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磁性硫化胶的成分鉴定曹珍年 摘 要 用FT-IR和GC-MS方法分别检测磁性橡胶的热裂解液,结合Beilstein铜丝实验,对其并用胶成分和助剂进行鉴定。该方法可推广应用于其他并用胶。 关键词 红外光谱, 气相色谱-质谱, 热裂解, 磁性橡胶。Identification of a Kind of Magnetic RubberCAO Zhen-Nian( Analytical and Testing Center,South China University of Technology, Guangzhou 510641,P.R.China) Abstract The components and additive of a kind of magnetic rubber were identificated, by using a new method that the pyrolyzates of the rubber were tested with FT-IR and GC-MS, and the rubber was tested with Beilstein experiment. This method can be used to idetify other rubbers. Key word FT-IR, GC-MS, Pyrolyzate, Magnetic Rubber.1 前言 橡胶鉴定已有若干标准方法可以采用,例如国家标准GB 7764-87《橡胶鉴定 红外分光光度法》就是参照采用国际标准ISO4650-84《橡胶鉴定——红外分光光度法》制定的。该方法适用于生胶、硫化胶和混炼胶中单一聚合物的鉴定,对并用胶要求小比例的聚合物应不低于20%(m/m),否则往往不能检出。当光谱特征属于两种聚合物难以判断时,可能属于并用胶的试样,根据试验情况要用其他方法进一步验证,方可作出正确判断。 磁性橡胶是在橡胶混炼时加入粉状磁性材料制得的一种挠性磁体,既有一定磁性,又保持橡胶的性能,具有独特的优点,广泛应用于许多领域。磁性橡胶中磁粉用量一般远大于橡胶用量,磁粉粒径大约0.5-3μm。当橡胶成分不是单一胶种,小比例的聚合物低于20%(m/m)时,应用红外分光光度法鉴定其成分是很困难的。在分析一种橡胶成分仅占10%的磁性橡胶时,为了同时分析助剂和并用胶的成分,又尽量避免繁复的分离操作,保持热裂解红外光谱法的简捷,我们采用了热裂解橡胶样品——取热裂解液分别测试红外光谱和用气相色谱-质谱鉴定裂解产物的方法,结果是满意的。http://elec.wanfangdata.com.cn/qikan/periodical.articles/gpsys/gpsy99/gpsy9903/990332.htm来源:万方数据。
随着人们生活水平的不断提高,食品安全变得尤为重要。对于肉制品中动物源性的检测成为现在的一个新的领域。往往会看到刷羊肉中掺杂鸭肉、牛肉干其实用的是貂肉等新闻。目前这项检测技术并没有完全普及实验室,今天和大家一起探讨一下运用PCR技术测定动物源成分(即动物源成分鉴定)。[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09512.gif[/img]好多肉肉,不知道吃的是什么肉。[align=center][img=,400,300]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707130909_01_2362238_3.png[/img][/align][align=center][b] 一、实验室场地要求[/b][/align]PCR实验室的场地明显区分于化学检测。对于实验室要求符合《GB/T 19495.2-2004 转基因产品检测实验室技术要求》,要具备样品制备区、核酸提取区、扩增区和检测区四大功能区,并且对于各个工作区域的压力有一定的要求。我公司拥有完整的PCR实验室(如图),我们的方法开发也在这里进行的。[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09502.gif[/img]请叫我摄影师!下面图片都是我拍出来的。[align=center]PCR检测室[/align][align=center][img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707130912_01_2362238_3.png[/img] [/align][align=center]准备室[/align][align=center][img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707130912_02_2362238_3.png[/img] [/align][align=center]提取室[/align][align=center][img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707130912_03_2362238_3.png[/img] [/align][align=center]扩增室[/align][align=center][img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707130912_04_2362238_3.png[/img] [/align][align=center]检测室[/align][align=center][img=,690,517]http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2017/07/201707130912_05_2362238_3.png[/img] [/align][align=center][b]二、实验仪器设备[/b][/align]1.荧光定量PCR测定仪(博日 FQD-96A)2.普通PCR测定仪(博日 NPA-32)3.核酸测定仪(Thermo Narodrop)4.凝胶成像仪(勤翔 1850)5.粉碎机6.液氮及研磨装置7.恒温水浴锅8.[url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff][url=https://insevent.instrument.com.cn/t/9p][color=#3333ff]移液器[/color][/url][/color][/url]9.电泳[align=center][b]三、试剂和耗材[/b][/align]1.动物基因组DNA抽提试剂盒2.无水乙醇3 .10×PCR反应液4 .dNTP5 .Taq酶6.引物7 .纯狗肉(阳性对照)、其他非狗肉相近动物源,如貂(阴性对照)8 .1.5mL离心管、枪头、PCR反应管[align=center][b][b]四、实验方法[/b][/b][/align][b](1)样品DNA的提取[/b]a、将约30mg的新鲜动物组织在液氮中充分研磨成粉末,并转移至1.5mL的离心管中。