细胞周期

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细胞周期相关的耗材

  • 带坐标的细胞培养片
    Cellattice?塑料培养片,其上往往刻有字母等做记号(micro-ruled coverslips),塑料材质,具有适宜细胞培养的表面。此类产品主要满足以下实验目的:l 检测同一个细胞:细胞周期研究,神经轴突的生长和分化l 直接细胞计数:进行细胞增生和细胞毒性学研究,不用移掉附着的细胞,直接计数。Cellattice?产品的突出特点是既具有细胞培养的表面又拥有显微尺子,由高品质的光学塑料制造,完全兼容所有的检测设备。活细胞研究和光学分析一体化操作,给研究者带来了很大的便利。植于盖塑片上的微尺可以直接检测细胞的生长和运动,而不需要图像采集。同一个细胞或者一簇细胞在一段培养时间后均可观测。Cellatice?还可以用来进行细胞形态学的研究,单个细胞水平的细胞运动和分化,细胞增殖均可以直接在玻片上进行。 订购信息:货号产品名称规格63571-25圆形微尺盖塑片,直径25mm,厚0.12 - 0.16 mm,微格10 x 10 mm50个63572-75方形25 x 75 mm,厚0.76 x 0.78 mm,微格10 x 10 mm50个
  • 流式细胞仪配套试剂盒
    多种流式细胞仪试剂盒提升您的分析能力使用 Luminex 流式细胞仪试剂盒扩展您在细胞计数、细胞活力、细胞健康及细胞信号研究方面的能力Luminex提供的各种流式检测试剂盒都经过了严格的优化,缩短了样品制备时间, 最大限度地减少建立检测方法所需的时间和精力,便于进行数据分析。与其他品牌流式检测试剂盒相比,路明克斯公司的流式细胞仪试剂盒在检测过程中需要的洗涤和孵育步骤更少,非常适合检测细胞活力、细胞周期、DNA 损伤 、线粒体健康、细胞凋亡指数和细胞自噬等。 所有的试剂盒均在传统的基于鞘液的流式细胞仪上进行过跨平台测试。相关试剂盒 Amnis® 细胞成像试剂盒可用于重要的细胞途径和药物发现应用。 Amnis成像流式细胞仪可在两个平台上使用:FlowSight® 成像流式细胞仪和ImageStream® XMk II成像流式细胞仪。我们的专家随时为您的研究和实验室需求提供最佳工具。Guava® 和Muse® 流式细胞仪试剂盒设计用于分析细胞事件和/或细胞表型。每个试剂盒都具有独特的直接偶联抗体和/或荧光染料和蛋白报告基因的组合,以监测蛋白表达,蛋白定位和/或翻译后修饰的变化。使用这些表格找到适合您的应用或仪器的最佳试剂盒。如需了解更多信息欢迎留言或访问Luminex官网
  • 啁啾光纤光栅_相移FBG_长周期_耐高温_传感用光纤光栅_FBG pm级_超窄带_筱晓光子
    啁啾光纤光栅啁啾光纤光栅是一种光栅周期沿光纤的纵向改变的特殊光栅。深圳市畅格光电有限公司采用相位掩模板方式写入啁啾光栅。通过调整啁啾光栅的反射强度可以使其作为增益平坦滤波器。同时利用其超宽的反射带宽可以为分布式系统服务。应用:增益平坦滤波器色散补偿光纤到户粗波分复用系统特性:大带宽低的插入损耗高的反射率指标特性 相移光纤光栅相移光纤光栅是在光纤光栅中引入相位不连续点,在光栅反射谱中产生一个极窄的透射窗口,随相移量的不同透射波长不同。相移光纤光栅可作为密集波分复用(DWDM)系统中的解复用器,相移的大小,位置和相移点的多少对该解复用器的技术指标长周期光纤光栅长周期光栅(long period fiber grating,LPFG)是由光纤轴向上产生周期性的折射率调制而形成,其周期一般大100μm。它的耦合机理是:向前传输的纤芯基模被耦合入几个特定波长的向前传输的包层模,包层模很快损失掉,所以LPFG基本上没有后向反射,在其透射谱中有几个特定波长的吸收峰。筱晓光子有限公司能根据客户的不同需要,提供不同的长周期光栅。特性:非反射型低的插入损耗应用:带通滤波器增益平坦滤波器生物化学传感技术指标耐高温光纤光栅筱晓光子技术有限公司能根据客户的要求定制耐高温的光纤光栅,以适用特殊的高温场合。特性高的波长稳定性反射率持续稳定性技术指标传感用光纤光栅由于对外界的温度和应变非常敏感,光纤光栅能够被作为传感器的核心元件。筱晓光子技术有限公司能根据客户的不同要求,提供个性化和批量的产品。特性高的稳定性和可靠性不同的光栅长度优异的切趾技术应用传感监测能量监测技术指标

细胞周期相关的仪器

