二手翻新安捷伦1260液相色谱仪

本文采用 Agilent Infinity 1260 四元系统结合表面多孔层色谱柱 Poroshell SB-C18 分析 了精对苯二甲酸母液中的 8 种芳香羧酸（偏苯三酸、羟甲基苯甲酸、邻苯二甲酸、对苯 二甲酸、4-羧基苯甲醛、甲苯二甲酸、苯甲酸和对甲基苯甲酸）。8 种芳香羧酸分离度良 好且不受 PTA 母液中的其他杂质干扰，一次样品分析只需 13 分钟即可完成。连续 6 针 进样，8 种芳香羧酸峰面积 RSD% ≤ 0.18%，保留时间 RSD% ≤ 0.05%。实验证明，该方 法可用于 PTA 母液中芳香羧酸的常规检测。

本应用简报介绍了使用 Agilent 1260 Infinity 分析型 SFC 系统结合 SIM 火焰离子化检测器 (FID) 测定变性乙醇中的烯烃含量。将 1260 Infinity 分析型SFC 系统与该 FID 相结合，可满足 ASTM D7347-07 方法的所有要求，例如基于时间的色谱柱切换所需的保留时间精密度、良好的峰面积精密度和校准函数。

本应用简报介绍了使用 Agilent 1260 Infinity 分析型 SFC 系统与 SIM 火焰离子化检测器 (FID) 测定柴油燃料中的芳烃含量。将 SFC 系统与开发的 FID 系统相结合，能够满足 ASTM D5186 方法的所有要求（如检测器准确度和线性）。这一组合为现有的正相 HPLC 方法 D1319 和 D2425 提供了一种经济有效且快速的替代方案。

本应用简报表明，配备示差折光 (RI) 检测器的 Agilent 1260 Infinity 二元泵液相 色谱系统能根据 IP436/ASTM D6379 方法，在正相条件下检测喷气燃料中的芳 香烃。

使用 Agilent Flex Cube 解决方案并采用三重四极杆质谱检测，开发出了用于环境水样和 果汁中痕量有机污染物（药物和农药）定性和定量分析的在线固相萃取 (SPE) 方法。在 聚合物柱上预浓缩了少量体积 (900 μL) 的样品。本文展示并讨论了实际样品中用于线性、 回收率和检测限的在线 SPE 系统的分析性能数据。回收率在 41% 至 115% 之间。方法检 测限在 1 ng/L 至 500 ng/L 的范围内。

使用一种检测污水中痕量有机化合物的快速 LC/MS/MS 方法，采用 80 μL 进 样量的水样直接进样方式，鉴定排放污水中一组 20 种指示物的存在情况。 分析周期小于 14 分钟，多数指示物的方法报告限 (MRL) 为 3-39 ng/L。多数 指示物的基质效应均小于 30%，20 种指示物中有 19 种的日内和日间变异系 数

本文将传统水样离线固相萃取、富集方法用具有阀切换功能的液相色谱系统代替，建立 了采用全自动在线固相萃取-超高效液相色谱联用系统测定自来水中痕量多环芳烃含量 的方法。该方法采用大体积进样方式，直接将 2.4 mL 样品加入到在线固相萃取小柱进 行浓缩和净化，再将浓缩、净化好的样品在线转移至分析柱进行分离，采用二极管阵列 检测器串联荧光检测器进行定量分析。方法灵敏度高，可有效检测自来水样品中低浓度 (ng/L) 多环芳烃。精密度实验结果显示，各多环芳烃保留时间稳定，相对标准偏差小于 0.04%，峰面积相对标准偏差除二苯并[a,h]蒽外均小于 5.0%。除去自来水中本底较高的 芴和菲外，自来水样品中低浓度多环芳烃的加标回收率在 90% - 144% 之间。实验结果 证明，该方法快速、简单易用、稳定性好、灵敏度高、自动化程度高，可用于自来水样 品中痕量多环芳烃的日常监测。

本应用简报介绍了 EPA 方法 537 中使用的全氟和多氟烷基化合物 (PFAS) 的改进的萃 取方法，使用安捷伦弱阴离子交换 (WAX) 柱从饮用水中萃取 30 种 PFAS（包括 EPA 537 中的所有 14 种）并使用 Agilent 1260/6470 LC/MS/MS 系统进行分析。

本应用简报演示了 Agilent 1200 Infinity 系列在线 SPE 解决方案与 Agilent 6460 三重四极杆质谱系统联用，在正和负 MS 离子化模式下，测定饮用水中的亚 ppt 级碱性和酸性农药与除草剂。该方法详细描述了分析碱性和酸性农药与 除草剂的起始条件，可通过适用的安捷伦 LC/MS 农药应用工具包对方法进 行设置和验证。此外，通过线性、定量限 (LOQ)、检测限 (LOD)、保留时间的 相对标准偏差 (RSD)、面积 RSD 和回收率证明了系统性能。

