本产品是基于离心柱/硅胶膜原理的、专门用于从新鲜或冷冻的动物(包括人
和禽类)抗凝全血中提取基因组DNA的试剂。它具有下列特点:
1.DNA纯净,0D260/280在1.8-2.0之间。不含蛋白质和RNA污染,可直
接用于PCR、酶切、杂交等。
2. 产量高,- -般为1-10 ug/ mL全血(对哺乳动物血液)。
3. 操作简单,整个过程约20分钟,全室温操作,适合大规模样品处理。
4.用量广泛,每次可以处理少达20u(对禽类动物血液),多达1mL的血
液(对哺乳动物血液)。
5. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
1.在0.02-1 mL新鲜或抗凝血液(冷冻血需先37C水浴隐化)中加入0.5 mL
红细胞裂解液(A型),吹打混匀。注意:溶液A非常容易长菌,取用需要在
无菌条件下进行。
a)哺乳动物, 血液使用量以300 uL以下为宜,使用量越大产量越高,但
产率会降低。如果血被多于300 u,重复1-2 步两次可以提高产率。
b)禽类动物, 血液使用量以20uL以下为宜,可以从第3步微起.
2. 室温12,000-15,000 rpm离心5分钟,沉淀呈粉红色,小心倾去上清。
3.再短暫离心半分钟,吸弃残留的液体。此步有利于后面的细胞裂解,但一般
可以省略。
4. 向有沉淀的离心管内加入0.5 mL溶液A (溶液A有少量晶体沉淀,用前需
要播晃均匀),用移液枪吹打使沉谊充分悬浮起来。此步目的是裂解细胞,释
敬DNA,所以吹打越充分越好。
5.静置2分钟待溶液变清亮后,将液体转移到离心吸附柱中并静置2-5分钟,
以使DNA与腹充分结合。
6. 12,000 rpm离心半分钟,DNA将吸附到腹上,弃收集管中的度液。
7.加入0.7 mL的通用洗柱液,12,000 rpm离心半分钟,弃收集管中的废液。
8.加入0.3 mL的通用洗柱液,12,000 rpm离心半分钟,弃收集管中的废液。
9. 12,000 rpm离心半分钟,甩干残留液体。此步很重要,以去除膜上残留通
用洗柱液,否则会影响后续反应。
10.将离心吸附柱置于- - 新的1.5 mL塑料离心管(自备)中,加入适量30-100uL
DNA洗脱液2.0,室温放置2分钟。如果将DNA洗脱液2.0在65C預热后
再使用,洗脱DNA的效果会更好。
11.12,000 rpm离心半分钟,离心管底溶液即DNA溶液。可以立即使用或版
冰箱长期保存。
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企业名称
上海钦胜生物科技有限公司
企业信息已认证
企业类型
信用代码
27000000202008180010
成立日期
2020-08-18
注册资本
100
经营范围
从事生物科技、医疗科技领域内的技术开发、技术咨询、技术转让;仪器仪表、机电设备、机械设备、玻璃制品、电子产品、医疗器械、化工产品及原料(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品)的销售。 【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】
上海钦胜生物科技有限公司
公司地址
上海市松江区余山镇陶干路701号5幢
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