕生物供应，该产品纯度高，检测/鉴别精确，稳定性强，为了防止产品含量降低，应防潮，避光和抗氧化包装，保存应以提高物质稳定性为原则，尽可能在干燥避光下储存。产品使用前请仔细阅读说明书，也可直接。中文名称:乳酸英文名称:DL-Lactic acidCAS:50-21-5纯度：85% 包装信息：25G,500G分子式: C3H6O3分子量:90.08EINECS号:200-018-0储存条件:2-8°C化学性质: 纯品为无色液体，工业品为无色到浅黄色液体。无气味，具有吸湿性。 能与水、乙醇、甘油混溶，不溶于氯fang、二硫化碳和石油醚。 主要用途:1、主要用于香料、食品、饮料行业，也是医药、化工、皮革、印染等行业的原料2、用作实验试剂、食用香料、防腐剂、增塑剂及粘合剂，也用于制药工业3、为抗菌增效药4、乳酸使重要的酸味剂，有特异收敛性酸味。可用于各类食品，按生产需要适量使用。还具有较强的杀菌作用，可防止杂菌的生长。5、用于络合滴定分析钙、镁和铝；用于测血浆中二氧化碳结合力；用于测定铜和锌6、食品的酸素及香料，防腐剂，制备乳酸盐，增塑剂，络合滴定分析、镁和铝，测血浆中二氧化碳结合力用，测定铜和锌。

ELISA实验因灵敏度高，特异性强在生物科研上得到了广泛的认可，但对初学者而言，如不注意实验操作过程中的各个环节，可能会对最终的实验结果产生比较大的影响，那么,在ELISA实验中应注意哪些问题呢?在ELISA实验中应注意以下问题：1.在实验前应该按相关要求将实验试剂平衡至室温。2.包被抗体和检测抗体应该是有高活性的且都针对同一抗原。3.试剂保存：蛋白抗体类试剂保存于-20摄氏度，显色液洗涤液保存于2-8摄氏度。4.各试剂在使用前应充分混匀，以保证试剂的均一性和准确性。5.严格控制反应温度和反应试剂。6.洗板次数，洗板液的量，洗板液浸泡时间的长短，洗板的力度都是应该注意的问题。7.相关浓缩液应按要求稀释到相应比例方可使用，PH值要保持在7.2-7.4之间。8.在终止反应时尽量避免微孔中存有气泡。9.终止反应完成后应该在2min内完成酶标仪读数。

      抗体的功能与其结构密切相关。同一抗体的V区和c区的氨基酸组成和顺序的不同，决定了其功能上的差异。不同抗体的V区和C区在结构变化上具有一定的规律，又使得其在功能上存在共性。V区和C区的组成和结构，决定了抗体的生物学功能。一、中和毒素和阻止病原体入侵      识别并特异性结合抗原是抗体的主要功能，执行该功能的结构是抗体的V区，其中CDR部位在识别和结合特异性抗原中起决定性作用。抗体有单体、二聚体和五聚体，因此结合抗原表位的数日也不相同。抗体结合抗原表位的个数称为抗原结合价。Ig单体可结合2个抗原表位，为双价。SIgA是二聚体，可结合4个抗原表位，为4价。IgM是五聚体，理论上可以结合10个抗原，应该是10价，但由于立体构象的空间位阻，使lgM一般只能结合5个抗原表位，故为5价。      抗体的V区与抗原结合后，借助于c区的作用，在体外可发生各种抗原抗体结合反应，有利于抗原或抗体的检测和功能的判断；在体内可中和毒素、阻断病原体入侵、清除病原微生物；B细胞膜表面的IgM和IgD构成B细胞的抗原识别受体，能辅助B细胞特异性识别抗原分子。二、激活补体产生攻膜复合物使细胞溶解破坏      人IgG1～3和IgM与相应抗原结合后，可因构象改变而使其CH2和CH3结构域内的补体结合点暴露，从而通过经典途径激活补体系统，产生多种效应功能，其中IgM、IgG1和IgG3激活补体系统的能力较强，IgG2较弱。IgA、IgE和IgG4本身难以激活补体，但在形成聚合物后可通过旁路途径激活补体系统。通常情况下，lgD不能激活补体。三、调理吞噬和ADCC      IgG可通过其Fc段与表面具有相应受体的细胞结合，产生不同的生物学作用。1．调理作用(opsonization) 指IgG抗体(特别是IgG1和IgG3)的Fc段与中性粒细胞、巨噬细胞表面相应的Fc受体结合，从而增强吞噬细胞的吞噬作用。例如，细菌特异性的IgG抗体可通过其Fab段与相应的细菌抗原结合后，以其Fc段与巨噬细胞或中性粒细胞表面相应的Fc受体结合，通过IgG的Fab段和Fc段的“桥联”作用，促进吞噬细胞对细菌的吞噬。2．抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(antibody-dependent cell—mediated cytotoxicity，ADCC) 指具E有杀伤活性的细胞(如NK细胞)通过其表面的Fc受体识别包被于靶细胞表面抗原(如病毒感染细胞或肿瘤细胞)上的抗体的Fc段，直接杀伤靶细胞。 NK细胞是介导ADCC的主要细胞。抗体与靶细胞上的抗原结合是特异性的，而表达Fc受体细胞的杀伤作用是非特异性的。四、介导 I 型超敏反应      IgE为亲细胞抗体，可通过其Fc段与肥大细胞和嗜碱性粒细胞表面的IgE高亲和力Fc受体结合，使其致敏。当相同的变应原再次进入机体时，可以直接与致敏靶细胞表面的特异性IgE结合，促使这些细胞合成和释放生物活性物质，引起I型超敏反应。五、穿过胎盘屏障和黏膜      在人类，lgG是唯一能够通过胎盘的抗体。胎盘母体一侧的滋养层细胞可表达一种特异性的IgG输送蛋白，称为FcRn。IgG可选择性地与FcRn结合，从而转移到滋养层细胞内，并主动进入胎儿的血循环中。IgG穿过胎盘的作用在于这是一种重要的自然被动免疫机制，对于新生儿抗感染具有重要意义。另外，sigA可通过呼吸道和消化道的黏膜，在黏膜局部免疫中发挥重要的免疫防御作用。