  • 生命科学的研究已进入了细胞组学的研究,科学家们渴求探究细胞深层次和综合性信息,既提供细胞群体的群体信息,也关注个体细胞的差异,既能看到细胞表型的特点,更能研究细胞的功能,但目前的流式细胞技术已无法满足科学家们的应用需求。Merck Millipore公司2012年推出的FlowSight多维全景流式细胞仪第一次实现了从群体到个体,从表型到功能的综合细胞分析,引领流式细胞技术进入了崭新的时代。 FlowSight是下一代专家级流式细胞仪FlowSight是一款体积小巧,但是功能强大的下一代专家级流式细胞仪。该系统革命性地设计提高了信噪比以及荧光检测的灵敏度。标配12个检测通道,除了传统荧光强度信息,还能获得&ldquo 每个细胞&rdquo 的明场、暗场以及10个荧光图像。FlowSight可以最多配置四根激光管(405, 488, 561, 642 nm),并加配785nm激光器专用于SSC信号检测,同时还可配置96孔板自动上样系统(AutoSampler)。FlowSight具有低于10MESF的超高检测灵敏度,特别对于弱信号的检测,有明显的优势。 FlowSight突破传统流式局限,实现圈门不再靠猜FlowSight与其他传统流式细胞仪不同之处在于它带来了每个细胞的真实图像。对于每个细胞,它能够生成12张图片。所获得的图片能够鉴别来自细胞质、细胞膜和细胞核的荧光。您只需点击散点图中的每个点或直方图中的每个点,即可查看与之对应的细胞图片。因此使用者再也不用靠猜测来判断设门是否准确。在FlowSight中,设门后,使用者可以通过观察所设门内外的细胞图片来确认设门是否准确。 FlowSight拓展了流式细胞技术的应用范围,获得前所未有的深入的细胞信息1. 细胞周期细化分析FlowSight可以将细胞周期分析和有丝分裂细胞分析结合起来。如下图所示,研究人员利用FlowSight对THP-1细胞周期进行分析(如下图左图所示),通过观察每个时期的细胞图片,FlowSight不仅可以分析细胞的G0/G1,S,G2/M期,还可将M期细分为分裂前期,中期,晚期,末期,获得最全面的细胞周期数据。 2. 八色免疫分型免疫分型通常用来鉴别血细胞亚群。FlowSight最多能够同时检测10色荧光,最大程度地满足研究者的实验需求。在这个例子中,研究人员用抗CD45, CD14, CD16, CD19, CD3, CD4和 CD123的抗体以及DAPI染料对细胞进行标记。通过一系列设门分析,他们鉴别了以下细胞类群: (A) CD3+ T细胞, CD4+ 辅助T细胞 (B) CD16+ 粒细胞 (C) CD19+ B 细胞 (D) CD14+ 单核细胞 (E) CD123+ pDC/嗜碱性粒细胞. 3.NFkB核转位研究NF-&kappa &beta 作为一种广泛存在的转录因子,被激活由胞浆转入胞核,从而参与炎症反应、免疫反应、细胞凋亡、肿瘤发生等。可以将细胞核和NF-&kappa &beta 分别用DAPI和FITC染色,FlowSight可观察每个细胞是否发生 NF-&kappa &beta 核转位,并量化分析NFkB核转位程度以及发生核转位细胞的比例。FlowSight革命性地光路设计,实现独特应用FlowSight系统平台也是由液流系统,光学系统和电子系统等三大部分组成。液流系统将样本细胞悬液和系统鞘液注入流动室中,使细胞在鞘液流的约束下聚焦在液流的中心,逐个流过检测窗口。光学系统中光源照射通过检测窗口的细胞,从而产生光信号。光源分为两种,其一用于产生明场细胞图像,另一种是用于产生荧光细胞图像的激光器。光源照射细胞产生的光信号被大数值孔径的物镜收集,然后通过光路系统传递到由二向色镜构成的滤光片堆栈(Dichroic Filter Stack)。光信号在这里被分成不同波段投射到TDI CCD的相应检测通道上,产生一个明场细胞图像,一个暗场细胞图像(Side Scatter,SSC)及至多10个不同荧光通道的细胞图像。FlowSight的光路系统能够自动调整焦距,并实时测定细胞运动速度,而其采用高端航空遥拍CCD进行信号采集,信噪比比PMT提高10-20倍,上述这些手段保证了系统采集到的细胞图像的质量和荧光信号的灵敏度。 综上,FlowSight多维全景流式细胞仪,采用革命性的技术,解决了传统流式细胞仪无法获得细胞个体信息的局限,真正让流式细胞仪睁开了&ldquo 眼睛&rdquo ,不仅可以对大量细胞进行统计学分析,而且还能观察细胞形态,极大地拓展了传统流式细胞仪的应用。虽然FlowSight是在2011年推出的,但是Amnis公司的下一代流式技术已经非常成熟,全球装机已经超过200台,超过300篇文献发表,其中大量Nature、Science和Blood等高水平文章。
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  • NovoCyte Penteon是一台灵敏的流式细胞仪,具有5激光和多达30个荧光通道。它具有出色的灵敏度、分辨率、速度和灵活性。它还具有7.2 log的宽动态范围以及全自动补偿功能,让用户能够在同一实验中检测暗淡信号和明亮信号。在上一代智能化流式细胞仪基础上,提供了更强大的处理能力,以适应更高端的使用需求。搭载自动上样系统NovoSampler Q,兼容40管流式管架、 24/48/96/384孔板等多种上样方式,还可以整合到不同的实验室自动平台。简便及友好的NovoExpress 软件,在数据获取、分析及报告方面带来更可期待的用户体验。仅限研究使用。不可用于诊断目的。- 5激光30荧光通道- 超凡灵敏度和分辨率- 软件功能强大,支持数据边获取边分析- 智能化设计,操作无需人工值守,简化工作流程- 高通量检测自动完成- 10^7.2宽动态范围检测,无需电压调节- 高速收集,最高可达100,000次/秒- 准确的体积法绝对计数功能,无需计数微- 优异的散射光分辨率,可检测小至100nm的颗粒具有流体反馈控制机制始终保持非常稳定的流速。