辅酶 II NADP(H)含量检测试剂盒(MTT 显色法)说明书
微量法
规格:100T/48S
产品内容:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
![image 2022060910114385417](https://shzbio.net/upload/ueditor/image/20220609/2022060910114385417.png)
溶液的配制:
1、 试剂二:临用前加入 4mL 蒸馏水充分混匀,溶解后 4℃保存 2-8 周。
2、 试剂四:临用前将试剂四 A 溶解到试剂四 B 中,溶解后加入 5mL 蒸馏水,分装保存,避免反复冻融,-20℃ 保存 4 周。
3、 NADP 标准品:临用前加入 1.27 mL 蒸馏水,即 5 μmol/mL,-20℃可以保存 2 周。
4、 NADPH 标准品:临用前加入 1.2 mL 蒸馏水,即 5 μmol/mL,-20℃可以保存 2 周。
产品说明:
![image 2022060910120533919](https://shzbio.net/upload/ueditor/image/20220609/2022060910120533919.png)
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、研钵/匀浆器、超声破碎仪、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
![image 2022060910125195726](https://shzbio.net/upload/ueditor/image/20220609/2022060910125195726.png)
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热 30 min 以上,调节波长至 570 nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、 NADP 标准品:用蒸馏水稀释为 2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078、0.039、0nmol/mL 的标准溶液(0nmol/mL即空白管)。
3、 NADPH 标准品:用蒸馏水稀释为 1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078、0nmol/mL 的标准溶液(0nmol/mL即空白管)。
4、 稀释表(附于说明书最 后)
5、 在 EP 管中按顺序加入下列试剂:
![image 2022060910132376837](https://shzbio.net/upload/ueditor/image/20220609/2022060910132376837.png)
![image 2022060910133370685](https://shzbio.net/upload/ueditor/image/20220609/2022060910133370685.png)
![image 2022060910140091636](https://shzbio.net/upload/ueditor/image/20220609/2022060910140091636.png)
注意事项:
1、如果一次性测定样本数较多,可将试剂一、二、三按比例配成混合液。
2、反应过程中注意避光。
3、由于每一个测定管需要设一个对照管,本试剂盒 100 管可以测定 48 个 NADP+或 NADPH。
4、如果测定吸光值超过线性范围吸光值,可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
实验实例:
![image 2022060910144306695](https://shzbio.net/upload/ueditor/image/20220609/2022060910144306695.png)
![image 2022060910145101025](https://shzbio.net/upload/ueditor/image/20220609/2022060910145101025.png)
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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