慢性粒细胞

生命科学的研究已进入了细胞组学的研究，科学家们渴求探究细胞深层次和综合性信息，既提供细胞群体的群体信息，也关注个体细胞的差异，既能看到细胞表型的特点，更能研究细胞的功能，但目前的流式细胞技术已无法满足科学家们的应用需求。Merck Millipore公司2012年推出的FlowSight多维全景流式细胞仪第一次实现了从群体到个体，从表型到功能的综合细胞分析，引领流式细胞技术进入了崭新的时代。 FlowSight是下一代专家级流式细胞仪FlowSight是一款体积小巧，但是功能强大的下一代专家级流式细胞仪。该系统革命性地设计提高了信噪比以及荧光检测的灵敏度。标配12个检测通道，除了传统荧光强度信息，还能获得&ldquo 每个细胞&rdquo 的明场、暗场以及10个荧光图像。FlowSight可以最多配置四根激光管（405, 488, 561, 642 nm），并加配785nm激光器专用于SSC信号检测，同时还可配置96孔板自动上样系统（AutoSampler）。FlowSight具有低于10MESF的超高检测灵敏度，特别对于弱信号的检测，有明显的优势。 FlowSight突破传统流式局限，实现圈门不再靠猜FlowSight与其他传统流式细胞仪不同之处在于它带来了每个细胞的真实图像。对于每个细胞，它能够生成12张图片。所获得的图片能够鉴别来自细胞质、细胞膜和细胞核的荧光。您只需点击散点图中的每个点或直方图中的每个点，即可查看与之对应的细胞图片。因此使用者再也不用靠猜测来判断设门是否准确。在FlowSight中，设门后，使用者可以通过观察所设门内外的细胞图片来确认设门是否准确。 FlowSight拓展了流式细胞技术的应用范围，获得前所未有的深入的细胞信息1. 细胞周期细化分析FlowSight可以将细胞周期分析和有丝分裂细胞分析结合起来。如下图所示，研究人员利用FlowSight对THP-1细胞周期进行分析（如下图左图所示），通过观察每个时期的细胞图片，FlowSight不仅可以分析细胞的G0/G1,S,G2/M期，还可将M期细分为分裂前期，中期，晚期，末期，获得最全面的细胞周期数据。 2. 八色免疫分型免疫分型通常用来鉴别血细胞亚群。FlowSight最多能够同时检测10色荧光，最大程度地满足研究者的实验需求。在这个例子中，研究人员用抗CD45, CD14, CD16, CD19, CD3, CD4和 CD123的抗体以及DAPI染料对细胞进行标记。通过一系列设门分析，他们鉴别了以下细胞类群： (A) CD3+ T细胞, CD4+ 辅助T细胞 (B) CD16+ 粒细胞 (C) CD19+ B 细胞 (D) CD14+ 单核细胞 (E) CD123+ pDC/嗜碱性粒细胞. 3．NFkB核转位研究NF-&kappa &beta 作为一种广泛存在的转录因子，被激活由胞浆转入胞核，从而参与炎症反应、免疫反应、细胞凋亡、肿瘤发生等。可以将细胞核和NF-&kappa &beta 分别用DAPI和FITC染色，FlowSight可观察每个细胞是否发生 NF-&kappa &beta 核转位，并量化分析NFkB核转位程度以及发生核转位细胞的比例。FlowSight革命性地光路设计，实现独特应用FlowSight系统平台也是由液流系统，光学系统和电子系统等三大部分组成。液流系统将样本细胞悬液和系统鞘液注入流动室中，使细胞在鞘液流的约束下聚焦在液流的中心，逐个流过检测窗口。光学系统中光源照射通过检测窗口的细胞，从而产生光信号。光源分为两种，其一用于产生明场细胞图像，另一种是用于产生荧光细胞图像的激光器。光源照射细胞产生的光信号被大数值孔径的物镜收集，然后通过光路系统传递到由二向色镜构成的滤光片堆栈（Dichroic Filter Stack）。光信号在这里被分成不同波段投射到TDI CCD的相应检测通道上，产生一个明场细胞图像，一个暗场细胞图像（Side Scatter，SSC）及至多10个不同荧光通道的细胞图像。FlowSight的光路系统能够自动调整焦距，并实时测定细胞运动速度，而其采用高端航空遥拍CCD进行信号采集，信噪比比PMT提高10-20倍，上述这些手段保证了系统采集到的细胞图像的质量和荧光信号的灵敏度。 综上，FlowSight多维全景流式细胞仪，采用革命性的技术，解决了传统流式细胞仪无法获得细胞个体信息的局限，真正让流式细胞仪睁开了&ldquo 眼睛&rdquo ，不仅可以对大量细胞进行统计学分析，而且还能观察细胞形态，极大地拓展了传统流式细胞仪的应用。虽然FlowSight是在2011年推出的，但是Amnis公司的下一代流式技术已经非常成熟，全球装机已经超过200台，超过300篇文献发表，其中大量Nature、Science和Blood等高水平文章。