在各种样品流速下具有出色的稳定性,可在不同的操作条件下提供一致的结果。新版NovoExpress,继续保留传统的优秀功能之外,提供了更多高级分析方法:- 细胞周期分析模块:除了之前的Watson Pragmati算法之外, 又新增了Dean Jet Fox(DJF)分析模型。为G1,S和G2 / M的定量拟合、以及其他参数(如CV's和G2 / G1 比率)的量化提供了更多选择, 尤其适合药物处理后的不规则周期分析。- 细胞增殖分析模型:自动分析细胞增殖,快速识别细胞分裂代数,并计算增殖指数,便于定量。- 热图数据显示:用户定义参数的颜色,方便快速查看并同时比较多个样品。 应用领域:- 癌症/免疫学- 药物及疗法开发- 病毒感染研究- 疫苗开发- 细胞生物学- 干细胞- 微生物学/水生生物学- 植物学性能指标:激光器数量5激光器配置UV/紫色/蓝色/黄色/红色荧光通道30工作原理:无与伦比的光电检测器硅光电倍增管 (SiPM) 是基于硅基底的固态半导体器件,具备光子能级灵敏度,动态范围为 7.2 个数量级,是一款具有光子计数功能的紧凑检测器。NovoCyte Penteon 设计中的创新光学器件包含 30 个独立的 SiPM,可收集并处理来自每个荧光通道的信号。出色的散射光分辨率,可检测小颗粒NovoCyte Penteon 散射光检测光学系统和信号处理电子器件经过优化,可以分辨粒径小至 0.1 µ m 的颗粒。凭借这种优异的分辨率,可轻松识别和分析血小板、细菌和各种亚微米颗粒。高重现性和稳定性NovoCyte Penteon 和 NovoCyte Quanteon 的液路系统专为提供高性能而设计。NovoCyte Penteon 和 NovoCyte Quanteon 拥有其他流式细胞仪无法比拟的液路一致性和稳定性。使用蠕动泵的其他仪器通常会受到液路脉动的影响,导致绝对细胞计数不一致和不准确。应用:凋亡分析细胞凋亡也称为细胞程序性死亡,是细胞调控自身死亡的过程,通过激活特定通路使细胞发生收缩、凝聚,并最终通过吞噬作用被清除。这与坏死细胞死亡形成鲜明对比,坏死细胞死亡时细胞失控死亡并裂解,可产生免疫反应异常激活等有害影响。因此,凋亡细胞以非常有序的方式死亡,可限制其对周围细胞和组织的破坏。多种方法可用于测定细胞死亡并区分其为凋亡还是坏死。NovoCyte 流式细胞仪具有自动补偿设置和宽荧光检测动态范围,可轻松对检测进行定量,无需调整 PMT 电压免疫表型分析免疫状态与疾病状态、治疗效率以及对疫苗等外部刺激的反应有关。免疫表型分析可快速识别候选细胞类型、亚类和功能。由于免疫细胞可能影响疫苗的免疫原性及其效能,因此监测多种免疫细胞群的频率以及特定细胞亚群(如单核细胞、NK 细胞、T 细胞和 B 细胞)的分化或活化状态至关重要。NovoCyte 流式细胞仪可同时定量分析多种白细胞,以便更好地了解患者的免疫状态并监测机体对传染病的免疫反应。细胞增殖细胞增殖是一种重要功能,是高度结构化的事件,如果不受控制,会导致疾病。我们可以通过绝对细胞计数或使用染料(例如 CFSE)测量增殖。当 CFSE 标记的细胞发生分裂时,染料在子细胞之间平均分配,随着染料的不断稀释,我们可以测量 CFSE 荧光随时间的损失。此外,还绘制染料的平均荧光强度 (MFI) 与细胞浓度随时间的变化曲线,以揭示两者之间的反比关系。这类分析方法通常用于观察 T 淋巴细胞活化的变化。图:使用 CFSE 测量 Jurkat T 细胞增殖。A) 使用 CFSE 标记 Jurkat T 细胞,并通过 NovoCyte 流式细胞仪分析细胞随时间的变化,以测定细胞分裂。每个峰值都对应于一个单独的时间点。B) 使用随细胞分裂产生的信号稀释,绘制绝对细胞计数与 CFSE 的平均荧光强度 (MFI) 随时间的变化曲线。细胞因子检测细胞因子是免疫细胞对病原体、自身免疫或治疗药物的激活反应所必需的小分子。细胞因子的信号传导可以调节基因调控、先天免疫反应和适应性免疫反应以及炎症。因此,测量细胞因子产生并确定细胞因子产生的来源对于深入了解免疫反应非常重要。基于微球的流式细胞术检测是测量细胞因子的高效方法,可以使用具有不同荧光强度的混合微球来测量单个样品中的多种可溶性分析物。细胞内蛋白质检测对细胞内蛋白质的检测和分析有助于细胞亚群和细胞过程的额外表征。为分析非细胞表面蛋白质,需要进行细胞固定和破膜。然而,许多磷酸特异性抗体与许多基于去垢剂的常用破膜方法(用于细胞内染色)不兼容。在确定磷酸特异性抗体的适宜固定和破膜方法时,需要特别注意。最常见的方法是用 1.5% 多聚甲醛固定,然后用 100% 甲醇破膜。虽然这种方法适用于多种抗体,但请注意,并非每种磷酸特异性抗体都适用。此外,在异质性样品中鉴定不同的细胞群,需要对表面蛋白连接的磷酸化蛋白进行染色。必须特别考虑这些表位对固定剂的敏感性,并采取相应预防措施,避免损害表位。因此,样品在固定前可能需要对特定的表面标记物进行染色细胞周期分析正常的人体细胞是含有恒定数量 DNA 的二倍体。在细胞分裂的过程中,DNA 合成导致总 DNA 含量翻倍,随后在有丝分裂后恢复正常的 DNA 含量。利用 NovoCyte 流式细胞仪,可以进行详细的细胞周期分析,了解肿瘤细胞分化、细胞转化以及细胞与化合物之间的相互作用。图:在 10 µ g/M MG132 或 500 µ g/M 5-FU 处理 16 小时后,使用 ACEA NovoCyte 流式细胞仪分析 A549 细胞的细胞周期分布。NovoExpress 内置的细胞周期分析模块中的图像显示了处于 G0/G1 期(绿色)、S 期(黄色)和 G2/M 期(蓝色)的细胞。与正常未处理的细胞相比,MG132 处理的细胞停滞在 G2/M 期,而 5-FU 处理的细胞停滞在 G0/G1 期。
