Benzonase 核酸酶

Benzonase 核酸酶

商品属性：

 产品介绍：

描述：

Benzonase 核酸酶是来自 Serratia marcescens, 经基因工程改进的核酸内切酶。它能降解所有形式(包括单链，双链，线性和环状)的 DNA 和 RNA 而没有蛋白裂解活性，在广泛条件范围具有很高的特异性。它将核酸完全消化成3-5 碱基长度（杂交限度以下）的 5’-单磷酸寡核苷酸，最适合从重级蛋白中去除核酸的操作，符合 FDA 关于核酸污染的处理规程。Benzonase 核酸酶迅速水解核酸的能力使该酶成为降低粘度以减少处理时间和增加蛋白产量的最佳选择。该酶与BacReady-Protein Extraction Solution和RIPA LysisBuffer 等蛋白抽提试剂配合使用，从而消除粗提物中的核酸，降低粘度。

单位定义：在 30 分钟内使△A260 值降低 1.0(相当于完全消化 37 μg DNA )的酶量定义为一个活性单位。

应用：

蛋白提取时去除核酸污染
2D 凝胶电泳
Western Blot
IP- Western
储存：置于-20°C 保存。

操作方法：

1. 组织处理方法：将 30-50mg 动植物组织研磨充分后，加入 100-200 μl RIPA 裂解液，同时加入 1 μlBenzonase 核酸酶，旋涡振荡混合均匀，室温孵育 30min。
2.细胞处理方法：将 106-107悬浮细胞液 6,000 rpm 离心10min 后，弃掉上清液，使用 100 μl RIPA 裂解液重悬细胞，同时加入 1μl Benzonase 核酸酶，旋涡振荡混合均匀，室温孵育 30min。注意：贴壁细胞重悬于 PBS 后，处理方法同悬浮细胞。
3. 大肠杆菌细胞处理：将 500 μl E.coli 培养液 8,000rpm 离心 5min 后，弃掉上清液，使用 100 μl 大肠杆菌裂解液重悬细胞，同时加入 1μl Benzonase 核酸酶，旋涡振荡混合均匀，室温孵育 30min。
4. 裂解步骤完成后，将裂解产物于 13,000 rpm 离心 10min后，取上清即为提取蛋白（包涵体蛋白留取沉淀为提取蛋白）。
5. 提取完蛋白后可利用 BCA 蛋白定量试剂盒测定蛋白浓度。

pcr相关试剂实验结果分析：

PCR实验结果的分析涉及多个方面，‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等，‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：‌

循环次数过多：‌增加模板量减少循环次数，‌缩短退火时间及延伸时间，‌或改用两种温度的PCR循环，‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低：‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增，‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题：‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题，‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题：‌运输储存不当可能引起试剂盒失效，‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板：‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果：‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果，‌需要注意以下几点：‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染，‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析，‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

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