5min RNA纯化试剂盒

5min RNA纯化试剂盒

商品属性：

 产品介绍：

描述：RNA 纯化试剂盒的优点为迅速仅需 5min 即可完成操作，回收率可高达 70～95％。该试剂盒采用 高特异吸附能力的硅胶吸附柱，应用优化好的特定缓冲 液，可选择性地结合回收目标 RNA，并去除杂蛋白、盐 等。该试剂盒每次可纯化得到高达 50 μg 的 RNA 片段 (>15nt)，回收的产物可直接用于 RT-PCR、用于 NGS 的 RNA 文库制备、基因编辑、显微注射、RNA 标记、转染 等。

操作方法：

1. 向 50 µl 待回收样品中加入 100 µl RNA CleanupBinding Buffer 用枪头吹打混合均匀。
注意：若样品不足 50 µl 需加入 RNase Free H2O 补至 50 µl；若样品大于 50 µl 则可按比例缩放缓冲液体积，当样品大于 150 µl 时应上两根吸附柱。
2. 向上述溶液中加入预冷 150 µl 无水乙醇（等体积），枪头吹打混合均匀。（当 15nt<25nt 时可加入 2倍体积的无水乙醇）。
3. 将上述溶液共 300 µl 加入到吸附柱中，室温静置 30s。4℃ 13,000rpm 离心 30s，弃去过柱液。
4. 向吸附柱中加入预冷的 700 µl 75%乙醇，4℃13,000rpm 30s，弃去过柱液，重复此步骤一次。
5. 13,000rpm 空离 2min 后，将吸附柱转移至新的 1.5ml收集管中，室温放置 2min 使残留乙醇挥发。
6. 向吸附柱芯中加入 50~100 µl RNase Free H2O，室温静置 1min 后，4℃ 13,000rpm 离心 2min，获得的产物即为纯化的 RNA。可立即使用或于-80℃保存。

注意事项：

自备试剂：75%乙醇。
储存：室温保存，有效期 2 年。

pcr相关试剂实验结果分析：

PCR实验结果的分析涉及多个方面，‌包括实验操作、‌试剂质量、‌实验条件等，‌这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。‌以下是对PCR实验结果分析的一些关键点：‌

循环次数过多：‌增加模板量减少循环次数，‌缩短退火时间及延伸时间，‌或改用两种温度的PCR循环，‌可以有效避免循环次数过多导致的问题。‌

退火温度过低：‌退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要，‌过低的退火温度可能导致非特异性扩增，‌影响结果的准确性1。‌

电泳体系问题：‌包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、‌凝胶没有凝固好、‌琼脂糖质量差等问题，‌这些都会影响DNA片段的分离效果。‌

试剂盒问题：‌运输储存不当可能引起试剂盒失效，‌试剂盒本身质量问题如引物选择、‌循环参数设置不当也可能导致实验失败1。‌

降解的陈旧模板：‌使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布，‌影响结果的解读1。‌

PCR假阴性结果：‌可能由引物长度不够、‌试剂浓度不标准、‌靶序列突变或缺失、‌循环参数设置错误、‌标本中有Taq酶抑制剂、‌PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。‌

为了获得准确的PCR实验结果，‌需要注意以下几点：‌

确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。‌

在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测，‌以便及时对反应条件进行调整。‌

防止样本的污染和交叉感染，‌以免影响PCR反应的准确性和可靠性。‌

通过上述分析，‌可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素，‌从而提高实验结果的准确性和可靠性。‌

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