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  • 默克密理博秉承一贯的创新理念,突破流式研发的思维定式,带来了革命性创新一代Muse&trade 智能触控细胞分析仪。内置Pad版触屏式电脑,结合全面的预置细胞分析常规实验方案,为您开创前所未有的流式操作新体验。您只需动动手指,即可实现包括:细胞计数,细胞活性,细胞周期,细胞凋亡等在内的细胞分析常规实验。分分钟让您体验悦动指尖的细胞分析艺术。 除此之外,默克密理博还将为Muse&trade 平台不断开发更多细胞分析的预置实验方案,近期8个预置实验方案即将推出:涉及Caspase 凋亡通路、线粒体损伤、免疫分型、淋巴细胞活力分析、细胞信号通路、DNA损伤等多个研究应用领域。用户将全部免费获得预置实验方案的软件升级。申请试用 | 索取MUSE资料 | 询价 更多详情,请点击此处 默克密理博:新流式,新思维 &mdash &mdash 全新的流式平台,全新的学术思维
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细胞周期相关的方案

细胞周期相关的论坛

  • 细胞周期的测定原理与操作步骤

    一、原理细胞周期指细胞一个世代所经历的时间。从一次细胞分裂结束到下一次分裂结束为一个周期。细胞周期反应了细胞增殖速度。单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。测定细胞周期的方法很多,有同位素标记法、细胞 计数法等,这里介绍一种利用BrdU渗入测定细胞周期的方法。BrdU(5-溴脱氧尿嘧啶核苷)加入培养基后,可做为细胞DNA复制的原料,经过两个细胞周期后,细胞中两条单链均含BrdU的DNA将占l/2,反映在染色体上应表现为一条单体浅染。如经历了三个周期,则染色体中约一半为两条单体均浅染,另一半为一深一浅。细胞 如果仅经历了一个周期,则两条单体均深染。计分裂相中各期比例,就可算出细胞周期的值。http://img.dxycdn.com/trademd/upload/asset/meeting/2013/08/27/A1377590583.jpg二、仪器、用品与试剂1. 仪器、用品:同常规细胞培养2. 试剂:BrdU(1.0 mg/ml),甲醇、冰醋酸,Giemsa染液,秋水仙素,2×SSC液三、操作步骤1. 细胞生长至指数期时,向培养液中加入BrdU,使最终浓度为10 μg/ml。2. 44小时加秋水仙素,使每ml中含0.1 μg。3. 48小时后常规消化细胞至离心管中,注意培养上清的漂浮细胞也要收集到离心管中。4. 常规染色体制片。5. 染色体玻片置56 ℃水浴锅盖上,铺上2×SSC 液,距紫外灯管6 cm处紫外照射30分钟。6. 弃去2×SSC液,流水冲洗。7. Giemsa液染色10分钟,流水冲洗,晾干。8. 镜检100个分裂相,计第一、二、三、四细胞期分裂指数。9. 计算:细胞 周期(Tc)=48/(小时)附:(1)BrdU配制: BrdU 10 mg十双蒸水10ml 4 ℃下避光保存。(2)2×SSC配制: NaCl 1.75克,柠檬酸三钠,2H2O 0.88克,加水至100 ml,4 ℃保存。

  • 流式细胞仪检测细胞周期及正常范围

    [b][font=宋体][font=宋体]细胞周期[/font][font=Calibri]cell cycle [/font][/font][/b][font=宋体]是指从一次细胞分裂形成子细胞开始到下一次细胞分裂形成子细胞为止所经历的过程,它反映了细胞增殖的速度。在临床上,有很多研究证明,细胞周期分析对人肿瘤的诊断预后具有很高的价值。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]一个完整的细胞周期包含间期和分裂期([/font][font=Calibri]M[/font][font=宋体]期)两个阶段,间期又分为[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成前期([/font][font=Calibri]G1[/font][font=宋体]期)、[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成期([/font][font=Calibri]S[/font][font=宋体]期)和[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成后期([/font][font=Calibri]G2[/font][font=宋体]期),处于不同时期的细胞的[/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]含量存在差异。