Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul)
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1238-1600U | 1600U | Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul) |
P-PR1238-16KU | 16KU | Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul) |
产品介绍:
描 述 :
该 酶 来 源 于 Bacillus stearothermophilus DNAPolymerase I,通过基因工程手段去除了其 5’-3’外切酶活性,而保留了 5’-3’聚合酶活性。该酶具有很强的链置换能力,因此是 Isothermal amplification (LAMP, RT-LAMP)的绝佳用酶。与野生型 Bst DNA 聚合酶(大片段)相比,该酶在扩增速度、产量、耐盐性和热稳定性等方面均有大幅提高,同时,该酶可以使用 dUTP 作为底物进行扩增(Bst 大片段无此活性)。
典型的 LAMP 反应
1. 按以下组分配制 LAMP 反应液
Bst 2.0 DNA Polymerase ( 8 U/μl) 0.25~1 μl
10×Isothermo Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100 mM Mg2+
X μl
dNTP Mixture (10 mM each) 3.5 μl
模板 DNA 10 ng~1 μg
*10X Primers 2.5 μl
ddH2O Up to 25 μl
*10X Primers:16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4-8 μM LpF/B each。
2. 65°C 30~60min; 85°C 5min 失活。
单位定义:
一个活力单位即在 65°C 条件下,30 分钟内催化 10 nmoldNTP 的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
应用:
DNA 等温扩增
富含 GC 结构的快速测序
微量模板 DNA 的快速测序
失活:
85°C,5min 失活。
储存:-20℃可保存 3 年。
注意事项:
(1) Mg2+的使用浓度为 4~10 mM 浓度,Isothermo Buffer中没有 Mg2+,通常情况下,在 6-8mM Mg2+条件下可获得较好的 LAMP 结果。
(2) 有文献报道加入 Tte Uvrd 解旋酶可改善 LAMP 的效果。
(3) 使用无模板 DNA 作为对照检测扩增的特异性。
![1.png 1.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/6c3845b4-40f6-4da9-9255-cd3d60482c38.jpg)
![5.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/e61abc57-2a7c-4156-9260-f14e6ba63934.jpg)
![6.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/62851bc5-3a8d-40e2-a984-d347a9c64d3e.jpg)
![7.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/1321522b-6687-4131-a7b4-7a74974aa01c.jpg)
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
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Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul)信息由上海博湖生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul)报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应Bst 2.0 DNA聚合酶(8U/ul)外,上海博湖生物科技有限公司还可为您提供dNTP Mixture(10mM each)、血液基因组 DNA 提取系统(0.1-11ml盐析法)、2XSuper Taq PCR Mix(with Dye)等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。