柱式昆虫DNA提取试剂盒

本产品是专门用于从昆虫、节肢动物、蛔虫、扁形虫和一些富含多糖的动物组

织中提取基因组DNA的试剂盒。其原理是基于去垢剂在适当的离子强度条件下，特

异地跟基因组DNA结合形成沉淀,然后在用硅胶膜离心吸附法进行进--步纯化得到

DNA。

本产品具有下列特点: 

1.适 用于用常规方法难以提取的、各种富含多糖的动物，包括昆虫、节肢动物、

蛔虫、扁形虫等。

2.除新鲜样品外，还适合于各种保存状态的样品，包括冷冻的样品、用乙醇保存

的样品和福尔马林保存的样品。

3.提取到的基因组 DNA完整性，长度一般在20-50 Kb。

4. DNA 纯净，0D260/280- 般都在1.8左右，可直接用于PCR、酶切、杂交

等。

5. 操作简单，整个过程约30分钟。

6.安全无毒， 本试剂盒对人体无毒，无腐蚀性和刺激性气味。

1. 称取0.1-0.3 g昆虫样品转移到塑料研钵中，液氮研磨成粉后转移到-一个干净

的1.5 mL塑料离心管中。

注意:最好避免使用含二氧化硅的玻璃研钵,因为DNA会吸附在表面，影响得

率。

2. 在离心管中加入1 mL 65C预热的溶液A并用移液枪头充分吹打混匀(如果溶

液A有沉淀，需先在65C加热溶解后摇匀再使用)。

3. 65C保温5-30分钟，其间最好吹打混匀2-3次。

4.12000-15000g 室温离心3分钟。

5.将不超过0.75 mL的上清转移到新离心管中。有时候上清液中还会有少量细小

悬浮物，但对后续操作没有影响，不必进行特殊处理。

6.在上清液中加入等体积的溶液B,上下颇倒30秒充分混匀,溶液将呈白色混浊

状.

7.将其置于冰浴中放置5-10分钟。

8.12000-15000g 室温离心3分钟，转移上清到新的1.5 mL塑料离心管中。

9.加入02mL的氯仿自备)，震靄器上充分振靄30秒混匀。

10.12000-15000 g室温离心3分钟，两相交界面将有白色膜状物，小心转移上清

到新1.5-5mL塑料离心管中。注意:由于下一步要加1.5 倍体积的溶液c,所

以新的离心管的体积要足够大。

11.加入1.5倍体积的溶液C,上下颠倒30秒混匀，然后分多次的将混合液转移到

离心吸附柱中。

12.每次转移0.7-0.8 mL混合液后，室温放置5-10分钟。.

13.12000-15000g室温1分钟，弃穿透液。.

14.对需要多次上柱的样品，可以在此将剩余的样品加到离心吸附柱式中，重复第

12-14步的操作。

15.将0.7 mL通用洗柱液加入离心柱，室温离心1分钟，弃穿适液。

16.在离心吸附柱中加入0.3 mL的通用洗柱液，12000-15000 g离心半分钟(此

步为第二次洗涤)。

17.空甩1分钟去除残留液体。

18.将离心柱放置在一-新的 1.5 mL塑料离心管中，加入30- 100 uL DNA洗脱液

2.0.

19.室温放置5分钟后离心1分钟，管底即为昆虫DNA溶液，可立即使用，也可

长期保存在- 20C.

20.可以重复上步一次，以洗脱更多的DNA.