通过优化在其它三重四极杆平台上开发的方法参数可以充分实现 Agilent 6490 三重四极杆 液质联用系统更胜一筹的灵敏度。优化复杂基质样品废水中类固醇的分析方法可以获得低 于 1 ng/L（万亿分之一）的灵敏度。

从容器封闭系统中浸出的化合物会对药品的原料药和产品造成污染。为了完善风险评估，有必要鉴定这些化合物并确保药物适合其预期用途。通常来说，这些化合物浓度很低，并且会被药物基质掩盖。因此，需要高度灵敏和高选择性的方法来检测和鉴定这些化合物。四极杆飞行时间 (Q-TOF) 质谱仪具有极高的分辨率和精确质量数测量能力，非常适合检测此类物质。Agilent1290 Infinity 液相色谱系统联用 Agilent 6540 Q-TOF 系统再加上统计分析软件，可以准确检测和鉴定眼用药中的可萃取和可浸出 (E&L) 杂质。使用 AgilentMass Profiler 软件 (MP) 进行统计数据分析，以确定与对照品相比，样品中存在的化合物。MP 软件的数据库搜索工具有助于使用自定义的精确质量数据库鉴定 E&L。为了鉴定未知的 E&L，本研究通过 MS/MS 数据和结构预测软件（分子结构关联软件）进行分析。在本研究中，每个 E&L 样品中检测到50 种化合物。

单克隆抗体 (mAb) 可能会因细胞培养、收获、纯化、存储和填充期间的多种机制发生聚集。体积排阻色谱 (SEC) 是对 mAb 进行体积分离的标准方法。该方法被认为是用于定性和定量评估聚集体的强大参考技术。多种中间样品的SEC 分析不仅需要数小时才能完成，而且在样品处于不利环境中时，还会极大地影响聚集状态。本研究证明了使用短柱长小孔径的 Agilent AdvanceBioSEC 色谱柱对 mAb 和抗体药物偶联物 (ADC) 实现快速、高分离度、灵敏且可重现的分离和定量分析。分离和定量分析可在 4 min 内完成，更重要的是，该方法能够对应激条件下形成的聚集体进行监控与检测。

由于聚集体会对药物安全性产生显著影响并且可能引发抗原反应，因此蛋白质聚集是生 物治疗药物蛋白质的关键质量属性 [1]。聚集体还可能会降低生物治疗药物的药效并大幅 降低生产工艺的经济效益。蛋白质通常在暴露于压力条件下时发生聚集，例如 pH、温度 或浓度的变化，因此不同生产阶段均有可能发生聚集。目前人们已经确定选择体积排阻 色谱 (SEC) 方法进行聚集体的定量分析。在生物治疗药物开发过程中（例如在克隆选择过程中或在通过严格的“实验设计”法优 化发酵条件时）监视聚集体的形成情况，这些过程可能产生大量需要进行体积排阻分析 的样品。SEC 常用条件的分析时间往往需要 20 min 甚至更长，这极大限制了对大量样品的分析能力。Agilent AdvanceBio SEC 色谱柱具有高度优化的粒径和孔径设计，可实现更快速的分离，从而显著减少分析瓶颈问题。本应用简报介绍的技术可提高样品通量而不影响分析的准确性。

本应用简报证实，使用配备新型 HILIC 色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260Infinity 生物惰性四元液相色谱仪，可对人免疫球蛋白 G 的 N-连接糖链进行灵敏、重现的分析。对人 IgG N-连接糖链文库分析的保留时间和峰面积精度进行测定。此外，对于具有低检测限和低定量限的五种糖链标准品（M5、A2G2、A2G2S1、FA2G2S1 和 A2G2S2）混合物，在 0.016-1 pmol 的范围内具有良好的线性。配备 Agilent AdvanceBio 2.7 μm 糖谱分析色谱柱和荧光检测器的 Agilent 1260Infinity 生物惰性四元液相色谱仪是一款出色的系统，可实现灵敏且重现的2-AB 衍生人免疫球蛋白 G 释放 N-连接糖链分析。

聚乙二醇化的多肽和蛋白质为生物治疗药物的详细结构表征带来重大挑战，这主要是由于 聚乙二醇 (PEG) 具有异质性。本应用简报描述了一种联用 Agilent HPLC 及 Agilent 6520 精确质量数 Q-TOF LC/MS 系统分析聚乙二醇及聚乙二醇化蛋白的方法。其使用了一种 电荷剥离剂（三乙胺）作为柱后添加剂，这样有助于简化质谱图，因此可更好地阐释结 果。结果表明聚乙二醇和聚乙二醇化蛋白质的质谱图质量均得到显著改善。