仪器简介：Millicell 24孔板组件用于支持细胞附着，生长和区分的各种细胞应用。Millicell 24孔板组件不但用于细胞培养和分析，还可以用于手动或自动的细胞种植，喂养和清洗系统。技术参数：Millicell 24-well Cell Culture Plate Assembly, PCF, 0,4 µ m，包括 24-孔过滤板, 接受底盘和盖子或Millicell 24-well Cell Culture Plate Assembly, PET, 1 µ m，包括 24-孔过滤板, 接受底盘和盖子主要特点：新的24孔细胞培养板组件使用及其方便，可靠。其主要特点有：无须独立的细胞培养板和接受底盘，可以直接从底侧输入口添加培养液；一旦移开接受底盘，细胞培养板可以站立，保护细胞单层；另外，新的24孔细胞培养板还有加宽的孔边，和加大的标签面积，使用更方便。24 孔培养板上盖的独特“tear-drop”孔设计降低了膜底气泡的形成，使细胞单层能得到充分的营养。如果使用单孔底盖，Millicell assembly 可以通过隔板防止培养液的泄漏和污染。

Lionheart LX是一款高性价比的全自动显微成像系统，整个机型设计紧凑，无需人眼通过目镜观察样本，有效的避免长时间人眼观察造成的视觉疲劳，也无需耗费高昂的采购成本和学习成本，搭载具有高内涵分析功能的Gen5软件，可以自动化进行图片拍摄、处理和分析，在实验室应用非常广泛。特点全自动智能显微成像系统：Lionheart LX拥有全自动的6位物镜转轮，能够同时实现4色荧光通道的成像，具有高精度电动载物台，可以自动聚焦、自动曝光、一键式成像，Gen5软件功能可以让用户体检轻松简单的全自动图像拍摄和分析。具有高对比度明场、彩色明场和荧光成像模式：明场、彩色明场和20多种荧光通道成像可选，Lionheart LX 突破多种成像拍摄体验，从Z轴层切（Z-stacking）到Z轴图像展示（Z-projection)，Montage拍摄实现图像拼接，并且具有视频录制、自定义坐标拍摄和高通量整版拍摄功能，极大的拓宽了Lionheart LX在生命科学领域的应用。非标记细胞成像：可以通过高对比度明场进行非标记细胞成像，利用Gen5软件全自动完成图片拍摄、图片处理和结果分析，方法简便，适用于细胞计数、细胞毒性、细胞增殖和融和度相关实验。Lionheart LX典型应用：——终点法活细胞检测细胞凋亡细胞自噬细胞周期细胞毒性线粒体膜电位——组织学（HE）——非标记细胞计数——融合度分析——基因毒性彗星分析γH2AX——表型分析免疫荧光