一般认为,[/font][font=Calibri]G 1 [/font][font=宋体]期细胞具有增殖活性,参与细胞周期循环,是二倍体细胞;[/font][font=Calibri]S [/font][font=宋体]期细胞,[/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]含量逐渐增加,从二倍体变成四倍体,随后进入 [/font][font=Calibri]G 2 [/font][font=宋体]期,最终进入 [/font][font=Calibri]M [/font][font=宋体]期。检测细胞周期常用的方法是检测[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量,可以选择能与[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]结合的荧光染料(如[/font][font=Calibri]PI[/font][font=宋体]等),再根据细胞各个时期[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量不同从而荧光强度不同的方法,分析各个阶段的细胞比例。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]流式细胞仪[/font][font=Calibri]PI[/font][font=宋体]染色法检测细胞周期的原理[/font][/font][/b][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]由于细胞周期各时相的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]不同[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]通常正常细胞的[/font][font=Calibri]G1/G0[/font][font=宋体]期具有二倍体细胞的[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量[/font][font=Calibri](2N),[/font][font=宋体]而[/font][font=Calibri]G2/M[/font][font=宋体]期具有四倍体细胞[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量[/font][font=Calibri](4N),[/font][font=宋体]而[/font][font=Calibri]S[/font][font=宋体]期的[/font][font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]含量介于二倍体和四倍体之间。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=Calibri]PI[/font][font=宋体](碘化丙啶)为插入性核酸荧光染料,能选择性嵌入核酸[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]和[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]双螺旋的碱基之间与之结合,结合量与[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]的含量成正比关系,其荧光强度直接能反映细胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]因此[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]通过流式细胞仪[/font][font=Calibri]PI[/font][font=宋体]染色法对细胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量进行检测时[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]可以将细胞周期各时相区分为[/font][font=Calibri]G1/G0 [/font][font=宋体]期[/font][font=Calibri],S [/font][font=宋体]期和[/font][font=Calibri]G2/M [/font][font=宋体]期[/font][font=Calibri],[/font][font=宋体]获得的流式直方图对应的各细胞周期可通过特殊软件计算各时相的细胞百分率。