离子交换是温和条件下分离蛋白质混合物的一个非常有用的技术，最常见的是应用增 加盐浓度的缓梯度溶液进行洗脱。pH 梯度洗脱使用频率较低（除专属应用外，例如色谱聚 焦），并且需要复杂的缓冲液体系。尽管如此，如今的四元液相色谱系统完全能够利用常 规缓冲盐实现 pH 梯度洗脱。本篇应用报告中，我们展示了 pH 梯度洗脱在分离单克隆抗体带电异构体时的优势。本文的工作使用了 Agilent Bio mAb 色谱柱、安捷伦 1260 Infinity生物惰性四元液相色谱系统和安捷伦缓冲液顾问软件。

利用 Agilent InfinityLab Poroshell 120 HILIC-Z 色谱柱通过梯度和等度洗脱分离 11 种 糖化合物。考察了 pH 和温度对葡萄糖端基异构体分离的影响。研究发现强碱和低温 的组合为峰形和柱寿命提供了最佳解决方案。最终分离使用氢氧化铵流动相和 35 °C 的柱温。

本应用简报介绍了对分离方法的优化，该方法利用超临界流体色谱 (SFC) 与 三重四极杆质谱检测来测定复杂食品基质中的农药。利用不同陡度的多个梯 度分析其中加入了不同浓度的多农药标准品的蔬菜基质。利用软件辅助的批 次比较确定最佳分离条件，以鉴定具有最低基质影响的梯度。

砷 (As) 天然存在于环境中，但人类活动也会造成某些地区的砷含量增加。人为砷来源包括采矿、冶炼和发电等工业过程，以及农业农药和木材防腐剂等[1]。一旦发生砷污染，其在环境中可存在数十年。例如，在 20 世纪 70年代禁止了含砷农用化学品的广泛使用，但在一些土壤中，砷酸铅和砷酸钙的含量仍然很高。土壤和水中的砷可被农作物吸收。以葡萄酒为例，砷含量也会受到酿酒过程的影响。

本文在 NY/T 761-2008 标准方法的基础上，考察了 Agilent Poroshell 120 液相色谱柱在农 药残留检测中的应用效果，建立了蔬菜水果中 7 种氨基甲酸酯类农药的快速、高通量分析方 法。采用 Poroshell 120 色谱柱可以显著节省分离时间并降低溶剂消耗，满足当今液相色谱 及液质联用快速高通量分析氨基甲酸酯农药的要求[1-2]。

药物发现和开发期间，需要可靠且易用的仪器进行化合物鉴定和纯度检查。Agilent 6120B 单四极杆硬件和软件是在多用户环境中支持 Walkup LC/MS 方法分析小分子和生物分子的理想选择。简洁的软件界面与稳定耐用的硬件结合，让非专家用户也可以自信地执行高质量且可靠的 LC/MS 分析。AgilentMassHunter Walkup 软件提供自动电子邮件报告，用户坐在办公桌旁就可以接收到条理清晰的结果。本应用简报讨论了 6120B 单四极杆 Walkup 系统的主要硬件和软件功能，以及包括化学品库分析等应用中的实际使用。

法医和疼痛科实验室进行全血中丁丙诺啡和去甲丁丙诺啡的检测时，需要一种能在浓 度低于 1 ng/mL 的水平内可靠检测这些化合物的分析方法。一种简单的样品净化步 骤，结合使用离子对 468.2&55.1 和 414.2&83.1 的 LC/MS/MS 方法，可实现两种 分析物的检测限（LOD）低于 0.1 ng/mL。每种分析物校正曲线的线性范围为 0.2 到 20 ng/mL，其 R2 等于或大于 0.999。采用安捷伦新一代产品分析可获得更高的检测 灵敏度。这些产品包括 Agilent Bond Elut Plexa PCX 混合模式聚合物 SPE 吸附剂、 Agilent Poroshell 120 EC-C18 2.7 μm 表面多孔填料 LC 柱、Agilent 1200 Infinity LC 系统、以及配备了安捷伦喷射流技术（AJST）增强型电喷雾离子源的 Agilent 6460 三 重四极杆 LC/MS 系统。

含有弱阳离子交换固定相的色谱柱用于分离带正电的蛋白质时呈现出一定的多功能性。特 别值得注意的是，通过调整流动相的 pH 可以实现样品选择性的差异。我们探讨了这些值得 注意的参数，以及如何通过改变这些参数来优化目标化合物的分离。这些工作使用了安 捷伦 Bio WCX 色谱柱，安捷伦 1260 Infinity 生物惰性四元液相色谱系统和安捷伦缓冲液 顾问软件。