直链淀粉含量检测试剂盒 可见分光光度法

直链淀粉含量检测试剂盒说明书

可见分光光度法

注意:本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

规格: 50T/48S

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,

溶液的配制：

1、 试剂二：乙醚 50 mL 自备；

2、 试剂四：提供 125mL 空瓶一个；将试剂三：H2O =9 mL：91 mL 混匀，现用现配，2-8℃保存半年；

3、 标准品：10 mg 直链淀粉。临用前加入 0.1 mL 无水乙醇和 0.9 mL 试剂三，混匀后封口膜封口，沸水浴至溶解，即 10 mg/mL 的直链淀粉，2-8℃保存半年。

产品说明：

直链淀粉是 D-葡萄糖基以 α-(1,4)糖苷键链接的多糖链，直链淀粉含量影响着食品的食用品质和外观品质，与食品安全息息相关。

直链淀粉和碘形成蓝色络合物，利用乙醇分开样本中的可溶性糖和淀粉，再用碘与其反应得到直链淀粉含量。

技术指标： 

最 低检出限：0.006 mg/mL

线性范围：0.0125-0.6 mg/mL

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、乙醚、无水乙醇、EP管、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1、 称取 0.01g 烘干样本，加入 1mL 试剂一，充分匀浆；

2、 80℃水浴提取 30min，3000g，25℃离心 5min，弃上清，留沉淀；

3、 在步骤 2 沉淀中加入 1mL 试剂二（乙醚）振荡 5min；3000g，25℃离心 5min，弃上清，留沉淀；

4、 在步骤 3 沉淀中加入 5mL 试剂四充分溶解，90℃水浴 10min，冷却后 3000g，25℃离心 5min，取上清待测。

二、测定步骤

1、 分光光度计预热 30min 以上，调节双波长至 550nm 和 485nm，蒸馏水调零。

2、 标准溶液的稀释：取 40μL 10mg/mL 标准溶液，加入 960μL 试剂四，充分混匀，配制成 0.4mg/mL 标准溶液使用，现用现配。（实验中每管需要 100μL，为减小实验误差，故配制大体积。）

3、 操作表 (在 1.5mL 离心管中依次加入下列试剂) ：

三、直链淀粉含量计算

直链淀粉含量（mg/g 质量）=ΔA 测定÷（ΔA 标准÷C 标准）×V 样总÷W=2×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W

C 标准：标准溶液浓度，0.4mg/mL；V 样总：加入试剂四体积，5mL；W：样本质量，g。

1、 反应后建议在 20min 内检测完成防止褪色。

2、 若 A 测定大于 1，建议样本上清用试剂四稀释后再进行测定；若 A 测定低于 0.03 时，可以提取时减少试剂四体积进行测定。注意同步修改计算公式。

1、 取 0.01g 烘干玉米于研钵中研碎，加入 1mL 试剂一，充分匀浆后转移到 EP 管中，80℃水浴提取 30min，3000g，25℃离心 5min，弃上清，留沉淀，加入 1mL 试剂二（乙醚）振荡 5min，3000g，25℃离心 5min，弃上清，留沉淀，加入 5mL 试剂四充分溶解，90℃水浴 10min，冷却后 3000g，25℃离心 5min，取上清，之后按照测定步骤操作，测得计算 ΔA 测定=（A 测定-A 空白）-（A’测定-A’空白）=（0.664-0.003）-（0.474-0.034）=0.221，ΔA 标准=（A 标准-A 空白）-（A’标准-A’空白）=（0.723-0.003）-（0.447-0.034=0.307，按样本质量计算含

量得：直链淀粉含量（mg/g 质量）=2×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W=143.97 mg/g 质量。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！