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]通过定量测定[/font] [font=Calibri]DNA [/font][font=宋体]含量来分析细胞周期是流式细胞术最早的应用之一。[/font][/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]流式细胞周期([/font][font=Calibri]cell cycle[/font][font=宋体])检测结果分析常用的流式细胞术分析细胞周期的方法是依据细胞[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量(横坐标)来分析的:[/font][font=Calibri]G0[/font][font=宋体]期:静止期,有丝分裂完成后,脱离细胞周期暂时停止分裂的一个阶段,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量保持二倍体;[/font][font=Calibri]G1[/font][font=宋体]期:[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成前期,从有丝分裂到[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]复制前的一段时期,此期主要合成[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]和核糖体,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量保持二倍体;[/font][font=Calibri]S[/font][font=宋体]期:[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成期,在此期,合成[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]及组蛋白,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量介于[/font][font=Calibri]G1[/font][font=宋体]期与[/font][font=Calibri]G2[/font][font=宋体]期之间;[/font][font=Calibri]G2[/font][font=宋体]期:[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成后期,是有丝分裂的准备期,合成[/font][font=Calibri]RNA[/font][font=宋体]及蛋白质,[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]合成终止,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量为四倍体;[/font][font=Calibri]M[/font][font=宋体]期:细胞分裂期,胞内[/font][font=Calibri]DNA[/font][font=宋体]含量为四倍体;[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体]流式细胞检测正常范围[/font][/b][font=宋体]流式细胞检测的正常范围通常依赖于被检测细胞或生物粒子的类型以及所测参数的性质。一般而言,正常的细胞数量、细胞大小、细胞形态、细胞内物质的浓度和分布等参数都在一定的范围内。这些正常范围通常是通过对比大量健康个体或样本的流式细胞检测结果而得出的。例如,正常血细胞的计数和比例,各种免疫细胞的分布,以及细胞内的荧光强度等,都有相应的正常范围。[/font][font=宋体] [/font][font=宋体][font=宋体]义翘神州提供[url=https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service][b]流式细胞检测技术服务[/b][/url],同时还提供完善的[url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]流式单[/b][/url][/font][font=Calibri][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]B[/b][/url][/font][font=宋体][url=https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting][b]细胞分选平台[/b][/url],详情关注:[/font][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/flow-cytometry-service[/font][/font][font=宋体][font=Calibri]https://cn.sinobiological.com/services/platform/facs-b-cell-sorting[/font][/font][font=宋体] [/font][b][font=宋体][font=宋体]义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索[/font][font=宋体]“义翘神州”与我们取得联系。[/font][/font][/b]