b、加入200μL 缓冲液GA,震荡至沉底悬浮,加入20μL Proteinase K,溶液混匀后,56℃放置直至组织溶解,期间混合样品2~3次。c、加入200μL缓冲液GB,充分颠倒混匀,70℃放置10min,溶液变清亮后,简短离心,去除管盖内壁的水珠。d、加入200μL无水乙醇,充分振荡混匀15s,简短离心,去除管盖内壁的水珠。e、将上一步所得溶液加入吸附柱CB3中,12000rpm离心30s,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中。f、向吸附柱CB3中加入500μL缓冲液GD,12000rpm离心30s,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中。g、向吸附柱CB3中加入600μL缓冲液PW,12000rpm离心30s,倒掉废液,将吸附柱CB3放回收集管中。h、重复操作步骤g。i、将吸附柱CB3放回离心管中,12000rpm离心2min,倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟,以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。j、将吸附柱CB3转入新的1.5mL离心管中,向吸附膜的中间部位悬空滴加50~200μL的洗脱缓冲液TE,室温放置2~5min,12000rpm离心2min,将溶液收集到离心管中,-20℃保存。[b](2) 定性PCR检测[/b]a、配制反应体系[table][tr][td][align=center]试剂名称[/align][/td][td][align=center]体积(μL)[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]10×PCR反应缓冲液[/align][/td][td][align=center]5[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]dNTP[/align][/td][td][align=center]4[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]上游引物[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]下游引物[/align][/td][td][align=center]1[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]Taq酶[/align][/td][td][align=center]0.5[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]模板[/align][/td][td][align=center]2[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]水[/align][/td][td][align=center]36.5[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]总计[/align][/td][td][align=center]50[/align][/td][/tr][/table]b、反应程序[table][tr][td][align=center]变性[/align][/td][td][align=center]扩增[/align][/td][td][align=center]循环次数[/align][/td][td][align=center]最后延伸[/align][/td][/tr][tr][td=1,3][align=center]94℃ 3min[/align][/td][td][align=center]94℃ 30S[/align][/td][td=1,3][align=center]35[/align][/td][td=1,3][align=center]72℃ 5min[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]58℃ 45S[/align][/td][/tr][tr][td][align=center]72℃ 45S[/align][/td][/tr][/table]c、反应对照设置阳性对照:用纯狗肉所提的DNA作为模板阴性对照:用非狗肉,如貂肉等所提DNA作为模板空白对照:用配制反应体系的实验用水代替模板[b](3)凝胶电泳检测PCR产物[/b]a、称取1g琼脂糖,加入50mL TBE缓冲液,微波加热溶解。b、稍冷却后,加入5μL 4s Red Plus核酸染色,倒入制胶板,放置凝固。c、取5μL所提DNA和1μL 6×Loading Buffer混匀,加到点样孔中。d、100V电泳10min,然后将电压调至110V,电泳35min。e、凝胶成像观察电泳结果。[b](4) 限制性内切酶酶切及产物电泳检测[/b]如果PCR扩增产物电泳检测结果阳性,进行限制性内切酶酶切反应a、 反应体系[table][tr][td][align=center]试剂名称[/align][/td][td][align=center]体积(μL)[/align][/td][/tr][tr][td][align=left]酶切缓冲液[/align][/td][td][align=left]2[/align][/td][/tr][tr][td][align=left] Hph I酶[/align][/td][td][align=left]2[/align][/td][/tr][tr][td] PCR扩增产物[/td][td]16[/td][/tr][tr][td][align=left]总计[/align][/td][td][align=left]20[/align][/td][/tr][/table]b、 反应条件37℃ 20min[b](5)结果分析与判定[/b]a、酶切后有目的基因条带,且阳性对照、阴性对照和空白对照均正确,可根据结果判定被检样品中含有狗源性成分。b、酶切后不含有目的基因条带,且阳性对照、阴性对照和空白对照均正确,可根据结果判定被检样品中不含有狗源性成分。c、如阳性对照、阴性对照、空白对照有一项不符合判定标准,则应重新试验。终于写完了,请大家多多支持!谢谢[img]http://simg.instrument.com.cn/bbs/images/default/em09506.gif[/img][b] [/b]
成分分析中圆形抱枕有一圈猫耳朵样式的边,占比比较大,这个部分是属于拼接还是可以叫装饰?类似这种的?[img=,441,384]https://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2022/03/202203081039375704_6401_2154459_3.png!w441x384.jpg[/img]