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  • Nature Protocols:荧光显微镜确定单个细胞周期进程
    2015年2月3日讯 /生物谷BIOON/ --近日,著名国际期刊Nature Protocols在线刊登了来自美国NIH Tom Misteli研究小组的一项最新研究成果,他们提出了一个利用荧光显微镜确定单个细胞周期的实验方法。应用这种实验方法或可实现对群体中不同个体细胞周期的监测观察。  细胞周期进展是细胞最基本特征之一,传统上对细胞周期的研究主要依赖于群体分析,并通过周期相关特异性标记或者使用基因修饰系统的方法来确定,这使得对稳定的单细胞周期的确定变得非常困难。因此,研究人员提出一个应用高分辨率成像的荧光显微镜测量DNA含量来确定单个细胞周期的实验方案,这种方法是基于对DNA的染色,通过图像分析精确定量完整细胞核的荧光强度,并且能够与其他组化方法联合使用。Tom Misteli研究小组开发的双通道自动图像分析算法,结合商业软件或者开源软件能够导出对不同个体细胞周期的描述。这个实验方案适用于贴附细胞并且可使用几种不同的DNA染料。  综上所述,该文章提出了利用DNA染色结合荧光显微镜检测的实验方法来判断单个细胞的周期进程,或对精确研究群体中单个细胞的周期具有重要意义。
  • 重大发现! 细胞周期抑制蛋白p21新功能:免疫监视“侦察兵”与“计时器”
    为了对衰老细胞的分子特性进行进一步的理解,美国梅奥医学中心Jan M. van Deursen研究组与Hu Li研究组通过筛选不同的应激因素、细胞类型以及在哺乳动物体内寻找与衰老相关的增强子,希望能够鉴定出免疫系统识别衰老细胞的关键因素。这项工作发表在Science上题为p21 produces a bioactive secretome that places stressed cells under immunosurveillance。研究发现细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子p21除了经典的细胞周期阻滞的作用之外,会作为免疫监视“侦察兵”以及“计时器”的作用帮助机体建立内在的监察机制,促进衰老细胞的清除,确保机体的稳态。为了对衰老细胞在分子水平上进行更深入的了解,作者们希望鉴定衰老相关的超级增强子所控制的基因。在最初的筛选中,作者们使用了小鼠胚胎成纤维细胞这一体外系统,并且应用在三种不同的衰老诱导应激胁迫条件:γ-射线、过度复制以及癌基因诱导。作者们绘制了细胞过渡到衰老状态后超级增强子以及与这些超级增强子相关的转录激活基因,从中作者们找到了p21这个被调控的基因位点。p21是一个传统的细胞周期抑制因子,在筛选中发现该基因位点引发了作者们的兴趣, 这可能暗示了p21在衰老细胞中还具有其他的功能。为此,作者们在细胞中敲降了p21,发现衰老相关的基因表达中有三分之一是p21依赖的,因此作者们将这种表型称为p21激活的分泌表型(p21-activated secretory phenotype,PASP)。在受到影响的因子中,作者们将目光集中在Rb(Retinoblastoma protein)蛋白之上,因为在p21敲降后Rb在衰老细胞中缺失并且会降低衰老相关分泌表型的减弱。因此,p21是通过降低Rb的磷酸化对SASP产生影响。为了进一步地探究p21介导的Rb低磷酸化水平是如何激活衰老相关分泌表型基因的,作者们对调控不同衰老相关进转录因子以及不同衰老条件所产生的RNA-seq数据进行分析。作者们发现Rb会促进衰老细胞中这些关键转录因子的转录活性,从而建立起p21依赖的衰老相关分泌表型的产生。另外,作者们还发现p21所控制的转录程序是响应应激胁迫的第一道关,会在细胞周期阻滞的情况下开启机体的免疫监控。但是p21的这种免疫监控是如何开启的呢?作者们对衰老相关的分泌表型因子进行分析,发现小鼠胚胎成纤维细胞来源的p21依赖的分泌因子中包括Cxcl14,这是CXC家族趋化因子之一,会作为多种免疫细胞化学引诱剂发挥作用【1】。为了验证p21是否是由CXCL14开启机体的免疫监控的,作者们在实验系统中加入了CXCL14中和抗体,发现在加入后巨噬细胞被引诱后迁移的现象会消失。为了进一步在体内的系统证明这一观点,作者们对构建了标记的p21小鼠品系,p21过表达后肝脏细胞会出现显著的衰老特征,比如laminB1缺失以及HMGB1的核挤出等。但是随着时间的流逝,p21过表达的肝脏细胞数量显著降低,说明这些衰老的细胞会被清除。而再加入中和抗体后,衰老细胞的清除现象就会消失。那么p21所介导的衰老分泌表型因子的是否是特异的呢?为此作者们构建了p16以及p27的过表达品系。p16与p21相比是一个更为特异的细胞周期依赖性激酶抑制因子,只靶向G1-CDK。作者们发现p16也会出现显著的细胞周期抑制,但是并不能促进巨噬细胞的迁移。同样的,p27会作为在细胞终末分化的细胞周期发挥作用,而不似p21。因此,细胞周期阻滞与免疫监控是p21而非其他细胞周期依赖性抑制因子的特征。通过癌变诱导的应激胁迫,作者们证明了在癌基因诱发的应激胁迫中p21所介导的免疫监控作用也会发挥功效,从而作为应对胁迫的第一道防线保护机体的健康和稳态。但应激诱导的致癌点突变是不可修复的,但细胞一般来说遇到的很多应激胁迫都是短暂的或者是可以修复的。那么p21依赖的衰老分泌表型是否可以对可逆的应激胁迫进行响应呢?作者们构建了慢病毒载体的p21小鼠品系,在阿霉素(Dox)作用的情况下会产生符合p21过表达的表型,而在去除阿霉素后p21的水平会逐渐恢复正常,作者们发现p21恢复正常水平后,p21依赖的衰老分泌表型缓解下来,巨噬细胞会从应激胁迫的上释放,细胞的免疫监控状态停止。总的来说,该工作鉴定发现了经典的细胞周期蛋白依赖性激酶p21在应激状态下作用“侦察兵”发挥免疫监控作用(图1),通过促进细胞释放趋化因子CXCL14等招募巨噬细胞,清除机体中危险的存在,同时又具有生物内在“计时器”功能,在应激胁迫撤出的情况下促进衰老分泌表型的缓解,从而解除多细胞内的警报,促使机体恢复正常状况。同期刊发观点文章对该文章进行介绍题为Clearing stressed cells,介绍了该工作中鉴定发现p21不仅对于衰老细胞的周期阻滞有关,还会早期阶段对受到胁迫的细胞进行免疫监控,清除受到胁迫的细胞。在细胞对内在环境进行修复,促使p21恢复正常水平后,可以使得巨噬细胞解离。但是应激胁迫造成的威胁超过细胞的修复能力后,细胞依赖于p21所释放的CXCL14等在内的趋化因子会招募巨噬细胞,巨噬细胞激活后招募T细胞,从而维护多细胞内环境的稳态。原文链接:https://doi.org/10.1126/science.abb3420
  • Cell Rep:细胞尺寸和周期状态或会影响HIV感染机体
    近日,一项刊登在国际杂志Cell Reports上的研究报告中,来自伊利诺伊大学的科学家们通过研究发现,细胞尺寸和细胞的周期状态或许在HIV中扮演着关键的决定性作用。如今抗逆转录病毒药物的开发使得HIV感染成为了一种可控的慢性疾病,然而如果未能及时诊断或治疗,HIV感染就会进化成为AIDS(获得性免疫缺陷综合征),2017年全球大约有100万人因感染HIV而死亡。挽救生命的药物并不能治疗HIV,因为当HIV感染机体后其会偷偷地靶向作用诱发机体抵御任何感染的免疫反应的细胞,尤其是HIV会入侵CD4 T细胞,并不断复制最终接管CD4宿主细胞的DNA。研究者Roy Dar教授说道,当感染CD4 T细胞后HIV会经历两种命运中的一种,其要么会整合成为复制状态,诱发成百上千个感染性病毒颗粒的产生;要么会进入一种休眠状态。这项研究中,研究人员重点分析了如何有效清除HIV潜在的病毒库,因为HIV病毒库会自发激活并且躲避药物疗法的攻击,如果HIV感染者没有严格遵守抗逆转录病毒药物体系的治疗,其机体中的病毒库就会激活从而引发感染者出现一系列疾病症状。截至目前为止,并没有一种有效的方法能够区分出机体中未感染的细胞和潜在感染的细胞,而诸如这种策略就能够支持当前科学家们治疗HIV感染的疗法。这项研究中,研究人员在实验室中调查了被HIV潜在感染的T细胞的重新激活的过程,他们构建出了一种携带绿色荧光蛋白(GFP)的特殊病毒结构,当细胞重新激活时GFP就会发生表达。研究者所开发的延时单细胞成像技术能够通过计算GFP的平均荧光强度来监测单个细胞从沉默状态到活跃状态的重新激活过程;一旦研究人员鉴别出重新激活的细胞后,他们就会对细胞的尺寸进行计算,并确定重新激活所需要的细胞平均参数,结果发现,在潜伏的细胞群体中,只有较大尺寸的细胞会恢复活性,而较小的细胞则会保持沉默。据研究者介绍,较大的宿主细胞尺寸或能提供一种天然的细胞机制来帮助增强病毒表达所需要的细胞裂解量,同时当病毒决策发生偏离时也能够帮助破坏病毒的潜伏状态。Dar说道,这项研究中我们提出了一种被动性的宿主细胞主导病毒制定决策的案例,当宿主细胞尺寸较小时病毒就不会发起攻击,只有当宿主细胞尺寸较大时病毒才会被重新激活。此外,研究者还发现,细胞从潜伏状态过渡到活性状态依赖于细胞的周期(即细胞中DNA复制的阶段),同时其还受到了药物疗法的调节;研究者表示,我们可以使用药物疗法来调节特定细胞周期状态内外的细胞数量,从而感染HIV的激活决策;本文研究结果有望帮助研究人员开发抑制HIV感染的新型策略和疗法,后期研究人员还希望通过更为深入的研究来阐明细胞尺寸和周期状态如何影响HIV的感染决策。
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